• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于脂質(zhì)組學(xué)技術(shù)探究熱處理和發(fā)酵對(duì)乳脂質(zhì)的影響

    2022-08-02 03:10:44高文浩尹乾隆王筱迪滕翔宇任皓威
    食品科學(xué) 2022年14期

    高文浩,尹乾隆,王筱迪,滕翔宇,2,任皓威,2,劉 寧,2,*

    (1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院,乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,黑龍江 哈爾濱 150030;2.哈爾濱騰凝科技有限公司,黑龍江 哈爾濱 150030)

    酸乳是世界上最受歡迎的發(fā)酵乳制品之一,作為健康食品已獲得消費(fèi)者的廣泛認(rèn)可。酸乳不僅能提供全面營(yíng)養(yǎng),還具有許多健康益處,其生產(chǎn)是一個(gè)長(zhǎng)期的、不斷變化的過(guò)程。酸乳的質(zhì)量特性受諸多因素影響,其中熱處理和發(fā)酵是最重要兩方面。在20世紀(jì)后期,酸乳實(shí)現(xiàn)了生產(chǎn)工業(yè)和生產(chǎn)過(guò)程標(biāo)準(zhǔn)化,其中熱處理一般采用高溫巴氏殺菌,要求溫度在85 ℃持續(xù)20~30 min或90~95 ℃持續(xù)5 min,在此條件下除孢子外,大多數(shù)微生物被殺死,大多數(shù)酶失活,從而確保了產(chǎn)品的安全性。在商業(yè)化酸乳制作中最常用的發(fā)酵劑是嗜熱鏈球菌和德氏乳桿菌保加利亞亞種,在42 ℃左右條件下發(fā)酵,這一階段誘導(dǎo)凝乳的形成,促使酸乳產(chǎn)生質(zhì)地特征和獨(dú)特風(fēng)味。然而,目前關(guān)于酸乳加工過(guò)程中熱處理和發(fā)酵會(huì)對(duì)產(chǎn)品脂質(zhì)影響的研究較少。

    脂質(zhì)組學(xué)是組學(xué)的重要分支,作為食品科學(xué)領(lǐng)域中高效、敏感和強(qiáng)大的分析工具應(yīng)用范圍十分廣泛,如食品加工及轉(zhuǎn)化和食物對(duì)人類(lèi)健康影響等研究。然而,以酸乳為中心的脂質(zhì)組學(xué)研究有限。章麗等基于脂質(zhì)組學(xué)技術(shù)鑒定了嗜熱鏈球菌發(fā)酵乳的脂質(zhì)構(gòu)成;Lordan等基于超高效液相色譜(ultra-high performance liquid chromatography,UPLC)結(jié)合高分辨率質(zhì)譜分析發(fā)酵對(duì)羊乳極性脂質(zhì)的影響,并探究極性脂質(zhì)對(duì)血小板活化因子和凝血酶的抑制作用;Furse等用脂質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析市售牛乳、酸乳和乳酪的脂質(zhì)特性,但并未深入研究發(fā)酵對(duì)脂質(zhì)的影響。因此,本研究基于非靶向脂質(zhì)組學(xué)技術(shù)系統(tǒng)闡明牛酸乳和羊酸乳制造過(guò)程中脂質(zhì)組成及動(dòng)態(tài)變化,深入探究熱處理-巴氏殺菌(物理因素)和發(fā)酵-菌種脂質(zhì)代謝(生物化學(xué)因素)對(duì)牛乳和羊乳脂質(zhì)的影響,并篩選出可作為鑒別產(chǎn)品是否經(jīng)熱處理和發(fā)酵的潛在標(biāo)志物,用于商業(yè)化生產(chǎn)酸乳過(guò)程中加工工藝終點(diǎn)及產(chǎn)品狀態(tài)的判斷,并在分子水平上探索熱處理和發(fā)酵對(duì)不同乳基產(chǎn)生的共同脂質(zhì)的變化,以期推動(dòng)對(duì)酸乳最終產(chǎn)品質(zhì)量和營(yíng)養(yǎng)特性的理解。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    全脂牛乳和全脂羊乳分別購(gòu)自中國(guó)黑龍江省哈爾濱市當(dāng)?shù)啬翀?chǎng),品種分別為荷斯坦乳牛和薩能山羊,飼喂日糧均為玉米、黃豆和青貯飼料。采集10 頭乳牛和乳山羊擠出的新鮮牛乳和羊乳,分別混合后立即轉(zhuǎn)移至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行酸乳制作。

    發(fā)酵劑MY105(嗜熱鏈球菌和德氏乳桿菌保加利亞亞種按1∶1混合) 法國(guó)丹尼斯克公司;乙腈、異丙醇、甲醇 美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司;其余試劑均為色譜級(jí)。

    1.2 儀器與設(shè)備

    UPLC Nexera LC-30A系統(tǒng) 日本Shimadzu公司;Q-Exactive Plus質(zhì)譜(mass spectrometry,MS)儀美國(guó)Thermo Scientific公司;ACQUITY UPLC CSH C色譜柱(2.1 mmh100 mm,1.7 μm) 美國(guó)Waters公司。

    1.3 方法

    1.3.1 酸乳制作

    參照前期實(shí)驗(yàn)進(jìn)行酸乳制作。牛乳和羊乳經(jīng)過(guò)多次紗布過(guò)濾去除固體雜質(zhì),然后加熱至55 ℃采用二段法均質(zhì)(20/5 MPa),均質(zhì)后牛乳和羊乳在90 ℃下高溫巴氏殺菌5 min,冷卻至45 ℃準(zhǔn)備接菌。按照56 mg/L的比例接種丹尼斯克發(fā)酵劑MY105,接種后牛乳和羊乳于42 ℃恒溫培養(yǎng),待牛酸乳和羊酸乳pH值達(dá)到4.6左右立即于4 ℃冷卻停止發(fā)酵。生鮮牛乳(CM)、生鮮羊乳(GM)、巴氏殺菌牛乳(PC)、巴氏殺菌羊乳(PG)、牛酸乳(FC)、羊酸乳(FG)和質(zhì)控(QC),等量取各組樣品混合制備。樣品于-80 ℃冰箱冷凍保存,備用。每組樣品各6 個(gè)重復(fù)。

    1.3.2 脂質(zhì)提取

    采用改良的甲基叔丁基醚(methyl tert-butyl ether,MTBE)提取法,取樣本于4 ℃緩慢解凍后,將100 μL樣本加入200 μL超純水,混合,隨后加入240 μL預(yù)冷甲醇,渦旋混合,再加入800 μL MTBE,渦旋混合,室溫放置30 min后,14 000h、10 ℃離心15 min,取上層有機(jī)相,氮?dú)獯蹈?。檢測(cè)分析時(shí)加入200 μL異丙醇復(fù)溶、渦旋,14 000h、10 ℃離心15 min,取上清液進(jìn)樣分析。

    1.3.3 色譜及質(zhì)譜條件

    UPLC條件:ACQUITY UPLC CSH C色譜柱(2.1 mmh100 mm,1.7 μm);流動(dòng)相:A為含10 mmol/L甲酸銨的體積分?jǐn)?shù)60%乙腈溶液;B為含10 mmol/L甲酸銨的乙腈-異丙醇(1∶9,/)。梯度洗脫程序:0~2 min,70% A、30% B;2~25 min,70%~0% A、30%~100% B;25~35 min,70% A、30% B;柱溫45 ℃,流速300 μL/min;進(jìn)樣口溫度10 ℃。為避免儀器檢測(cè)信號(hào)波動(dòng)造成的影響,采用隨機(jī)順序進(jìn)行樣本連續(xù)分析。

    MS條件:采用電噴霧電離源,采用正負(fù)離子模式。正離子模式參數(shù)設(shè)定:離子源溫度300 ℃;噴霧電壓3.0(正離子模式)、2.5 kV(負(fù)離子模式);離子傳輸管溫度350 ℃;鞘氣流速45 arb;輔助器流速15 arb;吹掃氣流速1 arb;一級(jí)MS掃描范圍:200~1 800 Da。每次全掃描后采集10 個(gè)碎片圖譜,一級(jí)MS在/200時(shí)的分辨率為70 000,二級(jí)MS在/200時(shí)的分辨率為17 500。

    采用LipidSearch進(jìn)行峰的識(shí)別和提取、脂質(zhì)鑒定(二級(jí)鑒定)等。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

    2 結(jié)果與分析

    2.1 方法學(xué)驗(yàn)證

    將所有實(shí)驗(yàn)樣品和QC樣本提取到的數(shù)據(jù)進(jìn)行PCA,如圖1A所示,6 個(gè)QC樣本緊密聚集在一起,相對(duì)位置位于6 組樣品中間并且接近原點(diǎn),表明實(shí)驗(yàn)具有良好的重復(fù)性。Hotelling通過(guò)多元變量建立模型對(duì)總體樣本進(jìn)行檢驗(yàn),紅色虛線(xiàn)定義了99%置信區(qū)間,可用于離群樣本的診斷,如圖1B所示,所有樣本均在99%置信區(qū)間內(nèi),再次說(shuō)明實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好。

    圖1 所有樣本的PCA(A)和Hotelling T2檢驗(yàn)(B)Fig.1 PCA plot (A) and Hotelling T2 test plot (B) for all samples

    2.2 牛乳和羊乳在加工過(guò)程中脂質(zhì)特性變化分析

    基于UPLC-Q-Exactive-MS對(duì)牛乳、羊乳、巴氏殺菌牛乳、巴氏殺菌羊乳、牛酸乳和羊酸乳進(jìn)行非靶向脂質(zhì)組學(xué)分析。如圖2所示,實(shí)驗(yàn)樣本中檢測(cè)到脂質(zhì)亞類(lèi)共計(jì)27 類(lèi),其中檢測(cè)到數(shù)目最多的脂質(zhì)分子為三?;视王ィ╰riglyceride,TG)共731 種,其次為379 種二?;视王ィ╠iglyceride,DG)和110 種己糖基神經(jīng)酰胺(hexa-ceramide,HexCer)(其中包括83 種Hex1Cer、25 種Hex2Cer和2 種Hex3Cer),之后依次為82 種磷脂酰膽堿(phosphatidylcholine,PC)、74 種磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)、66 種鞘磷脂(sphingomyelin,SM)、43 種神經(jīng)酰胺(ceramides,Cer)、31 種磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PI)、21 種磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine,PS)、14 種鞘氨醇(sphingosine,Sph)、9 種單?;视王ィ╩onoglyceride,MG)、6 種溶血性磷脂酰膽堿(lysophosphatidylcholine,LPC)、6 種酵母甾醇(zymosterol,ZyE)、5 種溶血性磷脂酰乙醇胺(lysophosphatidylethanolamine,LPE)、5 種單半乳糖二?;视停╩onogalactosylmonoacylglycerol,MGDG)、5 種磷脂酰甘油(phosphatidylglycerol,PG)、4 種豆甾醇酯(stigmasterol ester,StE)、4 種蠟酯(wax exters,WE)、3 種磷酸神經(jīng)酰胺(ceramides phosphate,CerP)、3 種心磷脂(cardiolipin,CL)、2 種磷脂酰肌醇一磷酸(phosphatidylinositol(4)phosphate,PIP)、1 種神經(jīng)節(jié)苷脂(gangliosides,GD1a)、1 種溶血性磷脂酰甘油(lysophosphatidylglycerol,LPG)、1 種磷脂酰肌醇(lysophosphatidylinositol,LPI)、1 種植物鞘氨醇(phytosphingosine,phSM)。牛乳是一種復(fù)雜的脂質(zhì)混合物,含有數(shù)千種脂質(zhì),雖然研究眾多,但許多低豐度的脂類(lèi)仍然未知。Li Mohan等對(duì)牛初乳和成熟乳脂質(zhì)進(jìn)行全面表征,共檢測(cè)出13 亞類(lèi)335 種脂質(zhì)分子;Liu Zhiqian等對(duì)牛乳中TG進(jìn)行綜合表征共鑒定出3 454 種脂質(zhì)分子,并對(duì)牛乳中磷脂、鞘脂、糖脂、Cer進(jìn)行綜合表征,共鑒定出15 亞類(lèi)514 種脂質(zhì)分子。本研究在正負(fù)離子模式下共檢測(cè)到1 607 種脂質(zhì)分子,對(duì)牛乳和羊乳在加工過(guò)程中各階段的脂質(zhì)分子及動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行表征,結(jié)果表明牛乳和羊乳在加工制備酸乳過(guò)程中脂質(zhì)家族具有巨大的多樣性和復(fù)雜性。

    圖2 牛乳和羊乳的脂質(zhì)亞類(lèi)分析Fig.2 Analysis of lipid subclasses in cow and goat milk

    2.3 熱處理對(duì)牛乳和羊乳的脂質(zhì)組學(xué)影響

    如圖3A所示,TG(相對(duì)含量90%)是牛乳中檢測(cè)到最豐富的脂質(zhì)成分,其次是DG(8%),這表明牛乳脂肪主要以甘油酯形式存在,約占總脂質(zhì)含量的98%,而其他脂質(zhì)(2%)主要以磷脂、鞘脂、固醇類(lèi)和糖脂形式存在,這些脂質(zhì)是乳脂肪球膜(milk fat globule membrane,MFGM)的主要成分,確保了乳的水包油乳液的穩(wěn)定性。在2%的其他脂質(zhì)中,磷脂含量最為豐富,約占68%,其中亞類(lèi)及相對(duì)含量分別為PC(26%)、PE(15%)、SM(14%)、PG(10%)、PI(2%)和PS(1%),這與Zhang Xinhao等測(cè)定的牛乳磷脂組成較為相似,但PS含量相差較大,這可能是由地域、泌乳期、氣候、季節(jié)、飼料以及乳牛個(gè)體差異導(dǎo)致,這些因素均會(huì)對(duì)乳脂成分產(chǎn)生顯著影響;鞘脂相對(duì)含量約占24%,包括Hex1Cer(20%)、CerP(2%)、Cer(1%)和Hex2Cer(1%);固醇類(lèi)約占4%,包括ZyE(3%)和StE(1%);糖脂主要以MGDG(3%)形式存在;其余12 種亞類(lèi)含量極微量,共計(jì)1%。如圖3B所示,與生牛乳相比,熱處理后的巴氏殺菌牛乳DG相對(duì)含量下降1%,TG相對(duì)含量沒(méi)有改變,PC、SM、PI和MGDG相對(duì)含量有極小幅度上調(diào),PE、PG、Hex1Cer和ZyE極小幅度下調(diào)。如圖3C、D所示,與生羊乳相比,巴氏殺菌羊乳DG相對(duì)含量也降低1%,TG相對(duì)含量不變,PC和SM相對(duì)含量分別上調(diào)1%,Hex1Cer相對(duì)含量下調(diào)2%。表明熱處理對(duì)牛乳和羊乳脂質(zhì)特性的影響基本趨同,即熱處理對(duì)PC、SM相對(duì)含量有輕微上調(diào)作用,這與Gallier等探究生牛乳和巴氏殺菌后牛乳的極性脂質(zhì)變化一致;而DG、Hex1Cer相對(duì)含量輕微下降、TG相對(duì)含量基本保持不變,這一結(jié)果與Xu Qingbiao等研究結(jié)果一致;其他磷脂、鞘脂、糖脂在熱處理后沒(méi)有變化??偟膩?lái)說(shuō),高溫巴氏殺菌處理未導(dǎo)致牛乳和羊乳脂質(zhì)亞類(lèi)的顯著變化。Bezie等研究表明牛乳中的脂肪基本不會(huì)受到熱處理影響。

    圖3 熱處理前后牛乳和羊乳的脂質(zhì)特性比較Fig.3 Comparison of lipid properties of cow and goat milk before and after heat treatment

    PCA根據(jù)樣本的相似性或不同性對(duì)樣本進(jìn)行分組。如圖4A所示,[1]、[2]和[3]是對(duì)模型貢獻(xiàn)率最大的3 個(gè)PC,前3 個(gè)PC累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到49.4%,CM組和PC組之間觀(guān)察到較明顯差異,表明高溫巴氏殺菌對(duì)牛乳的脂質(zhì)分子產(chǎn)生一定影響。進(jìn)一步使用有監(jiān)督的OPLSDA,如圖4B所示,CM組和PC組明顯分離,再次驗(yàn)證了兩組樣本脂質(zhì)分子的差異性。如圖4C、D所示,GM組和PG組明顯分離,表明高溫巴氏殺菌使羊乳脂質(zhì)分子也發(fā)生變化。

    圖4 熱處理前后牛乳和羊乳的脂質(zhì)特性PCA和OPLS-DAFig.4 PCA and OPLS-DA plots for lipid properties of cow and goat milk before and after heat treatment

    選擇滿(mǎn)足<0.05并且VIP>1的脂質(zhì)分子,分別在CM組與PC組、GM組與PG組中篩選出65 種和170 種顯著差異脂質(zhì)分子。為使表征高溫巴氏殺菌對(duì)乳脂脂質(zhì)分子的影響更具普遍性和科學(xué)性,將上述牛乳和羊乳組的顯著差異脂質(zhì)分子進(jìn)行交集,根據(jù)豐度變化趨勢(shì),進(jìn)一步篩選出27 種脂質(zhì)分子作為判別熱處理乳脂的潛在生物標(biāo)志物。如圖5所示,熱處理后,這27 種脂質(zhì)分子在牛乳組和羊乳組中的變化趨勢(shì)相同,其豐度均呈下降趨勢(shì),表明高溫巴氏殺菌雖然未對(duì)牛乳和羊乳的脂質(zhì)亞類(lèi)特性產(chǎn)生顯著影響,但對(duì)乳脂分子層面產(chǎn)生影響。

    圖5 熱處理前后牛乳(A)和羊乳(B)中27 種潛在標(biāo)志物熱圖變化Fig.5 Heat map showing changes in 27 potential markers in cow milk (A) and goat milk (B) before and after heat treatments

    27 種脂質(zhì)分子以TG和PE為主,這可能反映了熱處理主要破壞了乳脂中TG和PE的脂質(zhì)分子結(jié)構(gòu),而其他脂質(zhì)亞類(lèi)分子受熱處理影響很小。這些脂質(zhì)分子豐度的顯著減少可能是因?yàn)樵诟邷匕褪蠚⒕鷹l件下,MFGM成分改變,蛋白質(zhì)含量升高而脂質(zhì)含量降低,熱處理對(duì)MFGM和脂肪球的損害導(dǎo)致部分游離TG和磷脂暴露;此外,牛乳中存在大量脂蛋白脂肪酶,具有脂肪分解活性,且對(duì)熱處理具有抗性,經(jīng)過(guò)高溫巴氏殺菌處理后,殘存的脂肪酶與從MFG(M)中游離出的TG和磷脂直接接觸并進(jìn)行脂解,生成游離脂肪酸,從而導(dǎo)致27 種脂質(zhì)分子豐度的顯著降低。事實(shí)上,比巴氏殺菌更高溫度的殺菌工藝對(duì)牛乳中的脂解程度更劇烈,因?yàn)楦叩臏囟葘?dǎo)致MFGM的脂質(zhì)表面暴露更多,從而可能導(dǎo)致更多的脂質(zhì)分子暴露。

    27 種脂質(zhì)分子中脂肪酸鏈大多為C~C、不飽和脂肪酸鏈多為C和C,以及極少數(shù)的奇鏈脂肪酸鏈(C和C),它們經(jīng)熱處理后被脂解生成游離脂肪酸,而游離脂肪酸較酯類(lèi)更易氧化,尤其是短鏈和中鏈脂肪酸(C~C),這些游離脂肪酸和氧化的脂質(zhì)產(chǎn)物導(dǎo)致風(fēng)味缺陷,這有可能是高溫巴氏殺菌后牛乳和羊乳產(chǎn)生“熟味”的原因,表明高溫巴氏殺菌處理使脂質(zhì)分子產(chǎn)生一定程度的脂解和氧化,對(duì)牛乳和羊乳風(fēng)味產(chǎn)生不利影響。

    2.4 發(fā)酵對(duì)牛乳和羊乳的脂質(zhì)組學(xué)影響

    如圖6A所示,巴氏殺菌牛乳經(jīng)發(fā)酵后,WE含量上升,CerP和MGDG含量基本一致,其余24 種脂質(zhì)亞類(lèi)含量均明顯下降,尤其是CL、GD1a、Hex2Cer、LPC、LPE、LPG、LPI、MG、PC、PE、phSM、PI、SM、StE和ZyE的含量下降了50%以上,表明發(fā)酵顯著改變了牛乳的脂質(zhì)特性。巴氏殺菌羊乳經(jīng)發(fā)酵后脂質(zhì)特性也表現(xiàn)出顯著變化。如圖6B所示,巴氏殺菌羊乳在發(fā)酵后CerP、GD1a、PG、PIP、StE和ZyE含量上升,MG、MGDG和Hex3Cer含量基本沒(méi)有變化,其余18 種脂質(zhì)亞類(lèi)含量均下降,尤其是LPC、LPE、LPG和LPI含量大幅下降。這些結(jié)果共同證明了發(fā)酵顯著改變了乳脂特性,值得注意的是,發(fā)酵對(duì)牛乳和羊乳在一些脂質(zhì)亞類(lèi)上表現(xiàn)出一致的變化趨勢(shì),TG、DG、PC、PE、SM、PS、PI、CL、LPC、LPE、LPG、LPI、Cer、Hex1Cer、Hex2Cer、phSM和SPH均表現(xiàn)出下降趨勢(shì),表明嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌代謝消耗這些脂質(zhì),使其含量降低,值得注意的是,這兩種乳酸菌對(duì)LPC、LPE、LPG和LPI的代謝程度最劇烈,這可能是由于溶血型磷脂的結(jié)構(gòu)由一條烷基鏈或?;満蜆O性頭基形成,更易被嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌分解利用。溶血型磷脂是一類(lèi)生物活性脂質(zhì),LPC是大腦發(fā)育和生長(zhǎng)過(guò)程中脂肪酸傳遞的重要途徑,在大腦生長(zhǎng)中扮演著重要角色;LPE具有抗細(xì)胞凋亡的作用,被證實(shí)可以誘導(dǎo)PC12細(xì)胞絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)活化,從而激活MAPK級(jí)聯(lián)反應(yīng)抑制血清剝奪誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡;LPG參與心血管疾病的發(fā)病機(jī)制;LPI可以上調(diào)脂肪生成基因的表達(dá),與人類(lèi)肥胖呈正相關(guān)。這些結(jié)果表明發(fā)酵降低了乳中溶血型磷脂含量,從而影響了其功能特性。

    圖6 發(fā)酵前后牛乳和羊乳中27 種脂質(zhì)亞類(lèi)含量變化Fig.6 Changes in the contents of 27 lipid subclasses in cow and goat milk before and after fermentation

    對(duì)PC組和FC組脂質(zhì)亞類(lèi)進(jìn)行PCA,如圖7A所示,前3 個(gè)PC累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到65.5%,在[1](51.6%)上觀(guān)察到兩組存在明顯差異,OPLS-DA得分圖(圖7B)中兩組樣本點(diǎn)分離良好,表明發(fā)酵對(duì)牛乳脂質(zhì)產(chǎn)生顯著影響。如圖7C所示,PG組和FG組PCA中前3 個(gè)PC累計(jì)貢獻(xiàn)率為45.2%,PG組和FG組樣本點(diǎn)相互包含,兩組樣本無(wú)明顯分離,但在有監(jiān)督的OPLS-DA得分圖(圖7D)中,PG組和FG組有效分離。

    圖7 發(fā)酵前后牛乳和羊乳的脂質(zhì)特性PCA和OPLS-DAFig.7 PCA and OPLS-DA plots for lipid properties of cow and goat milk before and after fermentation

    選擇滿(mǎn)足<0.05且VIP>1的脂質(zhì)分子,在PC組和FC組中篩選出191 種顯著差異脂質(zhì)分子,在PG組和FG組中篩選出46 種顯著差異脂質(zhì)分子。根據(jù)發(fā)酵前后的變化趨勢(shì),在上述191 種和49 種顯著差異脂質(zhì)分子中進(jìn)一步篩選出23 種脂質(zhì)分子作為表征發(fā)酵對(duì)乳脂影響的潛在生物標(biāo)志物。如圖8所示,經(jīng)發(fā)酵后,這23 種潛在生物標(biāo)志物豐度在牛酸乳和羊酸乳中均呈下降趨勢(shì)。這23 種潛在生物標(biāo)志物由7 種PE、4 種溶血型磷脂、4 種PI、3 種TG、2 種SM、2 種PS、1 種PC構(gòu)成,這一結(jié)果與發(fā)酵對(duì)乳脂亞類(lèi)的影響結(jié)果一致,再次驗(yàn)證了發(fā)酵降低了TG、溶血型磷脂、磷脂(PE、PC、PS、PI和SM)的含量。磷脂對(duì)脂類(lèi)代謝失調(diào)、腸道生態(tài)失調(diào)、炎癥、心血管疾病、腸道健康和神經(jīng)發(fā)育有積極影響,其損失可能影響食物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和生物活性。這些潛在標(biāo)志物的脂肪酸鏈大多由C和C家族組成,而且基本不包括短中鏈脂肪酸(C~C)和奇鏈脂肪酸(C和C),表明嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌基本不代謝短中鏈脂肪酸和奇鏈脂肪酸,它們更偏向于代謝C和C家族脂質(zhì)。Furse等的研究也表明牛乳和酸乳中的奇鏈脂肪酸含量相似。

    圖8 發(fā)酵前后牛乳(A)和羊乳(B)中23 種潛在標(biāo)志物熱圖變化Fig.8 Heat map showing changes in 23 potential markers in cow milk (A) and goat milk (B) before and after fermentation

    3 結(jié) 論

    用UPLC-Q-Exactive-MS聯(lián)用技術(shù)表征了“牛乳-巴氏殺菌牛乳-牛酸乳”和“羊乳-巴氏殺菌羊乳-羊酸乳”的脂質(zhì)特性動(dòng)態(tài)變化,共檢測(cè)出27 種脂質(zhì)亞類(lèi)1 607 種脂質(zhì)分子。結(jié)果表明,巴氏殺菌熱處理對(duì)牛乳和羊乳的脂質(zhì)亞類(lèi)基本無(wú)影響,但對(duì)脂質(zhì)分子產(chǎn)生顯著影響,篩選出27 種脂質(zhì)分子可作為鑒定生與巴氏殺菌牛乳和羊乳的潛在生物標(biāo)志物;而發(fā)酵對(duì)牛乳和羊乳的脂質(zhì)特性具有顯著影響,大部分脂質(zhì)亞類(lèi)表現(xiàn)出下調(diào)趨勢(shì),篩選出23 種脂質(zhì)分子可作為鑒定巴氏殺菌與發(fā)酵牛乳和羊乳的潛在生物標(biāo)志物。本研究為酸乳加工過(guò)程中熱處理和發(fā)酵階段對(duì)乳脂的影響提供了分子基礎(chǔ),有利于加深對(duì)不同階段對(duì)酸乳終產(chǎn)品質(zhì)量和營(yíng)養(yǎng)特性影響的理解,并且潛在生物標(biāo)志物可用于商業(yè)化生產(chǎn)酸乳過(guò)程中判斷加工工藝的終點(diǎn)及產(chǎn)品狀態(tài)。

    美女高潮的动态| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 婷婷六月久久综合丁香| 成人三级黄色视频| 国产爱豆传媒在线观看| 日本成人三级电影网站| 欧美区成人在线视频| 熟女电影av网| 麻豆成人av在线观看| 国产毛片a区久久久久| 中国美白少妇内射xxxbb| 免费一级毛片在线播放高清视频| 成人美女网站在线观看视频| 99热精品在线国产| 免费观看精品视频网站| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲天堂国产精品一区在线| 欧美黑人欧美精品刺激| 日韩欧美在线二视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国内精品宾馆在线| 欧美又色又爽又黄视频| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 中文字幕久久专区| 床上黄色一级片| 日韩精品中文字幕看吧| 听说在线观看完整版免费高清| 日韩欧美国产在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 一区二区三区四区激情视频 | 免费观看在线日韩| 伦理电影大哥的女人| 一个人看的www免费观看视频| 又紧又爽又黄一区二区| 九九在线视频观看精品| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 一级毛片久久久久久久久女| 在线观看美女被高潮喷水网站| 天美传媒精品一区二区| 91在线精品国自产拍蜜月| 成人国产麻豆网| 午夜爱爱视频在线播放| 一级黄色大片毛片| 国产精品三级大全| 亚洲自拍偷在线| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 18+在线观看网站| 亚洲最大成人手机在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久久久久久精品吃奶| 动漫黄色视频在线观看| 免费观看精品视频网站| 一级av片app| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产精品,欧美在线| av中文乱码字幕在线| 又紧又爽又黄一区二区| 九色国产91popny在线| 88av欧美| av中文乱码字幕在线| 午夜福利高清视频| 欧美日韩黄片免| 欧美日韩综合久久久久久 | 国产精品乱码一区二三区的特点| 欧美+日韩+精品| av在线老鸭窝| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产成人影院久久av| 精品人妻熟女av久视频| 精品人妻视频免费看| 久久久午夜欧美精品| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产在线男女| 99热这里只有是精品50| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产人妻一区二区三区在| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 观看美女的网站| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲真实伦在线观看| 国产一区二区三区视频了| 免费av不卡在线播放| 精品久久久久久久久久久久久| 一级av片app| 在现免费观看毛片| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 天美传媒精品一区二区| or卡值多少钱| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久精品人妻少妇| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产 一区 欧美 日韩| 又爽又黄无遮挡网站| 在现免费观看毛片| 日本a在线网址| 18禁在线播放成人免费| 黄色女人牲交| 成人国产麻豆网| 欧美日韩精品成人综合77777| 又粗又爽又猛毛片免费看| 久久精品91蜜桃| 女同久久另类99精品国产91| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲av中文av极速乱 | 久久亚洲精品不卡| 不卡一级毛片| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产在线精品亚洲第一网站| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 一本一本综合久久| 毛片一级片免费看久久久久 | АⅤ资源中文在线天堂| 久久久久久久久大av| 精品人妻视频免费看| 亚洲 国产 在线| 麻豆久久精品国产亚洲av| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲图色成人| 午夜福利成人在线免费观看| 精品无人区乱码1区二区| 成人性生交大片免费视频hd| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 日本一二三区视频观看| 一进一出抽搐动态| 亚洲avbb在线观看| 91在线观看av| 国产精品99久久久久久久久| 成人国产综合亚洲| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 精品午夜福利视频在线观看一区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 夜夜夜夜夜久久久久| 性欧美人与动物交配| 亚洲人成网站高清观看| 日韩欧美在线乱码| 亚洲欧美日韩东京热| 日韩国内少妇激情av| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产极品精品免费视频能看的| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 亚洲第一区二区三区不卡| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产午夜福利久久久久久| 身体一侧抽搐| 午夜福利高清视频| 午夜福利高清视频| 午夜福利18| 亚洲av熟女| 免费电影在线观看免费观看| a级一级毛片免费在线观看| 国产探花极品一区二区| 全区人妻精品视频| 日韩精品青青久久久久久| 色综合亚洲欧美另类图片| 深夜精品福利| 岛国在线免费视频观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 99热6这里只有精品| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲一区二区三区色噜噜| 12—13女人毛片做爰片一| 少妇人妻一区二区三区视频| 日韩欧美三级三区| 一级毛片久久久久久久久女| 禁无遮挡网站| 久久久久性生活片| av在线老鸭窝| 日韩精品中文字幕看吧| 1000部很黄的大片| 色噜噜av男人的天堂激情| 变态另类丝袜制服| 男女视频在线观看网站免费| 两人在一起打扑克的视频| 中出人妻视频一区二区| 国产成人福利小说| 嫩草影院新地址| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产69精品久久久久777片| 国产探花极品一区二区| 国产主播在线观看一区二区| 日韩高清综合在线| 天堂网av新在线| 亚洲经典国产精华液单| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 一个人观看的视频www高清免费观看| 午夜福利成人在线免费观看| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 亚洲av不卡在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 久久九九热精品免费| 国内精品久久久久精免费| 欧美区成人在线视频| 国产三级在线视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 超碰av人人做人人爽久久| 久久国内精品自在自线图片| 国产精品伦人一区二区| 久久久精品大字幕| 国产伦在线观看视频一区| 欧美最新免费一区二区三区| 我的老师免费观看完整版| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 欧美zozozo另类| 成年人黄色毛片网站| 亚洲国产精品久久男人天堂| 中文字幕高清在线视频| 久久精品91蜜桃| 精品人妻视频免费看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 免费观看的影片在线观看| 国产在视频线在精品| 日本成人三级电影网站| 日韩欧美三级三区| 午夜老司机福利剧场| 在线播放国产精品三级| 中文资源天堂在线| 国产一级毛片七仙女欲春2| 色噜噜av男人的天堂激情| 亚洲av一区综合| 在线免费十八禁| 级片在线观看| 成人国产综合亚洲| 无遮挡黄片免费观看| 丰满乱子伦码专区| 久久九九热精品免费| 老司机福利观看| 成人欧美大片| 全区人妻精品视频| 深夜a级毛片| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲精品久久国产高清桃花| 又爽又黄无遮挡网站| 波多野结衣巨乳人妻| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲av.av天堂| 中国美女看黄片| 国产 一区 欧美 日韩| av在线蜜桃| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 欧美色视频一区免费| 黄色丝袜av网址大全| 国产午夜精品论理片| 男人舔奶头视频| 国产精品一区二区三区四区久久| 欧美黑人巨大hd| 中出人妻视频一区二区| 国产亚洲精品av在线| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲熟妇熟女久久| 97热精品久久久久久| 中出人妻视频一区二区| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲国产精品sss在线观看| av视频在线观看入口| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲经典国产精华液单| 久久久久久久久大av| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产色爽女视频免费观看| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲图色成人| 天天一区二区日本电影三级| 男女下面进入的视频免费午夜| 日本 欧美在线| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 看十八女毛片水多多多| 精品久久久久久久久亚洲 | 亚洲欧美日韩高清专用| 最近最新中文字幕大全电影3| 熟女电影av网| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产精品久久视频播放| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产毛片a区久久久久| 91av网一区二区| 免费观看人在逋| 无人区码免费观看不卡| 日日夜夜操网爽| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 久久国产精品人妻蜜桃| 黄色一级大片看看| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲熟妇熟女久久| 99九九线精品视频在线观看视频| а√天堂www在线а√下载| 中亚洲国语对白在线视频| 久久久久九九精品影院| 亚洲男人的天堂狠狠| 欧美人与善性xxx| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 欧美精品国产亚洲| 久久久久国内视频| 内地一区二区视频在线| 免费看光身美女| 日日啪夜夜撸| 精品久久久久久久久av| 成人无遮挡网站| 欧美极品一区二区三区四区| 在线观看美女被高潮喷水网站| av女优亚洲男人天堂| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 成人永久免费在线观看视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 久久99热这里只有精品18| 狠狠狠狠99中文字幕| 午夜激情福利司机影院| 国内精品久久久久精免费| 中文亚洲av片在线观看爽| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 淫秽高清视频在线观看| 午夜爱爱视频在线播放| 亚洲人成网站高清观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 日韩中字成人| 超碰av人人做人人爽久久| 国产欧美日韩一区二区精品| 日本一本二区三区精品| av天堂中文字幕网| 成人国产麻豆网| 美女cb高潮喷水在线观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 成熟少妇高潮喷水视频| 全区人妻精品视频| 99在线人妻在线中文字幕| 女人被狂操c到高潮| 国产老妇女一区| 色哟哟·www| 欧美xxxx性猛交bbbb| 人人妻人人看人人澡| 久久欧美精品欧美久久欧美| 乱人视频在线观看| 久久草成人影院| 亚洲av五月六月丁香网| 亚洲av免费在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 免费在线观看日本一区| 成人av一区二区三区在线看| 有码 亚洲区| 国产成人av教育| 国产淫片久久久久久久久| av在线老鸭窝| 悠悠久久av| 日本a在线网址| 九九爱精品视频在线观看| 又紧又爽又黄一区二区| 高清日韩中文字幕在线| 亚洲最大成人手机在线| 国产亚洲精品av在线| 黄片wwwwww| 国模一区二区三区四区视频| 精品久久久噜噜| 最好的美女福利视频网| 国产黄色小视频在线观看| 老司机福利观看| 少妇高潮的动态图| 丰满的人妻完整版| 麻豆成人午夜福利视频| 国产精品野战在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 久久久久久久精品吃奶| av在线老鸭窝| ponron亚洲| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 91精品国产九色| 国产精品综合久久久久久久免费| 99九九线精品视频在线观看视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 我的女老师完整版在线观看| 午夜老司机福利剧场| 看黄色毛片网站| 美女免费视频网站| 亚洲国产精品成人综合色| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 久久久久久伊人网av| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 黄色日韩在线| 国产精品人妻久久久影院| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产伦一二天堂av在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产麻豆成人av免费视频| 看免费成人av毛片| 亚洲av免费在线观看| 久久99热6这里只有精品| 婷婷亚洲欧美| 黄片wwwwww| 欧美在线一区亚洲| 精品久久久久久久久久久久久| 国产熟女欧美一区二区| 丰满乱子伦码专区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 很黄的视频免费| 国内精品一区二区在线观看| 国产男人的电影天堂91| 久99久视频精品免费| 一个人看视频在线观看www免费| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 久久久色成人| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 亚洲精品色激情综合| 久久久久性生活片| av福利片在线观看| 少妇的逼好多水| 中出人妻视频一区二区| 在线观看免费视频日本深夜| 国产欧美日韩精品亚洲av| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 精品一区二区免费观看| 在现免费观看毛片| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 精品久久久久久久末码| 天堂网av新在线| 亚洲真实伦在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 国产成人a区在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 久久久国产成人免费| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲精品国产成人久久av| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产精品福利在线免费观看| 久久九九热精品免费| 国产精品国产高清国产av| av在线天堂中文字幕| 国产aⅴ精品一区二区三区波| av在线观看视频网站免费| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美人与善性xxx| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 午夜福利成人在线免费观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 狠狠狠狠99中文字幕| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚洲成人精品中文字幕电影| 男插女下体视频免费在线播放| 久久久久久久久中文| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产麻豆成人av免费视频| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 九色成人免费人妻av| 欧美国产日韩亚洲一区| 午夜福利高清视频| 中亚洲国语对白在线视频| 色5月婷婷丁香| 精品国产三级普通话版| 午夜激情福利司机影院| 国产熟女欧美一区二区| 超碰av人人做人人爽久久| 精品久久久久久久久久免费视频| 22中文网久久字幕| 色吧在线观看| 色视频www国产| 嫩草影视91久久| 最后的刺客免费高清国语| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 高清在线国产一区| 午夜影院日韩av| 色视频www国产| 国产三级中文精品| 麻豆国产av国片精品| 久久精品91蜜桃| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲av成人精品一区久久| 欧美精品啪啪一区二区三区| 哪里可以看免费的av片| 一本精品99久久精品77| 久久久久久久久大av| 精品久久久久久久久久久久久| 久久这里只有精品中国| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产精品无大码| 男人狂女人下面高潮的视频| 免费看a级黄色片| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲 国产 在线| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 男女啪啪激烈高潮av片| 热99re8久久精品国产| 男人舔奶头视频| x7x7x7水蜜桃| 人人妻人人澡欧美一区二区| xxxwww97欧美| 无遮挡黄片免费观看| 欧美丝袜亚洲另类 | 欧美在线一区亚洲| 成人国产综合亚洲| 一个人观看的视频www高清免费观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 日韩av在线大香蕉| 婷婷亚洲欧美| 欧美黑人巨大hd| 亚洲av二区三区四区| www日本黄色视频网| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产精品99久久久久久久久| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产色婷婷99| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 国产真实伦视频高清在线观看 | 欧美三级亚洲精品| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 97热精品久久久久久| 日本成人三级电影网站| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产精品亚洲一级av第二区| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 九九在线视频观看精品| 午夜精品在线福利| 两个人的视频大全免费| 成人性生交大片免费视频hd| 99国产极品粉嫩在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 日韩欧美国产一区二区入口| aaaaa片日本免费| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 精品人妻视频免费看| 中出人妻视频一区二区| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲avbb在线观看| 久久这里只有精品中国| 高清在线国产一区| 久久中文看片网| 成人综合一区亚洲| 亚洲综合色惰| 亚洲av成人精品一区久久| 五月玫瑰六月丁香| 成人欧美大片| 俄罗斯特黄特色一大片| 中国美白少妇内射xxxbb| 国产精品女同一区二区软件 | 九色成人免费人妻av| 色综合婷婷激情| 长腿黑丝高跟| 国产色婷婷99| 欧美一区二区国产精品久久精品| 亚洲人成伊人成综合网2020| 动漫黄色视频在线观看| av女优亚洲男人天堂| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 最新在线观看一区二区三区| 色噜噜av男人的天堂激情| 一本精品99久久精品77| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产av麻豆久久久久久久| 深爱激情五月婷婷| 成年版毛片免费区| 久久国内精品自在自线图片| 午夜福利高清视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 搡女人真爽免费视频火全软件 | av女优亚洲男人天堂| 婷婷精品国产亚洲av在线| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久久成人免费电影| 欧美一级a爱片免费观看看| 成年女人永久免费观看视频| 国产精品99久久久久久久久| 日本 欧美在线| 人妻夜夜爽99麻豆av| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 久久精品国产自在天天线| 欧美国产日韩亚洲一区| 99热只有精品国产| 麻豆一二三区av精品| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 观看美女的网站| 麻豆成人av在线观看| 真人一进一出gif抽搐免费| 色哟哟哟哟哟哟| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| av中文乱码字幕在线| 色视频www国产| 12—13女人毛片做爰片一| 一进一出好大好爽视频| 校园春色视频在线观看| 99热网站在线观看| 国内精品久久久久精免费| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲av熟女| 中文亚洲av片在线观看爽| 在线免费十八禁| 日韩欧美国产一区二区入口| 在线免费观看不下载黄p国产 | 国产精品精品国产色婷婷| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 国产av麻豆久久久久久久| 乱人视频在线观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲最大成人中文| 国产精品久久久久久av不卡| 全区人妻精品视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 91午夜精品亚洲一区二区三区 |