免疫治療對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌患者循環(huán)腫瘤細(xì)胞水平與免疫功能的影響＊

吳寬 董小萍 俞華琴

作為臨床常見的一種惡性腫瘤，近年來，肺癌在我國的患病率持續(xù)上升，現(xiàn)已成為嚴(yán)重威脅居民生命安全的多發(fā)性疾病之一[1]。非小細(xì)胞肺癌屬原發(fā)性肺癌的主要類型之一，占全部肺癌的80%～85%，其預(yù)后水平多與腫瘤分期等因素具有密切聯(lián)系，有研究指出，Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌患者的5年生存率相對(duì)較低，甚至已不足5%，隨著病情的持續(xù)進(jìn)展和腫瘤細(xì)胞的不斷轉(zhuǎn)移，容易對(duì)患者的生命安全構(gòu)成極大的威脅[2]。為了提高晚期非小細(xì)胞肺癌患者的生活質(zhì)量，延長其生存周期，臨床應(yīng)及時(shí)對(duì)患者實(shí)施針對(duì)性治療。早期常規(guī)治療非小細(xì)胞肺癌的手段為手術(shù)切除，但大部分患者的機(jī)體耐受性相對(duì)不足，且術(shù)后容易產(chǎn)生相關(guān)并發(fā)癥，因此，尋求更多、更科學(xué)、更有效的肺癌治療方案一直是臨床研究的目的?？寡苌伤幬锱c免疫治療方案現(xiàn)已被批準(zhǔn)用于肺癌治療，研究顯示，上述治療方案的抗腫瘤效果不僅優(yōu)于標(biāo)準(zhǔn)化療，而且還具有良好的藥物安全性[3]?；诖?，本研究將2018年1月-2020年12月收治的40例晚期非小細(xì)胞肺癌患者納入臨床試驗(yàn)，經(jīng)分組治療和干預(yù)，旨在討論免疫治療在晚期非小細(xì)胞肺癌患者對(duì)循環(huán)腫瘤細(xì)胞水平、免疫功能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇杭州市富陽區(qū)第一人民醫(yī)院2018年1月-2020年12月收治的40例晚期非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行臨床試驗(yàn)。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理組織學(xué)檢查明確晚期非小細(xì)胞肺癌的診斷；②預(yù)計(jì)生存期≥3個(gè)月；③TNM分期為ⅢB～Ⅳ的肺癌患者[4]；④年齡≥18歲；⑤肝腎功能良好。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①自身免疫性疾病；②合并其他原發(fā)性腫瘤；③肺間質(zhì)疾??；④肝腎功能嚴(yán)重異常；⑤臨床資料不全；⑥具有全身免疫抑制反應(yīng)。隨機(jī)將患者分為A組和B組，每組20例。A組中，男12例，女8例；年齡22～83歲，平均（58.43±1.26）歲。B組中，男13例，女7例；年齡21～84歲，平均（58.37±1.33）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及其家屬知情同意，并簽署相關(guān)協(xié)議書。

1.2 方法

兩組入院后，醫(yī)護(hù)人員需嚴(yán)格遵照醫(yī)囑對(duì)其開展常規(guī)化療，為減少胃腸道不良反應(yīng)的發(fā)生，化療前還應(yīng)對(duì)患者實(shí)施苯海拉明、昂丹司瓊等治療[5-6]。

予以A組紫杉醇聯(lián)合順鉑治療。為預(yù)防過敏反應(yīng)的發(fā)生，要求患者在紫杉醇治療前12 h口服0.75～3.00 mg地塞米松片（廣東華南藥業(yè)集團(tuán)有限公司，國藥準(zhǔn)字H44024469，規(guī)格：0.75 mg×100片）。將135～175 mg/m2紫杉醇注射液（上海新亞藥業(yè)閔行有限公司，國藥準(zhǔn)字 H20113538，規(guī)格：5 ml∶30 mg）與500 ml生理鹽水或5%葡萄糖水均勻混合，給予患者為期3 h的靜脈滴注治療，每3天1次，連續(xù)治療 3 次；60 min 后，取 45 mg/m2順鉑注射液（云南植物藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H53021740，規(guī)格：2 ml∶10 mg）與 500 ml生理鹽水混合，給予患者靜脈滴注治療，每3天1次，連續(xù)治療3 次。

在A組基礎(chǔ)上，予以B組程序性死亡受體-1（PD-1）抑制劑治療。取100 mg帕博利珠單抗注射液[MSD Ireland （Carlow），注冊(cè)證號(hào)S20180019，規(guī)格：100 mg∶4 ml]，給予患者靜脈注射治療，固定用藥劑量，每3周注射1次，連續(xù)治療3次。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

（1）循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）水平測定：連續(xù)治療3個(gè)療程后，采集兩組的外周血10 ml，將其置于Cell Save專用收集管中，并進(jìn)行標(biāo)記。將7.5 ml血樣加入 Cell Tracks Auto Prep 錐形管當(dāng)中，繼續(xù)加入6.5 ml稀釋的緩沖液，均勻搖晃后進(jìn)行離心操作[7]。待系統(tǒng)驗(yàn)證通過后，先后加入暗室中保存20 min以上的質(zhì)控和樣本Mangest，最后按照CTCs熒光染色特性對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定。判定標(biāo)準(zhǔn)：患者外周血中的CTCs數(shù)量≥2個(gè)/5 ml，表示CTCs陽性；反之，外周血中的CTCs數(shù)量＜2個(gè)/5 ml，表示CTCs陰性。（2）免疫細(xì)胞功能測定：治療前后，使用流式細(xì)胞儀分別測定外周血中的免疫細(xì)胞水平，包括CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及自然殺傷（NK）細(xì)胞活性等[8]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較通過t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，組間比較通過χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療后循環(huán)腫瘤細(xì)胞陽性率比較

與A組相比，B組治療后循環(huán)腫瘤細(xì)胞陽性率明顯較低（P＜0.05），見表1。

表1 兩組治療后循環(huán)腫瘤細(xì)胞陽性率比較[例（%）]

2.2 兩組治療前后細(xì)胞免疫指標(biāo)水平比較

兩組治療后免疫細(xì)胞（CD3+、CD4+、CD4+/CD8+）水平與NK細(xì)胞活性均升高，B組各項(xiàng)指標(biāo)水平明顯高于A組（P＜0.05），見表2。

表2 兩組治療前后細(xì)胞免疫指標(biāo)水平比較（±s）

表2 兩組治療前后細(xì)胞免疫指標(biāo)水平比較（±s）

*與本組治療前比較，P＜0.05。

組別 CD3+（%）CD4+（%）CD4+/CD8+NK細(xì)胞活性（%）治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后A 組（n=20） 43.28±4.17 48.19±7.32* 22.29±4.21 27.38±4.41* 1.12±0.23 1.41±0.25* 10.02±2.71 12.33±2.84*B 組（n=20） 42.92±4.31 66.69±9.42* 22.35±4.11 36.18±5.69* 1.07±0.18 1.84±0.32* 10.05±2.57 15.72±4.28*t值 0.268 6.935 0.045 5.466 0.765 4.735 0.035 2.951 P值 0.789 0.000 0.963 0.000 0.449 0.000 0.971 0.005

3 討論

由環(huán)境接觸、電離輻射、職業(yè)、吸煙及遺傳等因素誘發(fā)的非小細(xì)胞肺癌是臨床較為常見的一種腫瘤科疾病。據(jù)相關(guān)研究資料指出，非小細(xì)胞肺癌患者數(shù)量約占全部肺癌的80%，75%的非小細(xì)胞肺癌患者在確診時(shí)已步入中晚期，錯(cuò)過最佳治療時(shí)機(jī)的同時(shí)，還會(huì)嚴(yán)重降低5年生存率[9]。非小細(xì)胞肺癌發(fā)生早期，患者的臨床表現(xiàn)相對(duì)較輕，主要以胸部疼痛、痰血、低熱、咳嗽等癥狀為主，隨著病情的持續(xù)惡化，晚期患者會(huì)出現(xiàn)體重減輕、四肢乏力、食欲下降等表現(xiàn)，且伴有咳嗽、咯血、呼吸困難等局部癥狀。如不能對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者實(shí)施針對(duì)性治療，腫瘤細(xì)胞會(huì)在血液循環(huán)的作用下逐漸轉(zhuǎn)移至其他組織與器官，形成轉(zhuǎn)移灶的同時(shí)，還會(huì)嚴(yán)重威脅患者的生命安全[10]。以往，臨床在非小細(xì)胞肺癌治療時(shí)多采用鉑類藥物聯(lián)合化療，雖然能在一定程度上抑制疾病的持續(xù)進(jìn)展與惡化，但始終難以取得較為理想的整體療效。

根治性手術(shù)仍然是當(dāng)前治療肺癌的主要方式之一，但絕大部分患者的術(shù)后5年內(nèi)生存率相對(duì)較低，且在術(shù)后容易出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞微轉(zhuǎn)移等現(xiàn)象，增加疾病術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的同時(shí)，還會(huì)進(jìn)一步威脅患者的生存安全。經(jīng)李邦凱等[11]研究發(fā)現(xiàn)，給予已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移的非小細(xì)胞肺癌患者藥物為主的化學(xué)療法難以取得理想療效，不僅會(huì)增加不良反應(yīng)的發(fā)生率，甚至還會(huì)對(duì)患者的生存質(zhì)量造成嚴(yán)重影響。因此，積極探尋治療晚期非小細(xì)胞肺癌的新方法能夠?qū)μ岣呋颊呱尜|(zhì)量、改善預(yù)后產(chǎn)生十分重要的臨床意義[12]。

隨著新的免疫治療靶點(diǎn)被發(fā)現(xiàn)，免疫手段在臨床治療中的應(yīng)用范圍越發(fā)廣泛，據(jù)相關(guān)資料指出，該治療手段的實(shí)施既有助于推動(dòng)癌癥免疫治療的發(fā)展，又能進(jìn)一步提高晚期非小細(xì)胞肺癌治療的臨床效果及安全性[13]。作為臨床治療惡性腫瘤的一種新型藥物，PD-1抑制劑的應(yīng)用能夠上調(diào)腫瘤細(xì)胞PD-1配體，對(duì)激活的T細(xì)胞進(jìn)行有效抑制，同時(shí)還能免疫監(jiān)視患者的腫瘤病灶，阻斷PD-1活性，進(jìn)而破壞或殺死腫瘤細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)，將PD-1抑制劑廣泛應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌患者的臨床治療中，可顯著加劇機(jī)體細(xì)胞程序性死亡，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，積極降低腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥性[14-15]。此外，上述治療方案的應(yīng)用還能防止晚期非小細(xì)胞肺癌患者化療后白細(xì)胞水平降低、免疫功能抑制等不良反應(yīng)的發(fā)生，進(jìn)而取得較好的治療效果。本組臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示：與A組相比，B組的循環(huán)腫瘤細(xì)胞陽性率明顯較低（P＜0.05）；兩組治療后的免疫細(xì)胞功能水平均升高，B組的各項(xiàng)指標(biāo)水平明顯高于A組（P＜0.05）。經(jīng)過本次的研究結(jié)果表明，及早發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移并對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者實(shí)施相應(yīng)的免疫治療及干預(yù)手段，有助于發(fā)揮良好的抗腫瘤作用，在抑制腫瘤細(xì)胞增殖的同時(shí)，還能加速腫瘤細(xì)胞的凋亡，抑制腫瘤病灶的生長，從而取得理想的臨床治療效果。

綜上所述，在化療的基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用PD-1抑制劑，在抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的同時(shí)，能增強(qiáng)患者的機(jī)體免疫功能，值得持續(xù)推廣及應(yīng)用。