口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中survivin、IL-24的表達(dá)及意義

周曉麗 鄭雪莉 李福軍

口腔癌患者口腔內(nèi)部分布多種菌群，由于口腔內(nèi)部具有豐富的血液循環(huán)及頻繁的舌肌運(yùn)動(dòng)，癌變后極易出現(xiàn)菌群失調(diào)及口腔感染，部分嚴(yán)重患者還易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，具體的發(fā)病機(jī)制尚不明確[1]。

研究[2]認(rèn)為口腔癌的出現(xiàn)不僅表現(xiàn)為細(xì)胞異常增殖，也是細(xì)胞異常凋亡的結(jié)果，但細(xì)胞凋亡機(jī)制較為復(fù)雜，多種因子參與上述過程中。Survivin是現(xiàn)階段發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制作用最強(qiáng)的基因，但關(guān)于口腔癌的研究資料較少[3]。最新的文獻(xiàn)[4]提示IL-24能夠抑制癌細(xì)胞浸潤和腫瘤血管的生成、誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡并增強(qiáng)對(duì)化療、放療的敏感性，在乳腺癌、卵巢癌、肺癌及黑色素瘤等多種惡性腫瘤中均具有抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用。本研究探討了口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中survivin、IL-24表達(dá)及意義，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2020年3月我院保存的口腔鱗狀細(xì)胞癌組織65例，同時(shí)選取口腔扁平苔蘚組織40例，正常口腔黏膜組織33例，各組織一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)，見表1。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)病理學(xué)確診；②臨床病歷資料保存完整；③患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前行放化療等抗腫瘤治療；②合并有其他系統(tǒng)惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病等。

表1 各組一般資料比較

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

免疫組化染色法檢測survivin、IL-24表達(dá)。分別取適量口腔鱗狀細(xì)胞癌組織、扁平苔蘚組織及正常黏膜組織石蠟包埋后常規(guī)切片，乙醇復(fù)水后蒸餾水沖洗，過氧化氫(3%)滅活內(nèi)源性過氧化物酶，修復(fù)液抗原修復(fù)后牛血清蛋白(5%)封閉，滴加一抗抗體，4℃孵育過夜后滴加羊抗兔二抗，37℃與SABC混合孵育30 min后，DAB染色，蘇木精復(fù)染；脫水、透明后中性膠封片，高倍顯微鏡觀察survivin、IL-24表達(dá)情況[5]。

1.3 結(jié)果判斷

采用雙盲法，由兩名病理科醫(yī)師每張切片隨機(jī)選取10個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，其中陽性細(xì)胞比例≤5%為0分，>5%～25%為1分，>25%～50%為2分，>50%為3分；染色強(qiáng)度無著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。陽性細(xì)胞比例和染色強(qiáng)度得分之積≥3分為陽性表達(dá)[6]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 各組survivin、IL-24表達(dá)比較

口腔鱗狀細(xì)胞癌組織survivin陽性表達(dá)率明顯高于正常口腔黏膜組織和口腔扁平苔蘚組織(P<0.05)，而IL-24陽性表達(dá)率明顯低于正?？谇火つそM織和口腔扁平苔蘚組織(P<0.05)。見表2。

表2 各組survivin、IL-24表達(dá)比較(例，%)

2.2 survivin、IL-24表達(dá)與口腔鱗狀細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系

TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者survivin陽性表達(dá)率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期、高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)；TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者IL-24陽性表達(dá)率明顯低于Ⅰ～Ⅱ期、高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)。見表3。

表3 survivin、IL-24表達(dá)與口腔鱗狀細(xì)胞癌臨床病理的關(guān)系(例，%)

2.3 相關(guān)性分析

口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中survivin與IL-24表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(γs=-0.585，P<0.05)，見表4。

表4 相關(guān)性分析/例

3 討論

口腔鱗狀細(xì)胞癌是指發(fā)生在舌、牙齦、頰、腭、口底等口腔部位的鱗狀上皮癌，屬于口腔癌中最常見的病理類型?？谇坏镊[狀上皮癌除了局部增生，侵蝕周圍組織造成功能障礙以外，還經(jīng)常會(huì)發(fā)生相應(yīng)的頸部淋巴引流區(qū)的淋巴轉(zhuǎn)移[7]。但目前關(guān)于口腔鱗癌具體的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制尚不明晰，能夠在早期準(zhǔn)確診斷口腔癌，對(duì)提高治療效果具有重要意義。

Survivin基因?qū)儆诘蛲鲆种频鞍准易?，可參與細(xì)胞的有絲分裂過程，其異常高表達(dá)可促使腫瘤細(xì)胞逃避凋亡并促進(jìn)細(xì)胞增殖，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞凋亡的雙重作用[8]。IL-24是抗腫瘤基因，具有細(xì)胞因子特性，可通過介導(dǎo)多種不同信號(hào)通路，調(diào)節(jié)細(xì)胞的免疫效應(yīng)、增殖分化及自噬效應(yīng)，進(jìn)而抑制癌細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移、誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡、抑制血管生成[9]。近年來關(guān)于胰腺癌、肺癌及乳腺癌等的研究[10,11]發(fā)現(xiàn)IL-24可抑制上述瘤種的細(xì)胞生長，但關(guān)于口腔鱗癌的研究資料較少。

本研究結(jié)果顯示口腔鱗狀細(xì)胞癌組織survivin陽性表達(dá)率明顯高于正?？谇火つそM織和口腔扁平苔蘚組織，而IL-24陽性表達(dá)率明顯低于正?？谇火つそM織和口腔扁平苔蘚組織。提示survivin、IL-24可以作為口腔癌發(fā)生、發(fā)展的重要標(biāo)志物，具有成為腫瘤診斷的理想標(biāo)志物和基因治療的重要靶點(diǎn)的潛力。Survivin以細(xì)胞周期依賴方式表達(dá)于G2/M期而作用于有絲分裂，能夠使腫瘤細(xì)胞克服凋亡調(diào)控點(diǎn)[12]，因而口腔癌組織中存在survivin高表達(dá)。

survivin、IL-24表達(dá)與口腔鱗狀細(xì)胞癌臨床病理關(guān)系結(jié)果顯示TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者survivin陽性表達(dá)率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期、高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)；TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者IL-24陽性表達(dá)率明顯低于Ⅰ～Ⅱ期、高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.05)。上述結(jié)果說明survivin、IL-24與腫瘤的TNM分期、組織分化及淋巴轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性，可參與口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展過程，可初步將survivin認(rèn)為是口腔鱗癌的候補(bǔ)促癌基因，IL-24作為候補(bǔ)抑癌基因。

相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)口腔鱗狀細(xì)胞癌組織survivin與IL-24表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。該結(jié)果說明腔鱗狀細(xì)胞癌組織中survivin表達(dá)升高，而IL-24表達(dá)降低具有相關(guān)性，可能是因?yàn)閟urvivin可抑制線粒體活化并通過與線粒體的直接結(jié)合，抑制IL-24的表達(dá)，進(jìn)而干預(yù)細(xì)胞的凋亡進(jìn)程，但具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究證實(shí)。有文獻(xiàn)[13-16]提示IL-24主要通過MARK/ERK、JNK、PI3K-AKT等多條通路誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡及抑制癌細(xì)胞增殖，此過程還涉及增加促凋亡蛋白Bax的表達(dá)、抑制抗凋亡蛋白Bcl-2級(jí)上調(diào)caspase蛋白酶等多種過程，阻斷腫瘤細(xì)胞周期，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞凋亡。但現(xiàn)階段IL-24作為新型抑癌基因僅為口腔癌的治療提供了部分理論基礎(chǔ)，具體的調(diào)控和作用機(jī)制還需要更深入的研究。

綜上所述，口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中survivin表達(dá)升高、IL-24表達(dá)降低，且與TNM分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，值得進(jìn)一步研究。