玉米霉變粒與真菌毒素含量的相關(guān)性分析

◎ 朱春青，胡良宏，孫西勇，郭慶國，趙君永，孟 芳，楊 琨

（中央儲備糧菏澤直屬庫有限公司巨野分公司，山東 菏澤 274900）

真菌毒素屬于真菌生成的次級代謝物，是污染玉米質(zhì)量的一個主要因素。毒素的生成受眾多因素的影響，其中主要因素為溫度、濕度、氧含量、儲糧害蟲和儲藏條件等。玉米中的真菌毒素主要有黃曲霉毒素B1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮，這3種毒素均會使人畜發(fā)生不同程度的急性中毒，表現(xiàn)為發(fā)熱、嘔吐、食欲不振等，嚴重者出現(xiàn)腹水、下肢浮腫、肝大脾大甚至死亡。尤其是黃曲霉毒素是一種強致癌物質(zhì)，嚴重危害人體健康和生命安全[1-2]。因此，研究糧食中真菌毒素含量對確保食品安全至關(guān)重要。

據(jù)統(tǒng)計，全球每年有2%的糧食因為霉變不能食用，主要是霉菌生長導致的結(jié)果[3]。近年來，國家高度重視糧食食品安全，為保證人畜健康，我國食品和飼料安全標準對糧食中的霉變粒和真菌毒素的限量作出了明確的規(guī)定。玉米是我國主要的糧食作物之一，又是飼料生產(chǎn)的重要原料，玉米霉變和真菌毒素污染直接影響玉米儲藏加工的質(zhì)量和安全，因此，研究玉米霉變粒與真菌毒素含量之間的關(guān)系對玉米收儲具有重要的意義[4]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

收購期間隨機扦取的2020年新收獲玉米樣品。真菌毒素快速檢測試條：美國Charm公司；真菌毒素稀釋緩沖液：美國Charm公司；膠體金快速定量檢測試條：美國Charm公司。

1.2 儀器與設(shè)備

HC-300T型高速多功能粉碎機：永康市天祺盛世工貿(mào)有限公司；JM-A3002型電子天平：感量0.01 g，諸暨市超澤衡器設(shè)備有限公司；D1008型離心機：大龍興創(chuàng)實驗儀器有限公司；IKA型渦旋振蕩器：上海川翔生物科技有限公司；ROSA型孵育器（45℃）：美國Charm公司；ROSA型真菌毒素讀數(shù)儀：美國Charm公司。

1.3 試驗方法

按照國家糧食行業(yè)標準LS/T 6111—2015、LS/T 6112—2015、LS/T 6113—2015檢驗玉米中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、黃曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的含量[5-7]。按照國家標準GB/T 5494—2019檢測玉米樣品中霉變粒含量[8]。

1.3.1 樣品處理

稱取有代表性的樣品約500 g，粉碎使之全部通過20目篩，充分混勻。稱取10.00 g試樣于100 mL離心管中，檢測脫氧雪腐鐮刀菌烯醇加入50.0 mL的提取液，檢測黃曲霉毒素和玉米赤霉烯酮加入20.0 mL的提取液。渦旋振蕩1.5 min，取1.0 mL混合液于離心管中，用離心機（4 000 r·min-1）離心1 min。取上清液100 μL于另一離心管中，加入1.0 mL稀釋緩沖液，充分混勻待測。

1.3.2 樣品測定

將膠體金試條從冷藏狀態(tài)2～8 ℃平衡至室溫，并將孵育器預熱至（45±1）℃。將檢測條平放在孵育器凹槽中，輕輕撕開檢測條的薄膜至指示線處。保持移液槍豎直，緩慢均勻移取300 μL待測液至加樣孔中，將薄膜粘回，關(guān)閉孵育器蓋。孵育5 min后，取出檢測條。

選擇真菌毒素讀數(shù)儀檢測頻道，按“ENTER”開始樣品測定，讀數(shù)儀自動顯示樣品中真菌毒素的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 魯西南本地玉米真菌毒素檢測

表1表示的是玉米霉變粒的含量與3種真菌毒素含量之間的關(guān)系。從表1可以看出，魯西南部分地區(qū)的玉米霉變粒與真菌毒素有一定的弱相關(guān)性。霉變粒質(zhì)量分數(shù)≤3.0%時，19份樣品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇和黃曲霉毒素B1含量均低于國家限量值（脫氧雪腐鐮刀菌烯醇≤ 1 000 μg·kg-1，黃曲霉毒素 B1≤ 10 μg·kg-1），而玉米赤霉烯酮的含量即使霉變粒質(zhì)量分數(shù)＜3.0%，仍有6份樣品高于國家限量值（玉米赤霉烯酮≤60 μg·kg-1）；霉變粒＞3.0%時，12份樣品中，其中6份樣品嘔吐毒素含量低于國家限量值，雖然嘔吐毒素值低于國家限量值，但梯度值明顯高于霉變粒＜3.0%時的嘔吐毒素梯度值。黃曲霉毒素有4份樣品高于國家限量標準，梯度也明顯升高。而玉米赤霉烯酮的含量在霉變粒＞3.0%時均高于國家限量值（≤60 μg·kg-1）。通過數(shù)據(jù)分析，真菌毒素的含量與霉變粒含量有一定的相關(guān)性，尤其是嘔吐毒素和玉米赤霉烯酮的含量與霉變粒含量有一定的正相關(guān)性，而對黃曲霉毒素的影響卻不是太明顯。綜上所述，玉米中真菌毒素含量的高低，不能完全通過感官檢驗玉米的霉變粒來判斷。

表1 魯西南玉米樣品霉變粒和真菌毒素含量檢驗結(jié)果表

2.2 東北三省真菌毒素檢測

表2是對東北三省玉米樣品真菌毒素和霉變粒含量的檢測結(jié)果。對霉變粒質(zhì)量分數(shù)2.0%以內(nèi)的玉米樣品檢測3種真菌毒素的含量，20份樣品中嘔吐毒素的含量有3份高于國家限量值且不隨霉變粒的升高而升高，黃曲霉毒素沒有明顯變化且不超國家限量標準，玉米赤霉烯酮的含量有4份樣品高于國家限量值且與霉變粒含量不相關(guān)。綜上表明，東北三省玉米霉變粒與真菌毒素關(guān)系不存在相關(guān)性。

表2 東北三省玉米樣品霉變粒和真菌毒素含量檢驗結(jié)果表

3 結(jié)論與討論

（1）個別地區(qū)玉米霉變粒與真菌毒素值有一定的正向關(guān)系，但霉變粒含量低時對真菌毒素值的影響不明顯。通過檢測結(jié)果可以看出魯西南地區(qū)玉米霉變粒確實是影響真菌毒素的一個重要因素。而通過檢測東北地區(qū)玉米樣品霉變粒與真菌毒素結(jié)果來看，二者不存在相關(guān)性。因此，在收購過程中，因地區(qū)差異，基層糧庫可根據(jù)實地情況結(jié)合霉變粒的檢測結(jié)果，并配合真菌毒素快速檢測儀，從而更準確地監(jiān)控食品安全指標，更好地為收儲服務。

（2）從表1、表2對比可以看出，同年度不同地域的玉米，赤霉病粒占比相同的情況下真菌毒素值也不相同。據(jù)此推斷，赤霉病粒不是影響真菌毒素的唯一因素，通過實地調(diào)查，發(fā)現(xiàn)真菌毒素還與玉米生長過程中的天氣、溫度、濕度、倒伏及環(huán)境有關(guān)。因此，在實際收購中還要參考市場調(diào)查、各地環(huán)境因素和倒伏情況，不能只依靠檢測霉變粒的含量來判斷真菌毒素是否超標。

（3）關(guān)注玉米生長過程中天氣變化，特別是穗期階段的天氣情況。玉米成熟后相關(guān)部門應及時展開質(zhì)量調(diào)查，對糧源及各個地域的毒素有一個大致的了解，然后再結(jié)合實際決定逐車檢驗還是只檢測每天綜合樣?？傊?，為了確保整倉合格，一定要多措并舉，加強收購過程管控。