強(qiáng)心方對慢性心力衰竭大鼠心肌線粒體能量代謝與自噬的影響

羅遠(yuǎn)林， 徐燕梅， 譚志強(qiáng)， 周學(xué)鋒， 劉煥云

（1.樂山市人民醫(yī)院，四川樂山 614000；2.樂山職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)系，四川樂山 614000；3.重慶兩江新區(qū)第一人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，重慶 401121）

慢性心力衰竭（chronic heart failure）（簡稱慢性心衰）是心臟多種疾病發(fā)展至終末期的臨床綜合征，其發(fā)病機(jī)理與心肌長期缺血導(dǎo)致的心臟結(jié)構(gòu)改變有關(guān)[1-2]。慢性心衰治療多以藥物為主，其中，中醫(yī)藥發(fā)揮日益重要的作用。中醫(yī)古代文獻(xiàn)無慢性心衰病名記載，根據(jù)癥狀可將其歸屬于“心痹”“心悸”“喘證”“水腫”等范疇，其主要病機(jī)以心陽氣虛為本，瘀血、水飲、痰濁為標(biāo)，屬本虛標(biāo)實(shí)之證[3]。對于慢性心衰患者，在西藥規(guī)范化治療基礎(chǔ)上加用溫陽活血利水方藥（強(qiáng)心顆粒）能夠減輕慢性心衰患者的臨床癥狀，可增強(qiáng)心肌收縮力，增加心輸出量，明顯改善心功能等[4]。已有實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，采用溫陽活血利水法對慢性心衰大鼠具有良好的治療作用，并有助于改善慢性心衰大鼠的預(yù)后[5]。本研究采用的強(qiáng)心方是參考強(qiáng)心顆粒組方進(jìn)行加減的經(jīng)驗(yàn)方，具有活血、補(bǔ)氣及利水功效。本研究通過構(gòu)建慢性心衰大鼠，觀察強(qiáng)心方的治療機(jī)制，以期為其臨床應(yīng)用治療慢性心衰提供依據(jù)，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物72只SPF級Wistar雄性大鼠，體質(zhì)量200 ～250 g，由基爾頓生物科技（上海）有限公司提供，動物質(zhì)量許可證號：SYXK（上）2019-0006，在通風(fēng)且干凈的環(huán)境中對大鼠進(jìn)行飼養(yǎng)，5只大鼠1個籠子，溫度為23 ℃左右，濕度要求為50%左右，黑夜白晝交替循環(huán)，自由進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料，飲干凈飲用水。所有實(shí)驗(yàn)動物于開始實(shí)驗(yàn)前，適應(yīng)環(huán)境飼養(yǎng)1周。動物實(shí)驗(yàn)的實(shí)施嚴(yán)格遵照《實(shí)驗(yàn)動物護(hù)理和使用指南》，動物實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)為重慶大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心。

1.2 試劑與儀器單磷酸腺苷（AMP）、二磷酸腺苷（ADP）、三磷酸腺苷（ATP）酶聯(lián)免疫吸附分析（ELISA）試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）；二喹啉甲酸（BCA）蛋白定量試劑盒（天津金克隆生物技術(shù)有效公司）；考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒（上海紀(jì)寧生物科技有限公司）；過氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR）-γ 抗體（武漢益普生物科技有限公司）；微管相關(guān)蛋白輕鏈3Ⅱ（LC3-Ⅱ）抗體（美國Abcam 公司）； p38 絲裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）抗體[微蒙（上海）生物科技有限公司]；GAPDH 抗體（云南圣克魯斯生物科技有限公司）；異硫氰酸熒光素（FITC）標(biāo)記熒光二抗（武漢博士德生物工程有限公司）；蘇木素-伊紅（HE）染色試劑盒[康迪斯化工（湖北）有限公司]；免疫熒光染色試劑盒-抗兔FITC（上海碧云天生物技術(shù)有限公司）。L535R低速離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司）；S80彩色多普勒超聲診斷儀[大為醫(yī)療（江蘇）有限公司]；UG-1 熒光顯微鏡[賽默飛世爾科技（中國）有限公司]；Leica TCS SP8激光掃描共聚焦顯微鏡（成都生物所公共實(shí)驗(yàn)技術(shù)中心提供）。

1.3 藥物及制備強(qiáng)心方的組成為黃芪9 g、炒白術(shù)9 g、干姜6 g、水蛭6 g、茯苓12 g、車前子9 g、枳實(shí)9 g、葶藶子6 g、炙甘草12 g。將上述所有中藥材加10 倍量水煎煮60 min，過濾，藥渣再加8 倍量水煎煮60 min，過濾，減壓濃縮至相對密度1.25 ～1.30 的稠膏，加適量糊精混合均勻，制成顆粒，60 ℃烘干，整粒，分裝。規(guī)格為每袋9 g，每袋相當(dāng)于原生藥材17.31 g，由我院藥劑科制備并提供?？ㄍ衅绽◤V州邁特興華制藥公司產(chǎn)品，批號：國藥準(zhǔn)字H44023128）。

1.4 造模建模前對72只大鼠均采用S80彩色多普勒超聲診斷儀進(jìn)行心臟檢查，以確保心功能正常。抽取60只大鼠用1%戊巴比妥鈉麻醉后，連接小動物呼吸機(jī)，在3 ～4 肋骨間分離皮膚后剪開心包后用5 號絲線結(jié)扎左側(cè)心耳及動脈圓錐正下方2 mm處，后縫合皮膚。待大鼠自主呼吸后撤掉呼吸機(jī)。連續(xù)3 d 注射40 萬U 的青霉素。剩余12只大鼠僅切口穿線不結(jié)扎。4周后，行心臟彩超，若左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）＜45%，則判斷為建模成功[6]。因感染導(dǎo)致死亡大鼠5只，共有55只大鼠建模成功。僅切口穿線不結(jié)扎的大鼠無死亡。

1.5 分組與干預(yù)方法將55只造模成功的大鼠按照體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組，卡托普利組，強(qiáng)心方低、中、高劑量組，每組11只。將其余12只僅切口穿線不結(jié)扎的大鼠設(shè)為假手術(shù)組。大鼠給藥劑量按成人與大鼠體表面積法[7]進(jìn)行換算，為7.92 g·kg-1·d-1（設(shè)為中劑量），高、低劑量分別為中劑量的2 倍和1/2 倍，即15.84、3.96 g·kg-1·d-1。建模第1天，強(qiáng)心方低、中、高劑量組大鼠分別灌胃3.96、7.92、15.84（生藥）g·kg-1·d-1的強(qiáng)心方混懸液，卡托普利組大鼠灌胃10 g/mL 的卡托普利。假手術(shù)組和模型組分別灌胃等體積生理鹽水溶液。每日1次，連續(xù)4周。

1.6 觀察指標(biāo)與方法

1.6.1 ELISA法檢測血清AMP、ADP、ATP含量干預(yù)4周后，麻醉大鼠，胸部主動脈采血，3500r/min（離心半徑10 cm）離心10 min，取上清液，按照ELISA 試劑盒說明書操作，應(yīng)用酶標(biāo)儀在400 nm波長處檢測光密度（OD）值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和OD值計(jì)算血清ATP、ADP、AMP水平。

1.6.2 考馬斯亮藍(lán)染色法檢測心肌組織Na+-K+ATP酶及Ca2+-Mg2+ATP酶的活性 干預(yù)4周后，麻醉大鼠，取左側(cè)心室心肌組織100 mg，制備組織勻漿，將低速離心機(jī)調(diào)整為3500 r/min（離心半徑10 cm），運(yùn)轉(zhuǎn)10 min 后，保留上清液。按照考馬斯亮藍(lán)蛋白測定試劑盒說明書，經(jīng)蛋白濃度測定，酶促反應(yīng)，定磷及ATPase 活力計(jì)算等步驟檢測心肌組織Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶活性的變化。

1.6.3 HE染色法觀察心肌組織形態(tài) 心臟組織甲醛固定后，進(jìn)行石蠟包埋，切片5 μm。脫蠟，蘇木素染色10 min 后以小流量自來水沖洗，1%的鹽酸乙醇褪色變紅后停止操作，再次1%伊紅復(fù)染，脫水。封片。最后光學(xué)顯微鏡下觀察心肌組織形態(tài)。

1.6.4 免疫熒光法檢測心肌組織自噬蛋白LC3-Ⅱ表達(dá) 取心室肌組織部分PBS 清洗，4%多聚甲醛固定，脫水，石蠟包埋，切片，烤片。在切片組織上滴加正常山羊血清，室溫封閉60 min。吸水紙吸掉封閉液，再在每張切片組織上滴加足夠量的LC3-Ⅱ抗體（1∶200）并放入濕盒，4 ℃孵育過夜。陰性對照用PBS 液代替一抗。取出濕盒，室溫復(fù)溫30 min，PBS浸洗切片3次，每次3 min。吸水紙吸干切片組織上多余液體后滴加稀釋好的FITC 熒光二抗（1∶800），濕盒中37 ℃孵育60 min。PBS 清洗3 次，每次3 min。滴加DAPI 避光孵育15 min。PBS 清洗4 次，每次5 min。用含有抗熒光淬滅劑的封片液封片，然后在激光掃描共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像。在高倍鏡（×200）下，每張組織切片選取3個視野，每一個視野計(jì)數(shù)100個細(xì)胞，按LC3-Ⅱ陽性細(xì)胞所占百分比進(jìn)行評分，無陽性表達(dá)計(jì)0 分，陽性細(xì)胞數(shù)＜30%計(jì)1 分，陽性細(xì)胞數(shù)≥30%計(jì)2分。

1.6.5 蛋白免疫印跡法檢測心肌組織中p38MAPK、p-p38MAPK、PPAR-γ蛋白表達(dá) 取心肌組織，裂解提取蛋白，BCA 法進(jìn)行蛋白定量；加入5×十二烷基硫酸鈉（SDS）上樣緩沖液，煮沸使蛋白變性；加樣，進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）分離蛋白后，電轉(zhuǎn)移至PVDF 膜；用5%脫脂奶粉室溫封閉1 h；加入一抗稀釋液p38MAPK（1∶500）、p-p38MAPK（1∶500）、PPAR-γ（1∶500），內(nèi)參為GAPDH（1∶2000），室溫孵1 h后5 ℃孵育過夜；加入HRP 標(biāo)記的IgG 稀釋液（1∶5000），室溫孵育1 h；加入電化學(xué)發(fā)光試劑（ECL）顯影，凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行圖像采集和分析，結(jié)果以目的蛋白條帶與GAPDH 蛋白條帶的灰度比值作為目的蛋白的相對表達(dá)水平。

1.7 統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS 23.00 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組比較采用單因素方差異分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血清中ATP、ADP、AMP含量比較表1結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清ATP 含量降低，ADP、AMP 含量升高（P＜0.05）；與模型組比較，強(qiáng)心方低、中、高劑量組與卡托普利組大鼠血清ATP 含量升高，ADP、AMP 含量降低（P＜0.05），其中，強(qiáng)心方低、中、高劑量組上述指標(biāo)組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），強(qiáng)心方高劑量組上述指標(biāo)與卡托普利組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 各組大鼠血清中三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、單磷酸腺苷（AMP）含量比較Table 1 Comparison of ATP，ADP and AMP levels in serum among various groups of rats （±s，μg·mL-1）

表1 各組大鼠血清中三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、單磷酸腺苷（AMP）含量比較Table 1 Comparison of ATP，ADP and AMP levels in serum among various groups of rats （±s，μg·mL-1）

①P＜0.05，與假手術(shù)組比較；②P＜0.05，與模型組比較；③P＜0.05，與強(qiáng)心方低劑量組比較；④P＜0.05，與強(qiáng)心方中劑量組比較

組別假手術(shù)組模型組強(qiáng)心方低劑量組強(qiáng)心方中劑量組強(qiáng)心方高劑量組卡托普利組F值P值鼠數(shù)/只121111111111 ATP 755.80±130.55428.47±127.45①552.15±100.20①②586.90±124.50①②③620.44±130.10①②③④609.44±122.56①②③④9.590＜0.001 ADP 3004.20±305.473845.25±415.22①3655.10±390.22①②3480.19±333.11①②③3105.70±284.06①②③④3147.02±251.04①②③④11.530＜0.001 AMP 1050.80±224.301628.39±442.17①1381.22±354.47①②1256.39±331.07①②③1168.10±256.68①②③④1201.55±228.00①②③④4.6140.001

2.2 各組大鼠心肌組織線粒體酶活性比較表2結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠心肌組織勻漿中Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶活性降低（P＜0.05）；與模型組比較，強(qiáng)心方低、中、高劑量組與卡托普利組Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶活性升高（P＜0.05），其中，強(qiáng)心方低、中、高劑量組上述指標(biāo)組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），強(qiáng)心方高劑量組上述指標(biāo)與卡托普利組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 各組大鼠心肌組織線粒體酶活性比較Table 2 Comparison of mitochondrial enzyme activities in myocardial tissues among various groups of rats（±s，μmol·mg-1·h-1）

表2 各組大鼠心肌組織線粒體酶活性比較Table 2 Comparison of mitochondrial enzyme activities in myocardial tissues among various groups of rats（±s，μmol·mg-1·h-1）

①P＜0.05，與假手術(shù)組比較；②P＜0.05，與模型組比較；③P＜0.05，與強(qiáng)心方低劑量組比較；④P＜0.05，與強(qiáng)心方中劑量組比較

組別假手術(shù)組模型組強(qiáng)心方低劑量組強(qiáng)心方中劑量組強(qiáng)心方高劑量組卡托普利組F值P值鼠數(shù)/只121111111111 Na+-K+ATP酶7.80±0.604.25±0.31①5.50±0.47①②5.89±0.33①②③6.69±0.51①②③④6.80±0.66①②③④68.7900.001 Ca2+-Mg2+ATP酶7.41±0.404.20±0.29①5.30±0.30①②6.08±0.41①②③7.10±0.26①②③④7.04±0.30①②③④157.600＜0.001

2.3 各組大鼠心肌組織病理形態(tài)比較圖1結(jié)果顯示：假手術(shù)組大鼠心肌組織形態(tài)規(guī)則，細(xì)胞核分布均勻，未見變性壞死；模型組大鼠心肌組織細(xì)胞變形，結(jié)構(gòu)紊亂，部分纖維組織斷裂，伴大量炎癥細(xì)胞浸潤；強(qiáng)心方低、中、高劑量組及卡托普利組大鼠心肌纖維排列逐漸規(guī)則，心肌細(xì)胞水腫及壞死減少，逐漸恢復(fù)正常，炎癥細(xì)胞浸潤減少，其中以強(qiáng)心方高劑量組改善最顯著，改善程度與假手術(shù)組相近。

圖1 各組大鼠心肌組織病理形態(tài)比較（HE染色，×200）Figure 1 Comparison of the histopathological morphology of myocardium among various groups of rats（HE staining，×200）

2.4 各組大鼠心肌組織自噬蛋白LC3-Ⅱ表達(dá)比較圖2、圖3結(jié)果顯示：假手術(shù)組大鼠心肌組織自噬蛋白LC3-Ⅱ陽性表達(dá)率為（10.15±0.33）%、模型組為（49.66±7.55）%，強(qiáng)心方低、中、高劑量組分別為（30.49±4.11）%、（26.28±3.52）%、（22.30±2.80）%，卡托普利組為（23.06 ± 3.11）%。多組間比較存在差異（F=112.800，P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較：模型組LC3-Ⅱ陽性表達(dá)率高于假手術(shù)組（P＜0.05）；與模型組比較，強(qiáng)心方低、中、高劑量組與卡托普利組中LC3-Ⅱ陽性表達(dá)率均降低（P＜0.05），其中，強(qiáng)心方低、中、高劑量組LC3-Ⅱ陽性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），強(qiáng)心方高劑量組LC3-Ⅱ陽性表達(dá)率與卡托普利組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

圖2 各組大鼠心肌組織自噬蛋白LC3-Ⅱ陽性表達(dá)率比較Figure 2 Comparison of the positive expression rate of autophagy protein LC3-Ⅱin myocardial tissues among various groups of rats

圖3 各組大鼠心肌組織自噬蛋白LC3-Ⅱ陽性表達(dá)情況比較（免疫熒光法，×200）Figure 3 Comparison of myocardial tissue positive expression of autophagy protein LC3-Ⅱamong various groups of rats（immunofluorescence method，×200）

2.5 各組大鼠心肌組織中p38MAPK、p-p38MAPK、PPAR-γ 蛋白表達(dá)比較表3、圖4結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較， 模型組大鼠心肌組織中p38MAPK、p-p38MAPK 蛋白表達(dá)水平升高，PPAR-γ 蛋白表達(dá)水平降低（P＜0.05）；與模型組比較，強(qiáng)心方低、中、高劑量組與卡托普利組大鼠心肌組織中p38MAPK、p-p38MAPK 蛋白表達(dá)水平降低，PPAR-γ 蛋白表達(dá)水平升高（P＜0.05），其中，強(qiáng)心方低、中、高劑量組上述指標(biāo)組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），強(qiáng)心方高劑量組上述指標(biāo)與卡托普利組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

圖4 各組大鼠心肌組織中p38MAPK、p-p38MAPK、PPAR-γ蛋白電泳條帶圖Figure 4 Electrophoretic strip images of p38MAPK，p-p38MAPK and PPAR-γ proteins in myocardial tissues in various groups of rats

表3 各組大鼠心肌組織中p38MAPK、p-p38MAPK、PPAR-γ蛋白表達(dá)水平比較Table 3 Comparison of protein expression levels of p38MAPK，p-p38MAPK and PPAR-γ in myocardialtissues among various groups of rats

3 討論

多種原因誘發(fā)的心衰均與心肌細(xì)胞線粒體自噬及能量異常代謝有關(guān)[8]。線粒體與中醫(yī)學(xué)“氣”的功能相似。心衰發(fā)生發(fā)展過程中伴隨心肌線粒體損傷，多認(rèn)為與心氣虛有關(guān)[9]。氣為血之帥，心氣虛致血液、水液運(yùn)行不暢，導(dǎo)致血瘀、水停心下，引發(fā)短氣不足以息、水腫、心悸等一系列癥狀。另外，疾病發(fā)生發(fā)展的根本原因是人體機(jī)能的太過與不及，自噬參與多種疾病的病理過程，如心血管疾病的發(fā)生發(fā)展。自噬相當(dāng)于機(jī)體正氣與邪氣調(diào)控，中醫(yī)認(rèn)為，邪氣侵襲人體而致病，必然是正氣虛弱，所謂“邪之所湊，其氣必虛”。當(dāng)自噬相關(guān)基因低表達(dá)時，則可導(dǎo)致心血管疾病的發(fā)生[10]。改善心肌細(xì)胞自噬及線粒體能量代謝能力異常，可緩解心衰。

線粒體形態(tài)功能損傷是慢性心衰心功能降低及心肌細(xì)胞凋亡的主要因素之一。線粒體通透性改變進(jìn)而上調(diào)大分子物質(zhì)穿過內(nèi)膜導(dǎo)致線粒體腫脹及膜電位改變，進(jìn)一步影響心肌細(xì)胞能量代謝。心衰時心肌組織代謝異常，ATP 酶活力降低（主要包括Na+-K+ATP 酶及Ca2+-Mg2+ATP 酶活力的降低），導(dǎo)致心肌細(xì)胞內(nèi)鈉離子水平升高、細(xì)胞內(nèi)外鈣鎂離子分布失衡而造成鈣超載[11-12]。心肌細(xì)胞內(nèi)鈣超載會上調(diào)磷脂酶活性，誘導(dǎo)線粒體損傷，引起細(xì)胞自噬，加重心衰病理損傷[13]。有研究[14]表明，心肌組織Na+-K+ATP酶及Ca2+-Mg2+ATP酶降低提示細(xì)胞心肌細(xì)胞能量代謝障礙，因此，通過改善心肌細(xì)胞線粒體能量代謝狀態(tài)能夠控制疾病發(fā)展。本研究結(jié)果顯示，強(qiáng)心方各劑量組與卡托普利組血清ATP 含量和心肌組織Na+-K+ATP 酶活性、Ca2+-Mg2+ATP 酶活性高于模型組，血清ADP、AMP含量低于模型組（P＜0.05），其中，高劑量組與卡托普利組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），表明強(qiáng)心方能夠增強(qiáng)慢性心衰大鼠心肌線粒體能量代謝而發(fā)揮心臟保護(hù)作用。

有研究[15]表明，心衰大鼠模型自噬蛋白LC3-Ⅱ表達(dá)上調(diào)，7 d 后大鼠心肌細(xì)胞自噬功能被激活，提示心肌細(xì)胞自噬參與了心衰病理損傷過程。還有研究[16]證實(shí)，對心衰大鼠采用姜油酮有效治療后心肌自噬蛋白LC3-Ⅱ表達(dá)降低，亦表明降低心肌自噬蛋白LC3-Ⅱ表達(dá)可減少心肌損傷。本研究結(jié)果顯示，強(qiáng)心方各劑量組LC3-Ⅱ陽性表達(dá)率低于模型組（P＜0.05），與卡托普利組比較無顯著性差異（P＞0.05），表明強(qiáng)心方可通過減少心肌細(xì)胞線粒體自噬而發(fā)揮心肌細(xì)胞保護(hù)作用。

p38MAPK 是MAPK 的下游因子，廣泛分布于人體細(xì)胞中，在缺氧及炎性反應(yīng)時表達(dá)升高[17]。心衰時心肌p-p38MAPK 可將細(xì)胞外信息傳遞至細(xì)胞核，通過轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)多種靶基因共同加重心肌線粒體結(jié)構(gòu)改變及代謝異常等[18]。PPAR-γ 是PPAR 的家族成員之一，具有多種生物調(diào)節(jié)功能，如抑制炎癥及抗腫瘤等[19]。PPAR-γ 在心肌代謝異常疾病中呈低表達(dá)，是改善心臟病變的重要靶標(biāo)。有研究表明，通過激活心衰大鼠PPAR-γ表達(dá)后能夠增強(qiáng)心肌細(xì)胞能量代謝，從而改善心臟重構(gòu)[20]。本研究結(jié)果顯示，強(qiáng)心方各劑量組心肌組織p38MAPK、p-p38MAPK 蛋白表達(dá)水平低于模型組，PPAR-γ蛋白表達(dá)水平高于模型組（P＜0.05），與卡托普利組比較無顯著性差異（P＞0.05），表明強(qiáng)心方可通過抑制心衰大鼠心肌組織中p38MAPK活化、促進(jìn)PPAR-γ表達(dá)發(fā)揮心肌保護(hù)作用。

綜上所述，強(qiáng)心方能夠通過提高慢性心衰大鼠心肌線粒體能量代謝，降低心肌細(xì)胞自噬，抑制心肌p38MAPK 活化、促進(jìn)PPAR-γ 蛋白表達(dá)，進(jìn)而減輕病變。