貴州菜區(qū)南美斑潛蠅對(duì)殺蟲(chóng)劑的敏感性監(jiān)測(cè)

周宇航，李鳳良，金劍雪，李文紅，程 英

（貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所 貴陽(yáng) 550006）

南美斑潛蠅（）是一類主要危害瓜類、蔬菜、花卉的世界性檢疫害蟲(chóng)，其幼蟲(chóng)潛食寄主葉片形成潛道，破壞葉綠素和葉肉細(xì)胞，導(dǎo)致植株葉片枯萎脫落、幼苗枯死，嚴(yán)重影響作物產(chǎn)量和質(zhì)量，甚至造成絕收，易爆發(fā)且防治困難。1996—1998 年間，云南省因該蟲(chóng)導(dǎo)致的經(jīng)濟(jì)損失就達(dá)2.57 億元?；瘜W(xué)防治仍是控制斑潛蠅最主要的方法，但長(zhǎng)期、單一地使用化學(xué)藥劑，斑潛蠅已產(chǎn)生嚴(yán)重的抗藥性。

在我國(guó)危害最重的3 種斑潛蠅中，南美斑潛蠅比美洲斑潛蠅更具耐藥性。吳文偉等用藥膜法和浸葉法測(cè)定了南美斑潛蠅對(duì)阿維菌素類農(nóng)藥的敏感性，表明北郊種群最具抗藥性。在印度尼西亞，南美斑潛蠅對(duì)殺蟲(chóng)雙、阿維菌素和滅蠅胺已表現(xiàn)出高水平抗性，防治難度不斷加大。斑潛蠅屬于r-對(duì)策型害蟲(chóng)，蟲(chóng)體小、繁殖力強(qiáng)、寄主范圍廣且易產(chǎn)生抗藥性。對(duì)常用防治藥劑已表現(xiàn)出不同程度的抗性，加上世代重疊的特性，抗藥性不斷上升，導(dǎo)致化學(xué)農(nóng)藥的大量投入，造成環(huán)境污染，影響農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全，嚴(yán)重威脅蔬菜的安全生產(chǎn)。

抗藥性監(jiān)測(cè)是害蟲(chóng)綜合治理中重要的組成部分，根據(jù)抗藥性監(jiān)測(cè)的結(jié)果能及時(shí)掌握抗藥性水平及其分布，對(duì)新型殺蟲(chóng)劑的保護(hù)有重要的意義，減少農(nóng)藥的投入量，保證農(nóng)產(chǎn)品安全。南美斑潛蠅自1994 年入侵貴州省以來(lái)，在貴州省普遍發(fā)生且主要危害豆科、茄科、葫蘆科蔬菜，已成為貴州蔬菜生產(chǎn)上的重要害蟲(chóng)。關(guān)于貴州南美斑潛蠅敏感性的監(jiān)測(cè)尚未見(jiàn)研究報(bào)道，為明確貴州各地區(qū)南美斑潛蠅的敏感性現(xiàn)狀，本試驗(yàn)選擇在貴州5 個(gè)菜區(qū)測(cè)定南美斑潛蠅對(duì)7 種常用藥劑的敏感性，并連續(xù)3 年監(jiān)測(cè)發(fā)展動(dòng)態(tài)，以期準(zhǔn)確掌握南美斑潛蠅在貴州的抗性現(xiàn)狀，為有效防治南美斑潛蠅提供科學(xué)參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試蟲(chóng)源 2018—2020 年選擇在貴州5 個(gè)菜區(qū)的黃瓜和菜豆寄主上采集田間種群，采集地理信息為：貴陽(yáng)烏當(dāng)（N26.63°、E106.75°）、遵義播州（N27.53° 、E106.83° ）、安 順 平 壩（N26.36° 、E106.09°）、畢節(jié)大方（N27.11°、E105.58°）、黔南都勻（N26.08°、E107.43°）。田間采集幼蟲(chóng)后飼養(yǎng)在貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所昆蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，飼養(yǎng)1～2 代后進(jìn)行毒力測(cè)定。

1.1.2 供試藥劑 97.2%阿維菌素原藥（河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司）；95%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽原藥（河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司），文中簡(jiǎn)稱為甲維鹽；95%溴氰蟲(chóng)酰胺原藥（湖北康寶泰精細(xì)化工有限公司）；95%高效氯氟氰菊酯原藥（南京紅太陽(yáng)集團(tuán)有限公司）；85.8%乙基多殺菌素原藥（美國(guó)陶氏益農(nóng)公司）；99%滅蠅胺原藥（湖北鑫紅利化工有限公司）；95.3%高效氯氰菊酯原藥（江蘇常隆化工有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 配制藥劑 將各供試原藥用少量丙酮溶解，并加入0.1%Tween-80 蒸餾水得到母液，低溫保存?zhèn)溆?。試?yàn)前先做預(yù)試驗(yàn)，確保致使幼蟲(chóng)20%～90%死亡率的藥劑濃度范圍在處理濃度范圍之內(nèi)，再將母液等比稀釋成5～8 個(gè)濃度梯度待用。

1.2.2 浸葉毒力測(cè)定法 參照衛(wèi)清波和Ferguson的方法，室內(nèi)種植未接觸任何藥劑、用蠶豆苗飼養(yǎng)南美斑潛蠅，將附有2～3 齡幼蟲(chóng)的葉片在各藥劑處理濃度下完全浸漬10 s，浸沒(méi)沾濕后取出，自然晾干。然后用扎孔的保鮮袋罩住各處理葉片，用夾子夾緊，以免幼蟲(chóng)逃脫影響試驗(yàn)結(jié)果。接著將植株置于溫度為（25±1）℃、光周期L/D=16 h/8 h、相對(duì)濕度70%～80%的恒溫培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)觀察。48 h后檢查幼蟲(chóng)死亡率，用毛筆輕觸蟲(chóng)體，以不能正常運(yùn)動(dòng)或完全不動(dòng)者視為死亡。以Tween-80 蒸餾水處理的葉片為對(duì)照，每種農(nóng)藥設(shè)6 個(gè)濃度，每濃度3次重復(fù)，每次重復(fù)30 頭南美斑潛蠅。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用DPS 18.05 版數(shù)據(jù)處理軟件計(jì)算藥劑的毒力回歸方程、LC值和95%置信限等。以LC的95%置信限不重疊為判斷不同藥劑間毒力差異顯著的標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)監(jiān)測(cè)的LC值分別以年份、地區(qū)和殺蟲(chóng)劑為變量進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 貴州不同地區(qū)南美斑潛蠅對(duì)7 種藥劑的敏感性監(jiān)測(cè)

2018-2020 年測(cè)定了貴州5 個(gè)地區(qū)南美斑潛蠅對(duì)7 種殺蟲(chóng)劑的敏感性（表1）。結(jié)果表明，溴氰蟲(chóng)酰胺、乙基多殺菌素和滅蠅胺對(duì)貴州菜區(qū)南美斑潛蠅的毒力相對(duì)較高（LC值0.465 6～2.973 7 mg·L）；阿維菌素、甲維鹽對(duì)貴州菜區(qū)南美斑潛蠅的毒力相對(duì)較低（LC值1.962 8～14.293 2 mg·L）；高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯對(duì)貴州菜區(qū)南美斑潛蠅的毒力相對(duì)最低（LC值12.775 6～189.637 7 mg·L）。

表1 2018—2020 年貴州不同地區(qū)南美斑潛蠅的敏感性

續(xù)表1

2.2 南美斑潛蠅抗藥性動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)

2.2.1 對(duì)滅蠅胺的抗性變化 貴州5 個(gè)地區(qū)2018—2020 年南美斑潛蠅田間種群對(duì)滅蠅胺的抗性監(jiān)測(cè)動(dòng)態(tài)顯示（圖1），2019 年貴陽(yáng)、遵義、黔南種群對(duì)滅蠅胺的LC值分別是2018 年的1.3 倍、1.1倍、1.3 倍，表明貴陽(yáng)、遵義、黔南種群對(duì)滅蠅胺的抗性上升。2020 年貴陽(yáng)和遵義種群對(duì)滅蠅胺的LC值分別是2019 年的1.3 倍和1.1 倍，表明貴陽(yáng)和遵義種群對(duì)滅蠅胺的抗性繼續(xù)上升。2018 年安順?lè)N群對(duì)滅蠅胺的LC值分別是2019 年、2020 年的1.9 倍、2.6 倍，表明安順?lè)N群對(duì)滅蠅胺的抗性持續(xù)下降。

2.2.2 對(duì)阿維菌素的抗性變化 由圖1 可知，2019年黔南、安順、遵義種群對(duì)阿維菌素的LC值分別是2018 年的1.9 倍、1.5 倍、1.4 倍，表明黔南、安順、遵義種群對(duì)阿維菌素的抗性上升。2020 年黔南、遵義種群的LC值分別是2019 年的1.8 倍、1.5 倍，表明黔南、遵義種群對(duì)阿維菌素的抗性繼續(xù)上升。貴陽(yáng)種群從2018—2020 年，抗性表現(xiàn)出先下降后上升的趨勢(shì)。

2.2.3 對(duì)乙基多殺菌素的抗性變化 如圖1 所示，2019 年貴陽(yáng)、安順、畢節(jié)種群對(duì)乙基多殺菌素的LC值分別是2018 年的1.5 倍、1.2 倍、1.1 倍，表明貴陽(yáng)、安順、畢節(jié)種群對(duì)乙基多殺菌素的抗性上升。2020 年貴陽(yáng)、安順、畢節(jié)種群對(duì)乙基多殺菌素的LC值分別是2019 年的1.3 倍、1.3 倍、1.2 倍，抗性繼續(xù)上升。2018 年遵義種群對(duì)乙基多殺菌素的LC值分別是2019 年和2020 年的1.1 倍和3.0 倍，則表現(xiàn)出抗性急劇下降的趨勢(shì)。

2.2.4 對(duì)高效氯氰菊酯的抗性變化 如圖1 所示，2019 年黔南、畢節(jié)種群對(duì)高效氯氰菊酯的LC值分別是2018 年的1.9 倍、1.7 倍，表明黔南、畢節(jié)種群對(duì)高效氯氰菊酯的抗性上升。2020 年黔南、畢節(jié)種群對(duì)高效氯氰菊酯的LC值分別是2019 年的1.5倍、3.0 倍，表明抗性繼續(xù)上升，尤其是畢節(jié)種群表現(xiàn)出抗性急劇上升趨勢(shì)。

圖1 2018—2020 年貴州不同菜區(qū)南美斑潛蠅的抗性動(dòng)態(tài)變化

2.2.5 對(duì)高效氯氟氰菊酯的抗性變化 由圖1 可知，2019 年遵義、畢節(jié)種群對(duì)高效氯氟氰菊酯的LC值分別是2018 年的1.7 倍、1.5 倍，表明遵義、畢節(jié)種群對(duì)高效氯氟氰菊酯的抗性上升。2020 年遵義、畢節(jié)種群對(duì)高效氯氟氰菊酯的LC值分別是2019 年的1.5 倍、1.3 倍、1.6 倍，抗性繼續(xù)上升。而安順、黔南種群表現(xiàn)出抗性持續(xù)下降的趨勢(shì)。

2.2.6 對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的抗性變化 由圖1 可知，2019 年安順?lè)N群對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的LC值是2018 年的1.2 倍，表明安順?lè)N群對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的抗性上升。2020 年安順?lè)N群對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的LC值是2019 年的1.3 倍，抗性繼續(xù)上升。而貴陽(yáng)、黔南、遵義、畢節(jié)種群都出現(xiàn)了抗性持續(xù)下降的趨勢(shì)。

2.2.7 對(duì)甲維鹽的抗性變化 由圖1 可知，2019 年遵義、畢節(jié)種群對(duì)甲維鹽的LC值分別是2018 年的1.8 倍、1.6 倍，表明遵義、畢節(jié)種群對(duì)甲維鹽的抗性上升。2020 年遵義、畢節(jié)種群對(duì)甲維鹽的LC值分別是2019 年的1.0 倍、1.4 倍，抗性繼續(xù)上升。貴陽(yáng)和安順?lè)N群則表現(xiàn)出抗性持續(xù)下降的趨勢(shì)。

2.3 聚類分析

選取2018—2020 年7 個(gè)殺蟲(chóng)劑對(duì)貴州5 個(gè)地區(qū)南美斑潛蠅種群的LC值，分別以年份、地區(qū)、藥劑、同藥劑不同地區(qū)和同藥劑不同年份為變量進(jìn)行聚類分析。

2.3.1 年度、地區(qū)、藥劑間比較 由圖2 可知，以年份、地區(qū)、藥劑為變量，對(duì)所測(cè)LC值進(jìn)行聚類分析后，不同年份之間LC值沒(méi)有顯著差異；地區(qū)之間LC值沒(méi)有顯著差異；藥劑之間LC值存在極顯著差異（=26.19，＜0.000 1），毒力順序?yàn)殇迩柘x(chóng)酰胺≥乙基多殺菌素≥滅蠅胺＞阿維菌素≥甲維鹽＞高效氯氰菊酯≥高效氯氟氰菊酯。

圖2 南美斑潛蠅對(duì)殺蟲(chóng)劑LC50值年度間、地區(qū)間、藥劑間比較

2.3.2 同藥劑不同地區(qū)比較 由圖3 可以看出，以地區(qū)為變量，分別對(duì)同種殺蟲(chóng)劑的LC值進(jìn)行聚類分析，結(jié)果顯示，除了高效氯氟氰菊酯（=5.432，＜0.05）和溴氰蟲(chóng)酰胺（=7.468，＜0.05）外，南美斑潛蠅對(duì)同種殺蟲(chóng)劑的敏感性地區(qū)之間沒(méi)有顯著差異（＞0.05）。

圖3 南美斑潛蠅對(duì)同種殺蟲(chóng)劑LC50值的不同地區(qū)比較

2.3.3 同藥劑不同年份之間比較 由圖4 可以看出，以年份為變量，分別對(duì)同種殺蟲(chóng)劑的LC值進(jìn)行聚類分析，表明南美斑潛蠅對(duì)同種殺蟲(chóng)劑的年份之間沒(méi)有顯著差異（＞0.05）。

圖4 南美斑潛蠅對(duì)同種殺蟲(chóng)劑的LC50值年份間比較

3 討論與結(jié)論

目前，化學(xué)防治仍是控制南美斑潛蠅的主要措施，抗藥性水平直觀反映了田間用藥水平，對(duì)抗藥性進(jìn)行監(jiān)測(cè)有利于指導(dǎo)田間合理施藥。本試驗(yàn)抗藥性監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，貴州5 個(gè)菜區(qū)南美斑潛蠅種群對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺（LC值0.465 6～2.973 7 mg·L）、乙基多殺菌素（LC值0.653 3～2.312 6 mg·L）、滅蠅胺（LC值0.908 6～2.369 9 mg·L）的敏感性較高，對(duì)高效氯氰菊酯（LC值12.775 6～119.053 9 mg·L）、高效氯氟氰菊酯（LC值18.342 9～189.637 7 mg·L）的敏感性較差，總的毒力順序?yàn)殇迩柘x(chóng)酰胺≥乙基多殺菌素≥滅蠅胺＞阿維菌素≥甲維鹽＞高效氯氰菊酯≥高效氯氟氰菊酯。藥劑敏感性的水平差異反映出藥劑使用頻率的高低，不合理使用藥劑導(dǎo)致敏感性不斷下降、抗性風(fēng)險(xiǎn)上升，筆者連續(xù)3 年的抗性測(cè)定，得出了貴州地區(qū)種群對(duì)高效氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的低敏感性水平，加上擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥產(chǎn)生交互抗性的高風(fēng)險(xiǎn)，因此，在貴州區(qū)域內(nèi)應(yīng)注意高效氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的使用。

不同地區(qū)由于耕作制度、栽培方式和用藥歷史不同，導(dǎo)致藥劑的敏感性、抗藥性發(fā)展程度出現(xiàn)差異。筆者測(cè)定貴州5 個(gè)地區(qū)種群的抗藥性有區(qū)域差異，貴陽(yáng)、黔南、安順的抗性相對(duì)較低，而遵義種群的抗性則較高，尤其是對(duì)高效氯氟氰菊酯的敏感性顯著低于其他地區(qū)，對(duì)阿維菌素的敏感性也相對(duì)較低。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，遵義地區(qū)氣候適宜，蔬菜種植種類豐富、面積較大，給南美斑潛蠅提供了合適的生存環(huán)境，加上用藥水平高，致使藥劑選擇壓較大，種群抗性水平較高。需要在遵義地區(qū)控制合理施藥，值得注意的是，遵義種群對(duì)乙基多殺菌素的抗性下降快，乙基多殺菌素可作為輪換藥劑在此地區(qū)推廣使用。

根據(jù)抗性監(jiān)測(cè)年度變化可知，貴陽(yáng)和遵義種群對(duì)滅蠅胺、遵義種群對(duì)阿維菌素、安順?lè)N群對(duì)乙基多殺菌素都表現(xiàn)出抗性加劇上升的趨勢(shì)。已有研究表明，田間種群的抗藥性水平與該地區(qū)的用藥頻率呈正相關(guān)。由此推測(cè)，這些區(qū)域中的幾種藥劑抗藥性上升與使用頻率高相關(guān)，進(jìn)一步說(shuō)明滅蠅胺在貴陽(yáng)和遵義、阿維菌素在遵義、乙基多殺菌素在安順的使用都存在抗性風(fēng)險(xiǎn)，需謹(jǐn)慎使用。建議與其他藥劑輪換使用，以延緩其抗藥性的發(fā)展。

溴氰蟲(chóng)酰胺是一種新型的酰胺類殺蟲(chóng)劑，自登記以來(lái)其抗性已在幾種農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)上有報(bào)道，本試驗(yàn)結(jié)果表明南美斑潛蠅對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺具有一定的抗性，但抗性相對(duì)較低，因此，溴氰蟲(chóng)酰胺在貴州菜區(qū)可作為防治南美斑潛蠅的首選藥劑。乙基多殺菌素作為高效生物殺蟲(chóng)劑，被廣泛應(yīng)用于蔬菜上斑潛蠅、薊馬等害蟲(chóng)的防治。南美斑潛蠅對(duì)乙基多殺菌素的抗藥性未見(jiàn)研究報(bào)道，筆者監(jiān)測(cè)到貴陽(yáng)、安順、畢節(jié)3 個(gè)地區(qū)的種群均出現(xiàn)抗性上升的現(xiàn)象，由此需注意該藥劑的合理使用，延緩其使用壽命。阿維菌素是防治斑潛蠅的常用藥劑，吳文偉等監(jiān)測(cè)了1998—2002 年南美斑潛蠅對(duì)阿維菌素的抗性，昆明北郊的種群為低水平抗性，與該文中的敏感基線相比，本試驗(yàn)中2020 年遵義種群已至中等水平抗性。且本試驗(yàn)中監(jiān)測(cè)的貴陽(yáng)、畢節(jié)、黔南種群呈上升趨勢(shì)，表明在這些地區(qū)使用阿維菌素存在抗性風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)合理使用，避免盲目施藥，發(fā)揮其良好的控制作用。

綜上所述，在貴州菜區(qū)可選擇溴氰蟲(chóng)酰胺、乙基多殺菌素和滅蠅胺作為防治南美斑潛蠅的有效藥劑，但要注意合理使用，可選擇敏感性中等的阿維菌素和甲維鹽作為輪換藥劑，應(yīng)在全省區(qū)域內(nèi)暫停或停止使用高效氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯。為了有效實(shí)施抗性治理，可根據(jù)抗性差異分布的區(qū)域制定相應(yīng)的抗性治理方案：（1）加強(qiáng)南美斑潛蠅的抗藥性持續(xù)監(jiān)測(cè)：如擴(kuò)大監(jiān)測(cè)點(diǎn)方位范圍、連續(xù)監(jiān)測(cè)抗性動(dòng)態(tài)變化等，為制定方案提供科學(xué)依據(jù)；（2）科學(xué)合理用藥：應(yīng)暫停菊酯類交互抗性高、使用頻率高的抗性藥劑，選擇低抗的殺蟲(chóng)劑、復(fù)配藥劑、微生物殺蟲(chóng)劑，例如20%阿維·殺蟲(chóng)單微乳劑、短穩(wěn)桿菌等，同時(shí)需要注意使用頻率和用量；（3）采取綜合防治措施：農(nóng)業(yè)防治、物理防治、生物防治多種措施并舉控制南美斑潛蠅的為害，減少用藥次數(shù)以延緩其抗藥性，如利用“四季豆浸提液+蜂蜜”的引誘劑、不同類型的誘捕器、黃色粘蟲(chóng)板等。