雅安地區(qū)健康成人網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)參考區(qū)間的建立及驗(yàn)證*

陳 濤，黃 滔，付立芳，鄭 悅，李曉芳，杜順錦，何 霞△

雅安市人民醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.體檢中心，四川雅安 625000

隨著全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的快速發(fā)展，血常規(guī)中一些新穎參數(shù)，如網(wǎng)織紅細(xì)胞(Ret)相關(guān)參數(shù)Ret絕對(duì)值(Ret#)、Ret百分比(Ret%)、Ret血紅蛋白含量(RET-He)、高熒光強(qiáng)度Ret比率(HFR)、中熒光強(qiáng)度Ret比率(MFR)、低熒光強(qiáng)度Ret比率(LFR)、未成熟Ret比率(IRF)的檢測和應(yīng)用也日漸廣泛。Ret是一種骨髓新釋放的尚未完全成熟的紅細(xì)胞，單位體積血液中Ret的數(shù)量可以評(píng)估骨髓紅細(xì)胞的生成情況，有助于分析貧血的發(fā)病機(jī)制[1]。目前，中國地區(qū)可見Ret參考范圍的研究多為單一區(qū)域研究，如韓啟福等[2]和胡衛(wèi)紅等[3]的研究，多數(shù)醫(yī)院參考區(qū)間來源于《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》、儀器廠家說明書、教科書、試劑廠家說明書等[4]。雅安屬中國西南地區(qū)的中小城市，目前鮮見該地區(qū)的Ret參考區(qū)間的研究，因此，筆者根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)C28-A3文件標(biāo)準(zhǔn)[5]，利用Sysmex XN-1000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀對(duì)2 785例健康成人進(jìn)行Ret計(jì)數(shù)及分群測定，探討Ret參數(shù)與年齡、性別的關(guān)系，初步建立雅安地區(qū)健康成人Ret相關(guān)參數(shù)的參考區(qū)間，以期為Ret在雅安地區(qū)的臨床應(yīng)用提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年9月至2020年9月雅安市人民醫(yī)院健康體檢者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)長期生活于四川省雅安市；(2)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)(3.5～9.5)×109/L ；(3)男性血紅蛋白(Hb)>120 g/L，女性Hb>110 g/L；(4)體質(zhì)量指數(shù)(BMI)≤24.0 kg/m2[6-8]。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有腫瘤、血液病病史；(2)有吸煙、酗酒史；(3)女性在月經(jīng)期及妊娠期內(nèi)。最終符合條件的研究對(duì)象共2 785例，男1 561例，年齡21～91歲，女1 224例，年齡21～87歲。男女各分成3個(gè)年齡組，分別是>20～40歲組、>40～60歲組、>60歲組。

1.2儀器與試劑 Sysmex XN-1000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑，儀器定期接受校準(zhǔn)，本研究中涉及所有參數(shù)常年參加Sysmex全球在線質(zhì)控，成績良好。

1.3標(biāo)本采集和檢測 采集受試者空腹靜脈血液2.0 mL，用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝。檢測Ret 7項(xiàng)參數(shù)(Ret#、Ret%、Ret-He、HFR、MFR、LFR、IRF)。從采樣到檢測2 h內(nèi)完成。

2 結(jié) 果

2.1各年齡組間Ret參數(shù)的比較 不同年齡組間7項(xiàng)Ret參數(shù)比較，除Ret%和Ret-He差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其余參數(shù)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。隨著年齡增長，Ret#、LFR降低，IRF、MFR、HFR增高(P<0.01)，其中Ret#的差異主要表現(xiàn)在>20～40歲組與>60歲組及>40～60歲組與>60歲組之間，其余參數(shù)的差異主要表現(xiàn)在>20～40歲組與>40～60歲組及>20～40歲組與>60歲組之間。分別比較成年男女不同年齡的Ret相關(guān)參數(shù)發(fā)現(xiàn)，隨年齡變化，Ret#的變化主要體現(xiàn)在成年男性中，其隨年齡增加而升高(P<0.01)。LFR、IRF、MFR、HFR的差異主要體現(xiàn)在成年女性中，LFR隨年齡增加而降低(P<0.01)，IRF、、MFR、HFR隨年齡增加而升高(P<0.01)。見表1～3。

表1 不同年齡組成人7項(xiàng)Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

表2 不同年齡組成年男性7項(xiàng)Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

表3 不同年齡組成年女性7項(xiàng)Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

2.2各年齡組不同性別成人Ret各參數(shù)的比較 在>20～40歲組和>40～60歲組中，男女間均表現(xiàn)為除Ret%差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其余參數(shù)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中，LFR為男性小于女性(P<0.01)，Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He均表現(xiàn)為男性大于女性(P<0.01)。在>60歲組中，則表現(xiàn)為男女間僅Ret-He參數(shù)男性大于女性(P<0.01)，其余參數(shù)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4～6。

表4 ＞20～40歲不同性別成人Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

表5 ＞40～60歲不同性別成人Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

表6 ＞60歲不同性別成人Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

2.4參考區(qū)間的驗(yàn)證 選擇2020年5月5-15日來本院健康體檢者血常規(guī)標(biāo)本40份，其中男20例，女20例,對(duì)上述參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證，檢測結(jié)果全部落在所建立的參考區(qū)間范圍內(nèi)，驗(yàn)證通過。

3 討 論

Ret相關(guān)參數(shù)對(duì)多種疾病的診斷、治療具有重要價(jià)值，包括評(píng)估腫瘤化療患者骨髓抑制和恢復(fù)情況、癌癥兒童缺鐵狀況、孕婦缺鐵狀況、炎癥性腸病兒童缺鐵情況、透析患者鐵代謝情況等[9-16]；尤其對(duì)貧血的鑒別診斷具有重要價(jià)值[17-19]；此外，Ret相關(guān)參數(shù)可監(jiān)測骨髓移植后的造血功能[20]。

但多項(xiàng)研究結(jié)果顯示，不同地區(qū)人群由于地理環(huán)境、生活方式等差異，Ret相關(guān)參數(shù)存在較大差異[21-26]，目前中國南方健康成人的Ret相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間鮮有報(bào)道。本研究對(duì)雅安地區(qū)健康成人的Ret相關(guān)參數(shù)進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，Ret參數(shù)在不同年齡組之間存在差異，其中Ret#的差異主要體現(xiàn)在>20～40歲組、40～60歲組和>60歲組的男性之間，成年男性Ret#隨年齡增加而降低，考慮主要與老年男性雄激素的部分缺乏引起促紅細(xì)胞生成素分泌減少有關(guān)。而IRF、MFR、HFR的差異主要體現(xiàn)在>20～40歲組女性低于>40～60歲組和>60歲組的女性，相反，LFR表現(xiàn)為>20～40歲女性高于>40～60歲組和>60歲組的女性，考慮與女性月經(jīng)、內(nèi)分泌因素有關(guān)。但此結(jié)果與李小龍等[27]的研究結(jié)果恰好相反，考慮可能因地域和研究人群不同引起。

對(duì)同一年齡組不同性別之間的Ret相關(guān)參數(shù)分析發(fā)現(xiàn)，>20～40歲組和>40～60歲組的Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He和LFR存在性別差異，其中Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He表現(xiàn)為男性高于女性，LFR表現(xiàn)為男性低于女性，這與成年男性RBC和Hb參考范圍均高于女性是一致的，且與樂家新等[28]的研究結(jié)論也相同?？紤]可能與在這個(gè)年齡段，男性雄性激素水平較高，而睪酮有促進(jìn)紅細(xì)胞生成作用有關(guān)[29]，且男性運(yùn)動(dòng)量普遍大于女性，而運(yùn)動(dòng)能刺激骨髓造血功能增生活躍，從而促進(jìn)RBC更新代謝[30]，而MFR、HFR、IRF正是反映機(jī)體RBC生成的靈敏指標(biāo)，其值越高，說明RBC代謝越旺盛。>60歲組中，Ret相關(guān)參數(shù)僅表現(xiàn)為Ret-He男性大于女性(P<0.000 1)，其余Ret相關(guān)參數(shù)則表現(xiàn)為在性別之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，這可能是因?yàn)殡S男女性步入老年以后內(nèi)分泌生理因素、運(yùn)動(dòng)量在性別間的差異逐漸減小，因此Ret相關(guān)參數(shù)的差異也隨之消失。

此外，本研究結(jié)果顯示，Ret-He的成年男性[(26.3，37.2)pg]、成年女性[(24.1，36.1)pg]參考區(qū)間，與北京[31]成人男性[(29.25，33.83)pg]、成年女性[(29.25，33.83)pg]，以及深圳[32]成年男性[(32.96，39.28)pg]、成年女性[(31.11，36.99)pg]的參考區(qū)間有較大的差異，表現(xiàn)為參考區(qū)間下限值偏低，參考范圍變大，甚至和深圳[32]地區(qū)的缺鐵性貧血男性[(24.72±3.91)pg]、缺鐵性貧血女性[(22.63±3.76)pg]有較大重合部分，但高于汕頭[33]地區(qū)的缺鐵性貧血人群[16.70(14.32，19.70)pg]。這可能是因?yàn)楸狙芯康娜巳簽檠虐驳貐^(qū)人群，屬西南地區(qū)中小城市，而后者為北方、沿海等地，這充分說明了不同人群可能由于地理環(huán)境、生活方式及生理結(jié)構(gòu)等因素的差異而導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)鐵含量的不同，從而導(dǎo)致不同人群Ret-He有所差異，甚至差異很大，因此建立不同地區(qū)實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間尤為重要。

綜上所述，Ret相關(guān)參數(shù)的參考區(qū)間因受地區(qū)、民族、性別、年齡、儀器等眾多種因素影響而不同，不同地區(qū)各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本地區(qū)人群建立適合自己實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間，若是使用不適合本地區(qū)的Ret相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間，極易造成臨床誤診。因此，設(shè)置區(qū)域化的Ret相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間對(duì)臨床診斷和療效判斷十分必要。本研究按照年齡和性別分組初步建立雅安地區(qū)健康成人Ret相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間，已在本實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證，驗(yàn)證全部通過，可推廣至雅安甚至川西地區(qū)驗(yàn)證使用。