藏羊同時(shí)分點(diǎn)注射口蹄疫和小反芻獸疫兩種疫苗抗體效價(jià)檢測(cè)結(jié)果比對(duì)研究

周海軍，楊 耀，后雙喜，楊 非

(碌曲縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 碌曲 747200)

藏羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)與廣大藏區(qū)農(nóng)牧民群眾生產(chǎn)生活息息相關(guān)，藏羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展對(duì)藏區(qū)的社會(huì)進(jìn)步，經(jīng)濟(jì)發(fā)展起著舉足輕重的作用，特別是在脫貧攻堅(jiān)期，產(chǎn)業(yè)發(fā)展、產(chǎn)業(yè)脫貧、增加農(nóng)牧民收入起到不可替代的作用。提高藏羊養(yǎng)殖效率，防制藏羊各類疫病的發(fā)生是養(yǎng)羊業(yè)的重要環(huán)節(jié)。免疫接種是預(yù)防藏羊疫病的主要措施之一；但藏區(qū)藏羊養(yǎng)殖大多數(shù)以粗放放養(yǎng)模式為主，養(yǎng)殖區(qū)域分散、飼養(yǎng)設(shè)施簡(jiǎn)陋、勞動(dòng)力有限、加之藏羊性情狂野等因素給疫苗接種帶來(lái)了諸多不便，且疫苗種類多，注射周期長(zhǎng)。如：甘南藏族自治州碌曲縣藏羊共注射口蹄疫、小反芻獸疫、包蟲(chóng)病(間隔28天二免)、羊梭菌病、羊痘等5種疫苗共6次免疫注射，每次注射間隔15 d，全部注射完需三個(gè)月。為提高免疫效率，縮短疫苗注射周期，筆者與碌曲縣動(dòng)物疫控中心于2020年4月2日探索開(kāi)展了同時(shí)注射口蹄疫和小反芻獸疫疫苗試驗(yàn)研究工作。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

選擇碌曲縣西倉(cāng)鎮(zhèn)跟薩村村民周瓜家羊群，此羊群以放牧為主的健康藏羊群。

1.2 疫苗

注射疫苗為中農(nóng)威特畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗(O/HB/HK/99株+AF/72株)生產(chǎn)批號(hào)為D191110J；新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的小反芻獸疫(Clone9株)生產(chǎn)批號(hào)為2018008-1。

1.3 接種疫苗準(zhǔn)備

免疫接種前，查看使用疫苗包裝、確定包裝完好、無(wú)破損；查看疫苗的生產(chǎn)時(shí)間、生產(chǎn)批號(hào)、有效期、確定疫苗在有效期內(nèi)；查看疫苗性狀，確定疫苗無(wú)分層、腐敗、渾濁等異常情況。

使用疫苗提前取出在室溫條件下放置2 h或者在35℃溫水中放15 min進(jìn)行回溫處理，并輕輕搖動(dòng)，充分混勻。

1.4 試驗(yàn)免疫羊只觀察

正式免疫注射前要檢查試驗(yàn)羊群健康狀況，主要向養(yǎng)殖戶了解羊只的飲食、飲水、免疫等情況；向養(yǎng)殖戶了解周邊畜禽發(fā)病或死亡情況；檢查羊只精神、食欲、行為、體溫等臨床特征，確定健康狀況；查看羊只免疫證明和標(biāo)識(shí)，核實(shí)存欄羊只免疫狀況。

2 試驗(yàn)方法

2.1 實(shí)驗(yàn)羊只分組

從羊群中選擇體質(zhì)良好的羊只并隨機(jī)進(jìn)行分組，每組羊只不分年齡、公母，實(shí)驗(yàn)組50只，對(duì)照1組50只，對(duì)照2組50只，三組羊只分別用黑、紅、藍(lán)三種打號(hào)筆進(jìn)行區(qū)分并混群放牧。

2.2 疫苗注射方法

試驗(yàn)組羊只一次分點(diǎn)注射小反芻獸疫疫苗，口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗；對(duì)照一組注射小反芻獸疫疫苗；對(duì)照二組注射口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗。具體注射時(shí)間及劑量見(jiàn)表1。

表1 疫苗注射時(shí)間及劑量一覽表

3 免疫效果評(píng)價(jià)

3.1 臨床觀察

注射疫苗后，對(duì)試驗(yàn)羊進(jìn)行3 d的臨床觀察，發(fā)現(xiàn)3組實(shí)驗(yàn)羊體況和精神狀態(tài)均未出現(xiàn)不良反應(yīng)。

3.2 實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)結(jié)果

3.2.1 采樣 注射后第28天對(duì)3組實(shí)驗(yàn)羊分別隨機(jī)采樣20份血清，送碌曲縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)分析。

3.2.2 檢測(cè)方法及依據(jù) 口蹄疫抗體檢測(cè)使用液相阻斷-酶聯(lián)吸附實(shí)驗(yàn)(LpB-ELISA)GB/T18935-2018；小反芻獸疫抗體檢測(cè)使用小反芻獸疫抗體阻斷ELISA實(shí)驗(yàn)GB/T27982-2011。

3.2.3 結(jié)果判定 試驗(yàn)結(jié)果如表2 和圖1、圖2所示，陽(yáng)性對(duì)照阻斷率為(PB)>60，陰性對(duì)照阻斷率為(PB)<40，試驗(yàn)結(jié)果有效。待檢樣品阻斷率(PB)>50，判為陽(yáng)性，待檢樣品阻斷率(PB)≤50，判為陰性。

表2 實(shí)驗(yàn)室結(jié)果對(duì)照表

圖1 試驗(yàn)組與對(duì)照Ⅰ組結(jié)果分析

圖2 試驗(yàn)組與對(duì)照Ⅱ組結(jié)果分析

4 結(jié)論

試驗(yàn)表明藏羊同時(shí)分點(diǎn)注射口蹄疫與小反芻獸疫兩種疫苗，免疫羊只沒(méi)有臨床表現(xiàn)，試驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果表明一次分點(diǎn)注射口蹄疫和小反芻獸疫兩種疫苗產(chǎn)生兩種抗體互不影響，與單獨(dú)注射其中一種疫苗所產(chǎn)生的抗體差異不明顯，符合國(guó)家規(guī)定抗體保護(hù)率。藏羊同時(shí)注射口蹄疫、小反芻獸疫兩種疫苗不影響抗體效價(jià)，具有一定的可操作性。