基于表里關(guān)聯(lián)和多元統(tǒng)計(jì)分析的黃連藥材分級(jí)研究

董兆威 田茂穎 趙毅萌 王超 王漢夫 王瑾 黃勤挽

摘要 目的：探討外觀性狀與內(nèi)在質(zhì)量相關(guān)聯(lián)的黃連藥材量等級(jí)評(píng)價(jià)方法和標(biāo)準(zhǔn)。方法：以市場收集的18批黃連藥材為研究對(duì)象，構(gòu)建外觀性狀與內(nèi)在質(zhì)量相關(guān)聯(lián)的黃連的質(zhì)量等級(jí)評(píng)價(jià)手段。對(duì)18批黃連藥材進(jìn)行了水分、灰分、浸出物、長度、直徑、小檗堿含量、表小檗堿含量、黃連堿含量、巴馬汀含量和色度檢測;運(yùn)用主成分分析、相關(guān)性分析、方差分析等多種數(shù)理統(tǒng)計(jì)手段，篩選分級(jí)指標(biāo)，進(jìn)行黃連等級(jí)劃分研究。結(jié)果：經(jīng)篩選認(rèn)為長度、浸出物和小檗堿含量為黃連品質(zhì)評(píng)價(jià)的關(guān)鍵指標(biāo)，且外在指標(biāo)（長度）與內(nèi)在質(zhì)量（浸出物和小檗堿含量）在0.01水平上呈顯著性正相關(guān)，結(jié)合市場實(shí)際情況，制定了黃連一等、二等、統(tǒng)貨的質(zhì)量等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論：該質(zhì)量等級(jí)不僅從外觀特性上對(duì)黃連藥材進(jìn)行了等級(jí)評(píng)價(jià)，同時(shí)也在其內(nèi)在質(zhì)量差異上進(jìn)行了表征，補(bǔ)充了現(xiàn)有團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)的不足，也為后續(xù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或國家標(biāo)準(zhǔn)的建立提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞 黃連;外觀性狀;內(nèi)在質(zhì)量;質(zhì)量等級(jí)

Grading of Rhizoma Coptidis Based on Appearance Trait and Intrinsic Quality Correlation and Multivariate Statistical Analysis

DONG Zhaowei1，TIAN Maoying1，ZHAO Yimeng1，WANG Chao2，WANG Hanfu3，WANG Jin1，HUANG Qinwan1

（1 Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 610075，China; 2 Sichuan Integrative Medicine Hospital，Chengdu610042，China; 3 Sichuan Limin Traditional Chinese Medicine Decoction Pieces Co.Ltd.，Chengdu 611331，China）

AbstractObjective： To investigate the evaluation method and standard of the quantity rating of Huanglian medicinal materials related to the external traits and intrinsic quality. Methods： To construct a method for evaluating the quality grades of Rhizoma Coptidis based on correlation between appearance traits and intrinsic quality by using 18 batches of commercially available Rhizoma Coptidis.Eighteen batches of Rhizoma Coptidis were tested for moisture，ash，extractum，length，diameter，berberine content，epiberberine content，coptisine content，palmatine content and chromaticity.Mathematical and statistical tools such as principal component analysis（PCA），correlation analysis and analysis of variance were used to screen the grading indexes. Results： Length，extractum and berberine content were considered as the key indexes for the quality evaluation of Rhizoma Coptidis，and the extrinsic index（length） and intrinsic quality indexes（extractum and berberine content） were positively correlated at 0.01 significance level.Finally，the standards of first grade，second grade and general grade quality of Rhizoma Coptidis were developed in combination with the actual market situation. Conclusion： The quality grades not only evaluated Rhizoma Coptidis in terms of appearance characteristics，but also characterized it in terms of intrinsic quality differences，which made up deficiencies for the existing group standards and also provided the basis for establishing subsequent industry standards or national standards.

Keywords Rhizoma Coptidis; Appearance traits; Intrinsic quality; Quality gradesAEC2C78E-E1B4-4A27-9936-26B9DBE299F8

中圖分類號(hào)：R282 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ?doi： 10.3969/j.issn.1673-7202.2022.09.004

黃連為毛茛科植物黃連（ Coptis chinensis ?Franch.）、三角葉黃連（ Coptis deltoidea ?C.Y.Cheng et Hsiao）或云連（ Coptis teeta ?Wall.）的干燥根莖，分別習(xí)稱“味連”“雅連”和“云連”[1]。其具有清熱燥濕，瀉火解毒的功效，可用于細(xì)菌性痢疾、糖尿病、潰瘍性結(jié)腸炎等疾病[2-4]。由于云連產(chǎn)量極小，雅連資源稀缺，現(xiàn)在中藥材市場上流通的黃連品種主要為味連[5]。重慶石柱和湖北利川是味連的道地產(chǎn)區(qū)，在四川洪雅、峨眉，彭州、大邑等地也有產(chǎn)區(qū)[6]。

中藥飲片和中成藥的療效與中藥材的質(zhì)量密切相關(guān)，因此中藥材優(yōu)劣與否是影響臨床上中藥安全性及有效性的關(guān)鍵。自古以來中藥材都是“看貨評(píng)級(jí)，分檔議價(jià)”，藥材分等后有利于分檔議價(jià)售出，對(duì)于中藥材市場的健康發(fā)展具有重要的意義[7]。此外患者還可以根據(jù)自己的經(jīng)濟(jì)情況選擇不同等級(jí)的藥材，所以對(duì)中藥材進(jìn)行等級(jí)劃分十分必要。隨著歷史發(fā)展，各種藥材的等級(jí)區(qū)分方法在中藥市場中不斷演變，具有簡易、快捷的特點(diǎn)。雖然這種傳統(tǒng)方法可以直觀地判別出中藥外觀性狀與品質(zhì)價(jià)值的聯(lián)系，但需要依靠豐富的經(jīng)驗(yàn)。隨著藥材需求量增加以及專業(yè)藥工人才短缺，這種傳統(tǒng)方法逐漸消失[8]。為了解決藥材等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)粗糙、老化滯后等問題，不少研究者對(duì)中藥材商品規(guī)格等級(jí)外觀指標(biāo)與內(nèi)在指標(biāo)評(píng)價(jià)進(jìn)行了研究，分析其等級(jí)間質(zhì)量差異、外觀性狀與其內(nèi)在指標(biāo)成分含量的相互關(guān)系，制定中藥材商品規(guī)格等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，在五倍子、西洋參、車前子中已有報(bào)道[9-11]。張明智等[12]采用電子舌技術(shù)量化黃連味覺信息并考察其與總生物堿的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)不同等級(jí)黃連總生物堿含量與其味覺信息負(fù)相關(guān)，對(duì)黃連等級(jí)分類貢獻(xiàn)不大，也未體現(xiàn)外觀特性與內(nèi)在質(zhì)量之間的相關(guān)性。

歷來本草典籍均稱黃連“味極濃苦”“黃肥堅(jiān)者”為佳，即是現(xiàn)代分類手段中所說的長度、直徑、顏色與味道[13]。中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)發(fā)布的《中藥材商品規(guī)格等級(jí) 黃連》中利用長度和直徑將黃連藥材分為一等品、二等品和統(tǒng)貨，能夠直觀地反映黃連的商品等級(jí)，具有很強(qiáng)的應(yīng)用價(jià)值，但是未涉及黃連的內(nèi)在品質(zhì)評(píng)價(jià)[14]。黃連的味道與其生物堿含量有關(guān)，可以初步將其作為內(nèi)在指標(biāo)，而顏色要通過色彩色差計(jì)判斷。色彩色差計(jì)是通過模擬人眼對(duì)顏色的判斷，得到樣品顏色的3個(gè)刺激值X、Y和Z，再根據(jù)國際照明委員會(huì)Lab顏色空間原理計(jì)算得出色差值明度（L*）、紅綠色軸分量（a*）、黃藍(lán)色軸分量（b*）（其中，“+a*”表示紅色，“-a*”表示綠色;“+b*”表示黃色，“-b*”表示藍(lán)色）[15-16]，最后通過L*、a*、b*將顏色準(zhǔn)確量化。因得到的數(shù)據(jù)繁雜，需要以多元數(shù)理統(tǒng)計(jì)手段綜合篩選黃連品質(zhì)評(píng)價(jià)的關(guān)鍵指標(biāo)。結(jié)合實(shí)際應(yīng)用情況，現(xiàn)構(gòu)建黃連外在性狀與內(nèi)在質(zhì)量相關(guān)的質(zhì)量等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，為市場上黃連的品質(zhì)評(píng)價(jià)提供一定的參考方法。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1藥物

樣品共收集18批黃連藥材，分別來自四川省大邑縣6批、四川省峨眉山市6批、重慶石柱縣6批，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)黃勤挽教授鑒定均為毛茛科植物黃連 Coptis chinensis ?Franch的干燥根莖。

1.1.2試劑

乙腈（色譜純，Sigma-Aldrich，批號(hào)：WXBD4324V）、十二烷基硫酸鈉（色譜純，成都市科隆化學(xué)品有限公司，批號(hào)：2017072401）、磷酸二氫鉀（色譜純，成都市科隆化學(xué)品有限公司，批號(hào)：201604280）、鹽酸小檗堿對(duì)照品（成都曼思特生物科技有限公司，批號(hào)：MUST-17110502）

1.1.3儀器

高速離心機(jī)（無錫瑞江分析儀器有限公司，型號(hào)：RJ-TGL-16C）、超聲清洗機(jī)（昆山市超聲儀器有限公司，型號(hào)：KQ-300E）、型超純水器（都優(yōu)普超純科技有限公司，型號(hào)：UPH-1-10T）、電子天平（北京賽多利斯天平有限公司，型號(hào)：BS200S）、電子天平（上海越平科學(xué)儀器有限公司，型號(hào)：YP3002）、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海將任實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司，型號(hào)：DHG-9240）、循環(huán)水式真空泵[鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司，型號(hào)：SHZ-D（Ⅲ）]、島津高效液相色譜儀（島津公司，日本，型號(hào)：LC-2030C3D）、Wondasil C18色譜柱（5 μm，4.6 mm×250 mm，GL Sciences公司，日本，型號(hào)：8J3706-20）、pH計(jì)（上海儀電科學(xué)股份有限公司，型號(hào)：PHS-3C）、高速多功能粉碎機(jī)（上海冰都電器有限公司，型號(hào)：Q-400B）、電子數(shù)顯游標(biāo)卡尺（成都成量工具集團(tuán)有限公司，型號(hào)：ZM208-1）、色彩色差計(jì)（KONICA MINOOLITA SENSING INC，型號(hào)：CR-410）。

1.2方法

1.2.1檢查項(xiàng)測定

對(duì)18批黃連藥材樣品的水分、總灰分、浸出物進(jìn)行測定。其中，水分按2020版《中華人民共和國藥典（四部）》“0832水分測定法”項(xiàng)下第二法（烘干法）測定;總灰分按2020版《中華人民共和國藥典（四部）》“2302灰分測定法”項(xiàng)下測定;浸出物按2020版《中華人民共和國藥典（四部）》通則“2201浸出物測定法”進(jìn)行測定。

1.2.2長度和直徑的測量

隨機(jī)選取每批黃連藥材樣品的50根，用游標(biāo)卡尺測定50根黃連的長度和直徑，計(jì)算平均值，記錄數(shù)據(jù)。

1.2.3黃連生物堿含量測定

按照2020版《中華人民共和國藥典（一部）》黃連項(xiàng)下相關(guān)方法，采用高效液相色譜法（通則0512）測定各批次藥材中表小檗堿、黃連堿、巴馬汀和小檗堿的含量。AEC2C78E-E1B4-4A27-9936-26B9DBE299F8

1.2.4黃連色度檢測

分別取18批黃連藥材粉末，將樣品粉末置于色彩色差計(jì)中，測定樣品粉末顏色，每樣品平行測定3次，取平均值。顏色數(shù)據(jù)統(tǒng)一用L*、a*、b*色空間表示，并通過公式E*ab=（L*2+a*2+b*2）1/2，計(jì)算出各樣品的總色值。其中△E*為總色值，L*為亮度，a*和b*為色度坐標(biāo)。

色彩色差計(jì)測定條件為光源D65，標(biāo)準(zhǔn)觀察角度2°，照明口徑50 mm。經(jīng)白板校準(zhǔn)，以L*=100、a*=0、b*=0為參照校正色[17]，測得各樣品的L*、a*、b*。并且依次進(jìn)行精密度、樣品穩(wěn)定性和不同光照強(qiáng)度的穩(wěn)定性考察。

1.2.5統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 26.0及Origin 9.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用描述統(tǒng)計(jì)、主成分分析、相關(guān)性分析及方差分析篩選分級(jí)指標(biāo)，用K-聚類分析獲得等級(jí)劃分的聚類中心值， 制定黃連藥材等級(jí)劃分的標(biāo)準(zhǔn)。

2結(jié)果

2.1黃連外觀性狀與內(nèi)在含量的數(shù)據(jù)結(jié)果

18批黃連藥材水分、灰分、浸出物、小檗堿含量、表小檗堿含量、黃連堿含量、巴馬汀含量、長度、直徑及色度結(jié) 果見表1。18批黃連藥材水分為10.62% ～13.44%、灰分為2.18% ～2.89%，浸出物為21.78% ～28.83%，小檗堿含量為5.99% ～9.27%，表小檗堿含量為0.82% ～0.56%，黃連堿含量為1.59% ～2.77%，巴馬汀含量為1.62% ～2.48%，長度為33.819 9mm～62.588 4 mm，直徑為7.046 0 mm～10.058 7 mm，ΔE*為13.89～16.57。

2.2色彩色差計(jì)方法學(xué)考察

2.2.1精密度考察

取SZ-1黃連藥材樣品粉末適量，置于色彩色差計(jì)中，在同一時(shí)間內(nèi)按“1.2.4”重復(fù)測量6次，結(jié)果考察儀器精密度，其L*（YC1）、a*（YC1）、b（YC1）的RSD值分別為0.09%、0.10%、0.15%，本方法精密度良好。

2.2.2樣品穩(wěn)定性考察

取SZ-1黃連藥材樣品粉末適量，置于色彩色差計(jì)中，按“2.3.1”項(xiàng)下測定條件連續(xù)5天在同一時(shí)刻測定樣品色差值，考察穩(wěn)定性，其L*（YC1）、a*（YC1）、b*（YC1）的RSD值分別為0.10%、0.12%、0.11%，藥材粉末穩(wěn)定性良好。

2.2.3不同光照強(qiáng)度的穩(wěn)定性考察

取SZ-1黃連藥材樣品粉末適量，置于色彩色差計(jì)中，按“2.3.1”項(xiàng)下測定條件分別于同日內(nèi)9：00、11：30、14：00、16：30、19：00時(shí)連續(xù)測定樣品色差值，共5次。其L*（YC1）、a*（YC1）、b*（YC1）的RSD值分別為0.09%、0.31%、0.89%，不同光照強(qiáng)度對(duì)試驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定性影響較小。

2.3分級(jí)指標(biāo)的篩選

2.3.1指標(biāo)成分?jǐn)?shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)描述

將得到的18批次黃連藥材的數(shù)據(jù)資料水分、灰分、浸出物、小檗堿含量、表小檗堿含量、黃連堿含量、巴馬汀含量、長度、直徑及△E*進(jìn)行整理和歸納，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述。變異系數(shù)大的指標(biāo)，說明在組間的差異較大，可作為黃連質(zhì)量分級(jí)的依據(jù)。根據(jù)統(tǒng)計(jì)描述可知，小檗堿含量、表小檗堿含量、黃連堿含量、巴馬汀含量、長度和直徑變異系數(shù)較大，可考慮作為分級(jí)指標(biāo)。見表2。2.3.2主成分分析

10個(gè)指標(biāo)綜合評(píng)定時(shí)，指標(biāo)之間通常存在信息不統(tǒng)一或重復(fù)等眾多因素，故為達(dá)到客觀全面地綜合評(píng)價(jià)的目的，引入主成分分析法進(jìn)行降維，利用SPSS 26.0將水分、灰分、浸出物、長度、直徑、△E*、小檗堿含量、表小檗堿含量、黃連堿含量、巴馬汀含量進(jìn)行主成分分析，其中KMO取樣適切性量數(shù)為0.611>0.5，巴特利特球形度檢驗(yàn)顯著性<0.01，主成分分析有意義。見表3。第一主成分的特征根為4.681，第二主成分特征根為2.237，第三主成分特征根為1.122。見圖1。第一主成分已經(jīng)能比較全面反映所有樣本的信息，根據(jù)特征向量的大小可得到各指標(biāo)對(duì)于主成分貢獻(xiàn)的大小。從第一主成分中可以得到長度、直徑、浸出物、小檗堿含量、表小檗堿含量、黃連堿含量、巴馬汀含量的特征向量均>0.50，故長度、直徑、浸出物、小檗堿含量、表小檗堿含量、黃連堿含量、巴馬汀含量可作為劃分黃連藥材等級(jí)的重要參考指標(biāo)。

2.3.3指標(biāo)相關(guān)性分析

因表小檗堿含量、黃連堿含量和巴馬汀含量是由2020版《中華人民共和國藥典》中一測多評(píng)法測得，與小檗堿含量具有內(nèi)在聯(lián)系，故將小檗堿含量和浸出物看作是評(píng)價(jià)黃連品質(zhì)優(yōu)劣的內(nèi)在質(zhì)量指標(biāo)，制定質(zhì)量等級(jí)需要尋求外觀性狀與內(nèi)在質(zhì)量的相關(guān)性，故利用Origin 9.0軟件將18批藥材的7個(gè)指標(biāo)進(jìn)行兩兩相關(guān)的Pearson相關(guān)性分析。圖中的數(shù)字為兩指標(biāo)間的顯著性參數(shù)，數(shù)值為正數(shù)即正相關(guān)，數(shù)值為負(fù)數(shù)即負(fù)相關(guān)。長度與黃連內(nèi)在質(zhì)量（浸出物與小檗堿含量）在0.01水平上具有顯著正相關(guān)性，水分、灰分和直徑與內(nèi)在質(zhì)量無顯著性關(guān)系。見圖2。

通過主成分分析、相關(guān)性分析的結(jié)果，認(rèn)為長度是和浸出物與小檗堿含量有顯著相關(guān)的外觀指標(biāo)，同時(shí)長度、浸出物和小檗堿含量也是能夠評(píng)價(jià)黃連品質(zhì)的重要指標(biāo)，故將這3個(gè)指標(biāo)列為最終黃連藥材的等級(jí)劃分指標(biāo)。

2.3.4方差分析

為進(jìn)一步驗(yàn)證選擇指標(biāo)的準(zhǔn)確性，運(yùn)用SPSS 26.0對(duì)分級(jí)指標(biāo)——長度、浸出物和小檗堿含量進(jìn)行方差分析。通過方差分析結(jié)果可得長度的差異性達(dá)到極顯著水平（ P <0.01），而浸出物和小檗堿含量也達(dá)到顯著性水平（ P <0.05）。方差分析的結(jié)果進(jìn)一步佐證了長度、浸出物和小檗堿含量可作為黃連藥材分級(jí)指標(biāo)的合理性。見表4。

2.3.5等級(jí)劃分

利用Origin 9.0軟件將分級(jí)指標(biāo)長度、浸出物和小檗堿含量進(jìn)行K-均值聚類，將黃連分為3類，其中1類共3批、2類共9批、3類共6批。見圖3。黃連藥材規(guī)格等級(jí)的K-均值聚類法的最終聚類中心值見表5。AEC2C78E-E1B4-4A27-9936-26B9DBE299F8

長度越長，浸出物也越多，有效成分的含量也越高，成正相關(guān)。以K-聚類中心值，結(jié)合行業(yè)內(nèi)藥材分級(jí)情況和實(shí)際應(yīng)用的可行性，擬定黃連藥材等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)。見表6。

3討論

3.1分級(jí)指標(biāo)的合理性

黃連藥材是黃連植株的根莖，隨著生長年份的提高，黃連根莖的質(zhì)量、數(shù)量和長度都會(huì)有一定程度的增加，相應(yīng)的干物質(zhì)積累與生物堿含量也有增多[18]。外觀是否粗壯飽滿是歷代本草所推崇的黃連優(yōu)劣等級(jí)鑒別要點(diǎn)，其主要體現(xiàn)在長度與直徑上。本研究發(fā)現(xiàn)，直徑與長度呈顯著相關(guān)性（ P >0.05），這說明在黃連根莖生長的過程中，直徑的增加也同時(shí)伴隨著長度的增加。另外，長度與黃連內(nèi)在質(zhì)量（浸出物含量與小檗堿含量）在0.01水平上呈顯著性正相關(guān)，且長度越長，浸出物也越多，有效成分小檗堿的含量也越高。但是，直徑與黃連的內(nèi)在質(zhì)量無顯著性關(guān)系，這應(yīng)該與現(xiàn)代黃連種植中的人工施肥有關(guān)，將本不易產(chǎn)生區(qū)別的根莖寬度差距降到更低[19]。此外，研究發(fā)現(xiàn)不同批次黃連藥材之間的色度數(shù)據(jù)并不是主要的分類指標(biāo)，其與黃連內(nèi)在成分小檗堿之間也并不具有顯著性關(guān)系。黃連的顏色源于其生物堿，古人也稱“色黃者佳”，我們猜測雖然各批次間的生物堿存在差異，但是生物堿的量變并沒有引起顏色的質(zhì)變，因此其微小差異并沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？偟膩碚f，結(jié)果與黃連傳統(tǒng)評(píng)價(jià)分級(jí)規(guī)律“粗壯者佳”相一致，體現(xiàn)了研究工作的合理性。

在內(nèi)在指標(biāo)方面選擇了浸出物和小檗堿含量，浸出物反映了藥材中所含物質(zhì)的多少，可以間接反映出黃連中活性成分的含量。有研究表明，黃連中的主要成分為生物堿類，主要包含小檗堿、黃連堿、巴馬汀、藥根堿、木蘭花堿等，其中含量最高、研究最多且應(yīng)用最廣泛的是小檗堿[20-21]。2020版《中華人民共和國藥典》中也以小檗堿為指標(biāo)成分進(jìn)行含量測定，并通過一測多評(píng)法計(jì)算表小檗堿、黃連堿、巴馬汀的含量，因此后3種生物堿的含量與小檗堿間存在一定的相關(guān)性。但是有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，由于光照時(shí)間、土壤及氣候環(huán)境的差異，不同產(chǎn)地間黃連的生物堿比例也略有不同，即可能有產(chǎn)地1中的黃連堿含量高于產(chǎn)地2，但巴馬汀含量相差不多[22-24]。小檗堿與黃連的藥效作用具有高度相關(guān)性，可作為體現(xiàn)黃連內(nèi)在品質(zhì)質(zhì)量的重要指標(biāo)。因此，本研究選擇了浸出物和小檗堿作為評(píng)價(jià)黃連藥材的內(nèi)在因素。故本研究既順應(yīng)了已有的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容，同時(shí)也在黃連等級(jí)中體現(xiàn)了藥效功能的重要性。

3.2等級(jí)劃分的科學(xué)性

本研究利用多種數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法對(duì)10個(gè)分級(jí)指標(biāo)進(jìn)行逐步篩選，主成分分析法可以對(duì)數(shù)據(jù)達(dá)到降維的作用，在多指標(biāo)研究時(shí)優(yōu)選出更有價(jià)值的指標(biāo)因子;Pearson相關(guān)性分析可以得到兩變量之間的線性關(guān)系，構(gòu)建外觀性狀與內(nèi)在質(zhì)量的關(guān)聯(lián)性。使用多元統(tǒng)計(jì)方法，可以得到數(shù)據(jù)之間更多的關(guān)系，使得分析結(jié)果更具說服力和合理性。根據(jù)K-均值聚類結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)長度越長，浸出物越多，有效成分小檗堿含量也隨之增多。經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)，內(nèi)在成分較高的黃連，外形較含量低的黃連更加粗壯， 且有明顯的長度差異，說明分析所得的等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)與實(shí)際情況出入不大，結(jié)果具有較高的科學(xué)性，同時(shí)也方便日常的分級(jí)工作。本研究將黃連劃分為一等品、二等品和統(tǒng)貨共3個(gè)等級(jí)，不僅能順應(yīng)2020版《中華人民共和國藥典》黃連項(xiàng)下的描述和規(guī)定，也滿足歷代本草對(duì)黃連質(zhì)量的判斷標(biāo)準(zhǔn)，體現(xiàn)了以長度為核心的外觀性狀與內(nèi)在質(zhì)量的關(guān)聯(lián)性，同時(shí)將等級(jí)指標(biāo)進(jìn)行了量化和細(xì)分，以期在市場流通過程中能實(shí)現(xiàn)高效、準(zhǔn)確、可操作性強(qiáng)的等級(jí)評(píng)價(jià)。

3.3評(píng)價(jià)模式的可參考性

本研究從藥材品質(zhì)出發(fā)，建立符合現(xiàn)代化藥材分級(jí)的方法，相較于傳統(tǒng)的藥材商品規(guī)格等級(jí)分類而言，增加了浸出物和小檗堿含量測定為指標(biāo)成分的等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，并將能夠體現(xiàn)該藥材品質(zhì)質(zhì)量的外在性狀與內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行相關(guān)聯(lián)的等級(jí)區(qū)分，故該評(píng)價(jià)模式不僅從外觀特性上對(duì)藥材進(jìn)行了等級(jí)評(píng)價(jià)，后續(xù)可收集更多批次樣品進(jìn)行深入驗(yàn)證，這同時(shí)也在其內(nèi)在質(zhì)量差異上進(jìn)行了表征，補(bǔ)充了現(xiàn)有團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)的不足，也為后續(xù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或國家標(biāo)準(zhǔn)的建立提供依據(jù)。在未來的藥材分級(jí)過程中，可以憑借外觀特征為導(dǎo)向初步對(duì)藥材進(jìn)行分級(jí)篩選，再進(jìn)行深入的內(nèi)在指標(biāo)質(zhì)量評(píng)價(jià)，以期更加全面、準(zhǔn)確地體現(xiàn)不同等級(jí)中藥材的質(zhì)量差異。

參考文獻(xiàn)

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020：303.

[2]王巖.氟喹諾酮類藥物左氧氟沙星聯(lián)合黃連素治療細(xì)菌性痢疾的效果分析[J].中國醫(yī)藥指南，2020，18（2）：153-154.

[3] 劉慧玲，譚定英，黃敏，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子對(duì)接探討黃連治療2型糖尿病的作用機(jī)制[J].康復(fù)學(xué)報(bào)，2021，31（6）：485-494.

[4]王佳俊，陳青垚，王建，等.基于數(shù)據(jù)挖掘和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究含黃連方劑治療潰瘍性結(jié)腸炎的配伍規(guī)律及作用機(jī)制[J].中草藥，2021，52（19）：5984-5995.

[5]李建民，李華擎.黃連商品種類現(xiàn)狀考察[J].中國現(xiàn)代中藥，2017，19（10）：1476-1479.

[6]柳鑫，黃河，黃璐琦，等.黃連藥材原植物資源和市場品種調(diào)查[J].中國藥師，2014，17（10）：1691-1695.

[7]崔丹丹，曾令杰，黃嘉玲，等.基于主成分聚類和PLS回歸分析的穿心蓮質(zhì)量等級(jí)評(píng)價(jià)研究[J].中草藥，2019，50（13）：3200-3206.

[8]曹雪曉，任曉亮，王萌，等.中藥材及飲片規(guī)格等級(jí)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究進(jìn)展[J].中藥材，2021，43（2）：494-498.

[9]梁晴，周濤，江維克，等.五倍子商品規(guī)格等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究[J].中國中藥雜志，2019，44（12）：2459-2466.

[10] 嚴(yán)華，魏鋒，馬雙成.基于綜合權(quán)重分析的西洋參藥材等級(jí)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國現(xiàn)代中藥，2021，23（8）：1363-1373.AEC2C78E-E1B4-4A27-9936-26B9DBE299F8

[11]丁若雯，魏惠珍，呂尚，等.基于多元統(tǒng)計(jì)分析的車前子藥材質(zhì)量等級(jí)研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2021，38（6）：673-679.

[12]張明智，潘海金，梁維維，等.不同等級(jí)黃連飲片味覺信息表征及其與總生物堿的相關(guān)性[J].西南科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，32（3）：99-102.

[13]趙寶林，劉學(xué)醫(yī).黃連的本草考證[J].中藥材，2013，36（5）：832-835.

[14]黃璐琦，詹志來，郭蘭萍.T/CACM 1021.31-2018[S].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2018：257-263.

[15]張語凡，相樂康，王鑫，等.結(jié)合傳統(tǒng)性狀客觀化分析何首烏不同炮制方式與炮制程度的色彩色差[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2017，23（20）：1-7.

[16]屈玟珊，李林媛，戴全寬，等.不同產(chǎn)地西洋參的色彩色差分析[J].廣東化工，2018，45（5）：18-19.

[17]林華堅(jiān)，張梓豪，孟江，等.干姜及其炮制品色差值與活性成分含量的相關(guān)性研究[J].中國藥房，2020，31（10）：1197-1202.

[18]王鈺，李隆云，譚均，等.黃連生長發(fā)育及生物堿含量變化規(guī)律的研究[J].中國中藥雜志，2018，43（20）：4027-4032.

[19]陳仕江，張德利，鐘國躍，等.黃連緩釋專用肥對(duì)其產(chǎn)量、養(yǎng)分、品質(zhì)的影響研究[J].中國中藥雜志，2008，33（20）：2313-2316.

[20]王鑫喆，沈夢婷，閆鵬舉，等.黃連生物堿類活性成分與腸道菌群相互作用的研究進(jìn)展[J].中國藥房，2021，32（1）：109-115.

[21]Rauf A，Abu-Izneid T，Khalil AA，et al.Berberine as a Potential Anticancer Agent：A Comprehensive Review[J].Molecules，2021，26（23）：7368.

[22]崔燦.HPLC法鑒定不同產(chǎn)地黃連飲片中含生物堿的研究[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2017，36（14）：132.

[23]豐秀存，周蓮.不同產(chǎn)地黃連藥用成分的灰色關(guān)聯(lián)及聚類分析[J].廣東化工，2019，46（14）：13-14.

[24]馬浩，馬璇，高晗，等.不同產(chǎn)地黃連飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑制備與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2018，14（10）：26-31.

（2022-03-10收稿本文編輯：魏慶雙）

基金項(xiàng)目：四川省中央引導(dǎo)地方科技發(fā)展專項(xiàng)項(xiàng)目（2021ZYD0109）;四川省中醫(yī)藥管理局課題（2021MS183）;四川省中醫(yī)藥標(biāo)準(zhǔn)化研究項(xiàng)目（2020019）作者簡介：董兆威（1998.12—），男，碩士研究生在讀，研究方向：中藥炮制與物質(zhì)基礎(chǔ)，E-mail：1226802891@qq.com通信作者：黃勤挽（1979.10—），男，博士，教授，碩士研究生導(dǎo)師，研究方向：中藥炮制，E-mail：huangqinwan@cdutcm.edu.cnAEC2C78E-E1B4-4A27-9936-26B9DBE299F8