miR-590-3p、miR-126、miR-147a在宮頸癌演進過程中的表達變化分析*

王許平，石換麗，張利婷，趙 麗

河北省邯鄲市第一醫(yī)院：1.紡醫(yī)手術(shù)室；2.婦產(chǎn)科，河北邯鄲 056002

作為一種女性生殖系統(tǒng)上皮性惡性腫瘤，宮頸癌主要由機體宮頸上皮組織瘤變形成。宮頸癌具有較高的發(fā)病率，并且患者預(yù)后較差，據(jù)統(tǒng)計，宮頸癌發(fā)病率、病死率高居所有女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤第一位[1-2]。中年女性為宮頸癌的高發(fā)群體，我國子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率呈現(xiàn)逐年遞增趨勢，并且患者逐漸年輕化，引起廣大專家學(xué)者的關(guān)注[3-4]。宮頸癌患者主要臨床表現(xiàn)為陰道出血、排液，若患者病情得不到及時有效的控制，病情惡化，會出現(xiàn)下肢腫痛、尿頻、尿急等癥狀，嚴(yán)重威脅患者身體健康甚至生命安全[5-6]。因此對宮頸癌癥狀做到早診斷、早治療，對患者的病情治療及預(yù)后改善具有重要意義[7-8]。有研究表明，miR-590-3p、miR-126、miR-147a表達變化與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展具有密切聯(lián)系，但是關(guān)于三者表達在宮頸癌發(fā)生演進過程中的作用研究還相對較少。本研究對宮頸癌癌組織標(biāo)本miR-590-3p、miR-126、miR-147a的表達進行檢測，旨在探討miR-590-3p、miR-126、miR-147a在宮頸癌進展中的表達變化及意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年6月至2020年6月本院收治的宮頸癌患者82例，年齡45～68歲，平均(56.5±9.2)歲。TNM分期情況：Ⅰ期20例，Ⅱ期21例，Ⅲ期23例，Ⅳ期18例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況：無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移39例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移43例；浸潤情況：淺表癌49例，浸潤癌33例；病理檢查結(jié)果分析癌組織分化程度：高分化29例，中分化27例，低分化26例。本研究所有研究對象均知情同意，并經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合中國抗癌協(xié)會婦科腫瘤專業(yè)委員會對宮頸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]，均接受手術(shù)治療，且均未接受過放化療，病歷資料齊全。

排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)病歷資料不全者；(2)心、肝、腎等臟器功能障礙者；(3)非手術(shù)治療者；(4)接受過放、化療者；(5)并發(fā)其他婦科惡性腫瘤者；(6)溝通障礙者。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集、免疫組化染色 手術(shù)切除患者癌組織、距癌組織5 cm癌旁組織制作標(biāo)本，4%甲醛溶液固定、石蠟包埋，厚度3 μm，連續(xù)切片作免疫組化標(biāo)記，進行免疫組化染色。

1.2.2miR-590-3p、miR-126、miR-147a表達檢測 實時熒光定量PCR(qPCR)檢測miR-590-3p、miR-126、miR-147a表達。提取細(xì)胞總RNA，檢測RNA純度、濃度，反轉(zhuǎn)錄處理后獲得cDNA，使用Primer5.0軟件設(shè)計引物，采用2-ΔΔCt方法計算miR-590-3p、miR-126、miR-147a相對表達水平。

2 結(jié) 果

2.1miR-590-3p、miR-126、miR-147a在癌組織、癌旁組織中的表達比較 與癌旁組織比較，宮頸癌癌組織中miR-590-3p表達較高，miR-126、miR-147a表達較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1，圖1、2。

表1 miR-590-3p、miR-126、miR-147a在癌組織、癌旁組織中的表達比較

注：A為miR-590-3p在癌旁組織中的表達免疫組化染色圖；B為miR-126在癌旁組織中的表達免疫組化染色圖；C為miR-147a在癌旁組織中的表達免疫組化染色圖。圖1 miR-590-3p、miR-126、miR-147a在癌旁組織中的表達免疫組化染色圖(×40)

注：A為miR-590-3p在宮頸癌組織中的表達免疫組化染色圖；B為miR-126在宮頸癌組織中的表達免疫組化染色圖；C為miR-147a在宮頸癌組織中的表達免疫組化染色圖。圖2 miR-590-3p、miR-126、miR-147a在宮頸癌組織中的表達免疫組化染色圖(×40)

2.2miR-590-3p、miR-126、miR-147a表達與宮頸癌患者臨床特征的關(guān)系 與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者比較，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者miR-590-3p表達較高，miR-126、miR-147a表達較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與淺表癌患者比較，浸潤癌患者miR-590-3p表達較高，miR-126、miR-147a表達較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與宮頸癌Ⅰ～Ⅱ期患者比較，宮頸癌Ⅲ～Ⅳ期患者miR-590-3p表達較高，miR-126、miR-147a表達較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與宮頸癌高分化患者比較，宮頸癌中分化患者miR-590-3p表達較高，miR-126、miR-147a表達較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與宮頸癌中分化患者比較，宮頸癌低分化患者miR-590-3p表達較高，miR-126、miR-147a表達較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 miR-590-3p、miR-126、miR-147a表達與宮頸癌患者臨床特征的關(guān)系

續(xù)表2 miR-590-3p、miR-126、miR-147a表達與宮頸癌患者臨床特征的關(guān)系

3 討 論

有研究表示，宮頸癌的發(fā)病可能與性行為、分娩情況、病毒感染及其他因素等有關(guān)，但是目前臨床醫(yī)學(xué)尚未將宮頸癌發(fā)病機制研究透徹[10-13]。有學(xué)者通過分子生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)等途徑對宮頸癌發(fā)病機制進行研究，miRNA在大多數(shù)生物中大量存在，miRNA與機體炎癥反應(yīng)、免疫狀態(tài)、微生物感染等多種病理學(xué)變化具有密切關(guān)系，有學(xué)者在研究中表示，miRNA與機體組織細(xì)胞分化、凋亡、神經(jīng)元發(fā)育、脂肪代謝等生理過程密切相關(guān)，miRNA同時具有組織特異性、穩(wěn)定性、保守性等特點，腫瘤組織的發(fā)生發(fā)展與miRNA具有密切關(guān)系，在腫瘤組織發(fā)展過程中，miRNA具有抑癌、促癌的特性，是臨床常用的診斷腫瘤的標(biāo)志物[14-16]。

miR-590-3p是miRNA家族的重要成員，在結(jié)直腸癌、喉癌、胃癌、膽囊管惡性腫瘤中均呈異常表達，有研究表示，miR-590-3p在不同的惡性腫瘤中作用不一，可作為抑癌或促癌基因在惡性腫瘤發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[17-18]，但是關(guān)于miR-590-3p在宮頸癌中表達變化的研究報道較少。本研究結(jié)果顯示，相比癌旁組織，宮頸癌癌組織中miR-590-3p表達較高，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Ⅲ～Ⅳ期、低分化的宮頸癌組織中miR-590-3p表達較高，說明miR-590-3p表達變化與癌組織淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、病理分期、分化程度等臨床特征具有一定的相關(guān)性，其參與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。因此，本研究認(rèn)為miR-590-3p能夠作為宮頸癌潛在的診斷指標(biāo)和治療靶點，為宮頸癌的診斷、臨床治療提供新的研究方向。

miR-126是miRNA家族中重要的一種抑癌基因，在乳腺癌、胃癌等惡性腫瘤中均呈現(xiàn)異常低表達[19-20]，有研究表示，miR-126在宮頸癌中表達較低，其表達變化與宮頸癌細(xì)胞增殖能力具有密切關(guān)系[21]。本研究結(jié)果顯示，相比癌旁組織，宮頸癌癌組織中miR-126表達較低，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Ⅲ～Ⅳ期、低分化宮頸癌組織中miR-126表達較低，說明miR-126表達變化與癌組織淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、病理分期、分化程度等臨床特征具有一定的相關(guān)性，其在宮頸癌發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。因此，本研究認(rèn)為miR-126可作為宮頸癌潛在的診斷指標(biāo)和治療靶點，檢測miR-126表達對宮頸癌的診斷、臨床治療具有重要意義。

miR-147a作為一種抑癌基因，在多種惡性腫瘤中呈現(xiàn)異常表達[22]。李圃等[23]在研究中表示，miR-147a在宮頸癌中表達較低，上調(diào)miR-147a表達能夠?qū)m頸癌細(xì)胞增殖、侵襲起到抑制作用。本研究結(jié)果顯示，相比癌旁組織，宮頸癌癌組織中miR-147a表達較低，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Ⅲ～Ⅳ期、低分化宮頸癌組織中miR-147a表達較低，說明miR-147a表達變化與癌組織淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、病理分期、分化程度等臨床特征具有一定的相關(guān)性，其參與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。因此，本研究認(rèn)為miR-147a能夠作為宮頸癌潛在的診斷指標(biāo)和治療靶點，為宮頸癌癥狀的診斷、臨床治療提供新的研究方向。

本研究也存在一定的局限性，本研究選取病例數(shù)較少，且并未對患者進行一定時間的隨訪，未能對miR-590-3p、miR-126、miR-147a表達與患者預(yù)后的相關(guān)性進行研究。下一步將增加樣本量，對患者進行隨訪，研究miR-590-3p、miR-126、miR-147a表達與宮頸癌患者預(yù)后的相關(guān)性。

綜上所述，miR-590-3p、miR-126、miR-147a在宮頸癌中表達呈現(xiàn)明顯異常，且miR-590-3p、miR-126、miR-147a表達變化與有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤情況、TNM分期、分化程度有關(guān)，可能共同參與宮頸癌發(fā)展演進過程。