“無核沃柑”無核成因研究

陳傳武，牛 英，付慧敏，劉冰浩，范七君，蔣海蘭

(廣西柑桔育種與栽培工程技術(shù)研究中心/廣西特色作物研究院，廣西桂林，541004)

“沃柑”是“坦普爾”桔橙和“丹西”紅桔的雜交種，屬高糖晚熟品種。近些年在我國多地引種栽培，表現(xiàn)出適應(yīng)性廣、抗逆性強(qiáng)、生長勢旺、早結(jié)豐產(chǎn)、果實外觀漂亮、品質(zhì)優(yōu)良、果實采收期長等優(yōu)點。在生產(chǎn)中，“沃柑”單獨成片種植時單果種子數(shù)達(dá)10多粒，與花粉正常的其他柑桔品種混栽時單果種子數(shù)可達(dá)20粒?！盁o核沃柑”是通過輻射育種方法從“沃柑”育出的新品種，保留了“沃柑”的優(yōu)良特性，單果種子數(shù)量減少至1～3粒，甚至無籽[1]。近幾年，廣西多地引種了“無核沃柑”，栽培過程中發(fā)現(xiàn)其果實品質(zhì)優(yōu)、口感佳、鮮果采摘上市期長，值得試種，但存在?；ū９y的問題。種子生長發(fā)育過程中產(chǎn)生的激素對著果和果實發(fā)育有重要影響，與有核品種相比，無核品種由于沒有種子，果實發(fā)育期間抵御異常天氣等影響因素的能力往往不如有核品種，因而無核變異的產(chǎn)量一般低于有核品種[2]。造成柑桔無核的原因主要分為以下幾個方面：雄性不育、雌性不育、自交異交不親和、胚胎敗育等[2-3]。本研究以“沃柑”“無核沃柑”為材料，從花藥發(fā)育、異交親和性、胚胎發(fā)育等3個方面觀察比較兩者的生殖發(fā)育特點和差異，探討“無核沃柑”的無核成因，為生產(chǎn)上?；ū９夹g(shù)的開發(fā)應(yīng)用提供理論支持，為進(jìn)一步探索柑桔無核成因的分子機(jī)理奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 花藥發(fā)育動態(tài)觀察

花藥發(fā)育動態(tài)觀測：以5～6年生“沃柑”“無核沃柑”為材料，從花蕾露白至開花，每隔2 d采集一次花蕾，以橫徑相差0.5 mm進(jìn)行分組，每個等級取5個樣(花蕾)。橫徑小于5 mm的花蕾，進(jìn)行整蕾冷凍切片；橫徑大于5 mm的花蕾，剝?nèi)』ㄋ庍M(jìn)行冷凍切片。對切片進(jìn)行熒光顯微觀察[4]。

每藥花粉粒數(shù)量統(tǒng)計：取待開放花蕾20枚，每個花蕾取1枚花藥放入2 mL離心管中，共計20枚。加入200 μL蒸餾水，用玻棒碾碎花藥，再加入800 μL 0.5% 吐溫20溶液，充分振蕩，使花粉粒均勻分布于溶液中。用10 μL移液槍吸取2 μL花粉粒懸浮液滴于載玻片上，10×顯微鏡下觀察，統(tǒng)計2 μL懸浮液中的花粉粒數(shù)，重復(fù)3次。按下列公式計算每枚花藥的花粉量：每枚花藥花粉量(粒/花藥)=(每2 μL花粉粒懸浮液中的花粉粒數(shù)×500)/20。

1.2 異交親和性觀察

開花期對“沃柑”“無核沃柑”進(jìn)行自然授粉(因自身花粉粒極少，未進(jìn)行自交授粉；果園附近種植有金秋砂糖桔)及分別以“桂橙1號”“琯溪蜜柚”“北京檸檬”為父本人工異花授粉。授粉后7 d和14 d每個處理各取雌蕊10個，F(xiàn)AA固定液固定，苯胺藍(lán)染色法觀察花粉管生長情況。具體步聚：(1)將固定保存的雌蕊，用梯度酒精浸洗(70%、50%、30%、蒸餾水，每級15 min)；(2)將雌蕊縱切或橫切成若干薄片，置于10%亞硫酸鈉溶液(采用無水亞硫酸鈉配制)中沸水浴10～20 min；(3)沸水浴后，吸除表面溶液，用蒸餾水浸洗一遍；(4)加入適量0.1%水溶性苯胺藍(lán)染色液浸染20 min以上；(5)用吸管和鑷子轉(zhuǎn)移材料至載玻片上，蓋上蓋玻片適當(dāng)壓展后進(jìn)行熒光顯微觀察。成熟期采收果實，統(tǒng)計每果種子數(shù)。0.1%苯胺藍(lán)染液配制方法：稱取苯胺藍(lán)0.1 g溶于100 mL 0.1 mol/L K3PO4溶液中，裝入棕色試劑瓶避光冷藏。

1.3 種子發(fā)育動態(tài)觀察

開花期用“琯溪蜜柚”做父本，分別對“沃柑”“無核沃柑”進(jìn)行人工授粉。授粉后，每隔兩周，每個處理各取5個果實觀察種子發(fā)育動態(tài)。果實橫徑小于3 cm、種子較小時，切取帶種子的果實中柱進(jìn)行冷凍切片；果實橫徑大于3 cm、種子較大時，剝?nèi)》N子進(jìn)行冷凍切片。對切片進(jìn)行熒光顯微觀察[4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 花藥發(fā)育動態(tài)觀察

“沃柑”“無核沃柑”的花朵形態(tài)相似：花瓣5片，花瓣長0.7～1.1 cm，花瓣寬0.5～0.6 cm；花絲分離，雄蕊13～18枚，花絲長0.43～0.77 cm，花藥長0.2 cm左右；花藥淺黃白色，短小，上窄下圓，不飽滿較扁平，花藥低于柱頭，露柱花較多；開花后花藥呈淡黃白色，部分花藥黃褐色干癟狀，花藥大多不能開裂或部分開裂，肉眼難以看到花粉粒。解剖鏡下，“沃柑”花藥稍飽滿，可見少量花粉粒；“無核沃柑”花藥更為干癟，開裂少，可見花粉粒更少(見圖1 A1—A2和B1—B2)?！氨本幟省被ㄋ帲螒B(tài)飽滿，顏色金黃，成熟時正常開裂并散出大量花粉(見圖1 C1—C2)。

“沃柑”“無核沃柑”的每枚花藥平均花粉粒數(shù)量相當(dāng)，分別為1 062和1 000粒；每枚花藥有4個花粉囊，大多數(shù)外側(cè)的2個花粉囊較正常，但形態(tài)不飽滿、內(nèi)徑小、花粉粒少；內(nèi)側(cè)的2個花粉囊大多發(fā)育不良或不發(fā)育；由于花粉囊較小、不飽滿，藥室壁受擠壓程度輕，大蕾期中間層細(xì)胞仍留存，藥室壁較厚(見圖1 A3和B3)。“北京檸檬”的4個花粉囊內(nèi)徑大，為飽滿的圓形，且大小均勻，每枚花藥平均花粉粒數(shù)量達(dá)11 775粒；由于花粉囊較大飽滿，藥室壁受擠壓程度重，大蕾期中間層細(xì)胞已被擠壓破壞，僅留存表皮和內(nèi)壁，藥室壁較薄(見圖1 C3)。

“沃柑”“無核沃柑”的花藥發(fā)育動態(tài)較一致。當(dāng)花蕾橫徑為2.6～3.0 mm時，花藥的4個角隅隆起，花粉囊形態(tài)可見，外側(cè)兩個花粉囊發(fā)育較正常，內(nèi)側(cè)兩個花粉囊較小或不發(fā)育；藥室壁未發(fā)育完全，與花粉囊間組織形態(tài)界限不分明(見圖2 A1和B1)。當(dāng)花蕾橫徑為3.6～4.0 mm時，花粉囊內(nèi)徑進(jìn)一步增大，花粉母細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂時期，整體呈團(tuán)塊狀黏連；藥室表皮層細(xì)胞和內(nèi)壁細(xì)胞形態(tài)逐漸分明(見圖2 A2和B3)。當(dāng)花蕾橫徑為4.6～5.0 mm時，四分體壁被胼胝質(zhì)酶溶解，花粉粒清晰可見，但挨擠成團(tuán)；藥室表皮層、內(nèi)壁層、2～3層中間層及絨氈層細(xì)胞形態(tài)分明(見圖2 A3和B3)。當(dāng)花蕾橫徑為5.6～6.0 mm時，花粉囊內(nèi)徑增至最大，花粉粒分散開來，藥室壁內(nèi)層和中間層細(xì)胞開始不均勻條狀加厚，進(jìn)入開花散粉時期(見圖2 A4和B4)。從花藥的發(fā)育動態(tài)看，“沃柑”“無核沃柑”的花藥都存在發(fā)育不良現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為花粉囊發(fā)育不良或不發(fā)育，從而導(dǎo)致花粉囊中花粉粒數(shù)量少或無花粉粒產(chǎn)生。從花藥的外觀形態(tài)看，“沃柑”“無核沃柑”的花藥均屬于敗育型花藥[5]。

注：Ep-表皮；En-藥室內(nèi)壁；Ml-中間層；Ta-絨氈層；Ms-小孢子。A1—A3為“沃柑”花藥大蕾期(A1)、開花期(A2)外觀形態(tài)和大蕾期(A3)顯微形態(tài)；B1—B3為“無核沃柑”花藥大蕾期(B1)、開花期(B2)外觀形態(tài)和大蕾期(B3)顯微形態(tài)；C1—C3為“北京檸檬”花藥大蕾期(C1)、開花期(C2)外觀形態(tài)和大蕾期(C3)顯微形態(tài)。圖1 “沃柑”“無核沃柑”“北京檸檬”花藥外觀形態(tài)和顯微形態(tài)

2.2 異交親和性觀察

自然授粉時，“沃柑”“無核沃柑”柱頭上可見花粉粒極少。人工異花授粉時，“桂橙1號”“琯溪蜜柚”“北京檸檬”的花粉均能在“沃柑”“無核沃柑”柱頭上萌發(fā)，并經(jīng)花柱道進(jìn)入子房室(見圖3 A1和B1)，偶見花粉管伸入胚珠(見圖3 A2和B2)。

“沃柑”自然授粉及分別以“桂橙1號”“琯溪蜜柚”“北京檸檬”花粉進(jìn)行異花授粉后，每果種子數(shù)較多，分別為12.0、10.0、18.5和16.0粒(見圖3 A3)。“無核沃柑”自然授粉及分別以“桂橙1號”“琯溪蜜柚”“北京檸檬”花粉進(jìn)行異花授粉后，每果種子數(shù)較少，分別為0、1.0、1.5和0.5粒(見圖3 B3)。從異花授粉花粉管生長情況和果實結(jié)籽情況看，“無核沃柑”異花授粉后，花粉管可正常生長進(jìn)入子房室，其無核發(fā)生部位在胚珠，成因可能為雌性不育、受精受阻或胚胎敗育。

2.3 種子發(fā)育動態(tài)觀察

“沃柑”“無核沃柑”的子房形態(tài)相似，通常10室，每室2～6個胚珠，多為4個。異花(“琯溪蜜柚”花粉)授粉后2周，“沃柑”“無核沃柑”的胚珠大小無明顯差異，可見小的胚囊腔，部分胚珠的珠心細(xì)胞開始解體(見圖4 A1和B1)。授粉后4周，“沃柑”胚珠的大小分化明顯，較大胚珠的珠被、珠心進(jìn)一步發(fā)育(以下稱為正常胚珠)，較小胚珠則與2周左右時無明顯差異(見圖4 A2)；“無核沃柑”極少數(shù)胚珠進(jìn)一步發(fā)育長大，大部分胚珠的大小與授粉后2周無明顯差異，珠心細(xì)胞和內(nèi)珠被進(jìn)一步解體，在外珠被和胚囊間形成空腔(以下稱為異常胚珠)(見圖4 B2)。授粉后10周，“沃柑”正常胚珠進(jìn)一步發(fā)育，胚囊腔明顯長大，內(nèi)外珠被、珠心組織和胚囊組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)明晰(見圖4 A3)；“無核沃柑”異常胚珠的珠被、珠心和胚囊明顯解體、萎蔫(見圖4 B3)。授粉后12周，“沃柑”正常胚珠的胚囊腔直徑已達(dá)胚珠橫徑的1/3，且充滿游離胚乳核(見圖4 A4)，種子質(zhì)軟、種皮光滑(見圖4 C1-a)，未發(fā)現(xiàn)球形或心形胚(見圖4 C1-b)；“無核沃柑”異常胚珠完全萎蔫、皺縮，形成大小0.5 mm左右的微小癟子(見圖4 B4)。授粉后14周，“沃柑”正常發(fā)育種子的種皮表面出現(xiàn)明顯的棱紋，質(zhì)地變硬(見圖4 C2-a)；胚囊占據(jù)整個珠心，珠心細(xì)胞被壓擠成薄層，合子胚大多發(fā)育成球形、心形或較小的子葉胚(見圖4 A5和C2-b)。授粉后16周，“沃柑”的合子胚迅速發(fā)育成大小不等、質(zhì)地較軟、晶瑩剔透的子葉胚(見圖4 A6、C3-a和C3-b)。授粉后20周，“沃柑”較大的子葉胚已長滿整個胚囊，質(zhì)地變硬(見圖4 C4-a和 C4-b)。授粉后20周，“沃柑”的敗育種子大小不一，大的癟子長寬與正常種子相當(dāng)，小的癟子與授粉后兩周時的胚珠大小相當(dāng)(見圖4 C5-a)；“無核沃柑”的敗育種子普遍較小，大部分肉眼幾乎不可見(見圖4 C5-b)。

注：A1—A4“沃柑”花蕾直徑分別為2.6～3.0、3.6～4.0、4.6～5.0、5.6～6.0 mm時花藥顯微形態(tài)；B1—B4“無核沃柑”花蕾直徑分別為2.6～3.0、3.6～4.0、4.6～5.0、5.6～6.0 mm時花藥顯微形態(tài)。圖2 “沃柑”“無核沃柑”花藥發(fā)育動態(tài)

注：A1.“北京檸檬”花粉管進(jìn)入沃柑子房室；A2.“北京檸檬”花粉管進(jìn)入沃柑胚珠；B1.“北京檸檬”花粉管生長進(jìn)入“無核沃柑”柱頭和花柱；B2.“北京檸檬”花粉管生長進(jìn)入“無核沃柑”子房室和胚珠；A3.“沃柑”結(jié)籽狀(a.自然授粉；b.“桂橙1號”授粉；c.“琯溪蜜柚”授粉；d.“北京檸檬”授粉)；B3.“無核沃柑”結(jié)籽狀(a.自然授粉；b.“桂橙1號”授粉；c.“琯溪蜜柚”授粉；d.“北京檸檬”授粉)。圖3 “沃柑”“無核沃柑”異交親和性觀察

“無核沃柑”種子敗育的主要表現(xiàn)為早期珠心細(xì)胞解體，胚囊、胚珠停止發(fā)育，繼而引發(fā)整個胚珠的萎蔫、皺縮。本研究未能對胚囊的發(fā)育進(jìn)行系統(tǒng)的顯微觀察，不能判定“無核沃柑”的胚囊是否發(fā)育正常，也不能判定雌雄配子是否結(jié)合產(chǎn)生合子，因此，不能確定由胚囊敗育、受精受阻和早期胚敗育中的哪個因素導(dǎo)致了“無核沃柑”的種子敗育。

注：OI-外珠被；II-內(nèi)珠被；NC-珠心細(xì)胞；ES-胚囊；E-胚；A1—A6為授粉后2、4、10、12、14和16周“沃柑”種子的發(fā)育動態(tài)；B1—B4為授粉后2、4、10和12周“無核沃柑”種子的發(fā)育動態(tài)；C1-a和C1-b為授粉后12周“沃柑”的種子和胚囊；C2-a、C2-b，授粉后14周“沃柑”的種子和幼胚；C3-a和C3-b為授粉后16周“沃柑”的種子和胚；C4-a和C4-b為授粉后20周“沃柑”的種子和胚；C5-a為授粉后20周“沃柑”的敗育種子；C5-b為授粉后20周“無核沃柑”的敗育種子。圖4 “沃柑”“無核沃柑”種子發(fā)育動態(tài)

3 討論

3.1 雄性不育

雄性不育是柑桔無核的主要原因，溫州蜜柑和臍橙是雄性不育導(dǎo)致無核的代表，“伏令夏橙”“馬敘葡萄柚”“無籽甌柑”“少核紅江橙”等的無核和少核也與花粉部分?jǐn)∮嚓P(guān)[2，5-10]。有研究表明，花藥外觀形態(tài)與花粉育性密切相關(guān)[5，8-9]。陳力耕把雄性不育的溫州蜜柑做母本與雄性正?？捎谋∑ぜ?xì)葉甜橙做父本雜交所獲得的F1代單株的花粉育性分為正常型、低育型、敗育型和退化型；正常型單株的花藥形態(tài)飽滿、顏色金黃，成熟時正常開裂并能散出大量花粉；低育型單株的花藥呈短圓形，但形態(tài)較為飽滿，黃色或淡黃色，可開裂散粉，但花粉量明顯少于正常可育型；敗育型單株的花藥較短小，部分或大部分呈干癟狀態(tài)，色澤灰白或略顯淡黃，花藥大多不能開裂，開裂的也極少散出花粉；退化型單株的花藥呈箭頭狀，花藥與花絲基本等粗，似為花絲的直接延長，顏色灰白，毫無花粉粒[5]。胡志勇等發(fā)現(xiàn)，花藥的顏色與飽滿狀況基本上能反映該品種花粉的育性：花藥敗育品種“格倫臍橙”的花藥空癟、呈乳白色，完全沒有花粉；細(xì)胞質(zhì)雄性不育(細(xì)胞質(zhì)內(nèi)遺傳物質(zhì)控制花粉粒敗育等雄性個體不育的現(xiàn)象，不育性狀可以通過母性遺傳傳遞給后代)品種“國慶一號”溫州蜜柑的花藥細(xì)尖而癟，呈淺黃色；低育少核品種“華農(nóng)本地早”桔的花藥較飽滿，呈淡黃色；育性最強(qiáng)的多核品種“HB柚”的花藥飽滿、呈金黃色[8]。張遲等研究表明，“有籽甌柑”花藥飽滿，色澤金黃，在室內(nèi)放置2～3 d后花藥自然開裂散粉；“無籽甌柑”花藥空癟，色澤淡黃，在室內(nèi)放置2～3 d后花藥上幾乎沒有自然散發(fā)的花粉[9]。本研究中，“沃柑”“無核沃柑”的花藥短小、扁平，開花后呈干癟狀且大多不能開裂，散粉極少，應(yīng)歸屬為敗育型花藥[5]。

從花藥的組織細(xì)胞形態(tài)看，柑桔正常發(fā)育的花藥，4個藥室發(fā)育基本同步且大小相對一致，形態(tài)圓或橢圓，在花藥成熟后，每側(cè)的2個藥室之間藥隔消失而連成一體，成為具有2個藥室的成熟花藥。細(xì)胞質(zhì)雄性不育品種“國慶一號”溫州蜜柑花藥中的4個花粉囊發(fā)育不同步，外側(cè)的2個花粉囊發(fā)育較快，內(nèi)側(cè)的發(fā)育落后且較小[8]。“蕉柑”花藥從發(fā)育早期開始就陸續(xù)出現(xiàn)一些不正?，F(xiàn)象，表現(xiàn)為藥室發(fā)育受阻，藥室發(fā)育大小不一、畸形，同側(cè)的2個藥囊室之間的藥隔不解體等[11]?！案駛悺蹦毘然ㄋ幵谠缙谟性戽呒?xì)胞形成，但在隨后的發(fā)育過程中造孢細(xì)胞降解、退化，沒有花粉母細(xì)胞形成，最后在花藥室中央形成一個空腔，花藥壁細(xì)胞的分化正常[8]。相關(guān)研究表明，花藥發(fā)育異?，F(xiàn)象出現(xiàn)越早，花粉的敗育愈加嚴(yán)重[2，11]。本研究發(fā)現(xiàn)，與溫州蜜柑[8]和“蕉柑”[11]花藥的發(fā)育類似，“沃柑”“無核沃柑”花藥發(fā)育前期存在4個花粉囊發(fā)育不同步、大小不一的異常現(xiàn)象，后期存在花粉囊小、花粉囊內(nèi)花粉粒少的異常現(xiàn)象，前期花粉囊不正常發(fā)育是導(dǎo)致花藥畸形、花粉粒少的主要原因。

3.2 自交異交親和性

由于部分柑桔品種具有良好的單性結(jié)實能力，自交不親和便成為在毋需雜交的情況下獲得無核果實的一個有益性狀[2-3]。自交不親和在柚類品種中較為典型，“琯溪蜜柚”“晚白柚”“HB柚”“水晶柚”具有單性結(jié)實能力，在不授粉或自花授粉的情況下能獲得無核果實，異花授粉則獲得多籽果實；“沙田柚”“酸柚”“無酸柚”不具有單性結(jié)實能力，在不授粉或自花授粉的情況下不能獲得果實，異花授粉則獲得多籽果實[12]。“沙田柚”自交或異交授粉后，花粉管均能通過柱頭乳突細(xì)胞間隙進(jìn)入柱頭；自交花粉管在花柱1/2左右處停止生長，異交花粉管正常進(jìn)入胚囊[13]。“琯溪蜜柚”“度尾蜜柚”自交和互交(異花)花粉在柱頭上都可正常萌發(fā)；自交花粉管進(jìn)入柱頭組織后，大部分在伸長過程出現(xiàn)破裂，伴隨有內(nèi)容物滲出，在花柱道內(nèi)緣有胼胝質(zhì)出現(xiàn)，但仍有部分花粉管能正常生長進(jìn)入子房，并從胚柄處進(jìn)入胚珠，在珠心組織里觀察到胼胝質(zhì)的積累，其中大多數(shù)“琯溪蜜柚”和少數(shù)“度尾蜜柚”胚珠的胚囊位置出現(xiàn)強(qiáng)烈的熒光亮點，而互交的胚珠中沒有觀察到這些現(xiàn)象[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，與“蕉柑”[15]相似，“沃柑”“無核沃柑”異交花粉管均能通過花柱進(jìn)入子房室，“沃柑”異交均有籽，“無核沃柑”異交均無籽。

3.3 雌性不育和胚敗育

被子植物雌蕊通常由柱頭、花柱和子房構(gòu)成。雌性不育表現(xiàn)為柱頭、花柱和子房不發(fā)育或發(fā)育畸形，胚珠和胚囊發(fā)育異常等[16]。胚囊不育是形成無核柑桔的重要原因之一。華盛頓臍橙、伏令夏橙、哈姆林甜橙、馬敘無核葡萄柚和溫州蜜柑等，在胚囊的大孢子期、二核期、四核期和八核期皆有退化現(xiàn)象[3，6]?！敖陡獭钡牟糠峙咧榘l(fā)育緩慢，珠被不完全包裹珠心，珠心中沒有大孢子母細(xì)胞存在；大部分胚珠的大孢子發(fā)育滯后，花后10 d胚珠和胚囊出現(xiàn)敗育跡象，花后20 d敗育胚囊明顯萎縮[17]。胚敗育是指植物授粉受精后，雌雄配子結(jié)合形成胚，但由于某些因素，胚中途停止發(fā)育的現(xiàn)象[18]?！艾g溪蜜柚”Ⅰ型敗育種子，授粉后5 d珠心細(xì)胞開始出現(xiàn)萎縮，授粉后50 d珠心組織細(xì)胞完全萎縮，外珠被發(fā)育停止，形成0.5 cm左右的癟籽；Ⅱ型敗育種子，授粉后50 d珠心組織細(xì)胞沒有萎縮，胚囊繼續(xù)發(fā)育，胚乳開始萎縮，授粉后65 d未見合子胚的生長，珠心組織細(xì)胞和胚乳逐漸萎縮，最終成為0.7～1 cm左右的癟籽[19]?！澳县S蜜桔”自交、雜交組合授粉后4周多數(shù)胚停滯于合子胚階段，胚囊瓦解，珠心組織也彼此分離形成空腔，最終胚珠退化消失或僅留存胚珠退化的痕跡；授粉后8周大部分飽滿種子的胚發(fā)育到心形胚階段時，胚乳開始瓦解，至成熟期形成大小不一的癟子[20]。本研究發(fā)現(xiàn)，與“琯溪蜜柚”Ⅰ型敗育種子一樣，“無核沃柑”胚珠形態(tài)敗育的起始部位也為珠心細(xì)胞，不同的是“無核沃柑”的珠被停止發(fā)育時期較早，最終形成微小癟子。