毛棉杜鵑根際與非根際土壤微生物群落多樣性*

彭金根 龔金玉, 范玉海 張 華 張銀鳳, 白宇清 王艷梅 謝利娟

(1.深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院建筑工程學(xué)院 深圳 518055； 2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院 鄭州 450002； 3.日照市自然資源和規(guī)劃局 日照 276827； 4.深圳市梧桐山風(fēng)景區(qū)管理處 深圳 518004)

根際是指受植物根系影響的微型區(qū)域，是植物根系與土壤相互作用的主要場(chǎng)所(Shietal.， 2015)。在這個(gè)微型區(qū)域內(nèi)植物根系、土壤微生物群落以及土壤環(huán)境三者相互影響形成有利于植物生長(zhǎng)的穩(wěn)定微環(huán)境(黃娜等， 2019； Suretteetal., 2003)。根際微生物是指受植物根系影響最大的微生物群體，其對(duì)土壤養(yǎng)分的轉(zhuǎn)化(石柯等， 2019)、植物的生長(zhǎng)發(fā)育(陸雅海等， 2006)、抗逆性(孫英杰等， 2018)等都具有重要的作用。有研究表明植物根際存在某些有益微生物，它們通過(guò)抑制植物病原菌或者分泌有益激素或有機(jī)物質(zhì)來(lái)促進(jìn)植物的生長(zhǎng)(王光華等， 2004),而杜鵑花科植物根系能與某些土壤真菌共生形成典型根系形態(tài)的共生體，且能增強(qiáng)宿主植物的抗逆性以及養(yǎng)分吸收(李亞東等， 1996； 歐靜等， 2012)； 同時(shí)植物根際也存在一些使植物感病的病原菌(阮柳等， 2016)。侯慧等(2016)對(duì)經(jīng)濟(jì)作物的研究發(fā)現(xiàn)，植物的連作障礙是由于植物在長(zhǎng)期的生長(zhǎng)過(guò)程中，根際微生物群落結(jié)構(gòu)失衡，因此對(duì)于植物根系微生物功能及群落結(jié)構(gòu)研究對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育很有必要。

毛棉杜鵑(Rhododendronmoulmainense)是杜鵑花科(Ericaceae)杜鵑花屬的常綠植物，花期是每年3—4月，花序頂生，花朵簇生，花大色艷，具有極高的景觀價(jià)值及生態(tài)價(jià)值(黃滔等， 2010)。梧桐山毛棉杜鵑“十里杜鵑”景觀現(xiàn)已形成深圳市特色景觀，每年花期吸引成千上萬(wàn)的市民上山賞花。目前毛棉杜鵑的研究已有較多的報(bào)道，主要包括組織培養(yǎng)(趙富群等， 2017)、花芽分化(孫敏， 2009)、光適應(yīng)(白宇清， 2016)以及繁殖生物學(xué)(白宇清等， 2017)等。毛棉杜鵑屬于淺根系植物，根系的發(fā)育對(duì)毛棉杜鵑的生長(zhǎng)至關(guān)重要。廖映輝等(2016)對(duì)海南霸王嶺毛棉杜鵑根部真菌的研究表明，根部存在豐富的真菌資源，如子囊菌門(Ascomycota)、擔(dān)子菌門(Basidimycota)等。周玉潔等(2017)研究表明接種福廷瓶頭霉菌(Phialocephalafortinii)和聚多曲霉菌(Aspergillussydoeii)可以提高其幼苗的光合能力，促進(jìn)其植株及根系的生長(zhǎng)。本文利用高通量測(cè)序技術(shù)研究梧桐山毛棉杜鵑根際與非根際土壤微生物群落特征為,探究毛棉杜鵑根際、生態(tài)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

2021年7月上旬在深圳梧桐山選取樹齡、營(yíng)養(yǎng)管理水平及長(zhǎng)勢(shì)一致的毛棉杜鵑3塊樣地，每塊樣地內(nèi)保證毛棉杜鵑樣樹大于5株，在每塊樣地內(nèi)利用五點(diǎn)取樣法，去除表層的枯枝落葉，然后挖取0～20 cm的毛棉杜鵑細(xì)根，抖落附著在根上的大塊土壤作為非根際土壤；將附著在根系2 mm范圍內(nèi)的土壤利用無(wú)菌刷收集作為根際土；將每塊樣地內(nèi)5個(gè)點(diǎn)的根際土壤混合均勻作為本樣地的根際土壤；本樣地內(nèi)5個(gè)點(diǎn)的非根際土壤混合均勻作為該樣地的非根際土壤樣本。利用無(wú)菌袋及車載冰箱將土壤帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行后續(xù)處理，將每份土壤樣本分成2份，其中一份過(guò)2 mm篩自然陰干后用于測(cè)定土壤理化性質(zhì)； 另一份用干冰冷凍寄送北京百邁客生物科技有限公司以提取土壤微生物。

表1 梧桐山樣地基本情況

1.2 試驗(yàn)方法

毛棉杜鵑根系土壤理化性質(zhì)的測(cè)定主要參考劉光崧(1996)。土壤pH值的測(cè)定利用酸度計(jì)法(1∶2.5=土∶ 水)； 土壤有機(jī)質(zhì)(SOC)采用重鉻酸鉀氧化-外加熱法； 全氮(TN)的測(cè)定利用凱氏定氮法； 全磷(TP)的測(cè)定利用其氧化鈉熔融-鉬銻抗比色法； 全鉀(TK)的測(cè)定利用其氧化鈉熔融-火焰光度計(jì)法； 堿解氮(AN)的測(cè)定利用堿解擴(kuò)散法； 速效鉀(AK)的測(cè)定采用乙酸銨浸提-火焰光度法； 土壤有效磷(AP)的測(cè)定采用鹽酸-氯化銨浸提法。

1.3 土壤DNA的提取

利用TGuide S96磁珠法土壤基因組試劑盒提取土壤DNA，使用synergy HTX酶標(biāo)儀對(duì)已提取的核酸進(jìn)行濃度檢測(cè)，并通過(guò)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物，再在引物尾端加上測(cè)序接頭，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增時(shí)用引物ITS1F(5′-CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA-3′)和 ITS2(5′-GCTGCGTTCTTCATCGATGC-3′)擴(kuò)增真菌ITS1區(qū)； 用338F(5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3′)和806R(5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′)擴(kuò)增細(xì)菌v3+v4區(qū)，然后對(duì)其產(chǎn)物進(jìn)行純化、定量和均一化以構(gòu)建文庫(kù)，已建成的文庫(kù)首先采用Qsep-400方法進(jìn)行文庫(kù)質(zhì)量檢驗(yàn)，質(zhì)檢合格的文庫(kù)再用Illumina Novaseq 6000進(jìn)行檢測(cè)。高通量測(cè)序所得到的原始圖像數(shù)據(jù)文件，經(jīng)過(guò)堿基識(shí)別分析后轉(zhuǎn)換為原始序列(sequenced reads)，然后對(duì)原始序列進(jìn)行過(guò)濾、拼接、去除嵌合體等得到有效序列(effective reads)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

土壤理化性質(zhì)數(shù)據(jù)分析采用IBM SPSS Statistics 25軟件，根際與非根際間比較采用T-test法； 高通量測(cè)序數(shù)據(jù)下機(jī)后得到原始數(shù)據(jù)，用FLASHv1.2.11、Trimmomatic、UCHIME等工具對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行拼接、過(guò)濾、去除嵌合體，再基于97%的相似性對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類，以測(cè)序得到所有序列數(shù)的0.005%作為閾值過(guò)濾后劃分OTU，再參考Silva(細(xì)菌16S)、Unite(真菌ITS)分類學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)OTU進(jìn)行分類學(xué)統(tǒng)計(jì)。使用QIIME2軟件，對(duì)樣品的Alpha多樣性指數(shù)進(jìn)行評(píng)估，采用對(duì)樣本序列進(jìn)行隨機(jī)取樣的方法，構(gòu)建稀釋性曲線并統(tǒng)計(jì)多樣性指數(shù)等，比較不同土壤樣本的真菌與細(xì)菌豐度及多樣性； 利用QIIME軟件進(jìn)行 Beta多樣性分析； 真菌的功能預(yù)測(cè)分析利用FUNGuild數(shù)據(jù)庫(kù)，置信水平選用可能(probable)和很可能(highly probable)(Nguyenetal.， 2016)。通過(guò)采用R軟件中的Vegan軟件包，對(duì)土壤理化性質(zhì)與優(yōu)勢(shì)微生物進(jìn)行RDA分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 根際與非根際土壤理化性質(zhì)分析

毛棉杜鵑根際土壤理化性質(zhì)見表2。根際土壤pH值及速效鉀含量顯著低于非根際土壤(P<0.05)，根際土壤速效磷顯著高于非根際土壤(P<0.05)。根際土壤有機(jī)質(zhì)、全氮、堿解氮均高于非根際土壤，但差異不顯著。

2.2 微生物多樣性及群落結(jié)構(gòu)

2.2.1 細(xì)菌與真菌稀釋性曲線 以測(cè)序深度與物種數(shù)目來(lái)構(gòu)建稀釋性曲線從已測(cè)得的序列中隨機(jī)抽取OTU序列并統(tǒng)計(jì)物種數(shù)目。并由圖1可知，當(dāng)細(xì)菌OTU數(shù)目達(dá)到1 200左右，真菌OTU 數(shù)目達(dá)到1 000左右，稀釋性曲線趨于平穩(wěn)，說(shuō)明此時(shí)測(cè)序量已足夠覆蓋土壤中的微生物類群。

表2 毛棉杜鵑根際與非根際土壤理化性質(zhì)①

2.2.2 根際與非根際微生物群落豐富度和多樣性 基于OTUs分類結(jié)果繪制Venn圖，由圖2A可知，根際與非根際土壤細(xì)菌共有OTU為1 382個(gè)，其中非根際特有OTUs為144個(gè)，占總OTU數(shù)目的9%，根際特有OTU為51，占總OTU數(shù)目的3%。圖2B可知，根際與非根際土壤真菌共有OTU為1 231個(gè)，其中非根際特有OTU為10個(gè)，根際特有OTU為21個(gè)，根際特有OTU數(shù)目高于非根際土壤。

圖1 細(xì)菌(A)、真菌(B)稀釋性曲線

圖2 毛棉杜鵑根際和非根際土壤細(xì)菌(A)、真菌(B)Venn圖

Alpha多樣性(Alpha diversity)可反映單個(gè)樣品的物種豐度(richness)及多樣性(diversity)，主要包括Chao1指數(shù)、ACE指數(shù)等。毛棉杜鵑細(xì)菌與真菌根際與非根際Alpha多樣性指數(shù)均無(wú)顯著性差異(P>0.05)，但非根際細(xì)菌土壤樣本具有更高的微生物多樣性和物種豐度，而真菌根際與非根際相差不大(圖3A、3B)。毛棉杜鵑非根際土壤細(xì)菌與真菌Shannon指數(shù)與Chao1指數(shù)均高于根際土壤(P>0.05)，表明了非根際土壤細(xì)菌較真菌具有更高的多樣性和豐富度(圖3C、3D)。而根際與非根際土壤環(huán)境中，細(xì)菌相較于真菌具有更高的多樣性和豐富度(P<0.05)，說(shuō)明毛棉杜鵑根系環(huán)境仍屬于細(xì)菌主導(dǎo)型，細(xì)菌相較于真菌具有更高的物種豐度及多樣性。

表3 毛棉杜鵑根際與非根際土壤細(xì)菌和真菌群落的多樣性指數(shù)

圖3 根際與非根際土壤細(xì)菌和真菌群落的多樣性指數(shù)

2.2.3 根際與非根際土壤微生物組成 將原始序列過(guò)濾后統(tǒng)計(jì)出各樣品中各等級(jí)的物種數(shù)。以Silva、UNITE數(shù)據(jù)庫(kù)為參考，可獲得真菌、細(xì)菌物種統(tǒng)計(jì)表。由表3可知，毛棉杜鵑根際與非根際土壤微生物多樣性豐富，其中根際細(xì)菌分別注釋到23門、64綱、125個(gè)目、188科、277個(gè)屬以及291種，非根際注釋到25門、69綱、134目、201科、291屬以及305種，非根際在細(xì)菌水平上多樣性是稍高于根際土壤； 而根際真菌注釋到8門、29綱、77目、180科、352 屬、520種，非根際真菌注釋到8門、29綱、77目、180科、353屬、518種，根際與非根際真菌多樣性相差不大。

表3 根際、非根際土壤細(xì)菌、真菌物種統(tǒng)計(jì)

由門水平物種豐度圖4A可知，毛棉杜鵑根際土壤優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門前10名分別為酸桿菌門(Acidobacteria)42.47%、變形菌門(Proteobacteria)30.72%、放線菌門(Actinobacteria)6.80%、綠彎菌門(Chloroflexi)4.93%、浮霉菌門(Planctomycetes)4.42%、疣微桿菌門(Verrucomicrobia)2.84%、WPS-2 4.58%、芽單胞菌門(Gemmatimonadetes)0.87%、擬桿菌門(Bacteroidetes)0.93%以及厚壁菌門(Firmicutes)0.25%。非根際土壤優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門主要是酸桿菌門46.33%、變形菌門26.26%、放線菌門6.38%，其中非根際土壤樣本中酸桿菌門占比比根際土壤樣本高9.1%，而根際土壤樣本中變形菌門占比比非根際樣本高17%。

毛棉杜鵑根際土壤真菌優(yōu)勢(shì)物種菌門共注釋到8個(gè)門如圖4B，其中優(yōu)勢(shì)真菌門為子囊菌門和擔(dān)子菌門，兩者占比高達(dá)90%以上。而根際與非根際土壤優(yōu)勢(shì)真菌門分別是子囊菌門64.95%、擔(dān)子菌門29.51%、被孢菌門(Mortierellomycota)1%、羅茲菌門(Rozellomycota)0.81%、壺菌門(Chytridiomycota)0.34%、油壺菌門(Olpidiomycota)0.1%、球囊菌門(Glomeromycota)0.05%。非根際土壤優(yōu)勢(shì)菌門為子囊菌門72.21%、擔(dān)子菌門22.05%、被孢菌門1.26%。由圖4B可知，非根際土壤子囊菌門豐度比根際土壤高11.2%，而根際土壤擔(dān)子菌門豐度比非根際高33.8%。

圖4 根際與非根際土壤細(xì)菌、真菌門水平物種分布

由目水平物種豐度圖可知，毛棉杜鵑根際與非根際土壤優(yōu)勢(shì)細(xì)菌目(圖5A)，主要是為 Subgroup_2、酸桿菌目(Acidobacteriales)、Solibacterales、根瘤菌目(Rhizobiales)等。根際與非根際土壤優(yōu)勢(shì)真菌目(圖5B)，主要是散囊菌目(Eurotiales)、肉座菌目(Hypocreales)、蠟殼耳目(Sebacinales)等。

圖5 根際與非根際土壤細(xì)菌、真菌目水平物種分布

2.2.4 根際與非根際土壤β多樣性分析 主成分分析(PCA)可以將根際與非根際土壤樣品差異反映在二維坐標(biāo)軸上，樣本在坐標(biāo)軸上的距離越小，表示2個(gè)樣本的組成越相似。主坐標(biāo)軸顯示細(xì)菌在根際土壤差異較小，在非根際土壤差異較大(圖6A)； 真菌β多樣性在非根際土壤中分布較為集中，差異較小，在根際土壤差異要高于非根際土壤(圖6B)。

圖6 毛棉杜鵑根際與非根際土壤細(xì)菌(A)、真菌(B)主坐標(biāo)分析

2.2.5 根際與非根際土壤真菌功能基因預(yù)測(cè) 通過(guò)FUNGuild對(duì)毛棉杜鵑根際與非根際土壤真菌進(jìn)行功能預(yù)測(cè)分析，將置信水平為Highly Probable和Probable的物種篩選出來(lái)并進(jìn)行可視化，從而得到真菌生態(tài)營(yíng)養(yǎng)類型及各營(yíng)養(yǎng)類型在不同樣本中的占比情況。Trophic Mode結(jié)果顯示，毛棉杜鵑根際與非根際土壤真菌類群主要預(yù)測(cè)得到7種營(yíng)養(yǎng)類型(圖7A)，分別是共生營(yíng)養(yǎng)型(symbiotroph)、腐生-共生營(yíng)養(yǎng)型(saprotroph-symbiotroph)、腐生營(yíng)養(yǎng)型(saprotroph)、病理-共生營(yíng)養(yǎng)型(pathotroph-symbiotroph)、病理-腐生-共生營(yíng)養(yǎng)型(pathotroph-saprotroph-symbiotroph)、病理-腐生營(yíng)養(yǎng)型(pathotroph-saprotroph)和病理營(yíng)養(yǎng)型(pathotroph)。根際與非根際占比最高的營(yíng)養(yǎng)型均為病理-腐生營(yíng)養(yǎng)型、共生營(yíng)養(yǎng)型和腐生營(yíng)養(yǎng)型。其中，根際與非根際主要營(yíng)養(yǎng)型為共生營(yíng)養(yǎng)型、腐生營(yíng)養(yǎng)型、病理-腐生營(yíng)養(yǎng)型，三者豐度之和高達(dá)80%以上。根際共生營(yíng)養(yǎng)型真菌豐度比非根際高42%，說(shuō)明共生營(yíng)養(yǎng)型真菌在根際富集，主要序列為OTU7、OTU10、OTU22等，其注釋為擔(dān)子菌門的紅菇屬Russula等。

各營(yíng)養(yǎng)型豐度占比情況見表4。根際共生營(yíng)養(yǎng)型真菌豐度比非根際上升42%，其余營(yíng)養(yǎng)型真菌均為非根際高于根際?；贕uild結(jié)果根際與非根際預(yù)測(cè)共得到24個(gè)生態(tài)共位群，其相對(duì)豐度如圖7B所示，其中非根際(NR)優(yōu)勢(shì)共位群分別是木腐生菌(wood saprotroph，22%)，植物病原菌(plant pathogen，21%)和動(dòng)物病原菌(animal pathogen， 20%)等共位群。根際優(yōu)勢(shì)生態(tài)位則為木腐生菌(wood saprotroph，21%)，主要分類單元注釋為小柱孢屬(Scytalidium)。植物病原菌(plant pathogen， 20%)，主要分類單元注釋為粉紅螺旋聚孢霉屬(Clonostachys)以及動(dòng)物病原菌(animal pathogen， 19%)，主要分類單元注釋為蠟蚧輪枝菌屬(Lecanicillium)等。

表4 根際與非根際土壤真菌營(yíng)養(yǎng)類型及豐度

2.2.6 毛棉杜鵑土壤優(yōu)勢(shì)微生物的影響因子 對(duì)毛棉杜鵑根際與非根際土壤微生物及其土壤理化性質(zhì)進(jìn)行冗余分析，結(jié)果見圖8。對(duì)于土壤細(xì)菌群落RDA兩軸的貢獻(xiàn)率分別為36.56%和29.01%，所選5個(gè)土壤基本性質(zhì)共解釋65%的總特征值，其中有機(jī)質(zhì)，堿解氮與浮霉菌門、疣微桿菌門等呈正相關(guān)。pH值、速效鉀與酸桿菌門、綠彎菌門以及厚壁菌門呈正相關(guān)。對(duì)于土壤真菌群落RDA分析，兩軸的貢獻(xiàn)率分別為45.62%、28.74%，總貢獻(xiàn)率達(dá)74.3%，其中有機(jī)質(zhì)及堿解氮含量與羅茲菌門、壺菌門之間呈正相關(guān)。pH值以及速效鉀與子囊菌門、油壺菌門以及被孢菌門之間呈正相關(guān)。

圖7 根際與非根際土壤真菌功能基因預(yù)測(cè)

圖8 優(yōu)勢(shì)細(xì)菌(A)、真菌(B)與土壤理化性質(zhì)冗余分析

3 討論

土壤理化性質(zhì)對(duì)植物的生長(zhǎng)、發(fā)育至關(guān)重要，毛棉杜鵑根際土壤pH值明顯低于非根際土壤，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能是由于毛棉杜鵑根系產(chǎn)生的分泌物進(jìn)入根際土壤，從而引起根際土壤pH值降低。根際有機(jī)質(zhì)、全氮、堿解氮等營(yíng)養(yǎng)元素含量均高于非根際，其原因可能是根系分泌的有機(jī)物等進(jìn)入根際土壤，從而使根際與非根際土壤在理化性質(zhì)等方面產(chǎn)生差別。而土壤中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在根際區(qū)域發(fā)生富集現(xiàn)象在七葉一枝花(Parispolyphylla)(鄭梅霞等， 2020)、南酸棗(Choerospondiasaxillaris)(童琪等， 2019)、華北落葉松(Larixprincipis-rupprechtii)(郭輝等， 2020)等植物中均已被證實(shí)。

土壤微生物是土壤中重要的組成部分，其多樣性及豐富度可以間接的反映土壤質(zhì)量及土壤肥力(Wangetal.， 2019)。已有研究表明，由于植物的根系分泌以及淋溶等活動(dòng)，導(dǎo)致植物根際與非根際在土壤理化性質(zhì)以及微生物群落結(jié)構(gòu)等方面存在差異(Mousavietal.， 2018)。Yang等(2010)研究表明，土壤微生物主要以細(xì)菌為主，本研究結(jié)果中同樣也是細(xì)菌種類高于真菌，但真菌種類也相對(duì)較高。李巖等(2018)對(duì)不同生境黑果枸杞(Lyciumruthenicum)根際與非根際土壤微生物的研究表明，根際真菌微生物群落結(jié)構(gòu)多樣性低于非根際，與本文研究結(jié)果相同，但在本研究中非根際細(xì)菌高于根際，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因很有可能是深圳夏季多雨，而高溫高濕的土壤環(huán)境有利于微生物的增殖，在特定的氣候條件下根系分泌物的選擇功能，也會(huì)使根際微生物多樣性低于非根際，即形成根際負(fù)效應(yīng)； 通過(guò)FUNGuild分析表明，土壤真菌類群病理-腐生營(yíng)養(yǎng)型和病理營(yíng)養(yǎng)型等功能類群。因此，根際的負(fù)效應(yīng)有可能是毛棉杜鵑根際土壤真菌多為致病菌類型，導(dǎo)致植物根系分泌抑制物質(zhì)對(duì)病原菌產(chǎn)生抵抗，進(jìn)而導(dǎo)致根際微生物多樣性低于非根際的現(xiàn)象。馬志良等(2019)研究發(fā)現(xiàn)，增溫對(duì)高寒灌叢土壤根際與非根際微生物的影響不同，且在不同季節(jié)也會(huì)產(chǎn)生不同的根際效應(yīng)。蔣治巖等(2021)在研究表明，植物的根際效應(yīng)與根際形成的菌根類型以及植物種類均有關(guān)系。

毛棉杜鵑屬典型的杜鵑花科植物，土壤中某些真菌可以侵染其植物根系并與之形成杜鵑花類菌根(ericoid mycorrhizas,ERM)(張艷華等， 2021)，植物菌根的形成在促進(jìn)宿主營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收、增強(qiáng)抗逆性等方面具有重要作用。鄭鈺等(2010)在銀葉杜鵑(Rhododendronargyrophyllum)和繁花杜鵑(R.floribundum)根部真菌研究中發(fā)現(xiàn)，杜鵑屬植物具有豐富的真菌資源，蠟殼耳目和柔膜菌目(Helotiales)是形成其菌根的主要真菌。唐燕等(2019)對(duì)云南轎子山腋花杜鵑(R.racemosum)菌根的研究發(fā)現(xiàn)，瑞士無(wú)梗囊霉(Acaulosporarehmii)、布氏球囊霉(Glomusbrohultii)等與腋花杜鵑根系形成叢枝菌根(arbuscular mycorrhizas，AM)。廖映輝等(2016)對(duì)毛棉杜鵑根部真菌的研究發(fā)現(xiàn)，其具有豐富的根部真菌資源，主要是子囊菌門、擔(dān)子菌門等，與本文的研究結(jié)果一致。真菌群落結(jié)構(gòu)與細(xì)菌相比更加復(fù)雜，有可能是為了適應(yīng)惡劣的生存環(huán)境，從而進(jìn)化形成具有多種營(yíng)養(yǎng)方式，這是真菌群落為了適應(yīng)惡劣環(huán)境而形成的較為先進(jìn)的生存結(jié)構(gòu)(熊丹等， 2020)。土壤中病理真菌的大量繁殖會(huì)導(dǎo)致植物患病，嚴(yán)重的會(huì)導(dǎo)致植物體的死亡(姜子德等， 2000)，任偉恒等(2020)對(duì)馬纓杜鵑(R.delavayi)的研究發(fā)現(xiàn)，感染根腐病的杜鵑根際真菌明顯增多。

土壤理化性質(zhì)與優(yōu)勢(shì)微生物的冗余分析結(jié)果表明，土壤pH值、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、有效鉀含量均對(duì)土壤優(yōu)勢(shì)微生物有不同影響，有機(jī)質(zhì)，堿解氮與浮霉菌門、疣微桿菌門等呈正相關(guān)，pH值、速效鉀與酸桿菌門、綠彎菌門以及厚壁菌門呈正相關(guān)。字洪標(biāo)等(2017)對(duì)青海省不同林分微生物群落結(jié)構(gòu)研究發(fā)現(xiàn)，土壤pH值是影響微生物群落的主要環(huán)境因子，有機(jī)質(zhì)及堿解氮含量與羅茲菌門、壺菌門之間呈正相關(guān)。土壤pH值以及速效鉀與子囊菌門、油壺菌門、被孢菌門之間呈正相關(guān)。

4 結(jié)論

梧桐山毛棉杜鵑根際與非根際土壤理化性質(zhì)除土壤pH值、速效鉀和全鉀含量外，均為根際土壤高于非根際，土壤pH值、速效鉀含量顯著性低于非根際。根際與非根際優(yōu)勢(shì)細(xì)菌類群相同，均為酸桿菌門、變形菌門、放線菌門等。根際與非根際優(yōu)勢(shì)真菌為子囊菌門、擔(dān)子菌門、被孢菌門等。毛棉杜鵑根際與非根際優(yōu)勢(shì)細(xì)菌目，主要是Subgroup_2、酸桿菌目、Solibacterales、根瘤菌目等。根際與非根際優(yōu)勢(shì)真菌目主要是散囊菌目、肉座菌目、蠟殼耳目等。毛棉杜鵑根系真菌主要是病理-腐生營(yíng)養(yǎng)型、共生營(yíng)養(yǎng)型等，且根際與非根際在共生營(yíng)養(yǎng)型真菌豐度具有較大差異，毛棉杜鵑根際含有豐富的共生真菌資源，且根際與非根際的真菌功能結(jié)構(gòu)有差異。冗余分析結(jié)果表明，土壤有機(jī)質(zhì)，堿解氮與浮霉菌門、疣微桿菌門等細(xì)菌門呈正相關(guān)； 土壤pH值、速效鉀與酸桿菌門、綠彎菌門以及厚壁菌門呈正相關(guān)。有機(jī)質(zhì)及堿解氮含量與羅茲菌門、壺菌門等真菌門呈正相關(guān)； 土壤pH值以及速效鉀與子囊菌門、油壺菌門以及被孢菌門等真菌門呈正相關(guān)。