陰道微生態(tài)狀況與持續(xù)性高危型人乳頭瘤病毒感染及轉(zhuǎn)歸相關(guān)性研究

黃金印 劉 巍 李秋萍 鐘嘉玲 劉正嫻 溫慶輝 趙偉華 羅襯銀*

（1 東莞市謝崗醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 東莞 523590；2 東莞市謝崗醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 東莞 523590；3 東莞市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 東莞 523059）

人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）具有普遍感染性，高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）屬于臨床上常見(jiàn)感染病毒之一，會(huì)對(duì)女性生殖系統(tǒng)產(chǎn)生極大的威脅，如不予以及時(shí)有效的治療，隨著感染周期的延長(zhǎng)，甚至可能引發(fā)生殖系統(tǒng)腫瘤，嚴(yán)重威脅女性的生殖功能以及生命健康安全[1-2]。相關(guān)研究報(bào)道顯示，高危型人乳頭瘤病毒的持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌發(fā)生及發(fā)展的主要致病因素，高危型HPV持續(xù)感染會(huì)對(duì)女性陰道微生態(tài)狀況造成影響，并促使患者機(jī)體內(nèi)的感染情況加劇[3-5]。迄今為止，關(guān)于高危型HPV持續(xù)感染的具體機(jī)制尚不明確，且關(guān)于高危型HPV和女性陰道微生態(tài)狀況之間的關(guān)系尚未有統(tǒng)一的結(jié)論，陰道微生態(tài)異常是否會(huì)引起高危型HPV感染情況的持續(xù)惡化，改善陰道微生態(tài)狀況是否有利于HPV感染轉(zhuǎn)歸有待進(jìn)一步研究證實(shí)。鑒于此，本文通過(guò)研究陰道微生態(tài)狀況與持續(xù)性高危型HPV感染及轉(zhuǎn)歸的相關(guān)性，以期為臨床持續(xù)性高危型HPV感染的防治提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2021年1月于東莞人民醫(yī)院及東莞市人民醫(yī)院謝崗院區(qū)（東莞市謝崗醫(yī)院）婦科門診就診且自愿接受HPV篩查及陰道微生態(tài)檢測(cè)的育齡期女性作為研究對(duì)象。將其按照高危型HPV感染狀態(tài)的差異分成高危型HPV持續(xù)感染組200例、一過(guò)性感染組100例以及正常對(duì)照組100例，檢測(cè)其陰道微生態(tài)狀況并進(jìn)行對(duì)比。以多因素Logistic回歸分析明確高危型HPV持續(xù)性感染的相關(guān)影響因素。此外，以隨機(jī)數(shù)字表法將持續(xù)感染組患者分為觀察組和對(duì)照組，每組各100例。本次研究經(jīng)過(guò)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 本研究納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有受試者均為育齡期女性，性生活規(guī)律。②TCT檢查未出現(xiàn)上皮內(nèi)病變和惡性病變。③入組前7 d內(nèi)未接受過(guò)陰道藥物治療和陰道沖洗。④入組前3 d內(nèi)無(wú)性生活。本研究排除標(biāo)準(zhǔn)：①入組前7 d內(nèi)接受過(guò)抗生素類藥物治療。②妊娠期或哺乳期女性。③TCT檢查出現(xiàn)上皮內(nèi)病變和惡性病變。④意識(shí)障礙或合并精神疾病者。⑤正參與其他研究者。⑥研究期間因故退出或失訪者。

1.2.2 研究方法與觀察指標(biāo)

1.2.2.1 高危型HPV檢測(cè) 采用通用引物多重PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)多功能流式熒光雜交分型檢測(cè)儀進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)檢測(cè)27種型別，包括高危型HPV17種（16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、82），低危型HPV10種（6、11、40、42、43、44、55、61、81、83）亞型。

1.2.2.2 陰道微生態(tài)檢測(cè) 包括形態(tài)學(xué)檢測(cè)（菌群密集度、菌群多樣性、優(yōu)勢(shì)菌等）以及功能學(xué)檢測(cè)（陰道pH值、過(guò)氧化氫酶、唾液酸苷酶以及白細(xì)胞脂酶等）。

1.2.2.3 治療及療效評(píng)估 對(duì)照組不予任何處理，隨訪觀察。觀察組患者將乳酸菌陰道膠囊（西安正浩生物制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào)：H10980293）放置到陰道內(nèi)，1粒/次，1次/d，連續(xù)使用7次為1個(gè)療程，月經(jīng)期停用，共治療4個(gè)療程。用藥期間禁止沖洗陰道、盆浴、坐浴及性生活，月經(jīng)期停用，后分別于3個(gè)月、6個(gè)月后返院檢測(cè)HPV和陰道微生態(tài)，評(píng)估療效。

1.2.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) HPV感染判斷標(biāo)準(zhǔn)：①任何一種HPV亞型陽(yáng)性即為HPV陽(yáng)性，提示HPV感染。②受檢者分別于檢測(cè)當(dāng)日以及第6個(gè)月、第12個(gè)月檢測(cè)1次HPV，將≥2次檢測(cè)到相同亞型的高危型HPV記為持續(xù)感染組；同一受試者3次檢測(cè)僅出現(xiàn)1次陽(yáng)性記作一過(guò)性感染組。陰道微生態(tài)正常判斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：①菌群密集度為Ⅱ～Ⅲ級(jí)。②菌群多樣性為Ⅱ～Ⅲ級(jí)。③乳酸桿菌為優(yōu)勢(shì)菌。④pH≤4.5。⑤乳酸桿菌功能無(wú)異常。⑥過(guò)氧化氫酶、唾液酸苷酶以及白細(xì)胞脂酶陰性。上述任意一項(xiàng)異常記作陰道微生態(tài)失衡（異常）。HPV療效評(píng)估：對(duì)患者的HPV-DNA情況測(cè)定，分為轉(zhuǎn)陰、有效以及無(wú)效。如果高危型HPV的表達(dá)全部為陰性則為轉(zhuǎn)陰；有效為少數(shù)陽(yáng)性高危HPV亞型轉(zhuǎn)為陰性，≥1種HPV亞型判定為陽(yáng)性；全部為陽(yáng)性則為無(wú)效，治療總有效例數(shù)為轉(zhuǎn)陰例數(shù)和有效例數(shù)之和。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 采用SPSS20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。對(duì)于計(jì)數(shù)資料，使用頻數(shù)（%）的形式進(jìn)行描述，使用卡方分析法（包括連續(xù)性校正法和Fisher確切概率法）對(duì)計(jì)數(shù)資料進(jìn)行分析。利用Logistic回歸分析計(jì)算OR值及95%CI，描述相關(guān)危險(xiǎn)因素與HPV感染發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組基線資料對(duì)比 持續(xù)感染組無(wú)避孕措施人數(shù)占比高于一過(guò)性感染組及正常對(duì)照組（均P＜0.05），3組年齡、BMI、首次性生活年齡、性生活頻率、人工流產(chǎn)以及文化程度對(duì)比均不明顯（均P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 3組基線資料對(duì)比

2.2 3組陰道微生態(tài)狀況 持續(xù)感染組陰道微生態(tài)異常、菌群密集度異常、菌群多樣性異常、陰道分泌物pH＞4.5、過(guò)氧化氫酶異常、唾液酸苷酶異常以及白細(xì)胞脂酶異常發(fā)生率均高于一過(guò)性感染組以及正常對(duì)照組（均P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 3組陰道微生態(tài)狀況對(duì)比[n（%）]

2.3 高危型HPV持續(xù)性感染影響因素的多因素Logistic回歸分析 以高危型HPV持續(xù)性感染與否為因變量，賦值如下：持續(xù)感染=1，無(wú)持續(xù)感染=0；以避孕措施以及陰道微生態(tài)狀況為自變量，賦值如下：有避孕措施=0，無(wú)避孕措施=1；陰道微生態(tài)、菌群密集度、菌群多樣性、過(guò)氧化氫酶、唾液酸苷酶以及白細(xì)胞脂酶正常均賦值為0，異常均賦值為1；陰道分泌物pH≤4.5=0，陰道分泌物pH＞4.5=1。經(jīng)多因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，陰道微生態(tài)異常、菌群密集度異常、菌群多樣性異常、陰道分泌物pH＞4.5以及無(wú)避孕措施均是高危型HPV持續(xù)性感染的危險(xiǎn)因素（均OR＞1，P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 高危型HPV持續(xù)性感染影響因素的多因素Logistic回歸分析

2.4 觀察組及對(duì)照組HPV轉(zhuǎn)陰總有效率以及陰道微生態(tài)恢復(fù)情況對(duì)比 觀察組干預(yù)后3個(gè)月、6個(gè)月的HPV轉(zhuǎn)陰總有效率及陰道微生態(tài)正常人數(shù)占比均高于對(duì)照組（均P＜0.05）。見(jiàn)表4、表5。

表4 觀察組及對(duì)照組有效率對(duì)比[n（%）]

表5 觀察組及對(duì)照組陰道微生態(tài)改善對(duì)比[n（%）]

3 討論

大部分女性生殖道感染HPV后可自行清除，但仍有30%左右的女性在感染HPV后無(wú)法自行清除，且長(zhǎng)期處于感染狀態(tài)下進(jìn)展成為尖銳濕疣或?qū)m頸癌[7-8]。相關(guān)研究報(bào)道證實(shí)，高危型HPV的持續(xù)性感染是宮頸癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一。由此可見(jiàn)，及時(shí)檢測(cè)HPV對(duì)預(yù)防其感染具有極其重要的意義[9-10]。女性陰道屬于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的微生態(tài)系統(tǒng)，在一定程度上受機(jī)體內(nèi)分泌水平、陰道微生物菌群以及局部免疫功能等因素的影響。宮頸直接顯露于陰道內(nèi)，因此極易受到陰道微生態(tài)改變的影響，其中陰道微生態(tài)失衡會(huì)顯著增加宮頸高危型HPV感染的風(fēng)險(xiǎn)，繼而增加宮頸疾病發(fā)病概率[11-13]。因此，維持陰道微生態(tài)的正?？赡苡欣诮档透呶Ｐ虷PV感染風(fēng)險(xiǎn)。

本研究結(jié)果顯示，持續(xù)感染組陰道微生態(tài)異常、菌群密集度異常、菌群多樣性異常、陰道分泌物pH＞4.5、過(guò)氧化氫酶異常、唾液酸苷酶異常以及白細(xì)胞脂酶異常發(fā)生率均高于一過(guò)性感染組以及正常對(duì)照組。這與陳銳[14]等人的研究報(bào)道一致，持續(xù)高危型HPV感染患者存在一定程度的陰道微生態(tài)失衡。究其原因，可能是陰道微生態(tài)屬于女性機(jī)體內(nèi)一個(gè)極為靈敏的系統(tǒng)，在遭受內(nèi)源性以及外源性因素影響時(shí)，陰道微生態(tài)平衡系統(tǒng)會(huì)被打破，繼而導(dǎo)致陰道對(duì)各類病原微生物的抵御能力降低，最終引起感染。然而，魏東林[15]的研究報(bào)道發(fā)現(xiàn)，持續(xù)高危型HPV感染患者白細(xì)胞脂酶、過(guò)氧化氫異常率相較于非持續(xù)感染組無(wú)明顯差異。這和本研究結(jié)果存在一定的差異，而導(dǎo)致上述差異發(fā)生的主要原因可能和兩項(xiàng)研究分組方式和樣本量及檢測(cè)方法試劑敏感性不同有關(guān)。此外，經(jīng)多因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，陰道微生態(tài)失衡以及無(wú)避孕措施均是高危型HPV持續(xù)性感染的危險(xiǎn)因素，即隨著陰道微生態(tài)失衡的發(fā)生以及未實(shí)施避孕措施，高危型HPV持續(xù)性感染概率升高。究其原因，陰道微生態(tài)失衡極易導(dǎo)致陰道炎癥的發(fā)生，進(jìn)一步促使陰道黏膜屏障的破壞，從而促進(jìn)了高危型HPV的持續(xù)性感染，并引發(fā)宮頸炎癥，如不予以及時(shí)有效的治療，可能進(jìn)展為宮頸上皮內(nèi)瘤變乃至宮頸癌[16]。由此可見(jiàn)，維持女性陰道微生態(tài)平衡狀態(tài)尤為重要，亦是降低高危型HPV感染以及宮頸病變的關(guān)鍵。避孕措施的實(shí)施可有效維持陰道的自凈功能，從而有效抵御病原微生物的侵襲、感染。乳桿菌為陰道內(nèi)正常菌群，乳酸菌陰道膠囊是一種的微生態(tài)制劑，活乳桿菌為其主要成分，置入陰道后，分解陰道內(nèi)黏膜分泌的糖原，產(chǎn)生乳酸、乙酸等，使陰道保持酸性環(huán)境，進(jìn)而可抑制致病性細(xì)菌的增殖，促進(jìn)乳桿菌大量增殖，進(jìn)而競(jìng)爭(zhēng)性的抑制致病性細(xì)菌的增殖，加快陰道菌群恢復(fù)，平衡陰道微環(huán)境，持續(xù)作用下能夠改善微生態(tài)環(huán)境，可刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)，重建防御機(jī)制。本研究結(jié)果顯示，在使用微生態(tài)制劑陰道乳桿菌膠囊干預(yù)的觀察組干預(yù)后3個(gè)月、6個(gè)月的總有效率及陰道微生態(tài)正常人數(shù)占比均高于未干預(yù)對(duì)照組。這一結(jié)果反映了陰道微生態(tài)制劑干預(yù)的實(shí)施，一定程度上提高了治療效果，可有效促進(jìn)持續(xù)高危型HPV感染患者轉(zhuǎn)陰，也再次證實(shí)了陰道微生態(tài)在高危型HPV持續(xù)感染患者中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。

綜上所述，陰道微生態(tài)狀況與持續(xù)性高危型HPV感染及轉(zhuǎn)歸均密切相關(guān)，臨床工作中可能通過(guò)陰道微生態(tài)制劑干預(yù)等途徑改善陰道微生態(tài)，進(jìn)一步達(dá)到防治持續(xù)性高危型HPV感染的目的。