植物滅鼠劑對(duì)東方田鼠毒殺的有效性分析

楊冬梅，陶雙倫，何 纖，李 雙，李佳成，李安娜，李俊年

（吉首大學(xué)生物資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，湖南 吉首 416000）

東方田鼠（Microtus fortis）是洞庭湖區(qū)的主要農(nóng)業(yè)鼠害[1]，每年汛期因洪水脅迫東方田鼠由湖灘向農(nóng)田遷徙，對(duì)農(nóng)作物造成嚴(yán)重的危害。同時(shí)，東方田鼠也是鉤端螺旋體病和腎綜合征出血熱等疾病的重要媒介生物[2-3]。2021 年汛期，洞庭湖區(qū)東方田鼠在大堤內(nèi)聚集數(shù)量較往年顯著增加（筆者調(diào)研和走訪附近村民得知）。鼠類防治有很多途徑，但目前仍以化學(xué)防治為主[4]，如殺鼠靈、敵鼠鈉鹽、殺鼠迷、氯鼠酮鈉鹽、大隆和鼠得克等都用于防治[5-7]，以及近年普遍使用的第二代抗凝血滅鼠劑溴敵隆[6]?；瘜W(xué)滅鼠制劑不僅污染環(huán)境，而且使鼠類的天敵攝食了死亡的鼠中毒死亡，導(dǎo)致鼠類密度更易爆發(fā)。植物制劑滅鼠劑與劇毒滅鼠劑相比具有不易產(chǎn)生拒食性和緩慢中毒兩大優(yōu)勢(shì)[7-8]。因此，植物制劑滅鼠劑可作為重要的滅殺害鼠途徑[9]。為了有效利用植物制劑滅鼠，檢測(cè)棲息于洞庭湖區(qū)的東方田鼠對(duì)植物滅鼠劑（植物槲皮素及雷公藤甲素等植物活性成分）抗性，特在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行了用植物制劑滅鼠劑毒殺東方田鼠的有效性試驗(yàn)，現(xiàn)總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 試鼠的選擇

2019 年5 月，在湖南省洞庭湖區(qū)湖灘捕獲東方田鼠，帶回吉首大學(xué)生態(tài)研究所飼喂繁育并建立室內(nèi)封閉群。選擇成年（體重45 g 以上）、健康、非孕、體重相近的東方田鼠個(gè)體，單獨(dú)飼養(yǎng)于37 cm×27 cm×17 cm 的不銹鋼網(wǎng)罩聚丙烯透明飼養(yǎng)籠，飼養(yǎng)過(guò)程自由采食和飲水，并添加一定量的胡蘿卜，鼠房通風(fēng)良好，溫度18～26℃，相對(duì)濕度60%～70%，光照時(shí)間（12±1）h。保持動(dòng)物養(yǎng)殖房清潔衛(wèi)生。

1.2 藥品配制

植物滅鼠劑由吉首大學(xué)生態(tài)研究所研制，主要成分為植物槲皮素（河南平輿益美康植物科技有限公司，純度95%）及雷公藤甲素（江蘇無(wú)錫開(kāi)立實(shí)業(yè)有限公司，純度95%）等植物活性成分。用萬(wàn)分之一天平精確稱取5.000 g 原藥并溶于95%酒精，以去離子水稀釋，按照0.025%的質(zhì)量比加入市售玉米粉并充分混合，平鋪于金屬盤(pán)中，于60℃烘箱中烘干。

1.3 東方田鼠毒餌取食量測(cè)定

100 只試鼠（雌雄東方田鼠各50 只） 按5 個(gè)食毒期（1、3、5、7、9 d）攻毒, 采用無(wú)選擇性攝食方法，先供給無(wú)毒餌兔顆粒飼料適應(yīng)飼養(yǎng)3 d，每天測(cè)定試驗(yàn)個(gè)體食物攝入量。將第3 d 食物攝入量少于全部試驗(yàn)個(gè)體平均攝入量1 /5 的個(gè)體剔除。測(cè)定每只試鼠飼喂毒餌前的體重（g），鑒別雌、雄。按照體重隨機(jī)分為5 組，分別連續(xù)供給毒餌 1、3、5、7、9 d。測(cè)量每天的投食量和第2 d 的食物剩余量（g）。由于死亡時(shí)間不一致，可能導(dǎo)致食物攝入量統(tǒng)計(jì)上的偏差，因此東方田鼠死亡當(dāng)天的食物攝入量不進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，之后按公式（1）計(jì)算個(gè)體對(duì)植物滅鼠劑的實(shí)際攝入量——毒餌取食量。如果不同性別東方田鼠每天食物攝入量無(wú)差異，則合并計(jì)算毒餌取食量。依據(jù)毒餌取食量，按公式（2）計(jì)算每只東方田鼠的攝藥劑量。

毒餌取食量（g/g）=（前日投食量-次日剩余量）/體重 （1）

攝藥劑量（mg/kg）=∑毒餌取食量（含死亡日）×0.025%×10-6（2）

飼喂試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，處死尚存活的試鼠，對(duì)每只個(gè)體（死亡與處理個(gè)體）小心剝離其心臟、胸腺、肝臟、腎臟和脾臟等組織，用干凈濾紙吸干組織上的血液，稱重（±0.001 g）并計(jì)算臟器指數(shù)，臟器指數(shù)按公式（3）計(jì)算。

臟器指數(shù) = 臟器絕對(duì)重量 （mg） /體重（g） （3）

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SPSS 16 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。差異顯著性檢驗(yàn)均采用獨(dú)立樣本 t 檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用Pearson 相關(guān)分析法。

2 結(jié)果與分析

2.1 東方田鼠毒餌取食量

雌性東方田鼠和雄性東方田鼠的植物滅鼠劑攝入量分別隨取食天數(shù)的增加而呈現(xiàn)減少的趨勢(shì)，合并計(jì)算雌鼠和雄鼠的植物滅鼠劑攝入量隨取食天數(shù)的增加下降的趨勢(shì)，但差異不顯著（T ＞0.05）。雌鼠每天的植物滅鼠劑攝入量均高于雄鼠，而在第1～7 d 雌鼠和雄鼠間的毒餌取食量均無(wú)顯著差異（T ＞0.05）（見(jiàn)圖1）。

圖1 東方田鼠對(duì)植物滅鼠劑攝入量

2.2 植物滅鼠劑對(duì)東方田鼠的毒殺比

總體有效率：有效試鼠共100 只，雌鼠和雄鼠各50 只，合計(jì)死亡79 只，其中雌鼠死亡39 只，雄鼠死亡40 只。除1 d 組和3 d 組有存活鼠外，其他各組全部被毒殺（表1）。

表1 不同劑量植物滅鼠劑處理?xiàng)l件下東方田鼠毒殺比

東方田鼠死亡時(shí)間：不同食毒期東方田鼠平均致死天數(shù)相近，各組雌性東方田鼠平均致死天數(shù)范圍為6.2～8.4 d，而雄性東方田鼠平均致死天數(shù)范圍為6.1～7.2 d。東方田鼠死亡時(shí)間成正態(tài)分布，死亡高峰期集中在第4～7 d（表1）。因此，東方田鼠對(duì)植物滅鼠劑完全無(wú)抗性，且雌鼠和雄鼠對(duì)植物滅鼠劑的抗性無(wú)差異。

2.3 投喂植物滅鼠劑后試驗(yàn)個(gè)體的行為表現(xiàn)及解剖特征

投喂植物滅鼠劑后，東方田鼠出現(xiàn)食欲減退，飲水量減少，體重降低，活動(dòng)量明顯減少，且毛色凌亂無(wú)光澤，有全身掉毛，萎靡不振的現(xiàn)象。解剖尸體后發(fā)現(xiàn)動(dòng)物全身出現(xiàn)較多的出血點(diǎn)，肝臟、腎臟明顯腫大，顏色與正常飼養(yǎng)的東方田鼠相比明顯發(fā)暗發(fā)黑，呈暗紅褐色，心臟有增大現(xiàn)象，但色澤與對(duì)照組無(wú)明顯差異，其他臟器并無(wú)明顯變化。

2.4 植物滅鼠劑對(duì)東方田鼠的內(nèi)臟器官指數(shù)影響

如圖2，與對(duì)照組比較植物滅鼠劑處理組的雄性東方田鼠肝臟指數(shù)增加45.2%（P＜0.05），對(duì)雌性東方田鼠肝臟指數(shù)效應(yīng)差異不顯著（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，雌性東方田鼠和雄性東方田鼠腎臟指數(shù)分別增加54.3%（P＜0.05）和62.5%（P＜0.05），且各組試驗(yàn)個(gè)體雌體腎臟指數(shù)高于雄體，但差異不顯著（P＞0.05）。與對(duì)照組比較，雌性東方田鼠和雄性東方田鼠心臟指數(shù)分別增加16.1%（P＜0. 05）和11.9%（P＜0.05） 。

圖2 植物滅鼠劑對(duì)雌性東方田鼠（左圖）和雄性東方田鼠（右圖）內(nèi)臟器官指數(shù)的影響

2.5 植物滅鼠劑對(duì)東方田鼠的免疫器官指數(shù)影響

與對(duì)照組相比，經(jīng)植物滅鼠劑處理的雌性東方田鼠脾臟指數(shù)增加15.7%（P＜0.05），雄雌性東方田鼠脾臟指數(shù)增加16.2%（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，植物滅鼠劑處理的雌性東方田鼠胸腺指數(shù)增加14.6%（P＜0.05），雄雌性東方田鼠脾臟指數(shù)增加27.4%（P＜0.05）（圖3）。

圖3 植物滅鼠劑對(duì)雌性東方田鼠（左圖）和雄性東方田鼠（右圖）免疫器官指數(shù)的影響

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，洞庭湖區(qū)東方田鼠對(duì)植物滅鼠劑十分敏感。食毒期為5 d 的東方田鼠全部死亡。確定毒餌使用濃度和投喂時(shí)間是植物滅鼠劑在鼠害防治實(shí)踐的重要內(nèi)容。試驗(yàn)中使用的植物滅鼠劑濃度為0.025%。在只投喂植物滅鼠劑5 d 情況下，東方田鼠滅殺率可達(dá) 100%，因此，選用濃度為 0.025% 的植物滅鼠劑作為洞庭湖區(qū)東方田鼠毒餌濃度較合適。由于連續(xù)喂食5 d 的0.025% 植物滅鼠劑能夠有效滅殺東方田鼠，且東方田鼠的死亡高峰自第4 d 開(kāi)始出現(xiàn)，因此 0.025% 植物滅鼠劑連續(xù)投藥天數(shù)控制在5 d 為宜。東方田鼠內(nèi)臟指數(shù)變化結(jié)果顯示肝臟指數(shù)和腎臟指數(shù)顯著增加，可以初步判斷植物滅鼠劑嚴(yán)重?fù)p傷了東方田鼠的肝臟和腎臟可能是導(dǎo)致其死亡的直接原因。

在滅鼠劑的應(yīng)用過(guò)程中，拒食性是一個(gè)值得關(guān)注的問(wèn)題。野外滅鼠劑試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)褐家鼠、東方田鼠、地松鼠對(duì)慢性植物滅鼠劑存在明顯的拒食現(xiàn)象[10-13]，此試驗(yàn)中東方田鼠在1～9 d 的植物滅鼠劑攝入量下降趨勢(shì)不顯著，可能是由于樣本量較少、標(biāo)準(zhǔn)誤過(guò)大，或是植物滅鼠劑無(wú)明顯的苦味或不悅口感，沒(méi)有導(dǎo)致攝入量明顯下降。

由于植物滅鼠劑對(duì)害鼠的毒殺效果可能存在種間差異，因此，未來(lái)對(duì)于洞庭湖區(qū)黃胸鼠（Rattus flavipectus）、黑線姬鼠（Apodemus agrarius）、小家鼠（Mus musculus）、黃毛鼠（Rattus rattoides）大倉(cāng)鼠（Tscheskia Triton）、褐家鼠（Rattus norvegicus）等鼠種的滅鼠效果仍需實(shí)驗(yàn)室和野外條件下試驗(yàn)觀測(cè)。