1 753例血培養(yǎng)中分離出病原菌的分布特征及藥敏結(jié)果分析

劉亞男，郭錦聲，戚麗華，張淑艷*

（解放軍總醫(yī)院京東醫(yī)療區(qū)醫(yī)技保障科，北京 101149；2.解放軍總醫(yī)院第七醫(yī)學(xué)中心檢驗科，北京 100700）

血流感染是敗血癥和菌血癥的統(tǒng)稱。敗血癥主要臨床表現(xiàn)為驟發(fā)寒顫、高熱、心動過速、呼吸急促等嚴(yán)重臨床癥狀，嚴(yán)重者可引起休克、彌散性血管內(nèi)凝血和多臟器功能衰竭。菌血癥無明顯的毒血癥狀。血流感染是一種嚴(yán)重的全身感染性疾病[1]，它的診斷常有賴于不同部位多次血培養(yǎng)獲陽性結(jié)果或其他嚴(yán)格診斷標(biāo)準(zhǔn)，近年來，隨著臨床靜脈導(dǎo)管留置、機械通氣等設(shè)備廣泛使用，免疫抑制藥物和抗生素的濫用，病原菌對各類抗菌藥物的耐藥率隨之上升，血流感染的致死率和病死率逐漸升高[1,2]。目前，血培養(yǎng)仍是臨床上對于血流感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)[3]。本次研究收集解放軍總醫(yī)院京東醫(yī)療區(qū)2020年至2021年的血培養(yǎng)標(biāo)本結(jié)果，并對血培養(yǎng)分離的病原菌的鑒定結(jié)果進行分析，得出病原菌的分布特征和藥物敏感數(shù)據(jù)，從而指導(dǎo)臨床合理選擇抗生素進行治療。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 收集整理醫(yī)療區(qū)2020年1月1日至2021年12月31日血培養(yǎng)標(biāo)本1 753例，按實驗室常規(guī)操作方法對陽性標(biāo)本進行細菌分離、鑒定，分離出的非重復(fù)菌株161株。

1.2 儀器與試劑 采用BacT/ALERT 3D血培養(yǎng)儀及配套血培養(yǎng)瓶（法國梅里埃），VITEK-2 compact全自動微生物鑒定儀及配套鑒定藥敏板（法國梅里埃），哥倫比亞血平皿（鄭州安圖生物），中國藍平皿（北京陸橋生物），生物安全柜（江蘇安泰自動化科技公司）。

1.3 檢測方法 對懷疑血流感染的患者在使用抗生素之前采血；在無菌情況下，靜脈采集血液，成人在不同部位采集2～3套血培養(yǎng)，每瓶采血量8～10 mL，兒童一般只需采集需養(yǎng)瓶，每瓶2～5 mL，采集結(jié)束后立即放入全自動血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。

1.4 細菌鑒定及藥敏 對于儀器報警顯示陽性的血培養(yǎng)瓶，在安全柜中無菌操作將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)種至血平皿和中國藍平皿，將陽性瓶中的培養(yǎng)液涂片染色鏡檢為臨床醫(yī)生作初步報告；然后將平皿中長出的純菌落做菌種鑒定和藥敏試驗，得出結(jié)果參照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（CLSI）M100-S標(biāo)準(zhǔn)再次報告；對于培養(yǎng)5 d仍未出現(xiàn)陽性的則報告陰性。

1.5 結(jié)果統(tǒng)計 對病原菌的分布特征及耐藥數(shù)據(jù)采用WHONET 5.6軟件進行統(tǒng)計分析，并剔除同一患者相同部位分離出的重復(fù)菌株。

2 結(jié)果

2.1 血培養(yǎng)陽性標(biāo)本中檢測各種病原菌的數(shù)量情況 具體數(shù)值參見表1。

表1 血培養(yǎng)陽性結(jié)果病原菌的分布

2.2 葡萄球菌屬的抗菌藥物敏感性分析 金黃色葡萄球菌中甲氧西林耐藥株（MRSA）的檢出率23.08%，凝固酶陰性葡萄球菌甲氧西林耐藥株（MRCNS）的檢出率為88.89%，在葡萄球菌屬中沒有發(fā)現(xiàn)對利奈唑胺、四環(huán)素、萬古霉素、阿米卡星耐藥的菌株?？股厮幬锩舾星闆r見表2。

表2 葡萄球菌屬對抗菌藥物的耐藥率（%）

2.3 腸球菌屬的抗菌藥物敏感性分析 腸球菌屬對萬古霉素完全敏感，對慶大霉素、四環(huán)素、紅霉素、利福平表現(xiàn)出不同程度的耐藥，抗生素藥物敏感情況見表3。

表3 腸球菌對抗菌藥物的耐藥率（%）

2.4 鏈球菌屬的抗菌藥物敏感性分析 鏈球菌屬對萬古霉素完全敏感，對青霉素、頭孢吡肟、頭孢噻肟、氯霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星很大程度的敏感，對氨芐西林、紅霉素、克林霉素很大程度的耐藥，抗生素藥物敏感情況見表4。

表4 鏈球菌屬對抗菌藥物的耐藥率（%）

2.5 腸桿菌科的抗菌藥物敏感性分析 從表5中數(shù)據(jù)可以看出，腸桿菌科對阿米卡星完全敏感，黏質(zhì)沙雷菌對藥物的敏感程度高于另外三種菌，大腸桿菌的藥物敏感程度低于另外三種菌。抗生素藥物敏感情況見表5。

表5 腸桿菌科對抗菌藥物的耐藥率（%）

2.6 非發(fā)酵革蘭陰性菌的抗菌藥物敏感性分析 銅綠假單胞菌對哌拉西林、頭孢他啶、慶大霉素、亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、環(huán)丙沙星完全敏感，對氨芐西林/舒巴坦完全耐藥；而鮑曼氏不動桿菌對表6中抗菌藥物完全耐藥。抗生素藥物敏感情況見表6。

表6 非發(fā)酵革蘭陰性菌耐藥率（%）

3 討論

血流感染是嚴(yán)重的全身感染性疾病，臨床上常缺乏特異性表現(xiàn)，所以要及時做血流感染的實驗室檢查。而血培養(yǎng)仍是臨床上診斷血流感染的金標(biāo)準(zhǔn)。此外，應(yīng)強調(diào)規(guī)范操作，避免操作過程中對標(biāo)本產(chǎn)生污染。

本次收集的是解放軍總醫(yī)院京東醫(yī)療區(qū)2020年1月至2021年12月血培養(yǎng)標(biāo)本1 753例，其中陽性例數(shù)158例，占比9.01%，其中陽性結(jié)果中排名前三位的病原菌依次為大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌，與國內(nèi)的其他報道的結(jié)果基本上相同[4-5]。在檢測出的革蘭陽性菌中，檢出率排名靠前的分別是金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌和屎腸球菌；從表2可看到MRSA和MRCNS分別為23.08%和88.89%，與王鑫等人[6]、吳玲玲等人[7]報道的結(jié)果不一致，但數(shù)據(jù)差別不大，可能與收集的標(biāo)本數(shù)量、患者年齡和生活地域有關(guān)。從表3和4中可以看出腸球菌屬和鏈球菌屬對萬古霉素完全敏感，即使這樣，臨床醫(yī)生也應(yīng)對患者慎重用藥，在藥敏結(jié)果確定的情況下，再對癥治療，避免濫用抗生素。從表5可以看出腸桿菌屬中黏質(zhì)沙雷菌的敏感性最高，肺炎克雷伯菌相對大腸埃希菌對抗菌藥物更敏感，大腸埃希氏菌對第三代頭孢藥物的耐藥率為50.85%，比胡付品等人報道的數(shù)據(jù)56.4%要低[8]，但頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢唑林、哌拉西林-他唑巴坦的敏感率要高一些。從統(tǒng)計結(jié)果來看，肺炎克雷伯菌對氨芐西林完全耐藥，而對其他藥物耐藥率均低于20%，除了氨芐西林外，臨床醫(yī)生可根據(jù)患者藥敏結(jié)果使用其他藥物進行治療。陰溝腸桿菌對碳青霉烯類、阿米卡星等多數(shù)藥物敏感性較好。黏質(zhì)沙雷菌對藥物的耐藥整體上比較低。從表6可以看出銅綠假單胞菌的敏感性較好，而鮑曼氏不動桿菌完全耐藥，就銅綠假單胞菌而言，對氨基糖苷類和碳青霉烯類敏感率都較高，與方毅等人[10]的報道一致，而對于鮑曼不動桿菌來說，本次采集結(jié)果為完全耐藥，與國內(nèi)一些報道不完全相同[8-10]，在一定程度上反映了近些年來細菌耐藥性的增加。在以往臨床治療時，碳青霉烯類藥物被認為是治療耐藥革蘭陰性菌的殺手锏。此次結(jié)果顯示鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類藥物完全耐藥，根據(jù)胡付品、宋娟等人研究結(jié)果，再結(jié)合本次研究結(jié)果，顯示鮑曼不動桿菌對藥物完全耐藥，可能與被采樣患者自身有一定關(guān)系，但很大程度上說明耐藥率的提高。這提示臨床醫(yī)生抗感染治療宜根據(jù)藥敏試驗采取聯(lián)合用藥方式，聯(lián)合用藥可增強抗菌活性，避免使用單一藥物治療和經(jīng)驗用藥造成不良后果。

綜上所述，對血培養(yǎng)中各菌屬的耐藥率調(diào)查對于指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用抗生素很有幫助，及時準(zhǔn)確地檢測血培養(yǎng)標(biāo)本，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，降低血培養(yǎng)污染率，精確檢驗結(jié)果，減少患者住院時間，指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理應(yīng)用抗菌藥物，降低患者的病死率，減少耐藥菌株的產(chǎn)生，才能夠更好地服務(wù)患者。