類胡蘿卜素脂質(zhì)體的特性、制備與評價的研究進展

董鴻春，付聰，楊賢慶，柯悅，王曉真，任丹丹,3*，汪秋寬,3

1(大連海洋大學 食品科學與工程學院，遼寧省水產(chǎn)品加工及綜合利用重點實驗室，國家海藻加工技術研發(fā)分中心，遼寧 大連，116023)2(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)品加工重點實驗室，廣東 廣州，510300)3(海洋食品精深加工關鍵技術省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心，大連工業(yè)大學，遼寧 大連，116034)

類胡蘿卜素是一種廣泛存在于水果和蔬菜等食物中的天然色素，一般由9個共軛雙鍵多烯鏈與兩端基結合。其主要分為胡蘿卜素和葉黃素兩大類。前者是碳氫化合物，如α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素等，后者是氧化的胡蘿卜素，分子中含有一個或多個羥基、羰基、甲氧基、環(huán)氧和呋喃氧等含氧基團，如巖藻黃素、玉米黃質(zhì)等[1]。類胡蘿卜素具有良好的生理功能(抗氧化、增強免疫、延緩衰老等)，對于人體的健康有著積極的影響，受到人們的廣泛關注。類胡蘿卜素的功能性質(zhì)與其化學結構緊密相關，如共軛雙鍵的數(shù)量、環(huán)氧基團、羰基基團等結構的不同會導致活性的差異[2]。類胡蘿卜素穩(wěn)定性差，易受光、熱、酸等外界環(huán)境的影響而發(fā)生氧化、異構等[3]，且大多數(shù)的類胡蘿卜素為脂溶性色素，不溶于水，易溶于有機溶劑[4]，限制了其在一些領域的應用。而微膠囊包埋、納米乳液、脂質(zhì)體[5]等穩(wěn)態(tài)化技術是提高難溶性生物活性成分的穩(wěn)定性和生物利用率的有效途徑[6]。

類胡蘿卜素脂質(zhì)體，是指類胡蘿卜素被包裹于類脂質(zhì)雙分子層內(nèi)而形成的一種微型囊泡，其膜材為具有極性的磷脂，同時加入膽固醇等附加劑。作為一種生物活性成分的載體，脂質(zhì)體有著優(yōu)良的生物相容性，保護被包裹的活性物質(zhì)不與外界環(huán)境接觸進而避免被氧化分解，改善其水分散性，控制在體內(nèi)的釋放速率，提高其穩(wěn)定性和生物利用度[7]。

伴隨著類胡蘿卜素在食品、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥等領域的不斷發(fā)展，類胡蘿卜素脂質(zhì)體的應用也越來越廣泛，本文將從類胡蘿卜素脂質(zhì)體的特點、制備、評價和影響類胡蘿卜素脂質(zhì)體包封率大小的因素進行綜述，以期為類胡蘿卜素脂質(zhì)體的進一步研究提供理論參考。

1 類胡蘿卜素脂質(zhì)體的特點

類胡蘿卜素脂質(zhì)體具有眾多的優(yōu)良特性，例如分散性、穩(wěn)定性、緩釋長效性、靶向性和細胞膜有較強的親和性等。

磷脂作為類胡蘿卜素脂質(zhì)體的壁材，其分散在水中會形成呈閉合狀態(tài)的雙分子層囊泡結構，類胡蘿卜素與親油性尾部結合進入雙分子層內(nèi)部。磷脂具有親水性，通過脂質(zhì)體的包埋，可顯著提高類胡蘿卜素的溶解性。JHAN等[8]開發(fā)了番茄紅素與β-環(huán)糊精復合雙載脂質(zhì)體，并對其溶解度進行研究。研究表明，番茄紅素與β-環(huán)糊精復合脂質(zhì)體比純番茄紅素具有更高的溶解度，其溶解度提高了200%，溶解度的增加可能與絡合物形成有關。

類胡蘿卜素脂質(zhì)體穩(wěn)定性得到提高，在一定的貯藏條件下，可以保持一定量的類胡蘿卜素不被降解。PEZESHKI等[9]研究了β-胡蘿卜素納米脂質(zhì)體的穩(wěn)定性,通過14 d貯藏過程中的β-胡蘿卜素的釋放率評估脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。試驗結果表明，14 d后，其釋放率僅為8.51%，證實了經(jīng)磷脂包埋的β-胡蘿卜素具有良好的穩(wěn)定性。

類胡蘿卜素通過脂質(zhì)成分的包埋，避免了被氧化、分解。進入消化道后，被保護的類胡蘿卜素不會被體內(nèi)的酸性環(huán)境或者消化酶分解破壞，在組織和血液中的擴散速率減慢，從而延長了類胡蘿卜素在體內(nèi)的作用時間[10]。鄭景霞[11]通過人工胃腸模擬模型對β-胡蘿卜素和薏苡仁油復合脂質(zhì)體的緩釋特性進行研究，研究表明，在胃液中，β-胡蘿卜素的釋放特性符合一級模型，β-胡蘿卜素的積累釋放量隨消化時間的增加而逐漸升高，在第9小時達到33.13%后保持不變。而在腸液中，β-胡蘿卜素的釋放符合Korsmeyr-Peppas模型，即β-胡蘿卜素的釋放曲線分為2個持續(xù)釋放階段，但后一階段的釋放速率相對較慢，在第24小時達到最大釋放量為64.73%。經(jīng)研究證實，磷脂等壁材可在胃液中對β-胡蘿卜素起到一定的保護作用，而在腸液中得以緩慢釋放。

類胡蘿卜素脂質(zhì)體進入機體后，囊泡能保護被包裹的類胡蘿卜素，延長其在體循環(huán)中的時間，實現(xiàn)細胞特異性靶向[12]。張必芳[13]通過小鼠試驗研究番茄紅素納米脂質(zhì)體在體內(nèi)的消化分布。結果顯示，納米脂質(zhì)體與油溶相比較，番茄紅素在血清和肝臟中的含量均有所提高，但血清中的含量無顯著性差異，而肝臟中含量顯著提高，初步證實番茄紅素納米脂質(zhì)體對肝臟具有被動靶向性。

類胡蘿卜素脂質(zhì)體的結構與細胞膜相似[12]，目前已有研究通過表面修飾增加脂質(zhì)體的藥學特性。MALGARIM等[5]以殼聚糖包覆巖藻黃素脂質(zhì)體，改善其生物藥學特性。通過透射電鏡和電位分析，證實了納米顆粒表面存在殼聚糖膜。與未涂層系統(tǒng)相比，殼聚糖涂層的存在明顯提高脂質(zhì)體與細胞的親和性。

2 類胡蘿卜素脂質(zhì)體的制備

2.1 制備方法

目前，脂質(zhì)體的制備方法有很多，其中根據(jù)分散方法的差別可將其分為機械分散法和溶劑分散法兩大類。

2.1.1 機械分散法

機械分散法是一種通過施加機械能來制備脂質(zhì)體的方法，主要包括薄膜法、超聲法和擠壓法。

薄膜法是指首先將芯材和膜材使用有機溶劑溶解，再將有機溶劑用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器去除，加入緩沖液并使其充分溶解，再進行二次旋蒸至形成一層薄層脂膜即為脂質(zhì)體混懸液。歐春鳳等[14]通過薄膜-均質(zhì)法制備番茄紅素脂質(zhì)體，結果顯示，當m(膽固醇)∶m(卵磷脂)=1∶3、磷酸緩沖液pH 7.0、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度30 ℃、m(番茄紅素)∶m(卵磷脂)=1∶20時，包封率可達到71.65%。該方法制備的番茄紅素脂質(zhì)體顆粒小、穩(wěn)定性較好、耗時短。

超聲分散法包括水浴超聲和探頭超聲，制備脂質(zhì)體多采用水浴超聲分散法。芐春等[15]采用超聲波分散法制備葉黃素-花青素脂質(zhì)體，發(fā)現(xiàn)包封葉黃素最適親水親油平衡值值為10.9，當復合表面活性劑的用量為1%、膜材用量7.9%、pH為9、溫度為60 ℃、時間47 min時，葉黃素-花青素脂質(zhì)體的包封率可達到38%。超聲技術適用于制備0.025～0.08 μm的脂質(zhì)體，但不適用于大規(guī)模生產(chǎn)，長時間的超聲和隨后的熱積累可能會導致脂質(zhì)的過氧化和溶質(zhì)分子的降解，低能量的超聲作用是一個緩慢的過程，可能會破壞磷脂分子。

類胡蘿卜素脂質(zhì)體的制備中，薄膜法與超聲技術通常聯(lián)合使用。范遠景等[16]利用薄膜-超聲法制備番茄紅素脂質(zhì)體并且對其制備工藝進行了優(yōu)化，得到最佳制備工藝為：PBS緩沖溶液pH 7.0、洗膜溫度34 ℃、m(番茄紅素)∶m(膽固醇)∶m(卵磷脂)=2∶15∶100，此時包封率可達49.88%。李傳靈等[17]采用薄膜-超聲法制備葉黃素脂質(zhì)體，發(fā)現(xiàn)當葉黃素用量為5.34 mg、m(大豆卵磷脂)∶m(膽固醇)=14.35∶1、旋蒸溫度為32.9 ℃時，脂質(zhì)體的包封率最佳，可達到87.49%。

擠壓法的原理是利用壓力傳感器對脂質(zhì)體進行擠壓，通過此方法制備的脂質(zhì)體粒徑較大，類胡蘿卜素脂質(zhì)體的制備很少采用此方法。

2.1.2 溶劑分散法

溶劑分散法主要包括乙醇或乙醚注入法和反相蒸發(fā)法等。

乙醇注入法是指將卵磷脂、膽固醇與類胡蘿卜素等溶解于乙醇中，然后將其緩慢注入水合介質(zhì)中，經(jīng)加熱和真空旋蒸等將乙醇蒸出，然后利用過濾器過濾得到粗脂質(zhì)體。楊安平等[18]采用上述方法制備蝦青素脂質(zhì)體，最佳工藝為水合介質(zhì)pH值為7.0、溫度為60 ℃、m(脂質(zhì)體)∶m(蝦青素)=40∶1、m(磷脂)∶m(膽固醇)=20∶1，最佳工藝下的包封率為35.28%。焦巖等[19]采用上述的方法制備玉米黃色素脂質(zhì)體，當溫度為50 ℃、m(卵磷脂)∶m(膽固醇)=4∶1、玉米黃色素添加量為5 mg/mL時，得到的脂質(zhì)體包封率高達89.82%。乙醇注入法簡單可行，但易存在有機溶劑殘留問題且耗時較長。

反相蒸發(fā)法是指將卵磷脂和膽固醇等膜材溶解于氯仿等有機溶劑中，超聲后形成混合物，控制適宜溫度進行真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，形成一層薄層脂膜，將該薄層脂膜溶于乙醚中形成有機相，類胡蘿卜素溶解于乙醇-磷酸鹽緩沖液中，形成水相，水相和有機相按照合適的比例混合后，形成油包水乳狀液，經(jīng)超聲、放置、過濾后得到脂質(zhì)體混懸液。李淑梅等[20]利用上述方法制取番茄紅素脂質(zhì)體，得到最佳制備工藝為旋轉(zhuǎn)速度為200 r/min、溫度為35 ℃、m(卵磷脂)∶m(膽固醇)=3∶1和m(番茄紅素)∶m(卵磷脂)=1∶6時，脂質(zhì)體的包封率可高達71.26%。反相蒸發(fā)法制備出的脂質(zhì)體有較好的穩(wěn)定性且包封率較高，但存在有機溶劑去除不完全現(xiàn)象。

2.1.3 其他方法

除上述制備方法外，類胡蘿卜素脂質(zhì)體制備方法還包括噴霧冷卻法、超臨界CO2抗溶劑法、乳化蒸發(fā)-低溫固化法[21]等，均逐漸得以廣泛應用。

噴霧冷卻法是指熔化的載體和活性成分的混合物通過霧化噴嘴噴入冷室，當液滴與室內(nèi)寒冷環(huán)境相遇時，脂肪凝固形成微粒的過程。PELISSARI等[22]采用噴霧冷卻技術，以起酥劑為載體，制備了番茄紅素納米脂質(zhì)體制劑，研究發(fā)現(xiàn)此類脂質(zhì)體晶體結構呈非單一狀態(tài)，這種不均勻的結晶結構可以避免脂質(zhì)重結晶，并促進番茄紅素從微粒中排出，有利于其在生物體內(nèi)的消化吸收。噴霧冷卻法是一種低成本的連續(xù)工藝，且不需要溶劑，在制備的過程中不涉及高溫，適用于一些對熱敏感的類胡蘿卜素。

XIA等[23]采用超臨界CO2反溶劑技術制備葉黃素前體脂質(zhì)體，當溶液流速1 mL/min、壓力8 MPa、溫度35 ℃的條件下獲得最佳工藝，前體脂質(zhì)體的葉黃素負載量可達55 mg/g，前體脂質(zhì)體水合后，得到包封率大于90%的葉黃素脂質(zhì)體。韓春然等[24]采用超臨界CO2反溶劑技術制備番茄紅素脂質(zhì)體，研究表明當m(卵磷脂)∶m(膽固醇)=9∶20、緩沖溶液pH為7.0、m(番茄紅素)∶m(卵磷脂)=1∶50時，包封率達到最大值，為83.4%。該方法因其溶劑殘留量低、步驟簡單、操作溫和而得以應用，且該工藝綠色環(huán)保，在脂質(zhì)體的制備上具有強大的應用潛力。

乳化蒸發(fā)-低溫固化法是指將類胡蘿卜素和卵磷脂等膜材形成的有機相緩慢注射進由表面活性劑泊洛沙姆形成的水相中，經(jīng)高溫下攪拌蒸發(fā)后，迅速放入冰浴中，繼續(xù)攪拌產(chǎn)生脂質(zhì)體的過程。劉媛[25]采用上述方法制備蝦青素脂質(zhì)體，當無水乙醇用量為10 mL、泊洛沙姆150 g、超聲時間10 min、水浴溫度75 ℃、轉(zhuǎn)速1 000 r/min時，得到乳白色半透明脂質(zhì)體。乳化蒸發(fā)-低溫固化法操作簡單易行，可制取出粒徑小且分布均勻、并具有優(yōu)良的穩(wěn)定性的類胡蘿卜素脂質(zhì)體[26]。

脂質(zhì)體的研究已有近二十多年的歷史，脂質(zhì)體的制備技術還在不斷完善。隨著人們對脂質(zhì)體的深入研究，越來越多的先進技術，如冷凍干燥雙重法、膜收縮技術、雙不對稱離心和超臨界流體技術等將應用在脂質(zhì)體制備中，不斷提升高性能脂質(zhì)體的制備水平。

3 制備類胡蘿卜素脂質(zhì)體的影響因素

3.1 磷脂

磷脂是構成脂質(zhì)體的重要膜材，磷脂的來源十分廣泛，而且種類多種多樣，組成也非常復雜。其中主要的包括天然磷脂和合成磷脂，應用較多的天然磷脂主要有大豆卵磷脂和蛋黃卵磷脂。除天然磷脂外，目前已有通過純化技術或改性技術對磷脂進行結構調(diào)整來制備合成磷脂，但這類磷脂大多需要使用有機溶劑，存在著一定的安全隱患。

磷脂種類不同，理化性質(zhì)不同。脂質(zhì)體的制備應用于不同的磷脂，其性能也大相徑庭。研究發(fā)現(xiàn)，類胡蘿卜素脂質(zhì)體的制備常采用2種天然磷脂，蛋黃卵磷脂的性質(zhì)優(yōu)于大豆卵磷脂。楊安平等[18]和焦巖等[27]分別制備了蝦青素脂質(zhì)體和葉黃素脂質(zhì)體，前者選用大豆卵磷脂，后者選用蛋黃卵磷脂，在最佳工藝條件下所制備的脂質(zhì)體的包封率分別為(35.28±0.93)%和(91.20±0.56)%，證實了蛋黃卵磷脂的包封率略高于大豆卵磷脂，蛋黃卵磷脂擁有更好的類胡蘿卜素轉(zhuǎn)運能力，更適合于應用于脂質(zhì)體的制備。

3.2 膽固醇

膽固醇是脂質(zhì)體配方中的常用的添加劑之一，它在脂質(zhì)體中的作用主要為：改善雙層膜的流動性；改善脂質(zhì)體膜的通透性；在生物流體存在的情況下穩(wěn)定脂質(zhì)體[28]。膽固醇效應可以通過增加脂質(zhì)體的親脂性降低親水性藥物對脂泡的親和力。另外，膽固醇可能會引起囊泡大小的變化。

在類胡蘿卜素脂質(zhì)體的制備中，磷脂與膽固醇的用量會對脂質(zhì)體的包封率產(chǎn)生影響，對于二者的用量一般以它們添加比例的形式進行研究。鄭景霞[11]研究了不同質(zhì)量比的磷脂和膽固醇對于β-胡蘿卜素-薏苡仁油復合脂質(zhì)體的包封率和粒徑的影響，隨著增大卵磷脂與膽固醇質(zhì)量比，β-胡蘿卜素的包封率會先增大后趨于穩(wěn)定，而粒徑會先減小后趨于穩(wěn)定，當二者質(zhì)量比為5∶1時，可降低磷脂雙分子層膜的流動性，提高其致密性和剛性，增加包封率。當比例過小時，卵磷脂數(shù)量太少，不易形成脂質(zhì)體膜，且過低的比例會使磷脂雙分子層排列不夠緊密，且形成的脂質(zhì)體數(shù)量不足以包埋類胡蘿卜素。故在制備類胡蘿卜素脂質(zhì)體時，要選擇合適的磷脂與膽固醇質(zhì)量比。

3.3 制備方法

采用不同的制備方法，所獲得的脂質(zhì)體的包封率等性能會不同。具體比較見表1。制備方法各有優(yōu)劣，采用逆向蒸發(fā)法可制備出包封率較高的脂質(zhì)體，被包封的物質(zhì)也比較均勻分布于脂質(zhì)體中。有機溶劑法制備的脂質(zhì)體會有少量的有機溶劑的殘留。目前來說，一些新開發(fā)的制備方法如超臨界抗溶劑法等所制備的脂質(zhì)體不僅包封率高、穩(wěn)定性好，而且更先進、更環(huán)保。

表1 不同制備方法的類胡蘿卜素脂質(zhì)體的包封率比較Table 1 Comparison of encapsulation efficiency of carotenoid liposomes prepared by different methods

4 類胡蘿卜素脂質(zhì)體的評價

類胡蘿卜素脂質(zhì)體制備后，一般需要對其性能進行評價。評價脂質(zhì)體的指標包括包封率、平均粒徑、微觀結構、穩(wěn)定性和生物利用率等。

4.1 包封率

包封率作為衡量脂質(zhì)體內(nèi)在質(zhì)量的重要指標，也是對脂質(zhì)體制劑的監(jiān)管要求。包封率是評價輸送系統(tǒng)是否具有潛在應用價值的一個關鍵參數(shù)[8]，包封率的大小直接反映脂質(zhì)體質(zhì)量的好壞。

類胡蘿卜素脂質(zhì)體的評價多采用包封率為主要指標。鄭景霞等[38]制備β-胡蘿卜素-薏苡仁油復合脂質(zhì)體，以包封率作為主要評價指標，當PBS緩沖液體積為25 mL、m(卵磷脂)∶m(膽固醇)=7∶1、攪拌溫度為43 ℃ 時，通過有機溶劑萃取法測定該條件下的β-胡蘿卜素的包封率為84.39%。ZHAO等[39]制備了葉黃素脂質(zhì)體，以包封率為主要評價指標，當壓力300 Bar、降壓90 Bar/min、溫度50 ℃、m(葉黃素)∶m(磷脂)=1∶20時，脂質(zhì)體的包封率達到最佳水平，可達87.10%。

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，采用殼聚糖、果膠、多聚賴氨酸等聚合物進行表面修飾，可以提高脂質(zhì)體的包封率。焦巖等[28]利用多聚賴氨酸對葉黃素納米脂質(zhì)體進行修飾，經(jīng)修飾的脂質(zhì)體的包封率可達95.36%。多聚賴氨酸通過靜電吸附作用與脂質(zhì)體有效結合，形成包覆結構，進而提高了脂質(zhì)體對葉黃素的包封性能。白春清等[40]采用果膠-殼聚糖對番茄紅素脂質(zhì)體進行修飾，發(fā)現(xiàn)未經(jīng)修飾的脂質(zhì)體的包封率為85.4%，而經(jīng)多層修飾的脂質(zhì)體包封率可達97.8%，包封率得到顯著提升。

4.2 大小形態(tài)與電位

脂質(zhì)體的評價中，對其進行表觀的評價至關重要，一般要對其大小形態(tài)和電位進行檢測，以評估其質(zhì)量好壞和穩(wěn)定性。

采用透射電子顯微鏡對脂質(zhì)體進行微觀形態(tài)的研究，分析類胡蘿卜素脂質(zhì)體的內(nèi)部結構和形貌，觀察類胡蘿卜素被包埋進脂質(zhì)體膜內(nèi)部的分布是否均勻，分析類胡蘿卜素與壁材結合的緊密程度。

平均粒徑所體現(xiàn)的是脂質(zhì)體的大小程度，粒徑越小，其穩(wěn)定性等性能會更佳。近年來，類胡蘿卜素脂質(zhì)體的粒徑范圍集中在40～300 nm，但不同種類的類胡蘿卜素，粒徑的大小也不同，葉黃素、番茄紅素和β-胡蘿卜素脂質(zhì)體的粒徑較小，而斑螯黃素脂質(zhì)體的粒徑偏大，其體系中存在著聚集的囊泡[41]。

Zeta電位是一種間接衡量膠體穩(wěn)定性的指標，即懸浮液中顆粒表面上的靜電電荷。研究結果顯示，電位在±(0～10) mV范圍內(nèi)高度不穩(wěn)定，在±(20～30) mV范圍內(nèi)比較穩(wěn)定。Zeta電位的絕對值越大，脂質(zhì)體載體上的表面電荷就越高，這會導致囊泡之間的排斥力增大，從而可以防止脂質(zhì)體的聚集和絮凝，使脂質(zhì)體更加穩(wěn)定。LI等[37]制備蝦青素脂質(zhì)體，當pH值為7.4時，其Zeta電位值可達-31.80 mV，表明該脂質(zhì)體處于相對穩(wěn)定的狀態(tài)。

4.3 穩(wěn)定性

脂質(zhì)體的穩(wěn)定性反映了包封率等隨著時間變化的情況。對于脂質(zhì)體穩(wěn)定性的研究一般包括貯藏穩(wěn)定性、通過聚合物修飾提高其穩(wěn)定性等。

貯藏穩(wěn)定性通過將脂質(zhì)體的懸浮液在一定溫度或真空條件下貯存，在貯存期間，觀察脂質(zhì)體的大小和形態(tài)變化，通過測量脂質(zhì)體的包封率和PDI來評價脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。郎朗等[42]考察葉黃素口服脂質(zhì)體的貯藏穩(wěn)定性，分別在5 ℃和25 ℃的條件下貯存脂質(zhì)體30 d，檢測其包封率的改變，同時觀察脂質(zhì)體的外觀形貌的變化。結果顯示，葉黃素脂質(zhì)體在貯存前10 d，其包封率不變，10 d以后，包封率呈明顯下降趨勢。30 d后，脂質(zhì)體均勻分布，無絮凝和沉淀產(chǎn)生。MORAES等[43]研究β-胡蘿卜素前體脂質(zhì)體貯藏穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體在真空條件下可貯藏60 d時，可保存90%以上的類胡蘿卜素，顏色基本保持不變，脂質(zhì)體在常壓條件下貯存15 d后，脂質(zhì)體的包封率下降至75%，繼續(xù)貯存，在第60天時，脂質(zhì)體的包封率降為70%。

經(jīng)過脂質(zhì)體包埋的類胡蘿卜素的溶解性和穩(wěn)定性得以提高，但脂質(zhì)體在熱力上具有一定的不穩(wěn)定性，在貯存和運輸?shù)倪^程中，易發(fā)生聚集和融合、磷脂的氧化和水解等，導致其完整性的破壞和包埋材料的泄露。在脂質(zhì)體表面修飾生物聚合物是克服脂質(zhì)體不穩(wěn)定性的一種實用方法，以保持其結構、增加其動力學和機械穩(wěn)定性。常用的一些聚合物包括黃原膠、瓜爾膠、殼聚糖、海藻酸鈉和多聚賴氨酸等。TONIAZZO等[44]通過前體脂質(zhì)體法水合得到β-胡蘿卜素脂質(zhì)體，研究黃原膠和瓜爾膠的混合物作為增稠劑對脂質(zhì)體的修飾作用。研究發(fā)現(xiàn)，在沒有增稠劑的情況下，脂質(zhì)體在不到24 h的貯存時間內(nèi)完全失穩(wěn)，出現(xiàn)肉眼可見的相分離。劉欣等[45]采用殼聚糖、海藻酸鈉逐層修飾維生素C-β-胡蘿卜素復合脂質(zhì)體的表面制備了單層修飾脂質(zhì)體和雙層修飾脂質(zhì)體，通過對3種脂質(zhì)體的貯藏穩(wěn)定性的研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過修飾的脂質(zhì)體中的維生素C和β-胡蘿卜素的保留率在同一條件下比在原始脂質(zhì)體中高出2%～10%，證實了經(jīng)過表面修飾后的脂質(zhì)體，其貯藏穩(wěn)定性得以提高。劉瑋琳等[46]采用殼聚糖對粗脂質(zhì)體和納米脂質(zhì)體進行修飾，經(jīng)過加熱、紫外照射和消化處理后，結果顯示，經(jīng)修飾的脂質(zhì)體的穩(wěn)定性更高，且殼聚糖的濃度越高，脂質(zhì)體抵抗外界環(huán)境的能力越強。

4.4 生物利用率

類胡蘿卜素的低生物利用率限制了其在一些領域的應用和發(fā)展。將類胡蘿卜素制成脂質(zhì)體劑型，可以有效改善其溶解分散性，控制其在體內(nèi)的釋放速度，促進其消化吸收，提高其生物利用率。

伴隨著包封技術的不斷成熟，對于包封后的芯材的生物利用率的研究也隨之廣泛，類胡蘿卜素脂質(zhì)體生物利用率的研究主要包括動物試驗、細胞試驗和體外消化模型等。朱金芳等[10]制備番茄紅素脂質(zhì)體，采用透析法研究其體外釋放行為，通過大鼠單向腸灌流技術比較番茄紅素原料和其脂質(zhì)體在腸內(nèi)的吸收特性。研究結果表明，與番茄紅素原料相比，番茄紅素脂質(zhì)體能增加番茄紅素在小腸的吸收，提高番茄紅素的生物利用度。STOJILJKOVIC等[12]研究了番茄紅素納米脂質(zhì)體對甲氨蝶呤誘導的大鼠腎損傷的保護作用，分別給小鼠注射玉米油溶的番茄紅素和其脂質(zhì)體，并檢測血清生化指標(尿素和肌酐)、組織氧化損傷標志物和腎臟組織病理學改變，通過比較發(fā)現(xiàn)接受納米脂質(zhì)體形式的番茄紅素的小鼠比接受游離番茄紅素形式治療的小鼠顯示出更高的恢復程度。PENG等[47]比較游離蝦青素和蝦青素脂質(zhì)體對HepG2和Hep3B細胞的作用，發(fā)現(xiàn)蝦青素脂質(zhì)體比游離蝦青素更有效地激活超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶等抗氧化酶。這可能是由于蝦青素脂質(zhì)體的結構與細胞膜的結構相似，更容易進入細胞中，進而對細胞中的酶起作用，提高蝦青素的生物利用率。JIAO等[48]采用乙醇注入制備葉黃素脂質(zhì)體，對葉黃素和葉黃素脂質(zhì)體的體外消化進行研究，通過體外胃腸消化模型試驗證明經(jīng)過包埋的葉黃素的降解速率明顯降低，延長了葉黃素的作用時間，使生物利用率得以提高。脂質(zhì)體能增加類胡蘿卜素的水溶性及其與腸粘膜的生物相容性，使其更易通過被動擴散等途徑進入血液后被轉(zhuǎn)運到靶器官[8]。

類胡蘿卜素經(jīng)過包埋，其生物利用率會有不同程度的提高，提高的程度和類胡蘿卜素的種類有關。TAN等[49]研究了不同種類的類胡蘿卜素脂質(zhì)體的生物利用率，發(fā)現(xiàn)經(jīng)脂質(zhì)體的包埋后，類胡蘿卜素的生物利用度大小順序為：葉黃素>β-胡蘿卜素>番茄紅素>角黃素。通過二元相關分析，類胡蘿卜素脂質(zhì)體的生物利用率強烈地依賴于類胡蘿卜素對脂質(zhì)雙層的摻入能力、載藥量和體系的性質(zhì)。

雖然關于類胡蘿卜素脂質(zhì)體的生物利用率研究越來越廣泛，人們通過體外胃腸模擬消化和小鼠體內(nèi)藥代動力學等方法對其進行研究，但由于人體是一個非常復雜的體系，類胡蘿卜素脂質(zhì)體在體內(nèi)的吸收、分布、代謝等的規(guī)律還有待進一步深入研究。

5 展望

類胡蘿卜素是一類具有生理活性的健康的天然色素，目前，在制藥和食品工業(yè)中被廣泛用作天然著色劑和抗氧化劑，以延長乳制品、肉類、糖果和飲料產(chǎn)品的保質(zhì)期[12]。隨著人們對其生物活性的深層次研究，其在食品、醫(yī)藥保健及化妝品等領域的發(fā)展前景將更加廣闊。因此，解決類胡蘿卜素穩(wěn)定性低、分散性差及生物利用率低的脂質(zhì)體技術將有助于進一步拓展類胡蘿卜素的應用市場。

研究者們通過制備前體脂質(zhì)體、納米級脂質(zhì)體和表面修飾等提高了類胡蘿卜素的穩(wěn)定性和溶解分散性，并獲得了較高的生物利用率。但制備的類胡蘿卜素脂質(zhì)體依然存在著熱力學穩(wěn)定性差、芯材泄露等的問題，因此如何采用更簡單、易操作、更廉價的制備方法制備粒徑尺度更小、穩(wěn)定性更高、不易泄露的脂質(zhì)體，將成為研究者們下一步研究的方向。