趙樹(shù)強(qiáng),張麗琴,張玲霞
(山西醫(yī)科大學(xué)附屬汾陽(yáng)醫(yī)院檢驗(yàn)科 山西 汾陽(yáng) 032200)
病毒感染已成為當(dāng)前危害社會(huì)公共安全的重大因素,很多病毒通過(guò)飛沫、接觸傳播。大多數(shù)病毒對(duì)紫外線和熱敏感,56 ℃,30 min 也可被有效滅活。當(dāng)機(jī)體感染病毒時(shí),患者可出現(xiàn)肝酶、乳酸脫氫酶、肌酶和肌紅蛋白、肌鈣蛋白等指標(biāo)增高,上述指標(biāo)可對(duì)臨床提供重要的診療幫助,尤其是急重癥患者,更是不可缺少。當(dāng)患者標(biāo)本運(yùn)送到檢驗(yàn)科后,為避免接觸標(biāo)本引起的感染,首先用75%乙醇對(duì)裝有標(biāo)本的密封袋進(jìn)行噴灑消毒,在生物安全柜內(nèi)對(duì)標(biāo)本外表進(jìn)行75%乙醇二次消毒,然后進(jìn)行56 ℃,30 min 滅活。但有些項(xiàng)目不適宜上述滅活方法,如肝酶、肌酶、肌紅蛋白(myoglobin, MYO)、c-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein, CRP)、降鈣素原(procalcitonin, PCT)、血細(xì)胞分析、血?dú)夥治觥 二聚體、血沉等指標(biāo)。為減少工作人員因接觸標(biāo)本而被感染的概率。本研究采用75%乙醇噴灑消毒,紫外線二次消毒標(biāo)本的模式,通過(guò)研究紫外線消毒標(biāo)本前后對(duì)上述指標(biāo)的影響,建立經(jīng)紫外線消毒標(biāo)本的工作模式,以彌補(bǔ)熱滅活的不足,為傳染性標(biāo)本的安全檢測(cè)提供理論依據(jù),現(xiàn)報(bào)道如下。
選取2021 年4 月—9 月在山西醫(yī)科大學(xué)附屬汾陽(yáng)醫(yī)院住院的患者標(biāo)本(模擬有傳染性的標(biāo)本)40 例,每例受檢對(duì)象分別采集兩份標(biāo)本,受檢對(duì)象年齡、性別平均分配。納入標(biāo)準(zhǔn):①無(wú)黃疸、溶血、脂血患者;②知情同意;③結(jié)果盡可能覆蓋檢測(cè)項(xiàng)目的線性范圍。
(1)試劑與儀器:采用羅氏cobas e601 全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)PCT、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB, CKMB)、MYO,采用羅氏cobas c702 全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)CRP、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase, AST),所有項(xiàng)目均保證當(dāng)日儀器狀態(tài)穩(wěn)定,檢測(cè)當(dāng)日質(zhì)控在控。采用BIOBASE 生物安全柜內(nèi)置紫外線燈照射標(biāo)本。(濕度為26%,溫度為23 ℃,強(qiáng)度為100 W/cm,標(biāo)本與紫外線燈的距離不遠(yuǎn)于40 cm)。(2)檢測(cè)方法:空腹采集干燥管靜脈血4 mL,每位受檢對(duì)象采集兩份,分為兩組:紫外線組和對(duì)照組。紫外線組:使用75%乙醇對(duì)標(biāo)本進(jìn)行噴灑消毒,經(jīng)紫外線消毒1 h后以3 600 r/min離心10 min,由工作經(jīng)驗(yàn)豐富、責(zé)任心強(qiáng)的工作人員上機(jī)檢測(cè)。對(duì)照組:將另一份標(biāo)本使用75%乙醇對(duì)標(biāo)本進(jìn)行噴灑消毒,放置1 h 后與紫外線組標(biāo)本同時(shí)離心,盡可能使兩組標(biāo)本保持相同的條件,儀器檢測(cè)相應(yīng)指標(biāo)。
觀察并比較照射前后患者M(jìn)YO、CRP、PCT、ALT、CKMB、AST 的表達(dá)水平。
照射前后,MYO 的表達(dá)水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(>0.05);CRP、PCT、ALT、CKMB、AST 水平均顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(<0.05)。見(jiàn)表1。
表1 紫外線照射前后各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果(±s)
Bland-Altman 分析顯示:CRP、PCT、CKMB、AST、ALT 在照射前后的檢測(cè)偏差均在95%的區(qū)間范圍內(nèi),上述結(jié)果具有臨床可接受一致性見(jiàn)圖1,分析結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 Bland-Altman 一致性分析結(jié)果
圖1 部分檢測(cè)指標(biāo)紫外線照射前后的Bland-Altman 一致性分析
利用直線相關(guān)回歸分析,對(duì)CRP、PCT、CKMB、AST、ALT 照射前后的結(jié)果進(jìn)行校正,R值均>0.99,得到相應(yīng)的回歸方程,通過(guò)回歸方程校正可得到具有參考價(jià)值的結(jié)果見(jiàn)圖2,分析結(jié)果見(jiàn)表3。
圖2 部分檢測(cè)指標(biāo)紫外線照射前后水平散點(diǎn)圖
表3 紫外線照射前后部分檢測(cè)指標(biāo)的校正
突發(fā)公共衛(wèi)生事件嚴(yán)重威脅世界人民的人身安全。如何阻止病原體通過(guò)呼吸道飛沫和密切接觸傳播,將是世界各國(guó)共同面對(duì)的課題。作為檢驗(yàn)人員,做好傳染性標(biāo)本的防護(hù)工作將顯得尤為重要。有研究表明,亞甲藍(lán)/光化學(xué)法可滅活血漿中的SARS 冠狀病毒,但該方法需要特殊的儀器,不適合基層試驗(yàn)室使用。此前,國(guó)內(nèi)外已有許多關(guān)于熱滅活對(duì)生化指標(biāo)影響因素的研究,上述研究表明,熱滅活易使外周血中的酶類(lèi)活性下降,尤其是對(duì)熱敏感的項(xiàng)目。本研究分析了紫外線照射前后,臨床常用炎癥指標(biāo)(MYO、CRP、PCT、CKMB、ALT、AST)的表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)紫外線照射前后對(duì)MYO 的檢測(cè)無(wú)影響,而對(duì)CRP、PCT、CKMB、ALT、AST 的檢測(cè)結(jié)果比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(<0.05)??赡芘c紫外線照射破壞了某些指標(biāo)的蛋白空間結(jié)構(gòu),封閉了其檢測(cè)位點(diǎn),從而使其結(jié)果降低有關(guān),與李丹等研究結(jié)果基本一致。上述指標(biāo)經(jīng)一致性、相關(guān)性研究分析,在紫外線照射前后具有臨床可接受一致性和相關(guān)性。通過(guò)運(yùn)用回歸方程,可將照射后結(jié)果校正使用,使其仍具有臨床參考價(jià)值。
本研究通過(guò)對(duì)模擬的傳染性標(biāo)本進(jìn)行紫外線消毒,可以在不摘除試管帽的情況下對(duì)采血管外表進(jìn)行消毒,保證了接觸采血管時(shí)的生物安全性,使病毒在滅活前處于封閉狀態(tài),更大程度的避免了病原體的擴(kuò)散,為今后傳染性標(biāo)本的生物安全處理提供了理論依據(jù)。本研究不足之處在于標(biāo)本量相對(duì)不足和檢測(cè)指標(biāo)較少,紫外線的消毒效果與許多因素有關(guān),而本研究中僅僅在生物安全柜的紫外線燈管下照射,故尚需進(jìn)一步改進(jìn)。此外,由于各實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)儀器的測(cè)定原理不同,不同的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自身的情況進(jìn)行分析評(píng)估。