三七藥材提取過程對雜質(zhì)的控制

譚婷心　林　洪　羅琨熾　李釗文　

三七藥材提取過程對雜質(zhì)的控制

譚婷心林洪羅琨熾李釗文

（廣西梧州制藥（集團）股份有限公司，廣西 梧州 543000）

目的：探索三七藥材提取過程中對雜質(zhì)控制的工藝研究。方法：通過控制淀粉等雜質(zhì)的含量，降低后工序的處理難度，提高生產(chǎn)效率，提升中間體產(chǎn)品質(zhì)量。結(jié)果：通過調(diào)整三七藥材提取過程當中的提取方法、提取溫度、提取時間，能確定最佳提取方法，并對鞣酸、纖維、黃酮類及氨基酸類等雜質(zhì)含量的降低起重要作用，提升三七總皂苷含量。

三七；提??；雜質(zhì)控制；三七總皂苷

引言

三七藥材主要為五加科植物三七Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen的干燥根和根莖，具有散瘀止血、消腫定痛[1]等作用。用于咯血、吐血、衄血、便血、崩漏、外傷出血、胸腹刺痛、跌撲腫痛。三七藥材主要活性成分有皂苷、黃酮、氨基酸等，不同的活性成分具有不同的藥理作用[2]。其中三七總皂苷的主要藥理作用為活血祛瘀、通脈活絡，用于治療瘀血阻絡、中風偏癱、胸痹心痛及視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞癥[3]等。三七總皂苷主要來源于三七主根，主成分分別是三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd[4]。

目前三七藥材常用的提取方法有旋轉(zhuǎn)提取法、超聲提取法、回流提取法、水浸提法等[5]，其中旋轉(zhuǎn)提取法在提取過程當中物料與溶媒能接觸充分，能耗小，提取率高；回流提取法主要特點是在提取濃縮過程中，能始終保持藥材與溶劑中含可溶物質(zhì)高梯度的濃度，使有效成分快速析出，提高提取率[6]。

本文主要選取回流提取法以及旋轉(zhuǎn)提取法來研究不同的提取條件及工藝參數(shù)，達到控制三七藥材提取物中淀粉、鞣酸、纖維、黃酮類及氨基酸等雜質(zhì)含量目的，確定最佳提取方法。本文的提取條件及工藝參數(shù)均通過含量、能耗、效率等進行比對，其中三七藥材提取中，淀粉作為典型存在的非藥效成分幾乎沒有藥理活性，在雜質(zhì)中占比最高，留存在藥液中對三七總皂苷的含量影響最大，因此選取本提取物中的淀粉含量代表雜質(zhì)總體水平，并以此作為三七藥材提取研究的關(guān)鍵思路和方向。

1　材料與方法

1.1　材料與儀器

三七藥材（文山產(chǎn)地）；三七總皂苷對照品（中國藥品生物制品檢定所；批號170409-201904）；水浴鍋（RE-52AA），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（R-300）；乙醇；淀粉含量檢測試劑盒（北京索萊寶科技，批號：20190921）；可見分光光度計（UV2310II）；Waters高效液相色譜儀（e2695/UV2998）。

1.2　方法與結(jié)果

1.2.1回流提取法

1.2.1.1 條件1 不同固液比方法

（1）稱取文山三七藥材500 g，通過粉碎機制成大約80目的細粉，加6倍藥材量的80%乙醇3 L達到固液比為1∶ 6，浸泡4 h后，再放置水浴鍋中加熱回流1 h，溫度為80℃，重復回流2次，合并濾液，得三七藥材提取液①。

（2）稱取文山三七藥材500 g，通過粉碎機制成大約80目的細粉，加8倍藥材量的80%乙醇4 L達到固液比為1∶8，浸泡4 h后，再放置水浴鍋中加熱回流1 h，溫度為80℃，重復回流2次，合并濾液，得三七藥材提取液②。

（3）稱取文山三七藥材500 g，通過粉碎機制成大約80目的細粉，加10倍藥材量的80%乙醇5 L達到固液比為1∶10，浸泡4h后，再放置水浴鍋中加熱回流1 h，溫度為80℃，重復回流2次，合并濾液，得三七藥材提取液③。

1.2.1.2 條件1 不同固液比結(jié)果

（1）含量檢驗方法。

按三七總皂苷含量測定方法測得下述結(jié)果：

表1 條件1含量結(jié)果

結(jié)果如表1所示：固液比1∶6時，三七總皂苷含量較低，而固液比1∶8與固液比1∶10，三七總皂苷含量差別不大，由此可見，固液比1∶8時已能提取充分，能耗更少。

（2）淀粉檢驗方法（淀粉含量檢測試劑盒）。

按淀粉含量測試盒說明書使用，對上述提取物的淀粉含量，以標準曲線法進行測定，結(jié)果如表2所示。

表2 條件2淀粉含量結(jié)果

結(jié)果顯示：固液比1∶8與固液比1∶10的淀粉含量相差不大時，而固液比為1∶6時淀粉含量相對較高。結(jié)合表2含量數(shù)據(jù)結(jié)果，暫時認為固液比1∶8為最優(yōu)固液比，后續(xù)試驗按固液比1∶8進行。

1.2.1.3 條件2 不同提取溫度

（1）稱取文山三七藥材500 g，通過粉碎機制成大約80目的細粉，加6倍藥材量的80%乙醇3 L達到固液比為1∶6，浸泡4小時后，再放置水浴鍋中加熱回流1小時，溫度為60℃，重復回流2次，合并濾液，得三七藥材提取液④。

（2）稱取文山三七藥材500 g，通過粉碎機制成大約80目的細粉，加6倍藥材量的80%乙醇3 L達到固液比為1∶6，浸泡4小時后，再放置水浴鍋中加熱回流1小時，溫度為70℃，重復回流2次，合并濾液，，得三七藥材提取液⑤。

（3）稱取文山三七藥材500 g，通過粉碎機制成大約80目的細粉，加6倍藥材量的80%乙醇3 L達到固液比為1∶6，浸泡4 h后，再放置水浴鍋中加熱回流1 h，溫度為80℃，重復回流2次，合并濾液，得三七藥材提取液⑥。

1.2.1.4 條件2 不同提取溫度結(jié)果

（1）檢驗方法同1.2.1.2中的第一種方法。

表3 條件2含量結(jié)果

結(jié)果如表3所示：當提取溫度為60℃時，三七總皂苷含量最低，而提取溫度為80℃時，三七總皂苷含量最高。

（2）檢驗方法同1.2.1.2中的第二種方法。

表4 條件2淀粉含量結(jié)果

結(jié)果如表4所示：當溫度越高，對三七提取液中淀粉的破壞性越強，結(jié)合表4含量數(shù)據(jù)，可暫時認為提取溫度80℃為最佳提取溫度。

1.2.1.5 條件3 不同提取時間

（1）稱取文山三七藥材500 g，通過粉碎機制成大約80目的細粉，加6倍藥材量的80%乙醇3 L達到固液比為1∶6，浸泡4 h后，再放置水浴鍋中加熱回流1 h，溫度為80℃，重復回流2次，合并濾液，得三七藥材提取液⑦。

（2）稱取文山三七藥材500 g，通過粉碎機制成大約80目的細粉，加6倍藥材量的80%乙醇3 L達到固液比為1∶6，浸泡4 h后，再放置水浴鍋中加熱回流2 h，溫度為80℃，重復回流2次，合并濾液，得三七藥材提取液⑧。

（3）稱取文山三七藥材500 g，通過粉碎機制成大約80目的細粉，加6倍藥材量的80%乙醇3 L達到固液比為1∶6，浸泡4 h后，再放置水浴鍋中加熱回流3 h，溫度為80℃，重復回流2次，合并濾液，得三七藥材提取液⑨。

1.2.1.6 條件3 不同提取溫度結(jié)果

（1）檢驗方法同1.2.1.2中的第一種方法。

表5 條件3含量結(jié)果

結(jié)果如表5所示：當提取時間為3 h，三七總皂苷含量最高，但從數(shù)據(jù)上看，提取時間2 h，與提取時間3 h的三七總皂苷含量差別不大，3 h的提取含量僅比2小時的高2.06%，而能耗多一倍。

（2）檢驗方法同1.2.1.2中的第二種方法。

表6 條件3淀粉結(jié)果

結(jié)果如表6所示：隨著提取時間的增長，淀粉含量下降，但比對提取2 h與提取3 h的淀粉含量，只降低不到10%，結(jié)合表6含量結(jié)果，暫時可認為提取時間每次2 h，重復2次為最佳提取時間。

1.2.2旋轉(zhuǎn)提取法

參數(shù)的選擇與方法均與回流提取法一致，旋轉(zhuǎn)提取法選擇蒸發(fā)儀。

其中條件1（提取溫度為80℃；提取時間為：每次1 h，重復2次）結(jié)果如下。

表7 條件1含量結(jié)果

表8 條件1淀粉含量結(jié)果

結(jié)果如表7所示：當固液比為1∶8時，三七總皂苷含量為最高；結(jié)果如表8所示：固液比條件1∶8與1∶10的淀粉含量差別不大，暫時可認為固液比1∶8為最優(yōu)。

其中條件2（固液比為1∶8，提取時間為重復2次，每次1小時）結(jié)果如下。

表9 條件2含量結(jié)果

表10 條件2淀粉含量結(jié)果

結(jié)果為表9所示：當提取溫度越高，三七總皂苷含量越高，但在旋轉(zhuǎn)提取法中，提取溫度70℃與提取溫度80℃的三七總皂苷含量差別不大，以節(jié)約能耗的角度，選擇提取溫度70℃更為合理；再比較淀粉含量，結(jié)果見表10：當提取溫度升高時，淀粉含量下降，但是隨著溫度的升高，下降的比例降低，按此推斷，淀粉含量再隨著后續(xù)溫度的升高，可能會處于一個穩(wěn)定的數(shù)值，而不會持續(xù)的降低。從節(jié)約能耗的角度，再結(jié)合三七總皂苷含量的數(shù)據(jù)，暫時選擇提取溫度70℃為最優(yōu)。

其中條件3（提取溫度為70℃；固液比為1∶8）結(jié)果如下。

表11 條件3含量結(jié)果

表12 條件3淀粉結(jié)果

結(jié)果為表11、表12所示：隨著提取時間的增加，三七總皂苷的含量升高，淀粉含量降低，但從提取效率來說，提取時間3 h比提取時間2 h含量升高的比例及淀粉含量降低的比例并不高，從節(jié)約能耗角度選擇，可暫時認為提取時間2 h為最優(yōu)。

2　結(jié)果與討論

以上結(jié)果顯示，回流提取法中，工藝條件選擇固液比1∶8，提取溫度80℃，提取時間2小時為最優(yōu)選擇；旋轉(zhuǎn)提取法中，工藝條件選擇固液比1∶8，提取溫度70℃，提取時間2小時為最優(yōu)選擇；再將回流提取法與旋轉(zhuǎn)提取法比較，兩個方法的提取時間與固液比的條件一致，旋轉(zhuǎn)提取法的提取溫度比回流提取法的提取溫度要低，并且通過三七總皂苷的含量數(shù)據(jù)可知，旋轉(zhuǎn)提取法提取的三七總皂苷的含量更高。

綜上所述，淀粉含量與三七總皂苷含量呈反比關(guān)系，且淀粉含量減少，三七總皂苷含量呈線性上升。以此為據(jù)，可認為，三七藥材提取物中的其他雜質(zhì)含量（如鞣酸、纖維、黃酮類及氨基酸等）也隨淀粉的減少而降低。通過以上實驗中，淀粉含量與三七總皂苷含量的數(shù)據(jù)，確實證明了這一點。

從實驗結(jié)果來看，三七藥材提取在大生產(chǎn)中應選擇旋轉(zhuǎn)提取法，因為提取效率更高，不僅能提升三七總皂苷的含量，還能達到降低淀粉、鞣酸、纖維、黃酮類及氨基酸等雜質(zhì)。但是在提取條件的固液比選擇中，在實驗當中，雖然固液比1∶8在實驗階段是最優(yōu)選擇，而在實際大生產(chǎn)中，還要結(jié)合后工序進行比較，后工序還要進行濃縮等工序，當固液比太高會影響后工序的生產(chǎn)效率，在大生產(chǎn)中，可結(jié)合實際情況選擇固液比1∶6或者1∶7都可以。

3 結(jié)論

實驗數(shù)據(jù)顯示，當三七總皂苷的含量升高時，淀粉含量均呈下降趨勢。為證明是否通過設(shè)計不同的工藝條件，提高提取液中三七總皂苷的含量，從而提取液中的淀粉、鞣酸、纖維、黃酮類及氨基酸等雜質(zhì)也隨之降低，通過檢測各個提取液樣品中總黃酮的含量，確實存在這個趨勢。未來的研究方向可以再針對更多的工藝條件開展不同的雜質(zhì)含量測試。

[1]國家藥典委員會. 中國藥典[M]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社，2020.

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Impurity Control in the Extraction Process of Panax Notoginseng

Objective:To explore the technology of impurity control in the extraction of Panax notoginseng. Methods: By controlling the content of impurities such as starch, the difficulty of post-processing was reduced, the production efficiency was improved and the quality of intermediate products was improved. Results: By adjusting the extraction method, extraction temperature and extraction time in the extraction process of Panax notoginseng, the best extraction method can be determined, which plays an important role in reducing the content of impurities such as tannic acid, fiber, flavonoids and amino acids, and improving the content of total saponins of Panax notoginseng.

Panax notoginseng; extraction; impurity control; total saponins of Panax notoginseng

R284

A

1008-1151(2022)03-0038-03

2022-01-20

譚婷心（1985－），女，廣西梧州制藥（集團）股份有限公司工程師，從事藥品技術(shù)研究工作。