兩種梅毒抗體檢測方法在梅毒早期診斷中的應用

王虹力

（鳳城市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧 鳳城 118100）

梅毒是由蒼白（梅毒）螺旋體引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病[1]。主要通過性途徑傳播，臨床上可表現(xiàn)為一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潛伏梅毒和先天梅毒（胎傳梅毒）等。近年來，由于人們思想、行為開放等因素，疾病發(fā)病率遞增趨勢，且主要通過性行為、血液、母嬰等途徑進行傳播，嚴重危害人體健康狀況。流行性數(shù)據(jù)調(diào)查指出，世界衛(wèi)生組織估計，全球每年約有1 200萬新發(fā)病例，集中在南亞、東南亞。在我國也呈現(xiàn)明顯的增長速度，報告的梅毒中，潛伏梅毒、一期與二期梅毒、先天梅毒報告病例數(shù)均呈增加表現(xiàn)?；诩膊〉牟涣碱A后，需盡早診斷、治療[2]。梅毒患者的皮膚、黏膜中含梅毒螺旋體，未患病者在與梅毒患者的性接觸中，皮膚或黏膜若有細微破損則可得病。極少數(shù)可通過輸血或途徑傳染。獲得性梅毒（后天）早期梅毒患者是傳染源，95%以上是通過危險的或無保護的性行為傳染，少數(shù)通過接親吻、輸血、污染的衣物等傳染。胎傳梅毒由患梅毒的孕婦傳染，如果一、二期和早期潛伏梅毒的孕婦，傳染給胎兒的概率相當高。梅毒抗體檢測是常規(guī)篩查方法，在及時發(fā)現(xiàn)梅毒感染的基礎上進行治療，以促進患者預后、提升患者安全性[3]。由于梅毒臨床表現(xiàn)不典型，梅毒螺旋體培養(yǎng)困難，為了確保檢驗結果的準確性，需要有效的鑒定梅毒抗體檢測反應性較強標本、弱反應性標本[4]。本文就我院2019年10月至2020年10月期間梅毒患者與同期健康體檢者為例，對比分析TRUST、TPPA檢驗價值，為臨床工作的開展提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 從2019年10月至2020年10月來我院診治的患者和健康體檢者中選取梅毒螺旋體顆粒凝集試驗（treponema pallidum particle assay，TPPA）陽性體檢梅毒現(xiàn)癥患者（n=117）、同期健康體檢者（n=113）。納入標準：①患者知情同意參與。②病歷資料完整。③獲得醫(yī)院倫理委員會審核批準。④依從行為良好。排除標準：①重大疾病患者。②其他傳染類疾病患者。③退出研究者。117例梅毒患者中，男性80例、女性37例；患者年齡最小50歲、最大80歲，平均年齡（71.50±6.50）歲。同期113例健康體檢者中，男性79例、女性34例；患者年齡最小48歲、最大78歲，平均年齡（71.20±7.30）歲。兩組受檢者（梅毒現(xiàn)癥患者、同期健康體檢者）性別分布、平均年齡等基線資料比較，P＞0.05，其均衡具有研究可比性。

所有受檢者對本研究知情同意并簽署知情同意書，本研究已獲得我院倫理委員會的批準。

1.2 方法 告知受檢者空腹，于清晨、空腹情況下抽取靜脈血（3 mL）進行離心分離3 000 r/min，應用TECAN全自動酶免儀進行篩檢。TPPA檢測應用日本株式會社生產(chǎn)的相關試劑，甲苯胺紅不加熱血清試驗（tolulized red unheated serum test，TRUST）檢測應用上海榮盛生物公司，檢驗操作嚴格按照說明性進行。TPPA檢測：室溫下，生理鹽水稀釋1∶32，各個孔滴心磷脂抗原，振蕩器（100次/min）中震蕩10 min，觀察凝集結果。TRUST檢測：室溫下，U型板中稀釋血清加致敏、未致敏明膠顆粒，于孵育2 h后觀察結果。檢驗結果陽性情況下，進行雙孔復試，若1、2孔陽性則證明為陽性結果。

1.3 觀察指標 統(tǒng)計分析梅毒現(xiàn)癥患者、同期健康體檢者經(jīng)TRUST和TPPA兩種方法檢測后疾病檢出情況以及檢驗敏感度、特異度情況。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析 基于統(tǒng)計學軟件（SPSS21.0版本）建立數(shù)據(jù)分析模型，對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計。檢驗敏感度、特異度、疾病檢出率為計數(shù)資料，以例（n）、率（%）的形式描述，卡方（χ2）作對應檢驗值。P＜0.05情況下，相同觀察指標數(shù)據(jù)比較存在顯著性差異且具有統(tǒng)計學意義，反之差異無顯著性。

2 結果

2.1 疾病檢出情況分析 梅毒現(xiàn)癥患者、同期健康體檢者疾病檢出情況詳細數(shù)據(jù)見表1。健康體檢者經(jīng)TRUST、TPPA檢測后無陽性表達，經(jīng)TRUST檢測后陽性患者99例（84.62%），TPPA檢測后陽性患者117例（100.00%）。

表1 疾病檢出情況分析（n）

2.2 診斷靈敏度、特異性分析 經(jīng)TRUST、TPPA檢測后的診斷靈敏度、特異性情況見表2。經(jīng)統(tǒng)計學計算，TRUST、TPPA檢測靈敏度（84.61%vs.100.00%）差異顯著P＜0.05（具有統(tǒng)計學意義），特異度接近（100.00%vs.100.00%）P＞0.05。

表2 診斷靈敏度以及特異性情況分析

3 討論

梅毒屬于性疾病，具有較強的傳染性，屬乙類傳染病，危害性極大[5]。一期梅毒臨床標志性臨床特征是硬下疳。好發(fā)部位為陰莖、龜頭、冠狀溝、包皮、尿道口；大小陰唇、陰蒂、宮頸；肛門、肛管等。也可見于唇、舌、乳房等處。二期梅毒臨床以二期梅毒疹為特征，有全身癥狀，一般在硬下疳消退后相隔一段無癥狀期再發(fā)生。TP隨血液循環(huán)播散，引發(fā)多部位損害和多樣病灶。侵犯皮膚、黏膜、骨骼、內(nèi)臟、心血管、神經(jīng)系統(tǒng)。梅毒進入二期時，梅毒血清學試驗幾乎100%陽性；全身癥狀發(fā)生在皮疹出現(xiàn)前，發(fā)熱、頭痛、骨關節(jié)酸痛、肝脾腫大、淋巴結腫大；男性發(fā)生率約25%；女性約50%；癥狀在3～5 d好轉，接著出現(xiàn)梅毒疹，并有反復發(fā)生的特點。三期梅毒1/3的未經(jīng)治療的顯性TP感染發(fā)生三期梅毒。其中，15%為良性晚期梅毒，15%～20%為嚴重的晚期梅毒。臨床工作中發(fā)現(xiàn)，梅毒患者感染艾滋病的概率非常高，疾病發(fā)生與機體受到梅毒螺旋體感染關系密切[6]。早期階段治療、控制病情，可以控制病情蔓延，若治療不及時，可導致病情加重、蔓延，嚴重損害患者的健康狀況，造成機體組織器官嚴重損害、衰竭、死亡等問題，具有較高的危害性[6]。臨床工作中發(fā)現(xiàn)，當前梅毒發(fā)病率呈遞增趨勢，疾病發(fā)生與人們思想開放，患者過早接觸性生活、性生活不潔等有關[7]。顯性梅毒、隱性梅毒均為傳染源，感染后會傷害到機體各個器官[8]?；诩膊〉膫魅拘蕴攸c，需引起臨床和社會的重視。為了提高患者的安全性、生活質量，要求盡早診斷、治療。梅毒具有較高的傳染性、一定潛伏期，主要臨床表現(xiàn)無明顯癥狀，大多為皮膚表現(xiàn)，常被患者忽視。實驗室檢查中的暗視野顯微鏡檢查方法是取患者的可疑皮損（如硬下疳、扁平濕疣、濕丘疹等），在暗視野顯微鏡下檢查，見到運動的梅毒螺旋體，可作為梅毒的確診依據(jù)。血清學梅毒抗體檢測是常用的檢測梅毒的方法，患者感染1～2個月內(nèi)血液中有抗類脂質抗原非特異性反應素、螺旋抗原特異性抗體，進而進行早診斷、早治療[9]。梅毒血清學試驗方法很多，所用抗原有非螺旋體抗原（心磷脂抗原）和梅毒螺旋體特異性抗原兩類。前者有快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗（RPR）、TRUST等，可做定量試驗，用于判斷療效、判斷病情活動程度。后者有TPPA、梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗（TP-ELISA）等，特異性強，用于TP感染的確證。梅毒螺旋體IgM抗體檢測：感染梅毒后，首先出現(xiàn)IgM抗體，隨著疾病發(fā)展，IgG抗體隨后才出現(xiàn)并慢慢上升。經(jīng)有效治療后IgM抗體消失，IgG抗體則持續(xù)存在。TP-IgM抗體不能通過胎盤，如果嬰兒TP-IgM陽性則表示嬰兒已被感染，因此，TP-IgM抗體檢測對診斷嬰兒的胎傳梅毒意義很大。TRUST法在甲苯胺紅溶液中放入VDRL煉制，檢測血漿、血清中的反應素，操作簡單方便、檢出速度快，適用于大量人群篩查。充分治療后，反應素消失。未治療情況下，患者血清內(nèi)反應素將長期存在。但是，TRUST法也存在一定的問題。TRUST檢驗中梅毒螺旋體造成的組織損傷、釋放抗原性心磷脂，可能影響患者的機體抗體反應素，進而可能有生物學假陽性，降低了疾病診斷的準確性、特異性[10]。另外，急性發(fā)熱性傳染病、妊娠、吸毒，具有較高的漏診、誤診風險，從而影響患者早期治療和預后，增加了醫(yī)療糾紛風險。所以，梅毒潛伏期情況下體內(nèi)組織破壞小，為了確保檢驗結果的準確性，只能作為疾病的初篩方法[11]。TPPA檢測方法將提純的梅毒螺旋體抗原包被在明膠顆粒上，抗原、血清中間抗體發(fā)生特異性反應情況下產(chǎn)生顆粒凝集情況，凝集的強弱程度、抗體濃度關系密切，呈正相關關系。TPPA檢驗具有較高的特異性、敏感性，從標本處理到出具檢測結果一般2 h即可[12]。但是，該檢驗成本高，加上檢驗過程煩瑣、周期長等因素影響，限制了臨床應用。鑒于TRUST、TPPA檢測各自的優(yōu)劣勢，TRUST檢測可以用于疾病篩查，TPPA檢測可以作為初篩之后的確診方法，以減少疾病誤診、漏診風險，助于患者早期治療[13]。

本文結果：經(jīng)TRUST檢測后陽性率為84.62%、TPPA檢測后陽性率為100.00%。經(jīng)統(tǒng)計學計算，檢測靈敏度差異顯著P＜0.05。由此說明，TPPA檢測可以用于疑似患者確診，TRUST檢測可以用于疾病篩查，助于患者早期診治、預后。

綜上所述，近年來我國梅毒發(fā)病率一直呈遞增趨勢，梅毒是人類獨有疾病，顯性、隱性梅毒患者是傳染源。梅毒螺旋體通過胎盤傳給胎兒，早期梅毒孕婦傳染給胎兒風險性非常高。性接觸是梅毒的主要傳播途徑，感染梅毒的早期傳染性最強。關于梅毒疾病需盡早篩查、確診，治療以提高患者的安全性、生活與生存質量。TRUST、TPPA檢測均可用于梅毒疾病診斷中，其中，TRUST檢測的靈敏度不高，但是成本低、操作簡單。TPPA檢測具有較高的靈敏度，但檢測成本較高、操作復雜。所以，TPPA檢測可以用于疑似患者確診，TRUST檢測可以用于疾病篩查，兩種檢測方法各有優(yōu)勢和不足，可以視患者情況合理進行檢測。