EGFR和p53及Ki-67在乳腺癌組織中的表達(dá)及其與乳腺癌病理學(xué)特征的關(guān)系

尤曉夏，宋衛(wèi)國，馬慧君

（南通市通州區(qū)人民醫(yī)院病理科，江蘇 南通 226300）

乳腺癌是女性高發(fā)惡性腫瘤之一，嚴(yán)重威脅患者的生命安全[1]。表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）與細(xì)胞增殖、分化、生長密切相關(guān)，是多種腫瘤的靶標(biāo)分子[2]。Ki-67是一種核蛋白，與細(xì)胞周期密切相關(guān)，能輔助醫(yī)師判斷腫瘤增殖情況[3]。p53是一種編碼核磷酸蛋白的抑癌基因，當(dāng)發(fā)生突變后會引起癌變[4]。臨床聯(lián)合檢測多種腫瘤分子標(biāo)志物可為醫(yī)師臨床診療乳腺癌提供重要的參考依據(jù)。基于此，本研究選取92例乳腺癌患者為研究對象，旨在分析EGFR、p53、Ki-67在乳腺癌中的表達(dá)及其與乳腺癌病理特征的關(guān)系，以為臨床診療乳腺癌提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年6月至2020年6月本院收治的92例乳腺癌患者作為研究對象，其中男9例，女83 例；年齡31～75 歲，平均（53.04±8.83）歲；根據(jù)WHO乳腺癌病理分級標(biāo)準(zhǔn)[5]：Ⅰ級3例，Ⅱ級62例，Ⅲ級27例；腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例，無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移61例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：病理檢查確診為乳腺癌；均行手術(shù)治療；患者及家屬均對本研究知情同意，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)前未接受化療、放療、內(nèi)分泌及靶向治療；凝血機(jī)制異常；合并感染性疾病；合并其他嚴(yán)重器質(zhì)性功能障礙；臨床資料不完整。

1.2 方法 采用免疫組織化學(xué)法檢測患者乳腺癌組織及癌旁正常組織中EGFR、p53、Ki-67的表達(dá)水平，檢測抗體及配套試劑盒由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說明書步驟進(jìn)行檢測。EGFR、p53、Ki-67陽性判定標(biāo)準(zhǔn)[6]：使用半定量計(jì)分法判斷，陽性細(xì)胞數(shù)＞75%，計(jì)4分；陽性細(xì)胞數(shù)為＞50%～75%，計(jì)3分；陽性細(xì)胞數(shù)為＞25%～50%，計(jì)2分；陽性細(xì)胞數(shù)為＞5%～25%，計(jì)1分；陽性細(xì)胞數(shù)≤5%，計(jì)0分。陽性強(qiáng)度在400倍鏡視野下根據(jù)顯色強(qiáng)度計(jì)分，棕褐色，計(jì)3分；棕黃色，計(jì)2分；黃色，計(jì)1分；無陽性細(xì)胞，計(jì)0分；取上述兩項(xiàng)得分乘積，陰性（-）為0分；弱陽性（+）為1～2分；中度陽性（++）為3～4分；強(qiáng)陽性（+++）為5～12分，其中陰性為（-），陽性為（+）（++）（+++）。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較EGFR、p53、Ki-67在乳腺癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)陽性率。②根據(jù)患者臨床資料分析EGFR、p53、Ki-67 表達(dá)與乳腺病理特征的關(guān)系，臨床資料包括年齡、病理學(xué)分級、分子亞型、腫瘤大小、是否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。參照《2013年St Gallen 乳腺癌會議國際專家共識薈萃》[7]判斷分子亞型，包括 Luminal A 型、Luminal B 型、Her-2過表達(dá)型、Basical-like型。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以“”表示，采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用F檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，等級資料采用Z檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EGFR、p53、Ki-67在乳腺癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)陽性率比較 EGFR、p53、Ki-67在乳腺癌組織中的表達(dá)陽性率均高于癌旁正常組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 EGFR、p53、Ki-67在乳腺組織及癌旁正常組織中的表達(dá)陽性率比較[n（%）]Table 1 Comparison of positive expression rates of EGFR,p53 and Ki-67 in breast tissues and adjacent normal tissues[n(%)]

2.2 EGFR、p53、Ki-67表達(dá)與乳腺患者病理學(xué)特征的關(guān)系 EGFR、p53、Ki-67表達(dá)與患者年齡、腫瘤大小無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05）；EGFR、Ki-67表達(dá)與病理學(xué)分級、分子亞型有關(guān)（P＜0.05），p53表達(dá)與病理學(xué)分級、分子亞型無關(guān)，見表2。

表2 EGFR、p53、Ki-67表達(dá)與乳腺患者病理學(xué)特征的關(guān)系[n（%）]Table 2 Correlation of EGFR,p53,Ki-67 expression with pathological grading and molecular subtype of breast cancer[n(%)]

3 討論

近年來，隨著人們生活方式的轉(zhuǎn)變和社會生活節(jié)奏的加快，國內(nèi)乳腺癌發(fā)病率呈不斷升高趨勢。乳腺癌具有臨床多樣性特點(diǎn)，不同乳腺癌組織的基因表達(dá)存在差異[8]。當(dāng)前乳腺癌診療分子標(biāo)志物種類較多，但關(guān)于聯(lián)合檢測乳腺癌分子靶標(biāo)研究的報(bào)道較少。隨著乳腺癌研究的不斷深入，EGFR、p53、Ki-67等免疫組化指標(biāo)在指導(dǎo)乳腺癌診療方面的應(yīng)用日趨廣泛[9-10]。因此，有必要探索EGFR、p53、Ki-67在乳腺癌組織中的表達(dá)情況，分析其與乳腺癌病理特征的關(guān)系。

本研究結(jié)果顯示，乳腺癌患者癌組織中EGFR、p53、Ki-67 陽性率高于癌旁組織，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P＜0.05），其中EGFR、Ki-67 與乳腺病理學(xué)分級、分子亞型密切相關(guān)（P＜0.05），表明EGFR、p53、Ki-67 表達(dá)與乳腺癌腫瘤發(fā)生、進(jìn)展相關(guān)。分析原因?yàn)?，EGFR 參與細(xì)胞生長、分化、增殖、粘附、移動等腫瘤發(fā)生和進(jìn)展過程。本研究中EGFR在癌組織中的陽性率為55.43%，在Luminal A 型、Luminal B 型乳腺癌中的表達(dá)水平較低，分別為17.39%、16.67%，在Her-2 過表達(dá)型、Basical-like型乳腺癌中呈高表達(dá)水平，分別為82.61%、89.29%，提示EGFR對Her-2 過表達(dá)型、Basical-like 型乳腺癌的發(fā)展具有重要作用。p53 作為一種抑癌基因，當(dāng)其發(fā)生突變后可導(dǎo)致p53蛋白失活，致使細(xì)胞分裂失控，誘發(fā)癌變。p53 基因在激活DNA 修復(fù)、啟動細(xì)胞凋亡、停止細(xì)胞周期、維護(hù)基因組穩(wěn)定方面發(fā)揮重要作用[11]。Ki-67 是當(dāng)前評估腫瘤細(xì)胞增殖活性的重要參照指標(biāo)，其水平升高能反映腫瘤細(xì)胞增殖水平，而增殖活躍的腫瘤更容易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、侵襲情況[12]。本研究結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳腺癌患者的EGFR、p53、Ki-67表達(dá)水平高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者（P＜0.05），提示EGFR、p53、Ki-67 表達(dá)與乳腺癌的進(jìn)展有關(guān)。本研究結(jié)果還顯示，p53 與乳腺病理學(xué)分級、分子亞型無關(guān)，可能與p53基因突變率較高，特異性較差或本次研究納入樣本數(shù)較少有關(guān)。

綜上所述，EGFR、p53、Ki-67 表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，其中EGFR、Ki-67 與乳腺癌病理學(xué)分級、分子亞型相關(guān)，EGFR、p53、Ki-67表達(dá)水平與乳腺癌腫瘤的發(fā)展有關(guān)，對其進(jìn)行檢測能為臨床診療乳腺癌提供重要的參考依據(jù)。