宮頸癌前病變與宮頸癌患者的HPV 感染及免疫功能分析

葉秋蘭，王少蕾，詹翠玲

（博羅縣婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心孕產(chǎn)保健部 廣東 惠州 516100）

宮頸疾病在婦科比較常見，其中宮頸癌最為普遍，位居?jì)D科癌癥中的第2 位，近些年，宮頸癌的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，對女性的身體健康與生命安全具有較大的影響。而宮頸癌的發(fā)生與高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染、性行為、長期口服避孕藥有著密不可分的聯(lián)系，此外，免疫系統(tǒng)疾病、機(jī)體內(nèi)微環(huán)境的改變等原因都會導(dǎo)致疾病的發(fā)生。在全球范圍內(nèi)，每天發(fā)生宮頸癌的大約有50 萬，其中我國占有30%左右，并且患病年齡越來越年輕，宮頸癌患者在疾病初期階段通常無明顯表現(xiàn)癥狀，隨病情發(fā)展而出現(xiàn)異常陰道出血等癥狀。宮頸癌的發(fā)展主要經(jīng)過癌前病變、早期浸潤癌以及浸潤癌幾個階段，HPV 持續(xù)性感染對于推動宮頸癌的疾病發(fā)展進(jìn)程起著重要作用，而做好臨床HPV 感染篩查工作，可提高宮頸癌前病變檢出率，及早確診并進(jìn)行積極干預(yù)，在早期有效阻斷癌前病變發(fā)展風(fēng)險(xiǎn)，從而降低宮頸癌發(fā)生率。所以，在臨床上應(yīng)該給予一定的重視，才能盡早發(fā)現(xiàn)疾病，對疾病實(shí)施有針對性的治療，盡可能地改善患者的預(yù)后?；诖?，本文選取博羅縣婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心2020 年5 月—2021 年6 月收治的78 例高危型HPV 感染患者，針對高危型HPV 感染與宮頸癌前病變以及宮頸癌的相關(guān)性展開研究，現(xiàn)將具體內(nèi)容報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取博羅縣婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心2020年5月—2021 年6 月收治的78 例高危型HPV 感染患者，依據(jù)檢查結(jié)果將其分為觀察組和對照組，各39 例。對照組年齡30 ～50 歲，平均年齡（40.71±6.04）歲；觀察組年齡30 ～50 歲，平均年齡（40.32±5.91）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均有性生活；②年齡21 ～60 歲；③最近3 個月之內(nèi)并未接受其他方式治療宮頸疾??；④宮頸脫落細(xì)胞HPV DNA 檢查結(jié)果顯示，HPV 高危亞型為1 型或者超過1 型，則可以診斷為陽性，HR-HPV陽性的時間在6 個月以上，并且檢查結(jié)果顯示未轉(zhuǎn)陰，對本次研究簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①同時伴有比較嚴(yán)重的心、肝、腦、腎等器官功能障礙者；②存在凝血功能障礙患者；③嚴(yán)重精神疾病者；④在妊娠期或哺乳期的女性；⑤對本次研究依從性比較差者，不能配合完成檢查者；⑥經(jīng)過臨床診斷確診是滴蟲感染、淋球菌等相關(guān)生殖系統(tǒng)感染者；⑦對本試驗(yàn)藥物過敏者。

1.2 方法

標(biāo)本的采集：患者采取的是截石位，先對其進(jìn)行陰道鏡檢查，應(yīng)該選用無菌的醫(yī)用棉球來擦拭患者宮頸表面上存在的黏液，隨后放入細(xì)胞刷，插入宮頸口的深度為1.0 ～1.5 cm，輕輕地旋轉(zhuǎn)8 圈，隨后把細(xì)胞刷取出，將其放置在液基細(xì)胞洗脫液中，充分震動，并且將液體離心處理，以此來采集脫落的細(xì)胞，制作成細(xì)胞涂片備用。并用活檢鉗采集適量的宮頸組織，放在液氮中保存，對其進(jìn)行宮頸病理活檢。高危型HPV 檢測方式：采集完標(biāo)本之后，采用Step Oue Plus 熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）儀，嚴(yán)格按照操作說明完成整個檢測。高危型HPV 相對表達(dá)量檢測：取宮頸活檢組織50 mg，通過反轉(zhuǎn)錄試劑盒與信使RNA 抽提合成互補(bǔ)DNA 第1 鏈，隨后再通過PCR 擴(kuò)增試劑盒，對其進(jìn)行相關(guān)的定量檢測，嚴(yán)格按照操作說明完成整個檢測。高危型HPV 病毒載量檢測：首先建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，應(yīng)用同一儀器對每例標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)的計(jì)算，每個HPV 陽性的標(biāo)本都會生成一個相關(guān)的定量值，在對每例宮頸組織標(biāo)本β 球蛋白濃度進(jìn)行詳細(xì)的計(jì)算，以此來確保病毒載量的準(zhǔn)確性。免疫功能檢測：采用賽默飛Attune NxT 流式細(xì)胞儀檢測免疫功能指標(biāo)CD4、CD8、CD56水平，并計(jì)算CD4/CD8值。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）比較兩組高危型HPV 亞型的檢出情況。（2）比較兩組免疫功能指標(biāo)（CD4、CD8、CD56及CD4/CD8）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2.結(jié)果

2.1 兩組患者高危型HPV 亞型的檢出情況比較

觀察組高危型HPV 感染檢出率97.44%高于對照組的79.49%，且觀察組HPV 相對表達(dá)量、HPV 病毒載量均高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05），見表1。

表1 兩組患者高危型HPV 亞型的檢出情況比較（n/%； ± s）

2.2 兩組患者免疫功能指標(biāo)比較

觀察組免疫功能CD4、CD8、CD56及CD4/CD8各項(xiàng)指標(biāo)均低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05），見表2。

表2 兩組患者免疫功能指標(biāo)比較（ ± s）

3.討論

宮頸癌在婦科疾病當(dāng)中較常見，屬于婦科惡性腫瘤的一種，主要是因?yàn)樽訉m頸上皮內(nèi)瘤病變所致，大多發(fā)生在中老年女性當(dāng)中。隨著人們生活習(xí)慣的逐漸改變，導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)病率也逐漸增加，并且患者的年齡越來越小。近些年，女性第1 次發(fā)生性生活的年齡越來越小，大多數(shù)女性的生殖功能發(fā)育并不完善，同時，多次流產(chǎn)、性生活過于頻繁，這些都會損傷到宮頸，也就增加了宮頸感染的概率，導(dǎo)致宮頸逐漸出現(xiàn)病變。

在相關(guān)臨床研究中顯示，HPV 感染是導(dǎo)致宮頸癌前病變與宮頸癌發(fā)生的主要因素，尤其是高危型HPV 感染特別容易引起宮頸癌前病變與宮頸癌的發(fā)生，有研究表明高危型HPV 感染是宮頸癌前病變及宮頸癌發(fā)生發(fā)展的必需條件。另有研究提及，早在20 世紀(jì)，德國病毒學(xué)家Zur Hausen 已通過研究證實(shí)了宮頸癌與HPV 之間存在者直接的聯(lián)系，并為此而獲得諾貝爾生理及醫(yī)學(xué)獎。因此，HPV 檢測也是目前臨床上作為宮頸癌前病變以及宮頸癌的常用篩查方法。HPV 具有嗜上皮性，在臨床生屬于一種環(huán)狀雙鏈小型DNA 病毒，對宮頸鱗狀上皮轉(zhuǎn)化區(qū)、基底層的化生上皮細(xì)胞具有侵襲性，主要傳播途徑就是性行為，而女性HPV 感染率要比男性高，有很大一部分患者感染上HPV 之后沒有任何癥狀，HPV 感染后通常在10 個月左右就會自然清除，但是也有將近10%的患者會發(fā)生持續(xù)感染，繼而引起疾病的發(fā)生。如果只是感染HPV，通常不會直接進(jìn)展為宮頸癌，免疫性疾病、體內(nèi)為微環(huán)境改變也會導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生。免疫功能中包括了CD56等指標(biāo)，細(xì)胞免疫介導(dǎo)是淋巴細(xì)胞，成熟的T 淋巴細(xì)胞只會表達(dá)出CD4與CD8T 淋巴細(xì)胞，其中CD4淋巴細(xì)胞被活化之后，就會成為一種輔助性的T 細(xì)胞，CD8淋巴細(xì)被活化之后，就會成為一種具有毒性的T 細(xì)胞，對靶細(xì)胞具有比較強(qiáng)的殺傷力。所以，在臨床經(jīng)常用CD4、CD8、CD4/CD8來反映組織局部細(xì)胞免疫情況。本文結(jié)果顯示：確診為宮頸癌患者的高危型HPV 感染檢出率為97.44%，而宮頸癌前病變患者的高危型HPV 感染檢出率為79.49%，且宮頸癌患者的HPV 相對表達(dá)量、HPV 病毒載量亦均高于宮頸癌前病變患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05），提示高危型HPV 感染與宮頸癌及癌前病變的發(fā)生密切相關(guān)。分析原因可能為：在感染高危型HPV 后，HPV 中可引起E6、E7 過度表達(dá)的E2 基因會整合到機(jī)體細(xì)胞基因組內(nèi)，引起基因組不穩(wěn)固，從而抑制機(jī)體相關(guān)抑癌基因的活性，使得細(xì)胞的分化功能出現(xiàn)異常，致使正常細(xì)胞發(fā)生癌化現(xiàn)象。且作為一種雙鏈閉合的環(huán)狀DNA 病毒，HPV 感染后可迅速繁殖并侵襲機(jī)體引起細(xì)胞癌化，使宮頸癌前病變以及宮頸癌的發(fā)生發(fā)展風(fēng)險(xiǎn)提高。同時，本文結(jié)果也顯示，兩組患者的CD4、CD8、CD56及CD4/CD8等相關(guān)免疫功能指標(biāo)較低，且觀察組的免疫功能指標(biāo)低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05）。分析原因可能為：CD4為輔助性T 淋巴細(xì)胞，能協(xié)助多種體液免疫因子的合成以及輔助其他淋巴細(xì)胞功能。CD8為抑制性T 淋巴細(xì)胞，能抑制B 細(xì)胞產(chǎn)生抗體損傷機(jī)體。機(jī)體細(xì)胞的免疫功能失調(diào)，各免疫細(xì)胞無法維持相對穩(wěn)定的比例，不能相互協(xié)作與制衡，破壞了機(jī)體正常的免疫功能個，使得抵御感染能力隨之降低，也進(jìn)一步提高感染風(fēng)險(xiǎn)。另有研究指出，雖然約有90%以上的宮頸癌因高危型HPV 感染引起，HPV 感染卻不一定發(fā)展成宮頸癌，因?yàn)闄C(jī)體的免疫系統(tǒng)可清除50%～90%的HPV 感染以避免HPV感染對機(jī)體造成長期危害。因此，當(dāng)機(jī)體相關(guān)免疫功能指標(biāo)降低時，無法充分發(fā)揮清除HPV 感染的能力，致使HPV 感染逐步發(fā)展成宮頸癌前病變以及宮頸癌。段燕等將100 例女性分為宮頸癌前病變組、宮頸癌組與對照組進(jìn)行比較，其中HPV 陽性率檢測分別為56.25%、95.8%、11.36%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05），研究結(jié)果證實(shí)高危型HPV 感染與宮頸癌前病變以及宮頸癌關(guān)系密切，高危HPV 感染主要因素為HPV16，建議做好臨床HPV 檢驗(yàn)工作，控制病情進(jìn)一步發(fā)展，降低癌變概率，與本文結(jié)果相符合。

綜上所述，宮頸癌前病變與宮頸癌密切將相關(guān)，高危型HPV 感染與免疫功能下降是導(dǎo)致疾病發(fā)生的主要因素，因此，女性應(yīng)該定期檢查，盡早實(shí)施干預(yù)治療措施，預(yù)防疾病的發(fā)生。