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    免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者血清B族維生素水平的研究

    2022-06-12 21:52:44盧陽陳萍林素仙王勝男姜建昌張智勇楊美綠
    中國現(xiàn)代醫(yī)生 2022年13期
    關(guān)鍵詞:復(fù)發(fā)性流產(chǎn)

    盧陽 陳萍 林素仙 王勝男 姜建昌 張智勇 楊美綠

    [摘要] 目的 回顧性分析免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者水溶性B族維生素水平的數(shù)據(jù),為臨床干預(yù)提供參考依據(jù)。方法? 選取2020年7月至2021年5月在浙江省溫州市人民醫(yī)院就診的免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者為流產(chǎn)組(n=40),同期未孕婦女為對(duì)照組(n=31),采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析測定流產(chǎn)組與對(duì)照組的外周血中維生素B1、B2、B3、B5、B6、B9水平。結(jié)果? 流產(chǎn)組與對(duì)照組比較,兩組的維生素B2、B3、B5、B6水平相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。流產(chǎn)組的維生素B1水平為2.160(1.518,2.505)ng/ml,對(duì)照組維生素B1水平為2.710(2.050,3.390)ng/ml;兩組的維生素B1水平對(duì)比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。流產(chǎn)組的維生素B9水平為8.535(6.473,10.850)ng/ml,對(duì)照組的維生素B9水平為9.850(8.230,12.650)ng/ml;兩組的維生素B9水平對(duì)比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論? 維生素B1、B9可能是免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)發(fā)生、發(fā)展的一個(gè)重要因素,維生素B1、B9的檢測對(duì)免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的預(yù)防及治療具有一定的臨床意義,補(bǔ)充維生素B1、B9是可能的治療靶點(diǎn)之一。

    [關(guān)鍵詞] 復(fù)發(fā)性流產(chǎn);水溶性B族維生素;維生素B1;維生素B9

    [中圖分類號(hào)] R714.21? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-9701(2022)13-0082-04

    [Abstract] Objective To retrospectively analyze the data of water-soluble B group vitamins in patients with immune-related recurrent spontaneous abortion, so as to provide a reference for clinical interventions. Methods A total of 40 patients with immune-related recurrent spontaneous abortion of Wenzhou People′s Hospital in Zhejiang Province from July 2020 to May 2021 were selected as the abortion group and 31 contemporaneous non-pregnant women as the control group. The levels of vitamins B1, B2, B3, B5, B6 and B9 in peripheral blood of the abortion group and the control group were determined by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry. Results To compare the abortion group with the control group, there were no statistically significant differences in the levels of vitamins B2, B3, B5 and B6 between the two groups (P>0.05). The level of vitamin B1 in the abortion group was 2.160 (1.518, 2.505) ng/ml, and that in the control group was 2.710 (2.050, 3.390) ng/ml. There was a significant difference in the vitamin B1 level between the two groups. The level of vitamin B9 in the abortion group was 8.535 (6.473, 10.850) ng/ml, and that in the control group was 9.850 (8.230, 12.650) ng/ml. There was a significant difference in the vitamin B9 level between the two groups. Conclusion Vitamins B1 and B9 may be important factors in the occurrence and development of immune-related recurrent spontaneous abortion. Its detection is of certain clinical significance for the prevention and treatment of immune-related recurrent spontaneous abortion. Vitamins B1 and B9 supplementation is one of the potential therapeutic targets.

    [Key words] Recurrent spontaneous abortion; Water-soluble B group vitamins; Vitamin B1; Vitamin B9

    復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(recurrent spontaneous abortion,RSA)指同一女性與同一伴侶持續(xù)發(fā)生2次及其以上流產(chǎn)[1],發(fā)生率約為1%,是育齡婦女的常見病。該病再次妊娠可能發(fā)生自然流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)高,對(duì)患者家庭幸福與身心健康影響極大。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)原因復(fù)雜,包括染色體、解剖、內(nèi)分泌、自身免疫異常和生殖道感染等常見病因[2],其中免疫因素在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)中起著重要作用,根據(jù)免疫性流產(chǎn)的發(fā)病機(jī)制不同,可分為自身免疫型和同種免疫型,自身免疫型主要包括自身免疫性疾病和自身免疫性抗體異常[3]。對(duì)免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者進(jìn)行針對(duì)性與規(guī)范性的臨床治療,對(duì)患者預(yù)后有極大的重要意義。因此,本研究觀察免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者與正常人群B族維生素水平的差異,旨在為下一步B族維生素對(duì)免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的干預(yù)進(jìn)行初探,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    流產(chǎn)組(n=40)選取自2020年7月至2021年5月在浙江省溫州市人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科就診的免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者。對(duì)照組(n=31)選取自同期浙江省溫州市人民醫(yī)院就診的未孕婦女。流產(chǎn)組納入標(biāo)準(zhǔn):①就診時(shí)為非妊娠狀態(tài),自然流產(chǎn)≥2次;②夫婦雙方外周血染色體核型正常;③盆腔彩超除外生殖道器質(zhì)性病變;④宮頸分泌物檢查除外生殖道感染;⑤生殖內(nèi)分泌激素檢查無異常,包括月經(jīng)周期正常、有排卵、甲狀腺功能正常、無糖尿病史、無肝臟、腎臟急慢性疾病;⑥存在免疫異常,包括存在自身免疫性疾病、抗核抗體陽性、抗磷脂抗體間斷陽性、甲狀腺抗體陽性等,無明顯血栓指標(biāo)異常;⑦近半年內(nèi)未進(jìn)行維生素補(bǔ)充治療。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn):①至少有1次正常生育史,無不良孕產(chǎn)史;②近半年內(nèi)未進(jìn)行維生素補(bǔ)充治療;③無明確慢性病、自身免疫性疾病史。

    1.2 方法

    留取外周靜脈血2 ml,于4℃冰箱避光靜置30 min,4℃離心機(jī)4000 rpm離心5 min,吸取上清液轉(zhuǎn)移至干凈的EP管中立即凍存于-20℃冰箱中待處理。檢測時(shí)使用多種水溶性維生素樣本釋放劑試劑盒(杭州佰勤醫(yī)療器械有限公司),試劑盒包括A樣本釋放劑及B樣本釋放劑。將10 ml A液和水溶性維生素內(nèi)標(biāo)液(德國默克公司)按1∶2比例混合,渦旋混勻3 min,放-80℃?zhèn)溆?,?biāo)記為水溶性維生素內(nèi)標(biāo)工作液。用樣本釋放劑B液作為稀釋劑,取各水溶性維生素標(biāo)準(zhǔn)品(德國默克公司)各10 μl,加入稀釋液970 μl,制備成最高點(diǎn)濃度的標(biāo)線,濃度為100 ng/ml,制備水溶性維生素標(biāo)線,用樣本釋放劑B液和最高濃度點(diǎn)的標(biāo)線,依次制備標(biāo)線的其它濃度點(diǎn)。精密吸取血清樣本100 μl置于潔凈的離心管中,加入300 μl水溶性維生素內(nèi)標(biāo)工作液,渦旋震蕩5 min,離心管于4℃,15 000 rpm離心10 min。取上清液200 μl放入1.5 ml的離心管中,于真空濃縮儀中干燥1.5 h,取出加150 μl樣本釋放劑B液復(fù)溶,渦旋3 min,4℃ 15 000 rpm離心5 min,取上清液100 μl進(jìn)行分析。采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS)進(jìn)行分析。檢測單位為杭州佰辰醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司。

    1.3 觀察指標(biāo)

    研究組及對(duì)照組的外周血中維生素B1、B2、B3、B5、B6、B9水平。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    數(shù)據(jù)用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料以中位數(shù)四分位間距[M(P25,P75)]表示,采用秩和檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 一般資料比較

    流產(chǎn)組40例,對(duì)照組31例。流產(chǎn)組患者的平均年齡30.00(27.25,32.00)歲,對(duì)照組的平均年齡31.00(27.00,38.00)歲,兩組的一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-0.767,P=0.443),具有可比性。

    2.2 兩組的B族維生素水平比較

    流產(chǎn)組與對(duì)照組比較,兩組的維生素B2、B3、B5、B6水平相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。流產(chǎn)組的維生素B1水平為2.160(1.518,2.505)ng/ml,對(duì)照組的維生素B1水平為2.710(2.050,3.390)ng/ml;流產(chǎn)組的維生素B9水平為8.535(6.473,10.850)ng/ml,對(duì)照組的維生素B9水平為9.850(8.230,12.650)ng/ml;兩組的維生素B1、B9水平對(duì)比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

    3 討論

    復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病因復(fù)雜而多樣,治療難度大,給孕婦及家庭造成嚴(yán)重傷害。研究表明,免疫因素是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)極為重要的因素之一[4]。深入研究免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的致病因素及治療方案,可提高免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的妊娠成功率。

    維生素是維持人體生命活動(dòng)必需的一類物質(zhì),也是人體所需的七大營養(yǎng)素之一,主要參與機(jī)體代謝的調(diào)節(jié)[5]。維生素分為脂溶性維生素和水溶性維生素。B族維生素都是水溶性維生素,可促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂,參與能量代謝[6]。潛在性維生素缺乏病是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的盲點(diǎn),有專家推測,大約3個(gè)人中就有1個(gè)可能處于潛在性維生素缺乏癥,尤其中老年人、孕婦和兒童,其潛在性缺乏率很高[7]。孕婦和哺乳期婦女對(duì)所有維生素、礦物質(zhì)和微量元素的需要量是平時(shí)的1.3~1.8倍[8]。維生素B1也稱硫胺素,是最早發(fā)現(xiàn)的水溶性B族維生素,在細(xì)胞內(nèi)硫胺素可轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾N磷酸化衍生物,如焦磷酸硫胺素(thiamine pyrophosphate,TPP)[9]。TPP是維生素B1在細(xì)胞內(nèi)的主要活性形式,也是糖、脂肪酸和氨基酸氧化代謝中重要的輔助因子,對(duì)于維持細(xì)胞正常代謝、細(xì)胞生長和增殖等非常重要[10]。另外研究發(fā)現(xiàn),腸道中B細(xì)胞在向漿細(xì)胞分化的過程中會(huì)發(fā)生代謝性改變,Peyer氏斑中的天然B細(xì)胞和腸道固有層中的IgA+漿細(xì)胞都會(huì)利用三羧酸循環(huán)來維持細(xì)胞代謝[11],而維生素B1是三羧酸循環(huán)中一個(gè)必要的輔助因子[12],且IgA+漿細(xì)胞會(huì)利用糖酵解代謝,而維生素B1對(duì)糖酵解代謝起著重要作用[13],從而得出維生素B1在免疫中起著一定的作用。維生素B9(葉酸)不足會(huì)造成獲得性同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)代謝障礙,維生素B9缺乏可導(dǎo)致脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)甲基化異常和DNA合成修復(fù)的中斷,引起甲硫氨酸合成減少,從而造成Hcy在體內(nèi)蓄積[14]。在早孕期時(shí),過高水平的Hcy對(duì)絨毛血管的形成有明顯的抑制作用,絨毛血管數(shù)目明顯減少,從而減少胚胎供血量,導(dǎo)致胚胎著床不良及胚胎死亡[15]。越來越多的臨床和流行病學(xué)資料顯示,高同型半胱氨酸可增加慢性炎癥性疾病的風(fēng)險(xiǎn),高同型半胱氨酸與炎癥免疫相關(guān)妊娠不良結(jié)局相關(guān)[16]。體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),高Hcy可使孕期子宮平滑肌收縮幅度輕度升高,收縮頻率顯著增加,增加妊娠丟失的發(fā)生[17]。

    炎癥和免疫是免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病理基礎(chǔ)[18],正常的炎癥是機(jī)體防御功能,實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明,炎癥對(duì)疾病的發(fā)生發(fā)展起著重要作用,在代謝綜合征、2型糖尿病和自身免疫性疾病中最強(qiáng)[19-20]。另有研究表明,營養(yǎng)不良也可促進(jìn)炎癥的發(fā)生,并可能促進(jìn)系統(tǒng)性慢性炎癥的發(fā)展。這些因素包括加工或精制食品中維生素、礦物質(zhì)、omega-3脂肪酸等含量偏低[21]。而本研究也證實(shí)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的維生素B1、維生素B9較正常人群降低。因此推測維生素B1、B9在免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)中可能起著重要作用。

    綜上所述,免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者可見血中維生素B1、B9水平下降,維生素B1、B9水平的降低與免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有關(guān)。由此提示,對(duì)免疫相關(guān)性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者,補(bǔ)充維生素B1、B9可能對(duì)提高妊娠成功率有一定的幫助。

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    (收稿日期:2021-07-29)

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