鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方的安全藥理學(xué)研究

任麗君，顧 靜，侍雯婧，王瑞娜，張曉芳，陳基快 （海軍軍醫(yī)大學(xué)：. 海軍醫(yī)學(xué)系衛(wèi)生毒理學(xué)教研室, . 藥學(xué)系軍特藥研究中心, 上海 200433）

暈動癥是由于機(jī)體受到各種運(yùn)動刺激（如乘車、乘船 、乘坐飛行器等）所引發(fā)的一系列綜合征，主要表現(xiàn)為頭暈、面色蒼白、惡心、嘔吐、出冷汗等前庭和自主神經(jīng)反應(yīng)為主的癥狀[1]。目前臨床上抗組胺藥物廣泛用于暈動癥的治療，可以緩解暈動癥狀，但不良反應(yīng)較大[2]。隨著人們生活質(zhì)量的提高和工作的需要，發(fā)現(xiàn)療效好、不良反應(yīng)少的抗暈動癥藥物就顯得尤為重要。鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方是由鹽酸苯海拉明和咖啡因進(jìn)行有效質(zhì)量配比組成的復(fù)合物，可以減輕鹽酸苯海拉明在治療暈動癥時引起的不良反應(yīng)和不適感。

為了明確鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方在治療劑量或治療劑量以上的暴露水平時，潛在不期望出現(xiàn)的對生理功能的不良反應(yīng)[3]。本實驗對該復(fù)方進(jìn)行了安全藥理學(xué)研究，主要觀察該復(fù)方對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)及Beagle 犬心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)的影響，為后續(xù)進(jìn)一步的臨床試驗和臨床應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物

SPF 級ICR 小鼠，共60 只，雌雄各半，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK(滬) 2018-0006；普通級Beagle 犬36 條，雌雄各半，購自上海甲干生物科技有限公司，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK(滬) 2015-0005；小鼠飼養(yǎng)于SPF 級動物房，Beagle 犬飼養(yǎng)于普通級動物房，實驗動物使用許可證號：SYXK（滬）2017-0004。

1.1.2 藥物與試劑

鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方（鹽酸苯海拉明：啟東東岳藥業(yè)有限公司，含量：100.1%，批號：DH-201812104；咖啡因：山東新華制藥股份有限公司，含量：99.8%，批號：16112122），配制受試物時鹽酸苯海拉明、咖啡因按1: 2.4 的比例混勻；戊巴比妥鈉（MERCK 公司，批號：1063180500）。

1.1.3 主要儀器

ZH-ZPT 小動物自發(fā)活動檢測儀（淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司）；BL-420E 生物機(jī)能實驗系統(tǒng)、BL-420S 生物機(jī)能實驗系統(tǒng)（成都泰盟科技有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 小鼠爬桿試驗

ICR 小鼠60 只，雌雄各半。取基部固定，高為76.2 cm，直徑為1.27 cm 的光滑金屬桿，將小鼠放于桿頂，讓其自行爬下，預(yù)選能自行爬下的動物進(jìn)行試驗。雌雄分別按體重隨機(jī)分為6 個組，分別為溶媒對照組(超純水)、復(fù)方低劑量組(51 mg/kg)、復(fù)方中劑量組(102 mg/kg)、復(fù)方高劑量組(204 mg/kg)、鹽酸苯海拉明組(60 mg/kg)和咖啡因組(144 mg/kg)。灌胃給予受試物，給藥體積均為15 ml/kg。分別于給藥前及給藥后0.5、1、2、3、4 h 對小鼠的爬桿能力進(jìn)行評級。分級標(biāo)準(zhǔn)：0 級：一步一步向下爬；1 級：向下滑行；2 級：不能抓住棒；3 級：翻正反射消失。在0～3 級間又設(shè)0.5 級、1.5 級和2.5 級。

1.2.2 Beagle 犬心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)實驗

選取健康的Beagle 犬36 條，雌雄各半，分別按體重隨機(jī)分6 個組，分別為溶媒對照組(超純水)、復(fù)方低劑量組(雄14.2 mg/kg，雌5.66 mg/kg)、復(fù)方中劑量組(雄28.3 mg/kg，雌14.2 mg/kg)、復(fù)方高劑量組(雄56.6 mg/kg，雌28.3 mg/kg)、苯海拉明組(雄16.6 mg/kg，雌8.3 mg/kg)和咖啡因組(雄40.0 mg/kg，雌20.0 mg/kg)。灌胃給予受試物，給藥體積均為5 ml/kg。給藥前，將Beagle 犬以3%戊巴比妥鈉溶液靜脈注射麻醉，仰臥位固定四肢和頭部，股動脈插管，通過BL-420E/BL-420S 生物機(jī)能實驗系統(tǒng)采集信息。觀察給藥前、給藥后即刻，以及0.25、0.5、1、2、3 h 受試物對犬收縮壓、舒張壓、平均動脈壓、心率、ECG（P 波電壓、R 波電壓、T 波電壓、QRS 時間、PR 間期、QT 間期）、呼吸頻率和幅度的影響。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)處理

實驗數(shù)據(jù)均采用（xˉ±s）表示，采用Graph Pad 5.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對小鼠爬桿能力的影響

各劑量組小鼠給藥后一般狀態(tài)未見明顯異常，未出現(xiàn)小鼠死亡。與溶媒對照組相比，以及與同組給藥前相比，給藥后各劑量組各時間點(diǎn)小鼠爬桿能力均未見明顯差異（P＞0.05）。初步表明鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對小鼠爬桿能力無明顯影響，結(jié)果見表1。

表1 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對小鼠爬桿能力的影響( ±s，n=10)

表1 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對小鼠爬桿能力的影響( ±s，n=10)

組別 給藥前給藥后（t/h）0.5 1 2 3 4復(fù)方低劑量組 0.30±0.26 0.35±0.24 0.30±0.26 0.35±0.24 0.30±0.26 0.35±0.24復(fù)方中劑量組 0.25±0.26 0.25±0.26 0.30±0.26 0.30±0.26 0.25±0.26 0.15±0.24復(fù)方高劑量組 0.30±0.26 0.45±0.44 0.40± 0.32 0.40±0.32 0.35±0.34 0.25±0.26苯海拉明組 0.30±0.26 0.25±0.26 0.30±0.26 0.30±0.26 0.30±0.26 0.20±0.26咖啡因組 0.35±0.24 0.30±0.26 0.30±0.26 0.40±0.32 0.25±0.26 0.30±0.26

2.2 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬心電指標(biāo)的影響

給藥后，各劑量組在各時間點(diǎn)與溶媒對照組相比，以及與同組給藥前相比，Beagle 犬心率、P 波電壓、R 波電壓、T 波電壓、QRS 時間、PR 間期、QT 間期無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。初步表明鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬心電指標(biāo)無明顯影響，心電檢測結(jié)果見表2。

表2 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬心電指標(biāo)的影響( ±s，n=6)

表2 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬心電指標(biāo)的影響( ±s，n=6)

組別 檢測項目 給藥前給藥后（t/min）即刻 15 30 60 120 180溶媒對照組 心率（次/min） 176.0±19.0 174.7±19.2 172.3±14.0 170.2±14.1 161.7±21.3 158.5±44.3 145.2±42.3 P波（mV） 0.16±0.09 0.16±0.15 0.18±0.14 0.19±0.14 0.2±0.15 0.14±0.12 0.15±0.13 R波（mV） 0.79±0.33 0.79±0.38 0.86±0.44 0.84±0.37 0.91±0.43 0.81±0.43 0.78±0.40 T波（mV） 0.13±0.08 0.09±0.07 0.11±0.1 0.12±0.09 0.16±0.09 0.1±0.02 0.11±0.06 QRS間期（ms） 98.2±9.6 92.0±27 92.7±20.8 99.2±24.1 99.3±19.2 95.3±13.3 98.0±19.9 PR間期（ms） 58.7±15.7 56.3±12.0 57.2±11.2 57.3±8.5 56.7±8.5 54.0±12.9 62.5±12.2 QT間期（ms） 209.3±27.7 212.5±21.4 223.2±12.4 227.3±8.0 212.2±18.0 210.5±9.4 229.2±16.1復(fù)方低劑量組 心率（次/min） 155.5±35.4 152±34.3 149.8±43.2 157.2±43.4 156±43.1 164±16.3 157.2±16.2 P波（mV） 0.19±0.11 0.19±0.09 0.17±0.10 0.17±0.09 0.16±0.07 0.19±0.14 0.21±0.11 R波（mV） 0.97±0.55 0.98±0.55 1.02±0.6 0.99±0.59 0.96±0.59 1.06±0.81 1.07±0.69 T波（mV） 0.16±0.09 0.17±0.08 0.16±0.07 0.15±0.09 0.17±0.1 0.15±0.07 0.19±0.11 QRS間期（ms） 92.8±11.6 87.8±12.0 90.0±13.3 87.7±13.5 90.3±18.4 87.0±10.5 89.8±17.7 PR間期（ms） 66.7±30.8 67.2±21.0 74.0±39.4 68.7±28.8 63.3±23.6 64.8±22.1 61.3±13.8 QT間期（ms） 214.0±7.8 221.7±14.8 224.3±13.2 206.8±17.8 209.7±20.8 207.2±13.4 202.8±19.5復(fù)方中劑量組 心率（次/min） 182.0±26.4 181.5±25.9 180.8±24.2 182.8±26.9 181.3±30.5 185.3±30.7 186.2±25.5 P波（mV） 0.16±0.08 0.16±0.10 0.17±0.10 0.16±0.10 0.15±0.09 0.16±0.10 0.15±0.11 R波（mV） 0.62±0.34 0.59±0.32 0.61±0.3 0.59±0.36 0.61±0.36 0.53±0.3 0.6±0.37 T波（mV） 0.12±0.08 0.13±0.07 0.13±0.07 0.16±0.13 0.14±0.08 0.11±0.07 0.12±0.12 QRS間期（ms） 78.7±15.1 76.8±18.4 80.2±13.4 81.7±12.4 77.0±10.3 78.3±11.9 81.5±8.0 PR間期（ms） 51.8±15.1 53.7±10.3 53.8±12.2 53.3±26.1 54.3±20.3 45.8±16.2 48.0±17.0 QT間期（ms） 201.3±21 199.8±19.6 203±17.1 197.7±30.7 187.7±26.7 197.2±12 201.8±30.2復(fù)方高劑量組 心率（次/min） 177.2±36.9 174.2±33.8 170.2±29.7 170.3±30.5 173.7±31.4 171.5±27.7 178.3±28.6 P波（mV） 0.29±0.14 0.28±0.17 0.27±0.18 0.27±0.14 0.31±0.21 0.33±0.22 0.34±0.25 R波（mV） 0.99±0.69 0.96±0.63 0.9±0.62 1.01±0.67 0.99±0.69 1.04±0.74 1.06±0.77 T波（mV） 0.15±0.08 0.16±0.09 0.17±0.09 0.17±0.12 0.15±0.09 0.17±0.08 0.16±0.11 QRS間期（ms） 80.8±9.4 79.5±14.8 84.0±12.6 82.7±11.1 82.3±18.4 82.8±17.3 82.8±10.4 PR間期（ms） 65±18.8 61.2±22.8 68.8±24.3 67.7±25.0 69.7±23.2 69.8±26.1 66.8±19.4 QT間期（ms） 193.3±23.4 198.5±31.6 188.3±26.6 201.2±22.1 201.2±19.6 195.0±22.8 193.0±27.8苯海拉明組 心率（次/min） 155.5±6.1 155.7±7.3 163.8±24.8 167.0±30.9 157.3±16.4 147.0±28.5 147.2±45.6 P波（mV） 0.16±0.12 0.16±0.12 0.17±0.10 0.18±0.12 0.18±0.13 0.15±0.10 0.15±0.08 R波（mV） 0.75±0.54 0.77±0.56 0.74±0.54 0.76±0.63 0.79±0.64 0.81±0.61 0.79±0.55 T波（mV） 0.12±0.08 0.11±0.08 0.10±0.06 0.10±0.06 0.11±0.08 0.12±0.06 0.10±0.06

2.3 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬血壓的影響

給藥后，各劑量組在各時間點(diǎn)與溶媒對照組相比，以及與自身給藥前相比，Beagle 犬收縮壓、舒張壓、平均動脈壓無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。初步表明鹽酸苯海拉明咖啡因復(fù)方對Beagle 犬血壓無明顯影響，血壓檢測結(jié)果見表3。

表3 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬血壓的影響( ±s，n=6)

表3 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬血壓的影響( ±s，n=6)

給藥后（t/min）即刻 15 30 60 120 180溶媒對照組 收縮壓（mmHg） 172.0±27.5 171.0±27.8 176.4±22.4 180.2±21.8 176.4±21.7 176.0±25.3 180.6±21.6舒張壓（mmHg） 115.2±23.1 114.6±23.8 116.6±20.3 119.3±19.0 124.6±21.3 113.5±20.9 116.5±18.7平均壓（mmHg） 134.1±23.8 133.4±24.5 136.5±20.5 139.6±19.0 141.9±18.5 134.3±21.4 137.8±19.0復(fù)方低劑量組 收縮壓（mmHg） 162.4±22.3 159.7±22.2 168.7±31.7 172.0±24.3 177.4±24.7 182.2±15.7 181.3±16.6舒張壓（mmHg） 110.9±9.9 108.5±11.3 112.1±13.9 117.1±11.3 120.4±12.0 126.8±11.7 127.6±12.7平均壓（mmHg） 128.1±13.8 125.5±14.7 131.0±19.3 135.4±15.4 139.4±15.9 145.3±12.4 145.5±13.1復(fù)方中劑量組 收縮壓（mmHg） 198.5±28.7 198.9±25.0 205.0±28.3 202.9±30.0 199.9±31.4 201.9±35.4 209.6±25.5舒張壓（mmHg） 123.8±16.7 125.4±16.8 125.3±16.1 126.6±19.6 123.8±20.7 131.2±18.2 132.7±10.9平均壓（mmHg） 148.7±19.5 149.9±18.0 151.9±18.9 152.1±21.9 149.2±22.5 154.8±22.8 158.3±14.6復(fù)方高劑量組 收縮壓（mmHg） 180.5±15.4 179.8±16.0 179.7±16.5 181.9±18.4 185.0±19.4 178.2±16.1 184.1±20.2舒張壓（mmHg） 123.1±15.5 124.1±17.3 127.8±20.3 128.5±20.2 129.7±21.6 126.4±22.6 135.4±20.9平均壓（mmHg） 142.2±13.6 142.7±15.3 145.1±18.0 146.3±18.0 148.1±18.6 143.6±18.5 151.6±18.4苯海拉明組 收縮壓（mmHg） 161.5±47.6 163.7±47.8 170.5±42.9 183.9±47.1 193.0±39.2 187.1±33.7 182.5±41.2舒張壓（mmHg） 107.4±29.4 107.2±25.6 113.3±28.5 118.6±28.7 120.4±24.1 125.7±30.1 112.4±26.6平均壓（mmHg） 125.4±35.3 126.0±32.9 132.4±33.0 140.4±34.8 144.6±28.4 146.2±30.7 135.8±31.3咖啡因組 收縮壓（mmHg） 189.0±36.7 187.7±34.8 193.9±34.4 201.8±34.6 208.5±40.2 204.6±42.3 204.7±44.5舒張壓（mmHg） 124.5±18.2 123.3±17.6 130.6±14.7 132.3±17.7 139.4±24.2 136.1±21.4 133.0±24.3平均壓（mmHg） 146.0±24.7 144.8±23.0 151.7±20.5 20.73±2.99 155.5±22.4 162.4±28.7 156.9±30.3組別 檢測項目 給藥前

2.4 鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬呼吸的影響

與溶媒對照組相比，以及與自身給藥前相比，給藥后各劑量組各時間點(diǎn)Beagle 犬的呼吸頻率和呼吸幅度均無明顯差異。初步表明鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬呼吸系統(tǒng)無明顯影響。呼吸檢測指標(biāo)結(jié)果見表4。

表4 鹽酸苯海拉明咖啡因復(fù)方對Beagle 犬呼吸的影響( ±s，n=6)

表4 鹽酸苯海拉明咖啡因復(fù)方對Beagle 犬呼吸的影響( ±s，n=6)

給藥后（t/min）即刻 15 30 60 120 180溶媒對照組 呼吸頻率（次/min） 18.7±2.9 18.4±3.4 15.6±4.8 16.0±5.5 17.4±4.3 14.8±4.1 14.4±6.7呼吸幅度（g） 9.77±1.62 9.77±2.51 10.67±2.05 11.02±2.48 8.77±1.67 9.79±2.03 9.23±3.03復(fù)方低劑量組 呼吸頻率（次/min） 14.7±4.2 14.6±3.5 17.9±9.6 16.7±9.5 15.2±3.6 14.7±2.3 14.3±3.1呼吸幅度（g） 10.63±1.86 10.38±1.44 10.37±3.13 10.97±1.45 11.21±1.83 10.57±2.45 10.71±2.03復(fù)方中劑量組 呼吸頻率（次/min） 20.9±6.0 21±5.6 19.7±6.0 19.5±4.1 18.8±3.9 20.3±5.9 20.3±6.2呼吸幅度（g） 9.16±2.67 8.55±2.28 8.41±1.90 9.16±2.62 7.51±1.81 8.56±1.50 8.99±1.65復(fù)方高劑量組 呼吸頻率（次/min） 22.2±7.6 20.6±5.7 22.7±5.4 20.1±2.5 22.2±6.6 22±5.9 20.3±5.3呼吸幅度（g） 10.6±2.07 10.67±1.11 10.59±1.27 10.29±2.67 10.82±1.69 8.95±2.04 10.52±1.47苯海拉明組 呼吸頻率（次/min） 11.4±4.0 13.0±4.3 11.2±2.8 13.0±4.6 13.9±5.9 15.5±6.0 15.3±6.2呼吸幅度（g） 10.75±1.96 10.41±1.55 9.95±1.47 10.35±1.54 11.54±2.26 9.62±1.70 9.54±2.39咖啡因組 呼吸頻率（次/min） 14.6±3.0 14.2±2.9 12.9±2.1 14.7±4.4 16.9±4.2 16.1±5.4 15.2±5.0呼吸幅度（g） 9.52±2.55 10.25±1.57 10.69±0.98 10.12±1.4 10.97±2.08 9.46±1.30 9.24±1.35組別 檢測項目 給藥前

(續(xù)表2)

3 討論

鹽酸苯海拉明屬抗組胺藥物，有抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用，通過抑制前庭反應(yīng)的敏感性，發(fā)揮抗暈動癥的效果，有效降低患者的焦慮感、煩躁感，起到鎮(zhèn)靜的作用，同時也有抗膽堿能作用，緩解腦血管痙攣，改善腦血管循環(huán)，達(dá)到止吐的效果[4-7]，但會引起嗜睡、疲乏、注意力渙散、記憶力下降等不良反應(yīng)[8]?？Х纫?qū)偌谆S嘌呤類藥物，具有拮抗腺苷受體的作用，可有效的刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)，提高機(jī)體對二氧化碳的敏感性，興奮呼吸中樞[9-10]。鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方是一種由鹽酸苯海拉明和咖啡因進(jìn)行有效質(zhì)量配比組成的復(fù)合物，該配比是根據(jù)前期大小鼠藥理學(xué)及藥效學(xué)多次試驗結(jié)果，確定了該復(fù)方的配比為鹽酸苯海拉明與咖啡因之比為1:2.4，在鹽酸苯海拉明發(fā)揮抗暈動癥效果的同時利用咖啡因興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用，改善鹽酸苯海拉明在對抗暈動癥時所引起的不良反應(yīng)，為臨床上暈動癥的防治提供一個新的治療方法和思路，具有很好的使用價值和應(yīng)用前景。

本實驗對鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方進(jìn)行安全藥理學(xué)研究，觀察了該復(fù)方對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)及Beagle犬心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)的影響。結(jié)果表明小鼠單次灌胃給予鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方（鹽酸苯海拉明與咖啡因之比為1∶2.4）給藥劑量在51、102、204 mg/kg 時，對小鼠的爬桿能力無明顯影響，提示該復(fù)方對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)無明顯作用。

前期試驗結(jié)果顯示，雌性和雄性Beagle 犬對受試物敏感性不一致（預(yù)實驗：雄性，鹽酸苯海拉明/咖啡因16.6 和40 mg/kg；雌性，鹽酸苯海拉明/咖啡因8.3 和20 mg/kg），重復(fù)灌胃給予受試物4 周后均出現(xiàn)毒性反應(yīng)。因此，實驗劑量設(shè)計時，雌雄動物給予不同劑量。Beagle 犬單次灌胃給予同上比例復(fù)方，給藥劑量雄性為14.2、28.3、56.6 mg/kg、雌性為5.66、14.2、28.3 mg/kg 時，對Beagle 犬收縮壓、舒張壓、平均動脈壓、心率、P 波電壓、R 波電壓、T 波電壓、QRS 時間、PR 間期、QT 間期、呼吸頻率和幅度無明顯影響，提示鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對Beagle 犬的心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)無明顯作用。

在本實驗條件下，單次灌胃給予鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方對實驗動物神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)無明顯影響，提示鹽酸苯海拉明/咖啡因復(fù)方具有較高的安全性。