川西合耳菊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究*

達(dá)娃卓瑪 達(dá)娃普尺 次旦多吉

（西藏自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)研究院中藥（藏藥）質(zhì)量控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西藏 拉薩 850005）

藏藥川西合耳菊為菊科合耳菊屬植物川西合耳菊Synotis solidaginea(Hand.-Mazz.) C.Jeffrey et Y.L.Chen 的干燥地上部分，藏文名“尤庫星”。參考《藏藥晶鏡本草》［1］，藏藥材“尤庫星”認(rèn)定為雙花千里光實(shí)屬漢文和拉丁名翻譯錯(cuò)誤，該植物實(shí)際應(yīng)為是川西合耳菊，《中國(guó)植物志》中已修訂?！吨袊?guó)植物志》及《藏藥志》中記載該藥材具有清熱、解毒、治瘡、接骨等功效，其飲片在西藏地區(qū)主要用于愈合創(chuàng)傷、清熱解毒、清肝膽諸熱等癥狀［2-3］。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道川西合耳菊主要含黃酮類、酚酸類、倍半萜類等化學(xué)成分［4-8］，具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗衰老、抗抑郁、抗氧化等藥理作用［9-11］。該植物在治療外傷及美容方面等也有較好的開發(fā)價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)首次對(duì)該藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究，并本著“正本清源”的目的，對(duì)藏藥川西合耳菊藥材正確基原進(jìn)行說明，為全面評(píng)價(jià)和控制該藥材質(zhì)量提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

超聲波清洗儀，超級(jí)循環(huán)恒溫水浴箱：山西海金沙科技有限公司，型號(hào)：PTC-6；電熱鼓風(fēng)干燥箱：上海一恒科學(xué)儀器，型號(hào)：DHG-9242A;馬弗爐：Yamato，型號(hào)：Fo610C;十萬分之一天平：瑞士梅特勒公司，型號(hào)：AB204-S；十萬分之一天平：瑞士梅特勒公司，型號(hào)：XP504；萬用電爐：北京中興偉業(yè)世紀(jì)儀器有限公司，型號(hào)：DL-1；純水/超純水一體機(jī)：默克密理博，型號(hào)：Direct 16。

1.2 試藥

本實(shí)驗(yàn)收集到的10批川西合耳菊藥材，鑒定為菊科合耳菊屬植物川西合耳菊的干燥地上部分。綠原酸購自中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110753-202018。純度：96.1%；自制超純水；分析甲醇、分析丙酮、分析乙酸丁酯、分析甲酸、分析乙醇、三氯化鐵、鐵氰化鉀、三氯化鋁。

表1 川西合耳菊藥材信息

2 方法與結(jié)果

2.1 顯微鑒別

2.1.1 川西合耳菊生藥粉末。本品粉末黃綠色，用水合氯醛透化，稀甘油裝片，置顯微鏡下觀察：葉表皮細(xì)胞表面觀為呈不規(guī)則形或類長(zhǎng)方形，細(xì)胞壁稍微彎曲，氣孔為不定式。纖維成束，導(dǎo)管主要有螺紋導(dǎo)管和具緣紋孔導(dǎo)管，直徑19.04～45.43μm?；ǚ哿｜S色或淡黃色，類球形，直徑25.57～32.70μm，具3 個(gè)萌發(fā)孔，表面具尖刺。冠毛多列性分枝狀毛，各分枝單細(xì)胞先端漸尖，見圖1。

圖1 川西合耳菊生藥粉末

2.1.2 莖橫切面。類圓形，表皮細(xì)胞1列；木質(zhì)部管胞多數(shù)，射線寬2～5列細(xì)胞；髓部由數(shù)十列細(xì)胞組成的環(huán)髓帶包圍，髓部薄壁細(xì)胞較大。中心無導(dǎo)管，見圖2。

圖2 川西合耳菊莖橫切面

2.1.3 靠近根的莖橫切面木栓層為2～5列細(xì)胞；韌皮部較寬，可見石細(xì)胞群；形成層明顯，成環(huán)；木質(zhì)部射線較窄，導(dǎo)管呈環(huán)狀排列，見圖3。

圖3 川西合耳菊靠近根的莖橫切面

2.1.4 葉橫切面。上、下表皮細(xì)胞各1 列，長(zhǎng)方形；葉肉組織不等面型，柵欄組織1～2列，不通過主脈；主脈維管束雙韌型，木化，見圖4。

圖4 川西合耳菊葉橫切面（上方）、葉橫切面局部放大圖（左方）

2.2 薄層鑒別

取本品粉末0.5g，加甲醇50ml，超聲處理40min，濾過，作為供試品溶液。另取綠原酸對(duì)照品，加甲醇制成每1mL 含0.1mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。吸取上述供試品溶液6～10μl、對(duì)照品溶液5μl 分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以乙酸丁酯-甲酸-水（7∶2.5∶2.5）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn);在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)（圖略）。

2.3 水分測(cè)定

共測(cè)定10 批次川西合耳菊，水分含量最低值8.9%，最高值10.9%（見表2），水分平均值為9.7%.以平均值上浮20%為上限，向上取整數(shù)，暫定本品水分不得過12.0%.10 批樣品水分含量均在規(guī)定范圍內(nèi)，合格率為100%.因此擬定川西合耳菊水分含量不得過12.0%.

表2 川西合耳菊水分測(cè)量結(jié)果

2.4 總灰分測(cè)定

共測(cè)定10 批次川西合耳菊，總灰分最低值7.63%，最高值為9.27%（見表3），總灰分平均值為9.8%.以平均值上浮20%為上限，向上取整數(shù)，暫定本品總灰分不得過10.0%.10 批樣品總灰分含量均在規(guī)定范圍內(nèi)，合格率為100%.因此擬定川西合耳菊總灰分含量不得過10.0%.

表3 川西合耳菊總灰分測(cè)量結(jié)果

2.5 酸不溶性灰分

共測(cè)定10批次川西合耳菊，酸不溶性灰分最低值0.51%，最高值0.88%（見表4），酸不溶性灰分平均值為0.61%.以平均值上浮20%為上限，向下取整數(shù)，暫定本品酸不溶性灰分不得過0.73%.10 批樣品酸不溶性灰分含量均在規(guī)定范圍內(nèi)，合格率為100%.因此擬定川西合耳菊酸不溶性灰分含量不得過0.7%.

表4 川西合耳菊酸不溶性灰分測(cè)量結(jié)果

2.6 浸出物測(cè)定

熱浸法測(cè)定，用水作溶劑，共測(cè)定10 批次川西合耳菊浸出物，結(jié)果見表5。可知10 批川西合耳菊的浸出物在22.85%～40.09%之間，平均值為35.01%.以平均值下浮20%為上限，向下取整數(shù)，暫定本品浸出物含量不得小于28.0%.10 批樣品中酸浸出物含量有9批在規(guī)定范圍內(nèi)，合格率為90%.因此擬定川西合耳菊照水溶性浸出物測(cè)定法項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定浸出物含量不得小于28.0%.

表5 川西合耳菊浸出物含量測(cè)量結(jié)果（按干燥品計(jì)）

3 討論和結(jié)論

3.1 討論

3.1.1 薄層色譜鑒別。

3.1.1.1 不同展開劑考察。共考察了三種不同類型的展開系統(tǒng)：36%乙酸、乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（7∶3∶1∶1.2）、乙酸丁酯-甲酸-水（7∶2.5∶2.5），結(jié)果顯示，在乙酸丁酯-甲酸-水（7∶2.5∶2.5）體系下，分離效果好，Rf值適中，展開后斑點(diǎn)明顯，無明顯拖尾。

3.1.1.2 顯色劑的考察。共考察了三種顯色劑顯色效果：A.噴以1%三氯化鐵∶1%鐵氰化鉀混合溶液后于可見光下檢視、B.噴以5%三氯化鋁乙醇溶液后在紫外（365nm）下檢視、C.于紫外（365nm）下檢視。結(jié)果顯示，三者顯色效果都較好，考慮到操作難度，擬選擇顯色劑C作為顯色條件。

3.1.1.3 耐用性考察。分別就不同濕度、溫度以及不同規(guī)格的薄層板對(duì)樣品展開的影響進(jìn)行了考察。結(jié)果顯示，不同濕度、溫度對(duì)樣品展開基本沒有影響。而不同的薄層板的展開效果有所不同，其中硅膠G 板的展開效果最佳。

3.1.2 浸出物含量測(cè)定?？疾炝瞬煌軇?、不同提取方法對(duì)川西合耳菊浸出物提取效率進(jìn)行了考察，結(jié)果見表6。結(jié)果顯示，以水作為提取溶劑，熱浸法提取，浸出物含量最高。

表6 川西合耳菊樣7浸出物提取方式考察結(jié)果

表6 （續(xù)）

3.2 結(jié)論

經(jīng)上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，現(xiàn)擬定川西合耳菊水分含量不得過12%，總灰分不得過10%，酸不溶性灰分不得過0.73%，水溶性浸出物不得少于28.0%.