新生兒先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥篩查切值的影響因素分析

路 遙

大連市婦女兒童醫(yī)療中心(集團(tuán)) 遺傳代謝醫(yī)療中心 遼寧 大連 116600

新生兒疾病篩查是指在新生兒期通過快速、簡(jiǎn)便、敏感的檢測(cè)方法對(duì)一些嚴(yán)重影響患兒身體和智力發(fā)育的先天性、遺傳性疾病進(jìn)行早期群體篩查，從而使患兒得到早期診斷、早期治療，避免患兒生長(zhǎng)、智力發(fā)育障礙，甚至死亡。先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(CAH)是一種常染色體隱性遺傳病，由于類固醇激素合成過程中某些酶先天缺陷，導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)醇的合成過程完全或者部分受阻，使促腎上腺皮質(zhì)激素增加，導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)增生，引發(fā)以腎上腺皮質(zhì)功能不同程度減退、性腺發(fā)育異常、伴或不伴水鹽代謝、高血壓等為主要表現(xiàn)的綜合征[1]。血17α-羥孕酮(17-OHP)水平測(cè)定是CAH診斷和療效評(píng)估的一個(gè)重要指標(biāo)。本研究對(duì)大連地區(qū)新生兒CAH篩查數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，探討大連地區(qū)足月兒、早產(chǎn)兒及正常體重兒、低體重兒CAH篩查中17-OHP分布狀況及切值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對(duì)象為2019年12月至2021年4月在我市分娩的活產(chǎn)新生兒，共計(jì)45 504例。新生兒出生72 h后，并充分哺乳6次以上由助產(chǎn)機(jī)構(gòu)專業(yè)護(hù)理人員采集3滴足跟血滴于專用濾紙上，要求每個(gè)血斑直徑≥8 mm，血斑均勻滲透到濾紙兩面，在室溫下自然晾干，避免陽(yáng)光直射，放置于4℃冰箱密封保存，一周內(nèi)運(yùn)送或者郵寄到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行新生兒疾病篩查。

1.2 儀器與試劑 全自動(dòng)打孔儀(Panthera-PuncherTM9，美國(guó)PerkinElmer公司)；美國(guó)PerkinElmer公司全自動(dòng)熒光免疫分析儀(GSP，Genetic Screening Processor，型 號(hào)為2021-0010)及其配套的測(cè)定試劑盒。質(zhì)控品采用第三方質(zhì)控品，由杭州寶榮科技有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)為R1191201-2。檢測(cè)方法為時(shí)間分辨熒光免疫分析法。

1.3 結(jié)果判斷 測(cè)定濾紙血片中17-OHP濃度，初篩切值統(tǒng)一定為11 nmol/L。若標(biāo)本17-OHP濃度≥11 nmol/L，則判斷該新生兒先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥初篩為陽(yáng)性，然后原血片復(fù)查，結(jié)果仍為陽(yáng)性則由網(wǎng)絡(luò)組人員通知患兒家長(zhǎng)召回復(fù)查，若復(fù)查仍為可疑陽(yáng)性則需到綜合性醫(yī)院進(jìn)行確診及分型。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0軟件對(duì)新生兒17-OHP濃度結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。對(duì)新生兒的17-OHP篩查結(jié)果做正態(tài)性檢驗(yàn)，由于17-OHP濃度數(shù)據(jù)屬于偏態(tài)分布，因此本研究通過百分位數(shù)法確定其切值。

2 結(jié)果

2.1 17-OHP初篩濃度分析 研究對(duì)象中足月兒(≥37 w)42 987例，占比94.5%，早產(chǎn)兒(<37 w)2 517例，占比5.5%；正常體重兒(≥2 500 g)43 770例占比96.2%，低體重兒(<2 500 g)的1 734例，占比3.8%。對(duì)45 504例新生兒17-OHP初篩濃度進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)分析，結(jié)果顯示45 504例新生兒17-OHP初篩濃度呈偏態(tài)分布，見表1。17-OHP總體最小值為0.30 nmol/L，最大值為396.30 nmol/L，95%和99%百分位數(shù)分別為8.10 nmol/L和13.20 nmol/L。

表1 17-OHP濃度頻數(shù)分布表

2.2 17-OHP濃度與孕周的關(guān)系 將45 504例新生兒按出生孕周分為早產(chǎn)兒組(<37 w)和足月兒組(≥37 w)。其中早產(chǎn)兒2 517例，早產(chǎn)兒組17-OHP濃度分布水平為(8.6±6.3)nmol/L。早產(chǎn)兒組17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為19.12 nmol/L和32.87 nmol/L；足月兒42 987例，足月兒組17-OHP濃度分布水平為(3.8±2.7)nmol/L。足月兒組17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為7.20 nmol/L和10.01 nmol/L(表2)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，早產(chǎn)兒組和足月兒組17-OHP濃度比較，P<0.01。

表2 早產(chǎn)兒與足月兒17-OHP濃度的比較

2.3 17-OHP濃度與體重的關(guān)系 將45 504例新生兒按出生體重分為低體重兒組(<2 500 g)和正常體重兒組(≥2 500 g)。其中低體重兒1 734例，低體重兒組17-OHP濃度分布水平為(8.8±6.6)nmol/L。低體重兒組17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為19.99 nmol/L和33.62 nmol/L；正常體重兒43 770例，正常體重兒組17-OHP濃度分布水平為(3.9±2.8)nmol/L。正常體重兒組17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為7.5nmol/L和10.7 nmol/L(表3)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，低體重兒組和正常體重兒組17-OHP濃度比較，P<0.01。

表3 低體重兒與正常體重兒17-OHP濃度的比較

2.4 新生兒CAH篩查確診情況匯總分 45 504例篩查標(biāo)本中初篩陽(yáng)性共計(jì)818例，其中早產(chǎn)兒543例，足月兒275例；低體重兒415例，正常體重兒403例。經(jīng)召回復(fù)查確診，最終確診CAH共3例，均為男性患兒。確診患兒17-OHP初篩值及孕周、體重詳情見表4，CAH篩查發(fā)病率為1/15 168。

表4 確診患兒17-OHP初篩值與孕周、體重統(tǒng)計(jì)表

3 討論

CAH是一種常染色體隱性遺傳病，主要包括21-羥化酶、11β-羥化酶、17α-羥化酶缺陷等類型，其中21-羥化酶缺陷癥所占的比例高達(dá)90%～95%，是最常見的一種類型，通過對(duì)新生兒17-OHP濃度的檢測(cè)能篩查出70%未出現(xiàn)臨床癥狀的21-羥化酶缺陷，使患兒及時(shí)得到診斷和治療。21-羥化酶缺陷癥根據(jù)臨床癥狀可分為單純男性化型、失鹽型和非經(jīng)典型[2]。我國(guó)CAH發(fā)病率約為1/14 000～1/16 000[3]，大連市2019年12月—2021年4月新生兒CAH發(fā)病率為1/15 168。

在新生兒疾病篩查實(shí)驗(yàn)中，建立合理的切值十分重要，所采用的切值是否合理將直接影響陽(yáng)性結(jié)果的判斷，若切值過高會(huì)增加漏診的風(fēng)險(xiǎn)；若切值過低則會(huì)增加假陽(yáng)性率，浪費(fèi)人力、物力，并且還會(huì)給新生兒家長(zhǎng)帶來不必要的心理負(fù)擔(dān)。因此，設(shè)立合適的陽(yáng)性切值是CAH篩查的關(guān)鍵點(diǎn)。由于各篩查實(shí)驗(yàn)室篩查條件、方法不完全相同，且不同地區(qū)人群分布亦不同，因此各地區(qū)應(yīng)建立適合本地區(qū)、本實(shí)驗(yàn)室的17-OHP合理切值。切值設(shè)置常用方法包括均值±標(biāo)準(zhǔn)差法、ROC曲線法及百分位數(shù)法。由于17-OHP濃度分布為偏態(tài)分布，因此適合使用百分位數(shù)法確定其切值。

國(guó)內(nèi)研究表明，新生兒17-OHP濃度水平與新生兒出生孕周及體重有關(guān)，早產(chǎn)和低體重新生兒17-OHP濃度可有不同程度的增高[4-5]。因此，要制定與新生兒出生孕周、體重相關(guān)的17-OHP切值。本研究顯示，兩組新生兒17-OHP濃度差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究顯示17-OHP濃度隨體重增加而降低；且早產(chǎn)兒17-OHP濃度水平高于足月兒，這與國(guó)內(nèi)其他學(xué)者研究報(bào)道[6-8]相一致。

胡定波等[9]研究表明，提前采血尤其是新生兒出生后24 h內(nèi)就采血，會(huì)使CAH篩查的假陽(yáng)性率明顯升高。因此篩查的血標(biāo)本采集時(shí)間不宜過早，各采血單位應(yīng)嚴(yán)格按照采血規(guī)范采血、保存以及運(yùn)輸血片，以免造成假陽(yáng)性或者假陰性。對(duì)于CAH篩查，國(guó)內(nèi)多數(shù)新生兒疾病篩查實(shí)驗(yàn)室都有各自的陽(yáng)性切值，目前全國(guó)并無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。為了防止CAH病例的漏診及盡可能減少初篩假陽(yáng)性率,結(jié)合以上統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)同時(shí)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況,建議目前大連地區(qū)的足月且正常體重兒的17-OHP陽(yáng)性切值不調(diào)整依然為11 nmol/L；而早產(chǎn)兒或低體重兒的17-OHP陽(yáng)性切值切值適當(dāng)調(diào)高暫定為30 nmol/L，待本實(shí)驗(yàn)室早產(chǎn)和低體重新生兒17-OHP數(shù)據(jù)積累到一定數(shù)量再重新計(jì)算并校正其切值。