馬齒莧等植物提取物對桑表白粉病的室內(nèi)防效探究

□ 苗舒瑜 金 鳳 程 密 張子航 孫淑萍 畢兆東

（金陵科技學(xué)院，江蘇 南京 211100）

桑表白粉病是一種真菌性傳染病，是發(fā)生在桑樹上的主要病害之一，主要危害葉片，使得桑葉的質(zhì)量和產(chǎn)量低下。該病害發(fā)病時間為夏末秋初，發(fā)病時可見無定形外生菌絲和分生孢子，然后再逐漸擴大形成灰白色病斑。在嚴(yán)重情況下，葉子整個表面都會遭到損壞，10月左右病斑周圍散生黑色微粒狀子囊殼［1-2］。李焜華等［3］用百理通和好力克對桑樹白粉病進行防治試驗，試驗表明，43%好力克乳油3000倍、25%百理通可濕性粉劑2000倍，對桑樹白粉病防治效果分別達(dá)81.79%和83.61%，能達(dá)到很好的防治目的。但長期使用化學(xué)藥劑不僅會造成環(huán)境污染，還會使桑白粉菌產(chǎn)生抗藥性，增加化學(xué)藥劑的施用劑量，則會使非靶標(biāo)生物牽連致死，造成的結(jié)果是桑白粉病逐漸失去自然控制力。

白粉病易發(fā)生在秋季炎熱潮濕環(huán)境下以及桑葉中相對硬化早的品種中。病菌以閉囊殼的形式附著在枝干病葉中越冬，次年在適宜環(huán)境下，子囊孢子隨風(fēng)吹雨落，四散到桑葉上，進而危害桑樹。病菌在22～26℃的溫度下，在相對濕度70-80%的條件下尤其活躍。桑樹在環(huán)境較差的情況下容易爆發(fā)白粉病，如通風(fēng)不良、水肥控制不當(dāng)、透光性差、土壤缺鉀等［4］。

植物源農(nóng)藥可避免農(nóng)藥殘留對人體產(chǎn)生的不良影響，并且植物源農(nóng)藥產(chǎn)品中除有效成分外，還含有其他多種物質(zhì)，在田間應(yīng)用中，這些物質(zhì)表現(xiàn)出促進植物生長發(fā)育、誘導(dǎo)植物提高抗病性和抗逆性、改善作物品質(zhì)等效應(yīng)［5］。國內(nèi)外研究表明，許多植物提取物中都含有抑菌的活性成分，楊三維用溫室盆栽法測定了幾種植物提取物對小麥白粉病的防治效果，發(fā)現(xiàn)大黃、黃連等粗提物對小麥白粉病有明顯的防治效果［6］，而素有天然抗生素之稱的馬齒莧則對細(xì)菌和病毒具有較強的抑制作用［7］。

本文以桑表白粉病病葉為試驗材料，用馬齒莧和大蒜提取物處理離體桑表白粉病病葉進行室內(nèi)防治試驗，以探明馬齒莧和大蒜提取物對桑表白粉病的防治效果，為開發(fā)新型植物源殺菌劑提供科學(xué)依據(jù)。

一、材料與方法

（一）試驗材料

1.供試病葉

于金陵科技學(xué)院幕府校區(qū)實驗樓B樓后的桑樹栽培區(qū)，采集葉片表面帶有白粉病斑的桑葉。葉片選擇標(biāo)準(zhǔn)為：葉緣完整，葉片顏色偏綠，處于健康能夠繼續(xù)生長的，葉片縱直徑約為5-8cm，能夠整片放入直徑90mm培養(yǎng)皿之中的，桑葉表面病斑分散、未連接在一起的，并且避免帶有其他病原物。桑葉采集后立即用于試驗。

2.植物提取物

大蒜提取物：取45g市售白皮大蒜，剝?nèi)∷獍辏鬯楹蠓謨纱畏湃胙欣徶羞M行研磨，磨后在空氣中鋪開放置15min左右，加入225ml蒸餾水，搖勻，用四層紗布進行過濾，濾出液即為大蒜提取物，共計180ml。

馬齒莧提取物：取市售干燥馬齒莧100g，蒸餾水1000ml，放入全自動中藥煲中煎1小時15分鐘后，用8層紗布過濾，收集濾液，冷卻后的濾液即為馬齒莧提取物原液。

（二）試驗方法

1.大蒜和馬齒莧提取物對桑表白粉病的防治試驗

將所采患病桑葉的葉柄包上脫脂棉，放入培養(yǎng)皿中，用膠頭滴管吸取清水滴入2～3滴到脫脂棉上，保濕。每個培養(yǎng)皿放入一片同樣保濕處理的病葉，共20皿。20片病葉分成4組，每組5片，每組為1個處理，共4個處理，每片病葉為1個重復(fù)，每個處理5個重復(fù)。將準(zhǔn)備好的植物提取物噴在桑葉表面，一組噴大蒜提取物，一組噴馬齒莧提取物，對照用清水處理，另一組不做任何處理。用噴霧器將不同濃度馬齒莧提取物分別噴在各組桑葉表面，至葉面濕潤。處理好病葉后，蓋上皿蓋，放在室溫下保存。

試驗期間環(huán)境條件為：平均濕度為68%，平均最高溫13.3℃，平均最低溫5℃。

處理前和處理后1天、3天、5天分別觀測并記錄病葉上病斑數(shù)量、病斑直徑、閉囊殼數(shù)量并用膠頭滴管吸取清水滴入1滴到脫脂棉上，保濕。

2.不同濃度馬齒莧提取物對桑表白粉病的防治試驗

用馬齒莧提取物原液經(jīng)稀釋后進行不同濃度馬齒莧提取物對桑表白粉病的防治試驗。試驗方法同前。共5個處理，每個處理5個重復(fù)，每個重復(fù)為1片病葉，共25片病葉。不同濃度馬齒莧提取物用馬齒莧提取物原液加清水稀釋而成，馬齒莧提取物原液與清水的比例分別為：1∶16、1∶8、1∶4、1∶2、原液。配置方法如下：

先用量筒量取250ml馬齒莧溶液，再用大燒杯進行混勻工作。

1∶16的馬齒莧提取物：取50ml馬齒莧原液加入800ml清水中，攪拌均勻。

1∶8的馬齒莧提取物：取50ml馬齒莧原液加入400ml清水中，攪拌均勻。

1∶4的馬齒莧提取物：取50ml馬齒莧原液加入200ml清水中，攪拌均勻。

1∶2的馬齒莧提取物：取50ml馬齒莧原液加入100ml清水中，攪拌均勻。

原液：用量筒量取50ml馬齒莧原液。

用噴霧器將不同濃度馬齒莧提取物分別噴在各組桑葉表面，至葉面濕潤藥液預(yù)滴。處理后蓋上皿蓋，放在室溫下保存。

試驗期間環(huán)境條件為：平均濕度為68%，平均最高溫13.3℃，平均最低溫5℃。

處理前和處理后1天、3天、5天等分別觀測并記錄病葉上病斑數(shù)量、病斑直徑、閉囊殼數(shù)量并用膠頭滴管吸取清水滴入1滴到脫脂棉上以保濕。

（三）數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

利用SPSS20.0軟件對所得試驗數(shù)據(jù)進行處理分析，計算病斑數(shù)量減退率、校正病斑數(shù)量減退率、閉囊殼數(shù)量減退率、校正閉囊殼數(shù)量減退率、病斑直徑減退率、校正病斑直徑減退率等，計算公式如下：

二、結(jié)果與分析

（一）馬齒莧和大蒜提取物對桑表白粉病病斑數(shù)量的影響

馬齒莧和大蒜提取物處理桑表白粉病病葉的離體試驗，結(jié)果表明（見表1）：經(jīng)馬齒莧和大蒜提取物處理后，每葉病斑數(shù)均有明顯減少。處理后1天，馬齒莧和大蒜提取物處理組的校正病斑數(shù)量減退率分別為82.50%、65.81%；處理后3天，馬齒莧和大蒜提取物處理組的校正病斑數(shù)量減退率分別為52.65%、79.41%；處理后5天，馬齒莧和大蒜提取物處理組的校正病斑數(shù)量減退率分別為44.00%、56.00%。室內(nèi)離體保濕培養(yǎng)的病葉，不經(jīng)任何處理，隨培養(yǎng)時間的延長，每葉病斑數(shù)雖有所增加，但相對于清水對照組，病斑數(shù)量增加較少。馬齒莧提取物處理組，處理后1天，校正病斑數(shù)量減退率最高，隨時間推移，校正病斑數(shù)量減退率不斷減低。大蒜提取物處理組，處理后3天的校正病斑數(shù)量減退率最高，隨后降低。這表明馬齒莧和大蒜提取物對病斑數(shù)量都有控制效果，但兩者的作用時間不同，馬齒莧提取物處理組處理后1天，校正病斑數(shù)量減退率即達(dá)到82.50%，對該病病斑的形成抑制效果較好。

（二）馬齒莧和大蒜提取物對桑表白粉病閉囊殼數(shù)量的影響

馬齒莧和大蒜提取物處理桑表白粉病病葉的離體試驗，結(jié)果表明（見表1）：經(jīng)馬齒莧和大蒜提取物處理后，每葉閉囊殼數(shù)均有明顯減少。處理后1天，馬齒莧和大蒜提取物處理組的校正閉囊殼數(shù)量減退率分別為69.05%、49.64%；處理后3天，馬齒莧和大蒜提取物處理組的校正閉囊殼數(shù)量減退率分別為81.88%、91.88%；處理后5天，馬齒莧和大蒜提取物處理組的校正閉囊殼數(shù)量減退率分別為78.94%、71.21%。室內(nèi)離體保濕培養(yǎng)的病葉，不經(jīng)任何處理，隨培養(yǎng)時間的延長，每葉閉囊殼數(shù)雖有所增加，但相對于清水對照組，閉囊殼的數(shù)量增加較少。馬齒莧和大蒜提取物處理組，處理后3天，校正閉囊殼數(shù)量減退率均為最高，表明馬齒莧和大蒜提取物對閉囊殼數(shù)量都有控制效果，兩者均為在處理后3天，校正閉囊殼數(shù)量減退率達(dá)到最高。

（三）馬齒莧和大蒜提取物對桑表白粉病病斑直徑的影響

馬齒莧和大蒜提取物處理桑表白粉病病葉的離體試驗，結(jié)果表明（見表1）：經(jīng)馬齒莧和大蒜提取物處理后，病斑平均直徑均有減小。處理后1天，馬齒莧和大蒜提取物處理組的校正病斑平均直徑減退率分別為22.47%、68.38%；處理后3天，馬齒莧和大蒜提取物處理組的校正病斑平均直徑減退率分別為47.33%、68.89%；處理后5天，馬齒莧和大蒜提取物處理組的校正病斑平均直徑減退率分別為23.07%、9.49%。室內(nèi)離體保濕培養(yǎng)的病葉，不經(jīng)任何處理，隨培養(yǎng)時間的延長，病斑平均直徑不斷增長，與清水對照組的病斑直徑變化相一致。馬齒莧提取物處理組，處理后3天，校正病斑平均直徑減退率最高。大蒜提取物處理組，處理后1、3天的校正病斑平均直徑減退率均較高，分別達(dá)68%以上。大蒜提取物處理組校正病斑平均直徑減退率明顯高于馬齒莧提取物處理組。表明大蒜提取物對病斑直徑的抑制效果高于馬齒莧提取物。

減退率，隨時間推移，逐漸減低。1∶2的馬齒莧提取物處理組的病斑數(shù)量減退率，隨時間推移，逐漸增高。表明馬齒莧提取物原液與清水按1∶4混合后，對桑表白粉病病斑數(shù)量的控制效果最好。更高濃度的馬齒莧提取物，隨培養(yǎng)時間延長，病斑數(shù)量減退率不斷減低，可能與葉表浸潤狀態(tài)有關(guān)。

（四）不同濃度馬齒莧提取物對桑表白粉病閉囊殼數(shù)量的影響

不同濃度的馬齒莧提取物處理桑表白粉病病葉的離體試驗，結(jié)果表明（見表1）：不同濃度馬齒莧提取物處理病葉后，每葉閉囊殼數(shù)量減退率差異明顯。處理后1、3、5天，1∶4的馬齒莧提取物處理組的閉囊殼數(shù)量減退率均最高，分別為57.18%、72.87%、71.99%，處理后3天，閉囊殼數(shù)量減退率達(dá)到最高。1∶16、1∶8、原液的馬齒莧提取物處理組的閉囊殼數(shù)量減退率，均在處理后3天達(dá)到最高。1∶2的馬齒莧提取物處理組的閉囊殼數(shù)量減退率，隨時間推移，逐漸增高。表明馬齒莧提取物原液與清水按1∶4混合后，對桑表白粉病每葉閉囊殼數(shù)量的控制效果最好。

表1 不同濃度馬齒莧提取物對桑表白粉病閉囊殼數(shù)量的影響

（五）不同濃度馬齒莧提取物對桑表白粉病病斑直徑的影響

不同濃度的馬齒莧提取物處理桑表白粉病病葉的離體試驗，結(jié)果表明（見表2）：不同濃度馬齒莧提取物處理病葉后，每葉病斑平均直徑減退率差異明顯。處理后1、3、5天，1∶4馬齒莧提取物處理組的每葉病斑平均直徑減退率均最高，分別為90.80%、85.06%、82.07%，處理后1天，每葉病斑平均直徑減退率最高。1∶16、1∶8、原液的馬齒莧提取物處理組的每葉病斑平均直徑減退率，隨培養(yǎng)時間延長，逐步降低。1∶2的馬齒莧提取物處理組的每葉病斑平均直徑減退率，處理后3天最高。表明馬齒莧提取物原液與清水按1∶4混合后，對桑表白粉病每葉病斑平均直徑的控制效果最好，處理后1天病斑平均直徑減退率最高。

表2 不同濃度馬齒莧提取物對桑表白粉病病斑直徑的影響

三、結(jié)論與討論

本文利用馬齒莧和大蒜提取物處理離體桑表白粉病病葉，試驗結(jié)果表明：馬齒莧和大蒜提取物對病斑和閉囊殼數(shù)量的增加、病斑直徑的增大等都有抑制效果，但兩者的作用又有所不同。馬齒莧提取物處理組：處理后1天，校正病斑數(shù)量減退率即達(dá)到82.50%，抑制效果較好；處理后3天，校正閉囊殼數(shù)量減退率和校正病斑平均直徑減退率均達(dá)到最高。大蒜提取物處理組：處理后3天，校正病斑數(shù)量減退率和校正閉囊殼數(shù)量減退率均達(dá)到最高，處理后1天、3天的校正病斑平均直徑減退率均較高，分別達(dá)68%以上。馬齒莧提取物對病斑和閉囊殼數(shù)量增加的抑制效果比大蒜提取物的作用快，處理后1天，校正病斑數(shù)量減退率和校正閉囊殼數(shù)量減退率分別達(dá)82.50%、77.17%，但在病斑直徑的抑制上，大蒜提取物的作用處理后1天、3天好于馬齒莧提取物。不同濃度的馬齒莧提取物對桑表白粉病病葉的病斑和閉囊殼數(shù)量的增加、病斑直徑的增大等抑制效果不同。1∶4馬齒莧提取物，對桑表白粉病每葉病斑數(shù)量、閉囊殼數(shù)量、病斑平均直徑的控制效果最好。處理后1天，病斑數(shù)量減退率、病斑平均直徑減退率均達(dá)到90%以上，處理后3天閉囊殼數(shù)量減退率最高。

本試驗表明，室內(nèi)離體培養(yǎng)環(huán)境下，馬齒莧和大蒜提取物防治桑表白粉病的效果較好，有一定的開發(fā)價值，但田間應(yīng)用效果需進一步試驗探明，馬齒莧提取物對桑表白粉病病菌的作用機理也有待進一步研究探明。

李春宵等通過盆栽試驗測定了馬齒莧殘渣堆肥浸提液對黃瓜灰霉病、黃瓜霜霉病、黃瓜炭疽病的活性，結(jié)果表明馬齒莧殘渣堆肥浸提液對3種真菌性病害都有一定防治效果［8］。本文的試驗進一步表明，馬齒莧提取物對植物白粉病類病害也有一定防治效果。目前利用植物提取物控制植物白粉病類的研究表明，蛇床子提取液對南瓜白粉病有較好的保護和防治效果［9］；蛇床子醇提物對烤煙白粉病病菌的抑制效果最佳［10］；香樟葉、黃楊和刺槐提取物對小麥白粉病病菌有良好的抑制活性［11］。本文試驗也表明馬齒莧提取物對桑表白粉病具有防治效果。植物提取物防控植物真菌性病害有較廣泛應(yīng)用前景，控制各類植物真菌性病害的植物材料有待大量試驗探明。本文為馬齒莧應(yīng)用于植物病害防控提供了一定參考。