TURBT聯(lián)合吉西他濱對膀胱癌患者SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3表達(dá)的影響

蔡仙國　　盧子文　　李衛(wèi)林　　吳宏劍

[摘要] 目的 探討尿道等離子電切術(shù)（TURBT）聯(lián)合吉西他濱對膀胱癌患者的可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1（SVEGFR1）、血清胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3（IGFBP-3）、胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結(jié)合蛋白3（IMP3）表達(dá)的影響。 方法 收集2015年1月～2018年4月浙江省臺(tái)州醫(yī)院泌尿外科治療的101例膀胱癌患者資料并進(jìn)行回顧性分析，隨機(jī)分為對照組與研究組，對比兩組的臨床療效。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測SVEGFR1水平、全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀測定IGFBP-3水平、免疫組化法測定IMP3水平。 結(jié)果 治療后，血清DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平降低，IGFBP-3水平升高，相比對照組，研究組SVEGFR1、IMP3、DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平較低，IGFBP-3水平較高（P<0.05）;對照組術(shù)后1年、3年復(fù)發(fā)率及復(fù)發(fā)時(shí)間均較高于研究組，研究組不良反應(yīng)總發(fā)生率高于對照組（P>0.05）。 結(jié)論 TURBT聯(lián)合吉西他濱治療可提高膀胱癌患者的治療效果，可延長膀胱癌患者的生存時(shí)間，且毒副作用小，安全性較好，值得臨床推廣。

[關(guān)鍵詞] 尿道等離子電切術(shù);吉西他濱;膀胱癌;影響

[中圖分類號(hào)] R699.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-9701（2022）17-0015-04

Effects of TURBT combined with gemcitabine on expression of SVEGFR1， IGFBP-3 and IMP3 in patients with bladder cancer

CAI Xianguo? ? LU Ziwen? ? LI Weilin? ?WU Hongjian

Departmentof Urology Surgery，Taizhou Hospital of Zhejiang Province affiliated to Wenzhou Medical University， Taizhou 317000，China

[Abstract] Objective To investigate the effect of Human soluble vascular endotherial growth factor receptor1（SVEGFR1） urethral plasmakinetic resection （TURBT） and gemcitabine on the expression of insulin-like growth factor binding protein -3 （IGFBP-3） and insulin-like growth factor II mRNA binding protein 3 （IMP3） in patients with bladder cancer. Methods A total of 101 patients with bladder cancer treated were collected? in Departmentof Urology Surgery，Taizhou Hospital of Zhejiang Province affiliated to Wenzhou Medical University from January 2015 to April 2018 and analyzed retrospectively. They were randomly divided into the control group and the research group， and the clinical efficacy of the two groups was compared. The levels of svegfr1， IGFBP-3 and IMP3 were measured by enzyme-linked immunosorbent assay， automatic chemiluminescence analyzer and immunohistochemistry. Results After treatment， the levels of serum DKK1，CYFRA21-1 and VEGF decreased and the levels of IGFBP-3 increased. Compared with the control group， the levels of SVEGFR1，IMP3， DKK1，CYFRA21-1 and VEGF in the study group were lower and the levels of IGFBP-3 were higher（P<0.05）;The recurrence rate at 1 and 3 years after operation in the control group was higher than that in the study group， and the total incidence of adverse reactions and tine to relapse in the study group was higher than that in the control group（P>0.05）. Conclusion TURBT combined with gemcitabine can improve the therapeutic effect of bladder cancer， prolong the survival time of patients with bladder cancer， and have less toxic side effects and better safety， which is worthy of clinical promotion.

[Key words] Plasma electrourethral resection; Gemcitabine; Bladder cancer; Impact

膀胱癌是發(fā)生在膀胱黏膜上的惡性腫瘤形成，是臨床最常見的惡性腫瘤之一[1，2]。膀胱癌的原因與長期吸煙有關(guān)，除此之外受慢性感染、個(gè)人飲食等原因都易導(dǎo)致，給患者機(jī)體功能、身心健康和生活質(zhì)量造成巨大危害[3，4]。早期的膀胱癌是局限在膀胱黏膜的，常采用經(jīng)尿道的膀胱腫瘤電切術(shù)進(jìn)行治療，但復(fù)發(fā)率稍高，單一治療效果不理想[5]。吉西他濱作為一種化療藥，主要用于治療局部晚期或已有轉(zhuǎn)移的非小細(xì)胞肺癌和胰腺癌，療效顯著[6]。近年來研究發(fā)現(xiàn)可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1（SVEGFR1）、血清胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3（IGFBP-3）、胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結(jié)合蛋白（IMP3）在膀胱癌患者血清中存在異常表達(dá)，但臨床采用藥物治療膀胱癌患者對SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3水平影響的相關(guān)報(bào)道較少[7，8]?；诖?，本研究通過對膀胱癌患者采用TURBT、吉西他濱聯(lián)合治療，分析其對SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3表達(dá)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015年1月～2018年4月浙江省臺(tái)州醫(yī)院泌尿外科治療的101例膀胱癌患者資料，隨機(jī)分為對照組50例與研究組51例。研究組男31例，女20例，年齡28～85歲，平均（56.5±22.8）歲;對照組男29例，女21例，年齡29～84歲，平均（56.5±22.0）歲。膀胱癌分為Ⅰ期55例、Ⅱ期56例。兩組的性別、年齡等臨床資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究已通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬均知情同意。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理學(xué)診斷為膀胱癌;②病灶直徑0.7～2.6 cm;③化療前血常規(guī)及心電圖、肝腎功能無異常者。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有心、肝、肺、腎、免疫系統(tǒng)性等疾病者;②非原發(fā)性膀胱癌且合并其他惡性腫瘤者;③意識(shí)模糊不清或患有精神疾病，不能夠積極配合完成治療者;④對本研究藥物過敏者。

1.2 方法

兩組均進(jìn)行尿道等離子電切術(shù)（TURBT）治療，患者平躺于治療床，取截石位，全身麻醉，消毒鋪巾后經(jīng)尿道置入GYRUS電切鏡確認(rèn)病灶位置、大小、數(shù)量，使用0.9% NaCl溶液沖洗，從腫瘤表面徹底切除至基底層，對膀胱腫瘤蒂部周圍約2 cm范圍進(jìn)行處理，電凝止血，沖洗送檢，使用0.9% NaCl溶液沖洗，無出血置入導(dǎo)尿管，留置7d。對照組術(shù)后7d使用30 mg吡柔比星（浙江海正藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20045982）溶于50 ml 0.9% NaCl溶液進(jìn)行稀釋灌注治療。研究組術(shù)后7d給予吉西他濱膀胱灌注治療，灌注前囑患者排空膀胱尿液，取截石位，將1.2 g吉西他濱（江蘇豪森藥業(yè)集團(tuán)有限公司，國藥準(zhǔn)字H20030104）于40 ml 0.9%NaCl溶液進(jìn)行稀釋，囑患者適當(dāng)變換體位，保留1 h后排出。兩組治療時(shí)間均為每周1次，2個(gè)月后改為每個(gè)月1次，持續(xù)治療1年。

1.3 觀察指標(biāo)及隨訪

1.3.1 因子測定? 于治療前及治療1年后抽取兩組患者晨間空腹靜脈血5 ml，3000 r/min離心10 min，-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。酶?lián)免疫吸附法檢測SVEGFR1、DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平。試劑盒購自上海機(jī)純實(shí)業(yè)有限公司。將標(biāo)本血清自冰箱取出，室溫放置30 s，備置標(biāo)準(zhǔn)血清及溶液，300 μl洗板液洗板30 s，微孔拍干，導(dǎo)入50 μl檢測緩沖液，將50 μl標(biāo)準(zhǔn)液及樣本和檢測抗體放置微孔，封板，震蕩，室溫（37℃）孵育2 h，洗板，100 μl的酶標(biāo)記物導(dǎo)入檢測孔，封板，震蕩，放置室溫內(nèi)45 min，洗板，將100 μl底物液加入微孔，遮光孵育30 min，加入100 μl終止液，震蕩，采用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。采用免疫組化法測定IMP3水平。石蠟切片脫蠟、水化后清洗3次，95℃檸檬酸鹽緩沖液（pH 6.0）加熱，30 min后取出，PBS液清洗。加0.3%過氧化氫，4%脫脂奶粉，孵育30 min，PBS清洗3次，滴加山羊血清，26 ℃培養(yǎng)0.5 h，添加一抗（1∶1000），4 ℃孵育過夜，PBS液清洗，滴加二抗兔抗羊IgG（1∶1000），孵育30 min，與抗生物素蛋白-生物素-過氧化物酶復(fù)合物，孵育30 min，PBS液清洗，DAB顯色處理8 min，蘇木精染核，反藍(lán)、脫水處理后封片，顯微鏡觀察（200倍），使用ImageJ軟件分析ANXA10、FOXM1、CD63表達(dá)的積分光密度值。IGFBP-3采用MAGLUMI2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀（武漢醫(yī)盾醫(yī)療器械有限公司）測定。

1.3.2 隨訪? 術(shù)后隨訪半年，51例膀胱癌患者進(jìn)行隨機(jī)隨訪20例，隨訪率為39%，其中隨訪應(yīng)答17例，應(yīng)答率為85%;記錄兩組術(shù)后1、3年復(fù)發(fā)率和復(fù)發(fā)時(shí)間及并發(fā)癥發(fā)生率;統(tǒng)計(jì)并記錄患者的不良反應(yīng)發(fā)生情況及復(fù)發(fā)預(yù)后情況，包括腹瀉、皮疹、惡心等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床資料分析

兩組患者臨床資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2 兩組血清腫瘤標(biāo)志物水平比較

治療后，患者血清DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平降低，且研究組DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平較低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。見表2。

2.3 兩組血清SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3水平比較

治療后，患者血清SVEGFR1、IMP3水平降低，IGFBP-3水平升高，相比對照組，研究組SVEGFR1、IMP3水平較低，IGFBP-3水平較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。見表3。

2.4 兩組患者預(yù)后情況比較

對照組術(shù)后1、3年復(fù)發(fā)率及復(fù)發(fā)時(shí)間均高于研究組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。見表4。

2.5 兩組不良反應(yīng)比較

治療后，研究組不良反應(yīng)總發(fā)生率（13.73%）略高于對照組（12.00%），但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表5。3 討論

膀胱癌是一種常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率占我國男性泌尿生殖系統(tǒng)的首位。膀胱癌主要表現(xiàn)為血尿、尿頻尿急尿痛和排尿困難或上尿路梗阻等癥狀[9，10]。因此，根據(jù)患者機(jī)體不同狀態(tài)，確定不同的治療方案，具有重要價(jià)值。

本結(jié)果顯示，治療后膀胱癌患者DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平降低，提示聯(lián)合治療可發(fā)揮協(xié)同作用，可減少術(shù)后復(fù)發(fā)和浸潤現(xiàn)象，療效顯著。研究顯示，血清DKK1、CYFRA21-1及VEGF可作為判斷腫瘤活性的參考指標(biāo)[11]。TURBT具有操作簡便、安全性高、可縮短術(shù)后恢復(fù)時(shí)間、術(shù)中術(shù)后出血少等優(yōu)點(diǎn)，唯一不足之處在于術(shù)后1年極易復(fù)發(fā)[12]。大量研究顯示，治療后膀胱癌復(fù)發(fā)的原因與臨床治療手段、機(jī)體免疫力差、殘留腫瘤細(xì)胞及浸潤程度等有關(guān)[13，14]。因此，術(shù)后行膀胱灌注化療可減少復(fù)發(fā)率，殺滅殘留腫瘤細(xì)胞，且術(shù)后早期灌注化療療效比常規(guī)灌注化療療效顯著[15]。本研究顯示，聯(lián)合治療可降低復(fù)發(fā)率及患者體內(nèi)血清DKK1、CYFRA21-1、VEGF表達(dá)水平，進(jìn)而達(dá)到抑制腫瘤生長的目的，與上述研究結(jié)果基本一致。

IMP3是一種分泌性蛋白，可結(jié)合胰島素樣生長因子抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡等[16]。SVEGFR1是血管內(nèi)皮生長因子受體（VEGF）的抑制劑，可通過抑制VEGF與膜表面受體結(jié)合，進(jìn)而抑制腫瘤血管生成[17]。經(jīng)研究證實(shí)，惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展與SVEGFR1、IMP3、IGFBP-3相關(guān)[18]。劉繼普等[19]發(fā)現(xiàn)，VEGF在膀胱癌患者表達(dá)較高，且隨著T分期增加，VEGF表達(dá)越高。有研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤分級越高、T分期越晚、腫瘤復(fù)發(fā)率越高，IMP3蛋白陽性表達(dá)率及SVEGFR1表達(dá)就越高，表明腫瘤的惡性程度與IMP3、SVEGFR1表達(dá)有關(guān);IGFBP-3表達(dá)與之相反、相關(guān)分析結(jié)果顯示，IMP3蛋白表達(dá)陽性是膀胱癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，進(jìn)一步表明IMP3表達(dá)參與膀胱癌疾病過程[20]。石光英等[21]在相關(guān)研究中顯示，肝癌患者血清IGFBP-3水平下降，術(shù)前IGFBP-3低水平是肝癌早期復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素。本研究顯示，TURBT、吉西他濱聯(lián)合應(yīng)用治療后膀胱癌患者SVEGFR1、IMP3水平下降，IGFBP-3水平升高，且聯(lián)合治療療效優(yōu)于單一治療，提示SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3表達(dá)在膀胱癌疾病的發(fā)生、發(fā)展中具有重要意義。

綜上所述，TURBT聯(lián)合吉西他濱應(yīng)用可提高膀胱癌患者的治療效果，抑制SVEGFR1、IMP3水平，上調(diào)IGFBP-3水平，可延長膀胱癌患者的生存時(shí)間，且毒副作用小，安全性較好，值得臨床推廣。但本研究樣本納入量較小，可能會(huì)使研究結(jié)果有偏差，需進(jìn)一步加大樣本量深入研究確認(rèn)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]? ?Patel VG， Oh WK，et al. Treatment of muscle-invasive and advanced bladder cancer in 2020[J].CA Cancer J Clin，2020，70（5）：404-423.

[2]? ?Jordan B，Meeks JJ.T1 bladder cancer：Current considerations for diagnosis and management[J].Nat Rev Urol，2019， 16（1）：23-34.

[3]? ?Cao R，Yuan L，Ma B，et al. An EMT-related gene signature for the prognosis of human bladder cancer[J].J Cell Mol Med，2020，24（1）：605-617.

[4]? ?王熠，馮蕾，沈詩悅，等.煙草使用與膀胱癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系及機(jī)制的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2021，29（4）：692-697.

[5]? ?龐宸，朱照偉，郭國營.經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)聯(lián)合膀胱灌注化療治療膀胱癌的療效觀察[J].中國臨床醫(yī)生雜志，2021，49（4）：466-468.

[6]? ?葉海波，王軍衛(wèi)，張存明，等.吉西他濱與表柔比星灌注化療對非肌層浸潤性膀胱癌患者的療效對比[J].中華泌尿外科雜志，2021，42（5）：344-348.

[7]? ?馬進(jìn)華，魏紅兵，李先林，等.經(jīng)尿道鈥激光切除術(shù)對非肌層浸潤性膀胱癌患者氧化應(yīng)激因子和腫瘤相關(guān)因子的影響[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2020，43（2）：158-162.

[8]? ?徐昭宇.膀胱癌患者血清IGF-Ⅰ、IGFBP-3水平及其臨床意義[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2018，28（23）：99-103.

[9]? ?Oeyen E，Hoekx L，De-Wachter S，et al. Bladder cancer diagnosis and follow-up： The current status and possible role of extracellular vesicles[J].Int J Mol Sci，2019，14;20（4）：821.

[10]? Pham A，Ballas LK.Trimodality therapy for bladder cancer：Modern management and future directions[J].Curr Opin Urol，2019，29（3）：210-215.

[11]? 張姝越，劉吉文，蔣鑫，等.術(shù)前血清腫瘤標(biāo)志物水平對浸潤性膀胱癌根治術(shù)后生存率的預(yù)測價(jià)值[J].西部醫(yī)學(xué)，2021，33（2）：240-243，248.

[12]? 彭磊，蒙春楊，李金澤，等.吉西他濱較絲裂霉素治療TURBT后非肌層浸潤性膀胱癌的復(fù)發(fā)率低、毒副作用小：基于隨機(jī)對照試驗(yàn)的薈萃分析[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2021，24（23）：2978-2984.

[13]? 劉競，凌敏，安宇，等.腹腔鏡挽救性膀胱切除術(shù)治療膀胱部分切除術(shù)后膀胱癌復(fù)發(fā)的療效分析[J].中華泌尿外科雜志，2021，42（4）：274-277.

[14]? 薛佳，穆效斌，杜岳峰，等.熒光膀胱鏡下TURBT對非肌層浸潤性膀胱癌患者術(shù)后恢復(fù)及復(fù)發(fā)率的影響[J].貴州醫(yī)藥，2021，45（4）：596-597.

[15]? 程全科，王凱，朱向偉.吉西他濱膀胱灌注化療對非肌層浸潤性膀胱癌患者經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)術(shù)后復(fù)發(fā)的影響[J].癌癥進(jìn)展，2021，19（3）：268-271.

[16]? 董婉瑩，趙梅婷，郭建英.蓮草直胸跳甲胰島素樣生長因子系統(tǒng)相關(guān)基因 IGFALS和IMP3的表達(dá)模式[J].環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào)，2019，41（2）：358-366.

[17]? 胡明明，胡瑛，高廣闊，等.可手術(shù)非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)前血漿中VEGF/sVEGFR-1比值與長期生存關(guān)系的初步探索[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2020，28（2）：232-236.

[18]? 王明浩，湯紅平.IMP3與惡性腫瘤的關(guān)系及其臨床價(jià)值的研究進(jìn)展[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2018，24（21）：3255-3259.

[19]? 劉繼普，鐘煜韡，鄭永宏.膀胱部分切除術(shù)對局限性肌層浸潤性膀胱癌患者血清VEGF、MCP-1的影響[J].西部醫(yī)學(xué)，2020，32（2）：234-237.

[20]? 程鈺，盧柳，程肇平.胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白3與膀胱癌相關(guān)蛋白BCA7在膀胱癌中的表達(dá)及與患者臨床特征和預(yù)后的關(guān)系[J].癌癥進(jìn)展，2020，18（23）：2417-2420.

[21]? 石光英，周芳，王紅霞，等.原發(fā)性肝癌患者腫瘤標(biāo)志物、IGF-1的檢測及相關(guān)危險(xiǎn)因素分析[J].肝臟，2020， 25（10）：1079-1082.

（收稿日期：2021-10-14）