免疫學(xué)檢驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)在診斷類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷中的效果及檢出率分析

張慶榮

(華北石油廊坊礦區(qū)第一醫(yī)院 河北 廊坊 065007)

風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種以關(guān)節(jié)病變，骨骼，肌肉，血管及軟組織或是結(jié)締組織侵犯為主的疾病，大部分風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎均為自身免疫性關(guān)節(jié)炎疾病，其主要臨床癥狀表現(xiàn)為腫脹、疼痛、僵硬以及功能障礙[1-2]。以往，臨床主要以實(shí)驗(yàn)室診斷作為類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的主要診斷方案[3]，但隨著臨床免疫學(xué)研究的不斷深入，將免疫學(xué)指標(biāo)納入類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷中，為疾病的診斷提供了新的方向[4]。本次研究就此展開(kāi)探討，以免疫學(xué)檢驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)的臨床診斷價(jià)值為重點(diǎn)，納入類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者、健康體檢者各40例，進(jìn)行分組對(duì)照分析，研究過(guò)程如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

研究期：2019年6月-2021年6月，納入80名觀(guān)察對(duì)象展開(kāi)研究，觀(guān)察對(duì)象為40例類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者與40例健康體檢者，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，觀(guān)察對(duì)象組間無(wú)基礎(chǔ)資料差異，組間能夠比較(p>0.05)，且研究經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)：

觀(guān)察組中，男性患者14例，女性患者26例，年齡范圍18-75歲，平均年齡(48.42±12.36)歲，病程區(qū)間6個(gè)月-15年，平均病程(5.45±2.36)年。

觀(guān)察組患者納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者在入院時(shí)臨床癥狀主要表現(xiàn)為晨僵、手足腕踝顳頜關(guān)節(jié)等關(guān)節(jié)炎及關(guān)節(jié)畸形；②患者符合類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷標(biāo)準(zhǔn)(美國(guó)風(fēng)濕協(xié)會(huì)(ARA))[5]；③患者無(wú)其他心臟、腎臟、肝臟等器質(zhì)性病變；④患者對(duì)本次研究?jī)?nèi)容知情，自愿參與本次研究。

觀(guān)察組患者排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)排除非類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者；(2)哺乳期、妊娠期女性；(3)存在影響免疫學(xué)檢驗(yàn)指標(biāo)藥物短期用藥史患者[6]；(4)存在心臟等重要臟器的功能性障礙；(5)不認(rèn)同本次實(shí)驗(yàn)，不愿意簽訂知情同意書(shū)及不愿配合醫(yī)護(hù)人員的工作。

對(duì)照組中，觀(guān)察對(duì)象年齡最大者為67歲，年齡最小者為32歲，平均年齡(48.72±3.21)歲。

1.2方法

依次對(duì)其進(jìn)行類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)、抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體、免疫球蛋白G(IgG)、補(bǔ)體C3/補(bǔ)體C5等免疫學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢驗(yàn)。

標(biāo)本采集：在待測(cè)者空腹?fàn)顟B(tài)下對(duì)其進(jìn)行2-3ml血液標(biāo)本采集，采集結(jié)束后待其血液凝集后，利用3000r/min頻率離心機(jī)進(jìn)行10min充分離心，將血清分離后，置于-30℃環(huán)境下保存?zhèn)溆谩?/p>

標(biāo)本檢測(cè)：(1)類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)檢測(cè)。檢測(cè)方法為酶聯(lián)免疫吸附法，首先取患者血清置入微孔板中，微孔板已被抗體包被，再以標(biāo)準(zhǔn)品+陰性+陽(yáng)性對(duì)照加入，設(shè)置空白組。將準(zhǔn)備好的微孔板放入水浴箱中，環(huán)境溫度設(shè)定為37℃，保存60min，結(jié)束后將微孔板去除，以洗板機(jī)清洗5遍，待其干燥后向微孔板中各孔各加入GPI抗體，以同樣條件進(jìn)行溫育、清洗后，取底物顯色劑將入孔中，接著進(jìn)行避光顯色，持續(xù)15min，取終止液加入孔中，測(cè)定光密度，繪制標(biāo)準(zhǔn)品曲線(xiàn)，計(jì)算測(cè)定值。陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：RF檢測(cè)濃度>20IU/ml[7]。(2)抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體測(cè)定。測(cè)定方法為酶聯(lián)免疫吸附法，首先將采集患者的血清以比例1：:5進(jìn)行稀釋?zhuān)瑢⑾♂尯笱鍢颖炯尤胛⒖装逯?，微孔板被抗環(huán)瓜氨酸肽抗體包被，取標(biāo)準(zhǔn)、陰性、陽(yáng)性對(duì)照樣本加入，同時(shí)設(shè)置空白孔，封好板條口后，將微孔板放置于室溫(20-25℃)環(huán)境下，培育60min，然后洗板，取酶標(biāo)抗體放入除空白孔外其他孔中，持續(xù)30min，洗板+底物顯色后，加入終止液，以450mm波長(zhǎng)比色對(duì)光密度進(jìn)行測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，對(duì)標(biāo)本測(cè)定值進(jìn)行計(jì)算。陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：CCP檢測(cè)濃度>17U/ml[8]。(3)免疫球蛋白G(IgG)、補(bǔ)體C3/補(bǔ)體C5檢測(cè)：采用全自動(dòng)特定蛋白分析儀(西門(mén)子)進(jìn)行測(cè)定，試劑為配套試劑，方法為免疫比濁法，按照操作說(shuō)明書(shū)要求，完成測(cè)定操作。IgG正常值范圍：7-16g/L，補(bǔ)體C3正常值范圍：0.9-1.8g/L，補(bǔ)體C4正常值范圍：0.1-0.4g/L[9]。

1.3觀(guān)察指標(biāo)

針對(duì)不同組觀(guān)察對(duì)象RF與抗CCP指標(biāo)檢測(cè)值進(jìn)行對(duì)比，結(jié)合陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)，針對(duì)不同組觀(guān)察對(duì)象中RF與抗CCP指標(biāo)檢測(cè)陽(yáng)性率進(jìn)行計(jì)算；針對(duì)不同組觀(guān)察對(duì)象IgG、補(bǔ)體C3/補(bǔ)體C5檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1RF與抗CCP指標(biāo)對(duì)比

觀(guān)察組類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者RF平均值、抗CCP平均值指標(biāo)均高于對(duì)照組健康體檢者，(p<0.05)。見(jiàn)下表1：

表1 RF與抗CCP指標(biāo)對(duì)比

2.2RF與抗CCP檢測(cè)陽(yáng)性率指標(biāo)對(duì)比

觀(guān)察組類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者RF檢測(cè)陽(yáng)性率、抗CCP檢測(cè)陽(yáng)性率指標(biāo)高于對(duì)照組健康體檢者，(p<0.05)。見(jiàn)下表2：

表2 RF與抗CCP檢測(cè)陽(yáng)性率指標(biāo)對(duì)比

2.3IgG、補(bǔ)體C3/補(bǔ)體C5檢測(cè)指標(biāo)對(duì)比

觀(guān)察組類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者IgG指標(biāo)檢測(cè)值高于對(duì)照組健康體檢者，補(bǔ)體C3/補(bǔ)體C5檢測(cè)指標(biāo)值低于對(duì)照組健康體檢者，(p<0.05)。見(jiàn)下表3：

表3 IgG、補(bǔ)體C3/補(bǔ)體C5檢測(cè)指標(biāo)對(duì)比

3 討論

一直以來(lái)，針對(duì)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療，是臨床領(lǐng)域的焦點(diǎn)問(wèn)題。由于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎無(wú)特效治療藥物，為延緩病情發(fā)展，及時(shí)改善患者預(yù)后，及時(shí)、有效、正確的診斷，是患者早期接受治療的關(guān)鍵[10]。在臨床醫(yī)學(xué)中，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎被納入自身免疫性疾病范疇中，因此，諸多研究提出將免疫學(xué)指標(biāo)，融入患者的臨床診斷中[11]。

類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)是最早應(yīng)用于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)室診斷的自身抗體指標(biāo)，但是在長(zhǎng)期的臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，RF指標(biāo)檢測(cè)特異性較差，且易混淆于其他自身免疫性疾病，并且RF指標(biāo)值會(huì)隨著患者的年齡增長(zhǎng)，而逐漸增加，因此其診斷準(zhǔn)確性難以達(dá)到預(yù)期，在臨床實(shí)踐應(yīng)用中，往往需要聯(lián)合其他診斷指標(biāo)確診[12]。

抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體在機(jī)體內(nèi)是一種環(huán)狀聚絲蛋白的多肽片段，經(jīng)二十個(gè)氨基酸肽鏈組成，主要以IgG為主，對(duì)于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者而言，其在早期可表現(xiàn)出陽(yáng)性癥狀，因此對(duì)于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有較好的敏感度與特異度，陽(yáng)性預(yù)測(cè)價(jià)值高。但是對(duì)于抗環(huán)瓜氨酸肽抗體陽(yáng)性類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者而言，其受到的骨破壞嚴(yán)重程度，明顯高于抗環(huán)瓜氨酸肽抗體陰性人群，因此對(duì)于抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的檢測(cè)有助于臨床對(duì)于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)現(xiàn)與治療[13]。由于抗環(huán)瓜氨酸肽抗體是人體的血清標(biāo)志物，當(dāng)其指標(biāo)值低于25RU/ml時(shí)，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者機(jī)體內(nèi)的血清抗環(huán)瓜氨酸肽抗體含量將出現(xiàn)明顯的下降情況[14]。補(bǔ)體C3/C4使用機(jī)體非特異性免疫的組成成分，其能夠作為評(píng)估機(jī)體特異性免疫水平的參考標(biāo)準(zhǔn)，體液免疫其與類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生、發(fā)展存在著關(guān)聯(lián)性，而補(bǔ)體缺陷與自身免疫性疾病的發(fā)生具有密切聯(lián)系。因此，聯(lián)合補(bǔ)體C3/C4診斷，可提高類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷準(zhǔn)確性[15]。

綜上，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者，其存在免疫學(xué)檢驗(yàn)異常性變化，通過(guò)聯(lián)合免疫學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，能夠有效提升診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，為患者的治療、預(yù)后評(píng)估提供參考。