桿菌七肽對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)及腸道健康的影響

■李淑瑤 李永安 李佑杰 張 江 熊六鳳 王自蕊*

（1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西 南昌 330045；2.南昌市特色水生生物營(yíng)養(yǎng)生理與健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西南昌 330045；3.安杰利（重慶）生物科技有限公司，重慶 402460）

目前，關(guān)于動(dòng)物源抗菌肽的應(yīng)用較多，而微生物源抗菌肽在魚(yú)類(lèi)飼料中的應(yīng)用報(bào)道較少。桿菌七肽（又名腺苷七肽、Microcin C7七肽）是眾多抗菌肽種類(lèi)中的一種，是腸道微生物分泌的一類(lèi)細(xì)菌素抗菌肽，最早在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)，其分子量較小，由7個(gè)氨基酸殘基組成，其抗菌機(jī)制是通過(guò)破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和干擾微生物蛋白翻譯過(guò)程而實(shí)現(xiàn)[1-2]，且具有抵抗酶降解以及耐高溫的特點(diǎn)，其生產(chǎn)方式可以是微生物發(fā)酵或者是化學(xué)合成[3]。與其他來(lái)源的抗菌肽相比，微生物源抗菌肽還具有原料易獲取、生產(chǎn)周期短、易于規(guī)?；a(chǎn)等突出優(yōu)勢(shì)[4]。體外試驗(yàn)表明，桿菌七肽的抗菌抗逆性強(qiáng)、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，可進(jìn)行制粒和膨化等工藝，質(zhì)量可控，有效成分含量高，安全性較高，相比其他一些抗菌肽由于對(duì)動(dòng)物細(xì)胞存在溶血性而無(wú)法臨床應(yīng)用而言，桿菌七肽并不存在此問(wèn)題[5-7]。隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)飼料中添加抗菌肽能夠促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)、提高飼料轉(zhuǎn)化率和機(jī)體免疫力[8-9]。如今，抗生素耐藥性已成為全世界廣泛關(guān)注的一個(gè)問(wèn)題，嚴(yán)重威脅著人類(lèi)以及動(dòng)物健康，因此迫切地需要新的解決策略和新的抗生素，而桿菌七肽就是一種很有希望解決抗生素耐藥性問(wèn)題的抗生素替代物。

草魚(yú)（Ctenopharyngodon idellus）屬鯉形目、鯉科、草魚(yú)屬，為中國(guó)淡水魚(yú)中“四大家魚(yú)”之一[10]，因其具有生長(zhǎng)快、個(gè)體大、肉味鮮美等優(yōu)點(diǎn)，歷來(lái)受到廣大消費(fèi)者的青睞。在集約化養(yǎng)殖過(guò)程中，為了促進(jìn)草魚(yú)生長(zhǎng)和降低細(xì)菌性疾病的發(fā)生，養(yǎng)殖者往往在飼料中添加抗生素，但長(zhǎng)期這樣下去，養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)增大，草魚(yú)會(huì)產(chǎn)生耐藥性，魚(yú)肉產(chǎn)品中的抗生素殘留量也會(huì)增加，影響消費(fèi)者的身體健康[11]。目前關(guān)于桿菌七肽的研究主要集中在其結(jié)構(gòu)、表達(dá)調(diào)控、殺菌活性以及殺菌機(jī)制等方面，其作為飼料添加劑用于水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的研究幾乎沒(méi)有，因此本試驗(yàn)將不同水平的桿菌七肽添加在草魚(yú)飼料中，研究其對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和腸道健康的影響，從而更好地為桿菌七肽在草魚(yú)飼料中的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)共分5個(gè)處理，每個(gè)處理5個(gè)重復(fù)，每個(gè)網(wǎng)箱有魚(yú)25尾，均重（14.90±0.15）g。以魚(yú)粉、豆粕、菜粕、小麥粉等常規(guī)飼料原料成分組成基礎(chǔ)飼料，根據(jù)《草魚(yú)配合飼料》（GB/T 36205—2018）要求的營(yíng)養(yǎng)水平設(shè)計(jì)飼料配方。試驗(yàn)分為5個(gè)處理組，分別在基礎(chǔ)飼料中添加桿菌七肽為0（對(duì)照組）、2.5、5.0、7.5、10.0 mg/kg（桿菌七肽產(chǎn)品中桿菌七肽的含量為1%，載體為玉米芯粉和麥飯石，占比80%～89%，二氧化硅10%～15%，桿菌七肽含量的測(cè)定方法采用高效液相色譜法[12]，該產(chǎn)品由某生物科技有限公司提供）。將飼料原料經(jīng)粉碎過(guò)60目篩，混合均勻后加工成2 mm顆粒，晾干后貯備飼喂?；A(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)，%）

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在江西農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖基地進(jìn)行。草魚(yú)運(yùn)到時(shí)用2%的食鹽水消毒，并進(jìn)行水溫過(guò)渡。暫養(yǎng)期間用基礎(chǔ)飼料投喂2周。試驗(yàn)開(kāi)始前禁食24 h，選用規(guī)格整齊、體格健壯、體重相近的魚(yú)隨機(jī)分到25個(gè)網(wǎng)箱。每天08：00、17：00各投喂飼料1次，每次投喂均做到細(xì)撒、慢投，投喂時(shí)間不少于30 min。日投餌量一般根據(jù)試驗(yàn)魚(yú)總重量與投飼率的乘積所決定，也受天氣變化、試驗(yàn)魚(yú)食欲強(qiáng)弱的影響，酌情增減日投飼量，日投喂率約為體重的10%，對(duì)未吃食完的飼料進(jìn)行打撈并稱(chēng)重，及時(shí)捕撈死亡魚(yú)體，以免污染水質(zhì)。日夜連續(xù)充氣增氧、控溫，以保持溶氧量在5 mg/L以上，水溫控制在25 ℃左右。飼養(yǎng)周期為60 d。

1.3 樣品采集及測(cè)定方法

試驗(yàn)結(jié)束后禁食24 h，稱(chēng)重，計(jì)算末體重、增重率及特定生長(zhǎng)率；抽血后立即解剖，稱(chēng)量?jī)?nèi)臟重和胴體重，分離腎臟、脾臟、肝臟和腸道并稱(chēng)重；測(cè)量體長(zhǎng)、全長(zhǎng)及腸長(zhǎng)并做好記錄；取腸道（前、中、后）做切片；取腸道內(nèi)容物用于微生物的培養(yǎng)分析：解剖取出腸道，擠出內(nèi)容物至無(wú)菌離心管中，立即放入液氮，之后放于-80 ℃冰箱凍存；取背肌用于肌肉營(yíng)養(yǎng)水平的測(cè)定，-20 ℃保存。

1.4 生長(zhǎng)性能指標(biāo)

增重率（WGR，%）=（終末體重-初始體重）/初始體重×100

特定生長(zhǎng)率（SGR，%/d）= [Ln（終末體重）-Ln（初始體重）]/試驗(yàn)天數(shù)×100

攝食率（FI，%/d）=投喂飼料總量/[（初始體重+終末體重）/2×試驗(yàn)天數(shù)]×100

飼料系數(shù)（FCR）=平均飼料攝入量/（終末體重-初始體重）肥滿度（CF，g/cm3）=體重/體長(zhǎng)3×100胴體率（CR，%）=胴體重/體重×100

1.5 形體指數(shù)

內(nèi)臟指數(shù)（VSI，%）=內(nèi)臟重/體重×100

腎臟指數(shù)（RI，%）=腎臟重/體重×100

肝臟指數(shù)（HSI，%）=肝臟重/體重×100

脾臟指數(shù)（SI，%）=脾臟重/體重×100

腸道相對(duì)質(zhì)量（%）=腸道重量/體重×100

腸道相對(duì)長(zhǎng)度（%）=腸道長(zhǎng)度/體重×100。

腸系膜脂肪比（MFI，%）=腸系膜脂肪重/體重×100

1.6 肌肉營(yíng)養(yǎng)水平分析

肌肉樣品經(jīng)過(guò)干燥處理后進(jìn)行水分、粗蛋白、粗脂肪以及粗灰分含量的測(cè)定。水分含量測(cè)定采用105 ℃烘箱干燥恒重法（GB/T 6435—2014）；粗蛋白含量測(cè)定采用凱氏定氮法（GB/T 6432—1994)；粗脂肪含量測(cè)定采用乙醚抽提法（GB/T 6433—2006）；粗灰分含量測(cè)定采用馬弗爐550 ℃灼燒法（GB/T 6438—2007）。

1.7 血清生化指標(biāo)測(cè)定

試驗(yàn)共測(cè)定血清中6 個(gè)指標(biāo)，包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（AKP）、超氧化物歧化酶（SOD）、總抗氧化能力（T-AOC）、三酰甘油（TG）。所有指標(biāo)均采用試劑盒測(cè)定，所用試劑盒購(gòu)自南京建成生物研究所，一切操作按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.8 腸道微生物的培養(yǎng)

解凍腸道內(nèi)容物，置于搖床37 ℃復(fù)蘇。按1 g內(nèi)容物加入9 mL 無(wú)菌PBS 緩沖溶液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)靹?，得到樣品。然后進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)謩e制備10-1、10-2、10-3和10-4稀釋液。選用10-2、10-3和10-4稀釋液進(jìn)行固體培養(yǎng)基平板劃線，每個(gè)梯度做兩個(gè)重復(fù)。大腸桿菌的培養(yǎng)選用伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基，乳酸桿菌的培養(yǎng)選用MRS培養(yǎng)基。將劃線好的平板置于37 ℃恒溫生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h。培養(yǎng)結(jié)束后，選取細(xì)菌生長(zhǎng)疏密適當(dāng)、菌落清晰的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并將結(jié)果換算成每克樣品中菌落數(shù)（CFU/g）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.9 腸道組織切片的觀察

試驗(yàn)進(jìn)行至60 d，截取草魚(yú)腸道前、中、后三段腸段，用磷酸緩沖鹽溶液小心沖洗后迅速置于4%甲醛固定液中固定。按常規(guī)方法將固定好的腸段制作成石蠟切片，經(jīng)蘇木精-伊紅（HE）染色后采用光學(xué)顯微鏡觀察并選取區(qū)域拍照（倍數(shù)×100），而后使用Image pro plus 6.0進(jìn)行腸道絨毛高度、隱窩深度和肌層厚度的測(cè)量。

1.10 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 25.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（Mean±SE）”表示。采用單因素方差分析（one-way ANOVA，LSD），進(jìn)行Duncan’s多重比較，分析組間差異顯著性，顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中添加桿菌七肽對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響（見(jiàn)表2）

表2 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

由表2可以看出，飼料中添加7.5 mg/kg桿菌七肽組的WGR 和SGR 顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），分別提高34.34%和18.58%，其余組間差異不顯著（P＞0.05），10.0 mg/kg桿菌七肽組的WGR和SGR有下降趨勢(shì)。各組間攝食率和飼料系數(shù)差異不顯著（P＞0.05），7.5 mg/kg桿菌七肽組飼料系數(shù)最低，相比對(duì)照組降低26.83%。各組草魚(yú)肥滿度和胴體率組間差異不顯著（P＞0.05）。飼料中添加桿菌七肽與草魚(yú)WGR和SGR的關(guān)系通過(guò)建立折線模型得出最適添加量分別為7.8 mg/kg和7.9 mg/kg，如圖1所示。

圖1 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)增重率和特定生長(zhǎng)率的影響

2.2 飼料中添加桿菌七肽對(duì)草魚(yú)形體指數(shù)的影響（見(jiàn)表3）

由表3可知，飼料中添加桿菌七肽對(duì)草魚(yú)內(nèi)臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、腸道相對(duì)重量、腸道相對(duì)長(zhǎng)度以及腸系膜脂肪比各組間差異均不顯著（P＞0.05）。

表3 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)形體指數(shù)的影響（%）

2.3 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)肌肉營(yíng)養(yǎng)水平的影響（見(jiàn)表4）

表4 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)肌肉營(yíng)養(yǎng)水平的影響（濕重基礎(chǔ)，%）

由表4 可知，在0 和2.5 mg/kg 桿菌七肽組間粗蛋白和粗脂肪含量差異不顯著（P＞0.05）。相比對(duì)照組，5.0、7.5 mg/kg 和10.0 mg/kg 桿菌七肽組的草魚(yú)肌肉粗蛋白含量有不同程度的降低，分別降低8.62%、4.28%和13.58%，粗脂肪含量顯著降低（P＜0.05）。各組間水分和粗灰分均差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響（見(jiàn)表5）

由表5可知，飼料中添加桿菌七肽顯著降低血清ALT 和AST 活性，7.5 mg/kg 和10.0 mg/kg 的桿菌七肽組血清AKP活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；桿菌七肽的添加提高血清T-AOC活性；桿菌七肽含量為7.5 mg/kg時(shí)，血清SOD 活性與對(duì)照組相比顯著提高7.02%（P＜0.05），與2.5 mg/kg 和5.0 mg/kg 桿菌七肽組無(wú)顯著差異（P＞0.05），高含量的桿菌七肽（10.0 mg/kg）使得SOD活性相對(duì)于對(duì)照組顯著降低2.16%；血清TG活性在組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表5 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

2.5 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)腸道微生物的影響（見(jiàn)表6）

由表6可知，采用平板菌落計(jì)數(shù)法對(duì)各組草魚(yú)腸道大腸桿菌和乳酸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，7.5 mg/kg和10.0 mg/kg桿菌七肽組腸道大腸桿菌數(shù)量顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），桿菌七肽試驗(yàn)組間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。5.0 mg/kg和7.5 mg/kg桿菌七肽組腸道乳酸桿菌數(shù)量顯著高于其他組（P＜0.05）。

表6 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)腸道微生物的影響（×103 CFU/g）

2.6 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)腸道組織結(jié)構(gòu)的影響（見(jiàn)圖2、表7）

由圖2、表7可知，7.5 mg/kg桿菌七肽組前、中、后腸的絨毛形態(tài)清晰。經(jīng)過(guò)測(cè)量，7.5 mg/kg桿菌七肽組的前腸和后腸絨毛高度顯著高于其他組（P＜0.05）；10.0 mg/kg桿菌七肽組各腸段絨毛形態(tài)不完整，其前腸絨毛高度顯著低于7.5 mg/kg桿菌七肽組（P＜0.05)，但和中腸絨毛一樣高于其他組。7.5 mg/kg桿菌七肽組前腸隱窩深度顯著高于10 mg/kg桿菌七肽組，但顯著低于對(duì)照組和5.0 mg/kg桿菌七肽組（P＜0.05)，中腸隱窩深度顯著低于10.0 mg/kg桿菌七肽組（P＜0.05)，與其余3組無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；后腸隱窩深度與對(duì)照組無(wú)顯著性差異（P＞0.05），但顯著低于其他三組（P＜0.05)。比較各腸段組織肌層厚度得出，7.5 mg/kg桿菌七肽組三個(gè)腸段肌層厚度均高于對(duì)照組相應(yīng)腸段肌層厚度。

表7 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)腸道組織的影響

圖2 草魚(yú)腸道組織切片

3 討論

3.1 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能和形體指數(shù)的影響

本試驗(yàn)中，桿菌七肽對(duì)草魚(yú)的WGR 和SGR 有不同程度的影響，而對(duì)FCR、FI、CF、CR和形體指數(shù)無(wú)明顯影響，說(shuō)明桿菌七肽能提高草魚(yú)的生長(zhǎng)性能，而對(duì)形體指數(shù)沒(méi)有顯著性影響。利用復(fù)合抗菌肽對(duì)草魚(yú)進(jìn)行試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在添加量為100、200、400、800 mg/kg 和1 600 mg/kg的復(fù)合抗菌肽試驗(yàn)組中，800 mg/kg組的草魚(yú)增重率、特定生長(zhǎng)率均最高[13]。黃小紅等[14]試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中添加500 mg/kg天蠶素抗菌肽能夠顯著提高草魚(yú)增重率和特定生長(zhǎng)率，相比于對(duì)照組分別提高35.05%和25.72%。在鯉魚(yú)試驗(yàn)中，飼料中適量地添加抗菌肽能有效促進(jìn)鯉魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育，降低餌料系數(shù)，其中5 000 IU/kg的抗菌肽添加量效果最佳[15]。在其他水產(chǎn)動(dòng)物研究中也發(fā)現(xiàn)，湘云鯽飼料中添加150 mg/kg的天蠶素抗菌肽能夠使其增重率和特定生長(zhǎng)率相比于對(duì)照組顯著性提高37.4%和27.5%，但對(duì)肥滿度和形體指數(shù)無(wú)顯著影響[16]；凡納濱對(duì)蝦飼料中添加抗菌肽使得增重率和特定生長(zhǎng)率有所提高[17]，羅非魚(yú)飼料中添加抗菌肽也能夠促進(jìn)生長(zhǎng)，提高增重率[18]。

本試驗(yàn)中，每組之間的攝食率和飼料系數(shù)均沒(méi)有顯著性差異，但增重率、特定生長(zhǎng)率隨著桿菌七肽添加量的增加出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，且飼料系數(shù)有降低的趨勢(shì)，表明飼料中添加桿菌七肽能促進(jìn)草魚(yú)生長(zhǎng)，但過(guò)高的添加量會(huì)抑制草魚(yú)的生長(zhǎng)，之所以會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象可能是桿菌七肽抑制有害病原菌的生長(zhǎng)、調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、提高腸道消化酶活性、增強(qiáng)機(jī)體免疫力和抗氧化能力等，從而提高了生長(zhǎng)性能[19]，但高劑量的桿菌七肽也可能抑制有益菌的生長(zhǎng)而影響到腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。本試驗(yàn)桿菌七肽的最佳添加量為7.5 mg/kg，與王四新等[20]試驗(yàn)的抗菌肽添加量不同，這可能是抗菌肽種類(lèi)和有效成分、試驗(yàn)動(dòng)物品種規(guī)格以及養(yǎng)殖環(huán)境不同造成。

3.2 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響

檢測(cè)魚(yú)體肌肉中基本營(yíng)養(yǎng)成分，如水分、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分等含量是研究魚(yú)類(lèi)肌肉品質(zhì)的基礎(chǔ)。在配合飼料中添加適量抗菌肽促進(jìn)了建鯉肌肉中蛋白質(zhì)的沉積[21-22]，但本試驗(yàn)中肌肉粗蛋白含量隨著桿菌七肽的添加出現(xiàn)了降低趨勢(shì)。魚(yú)肉中脂肪含量過(guò)高會(huì)影響口感，該試驗(yàn)中桿菌七肽的添加降低了粗脂肪含量，說(shuō)明飼料中添加桿菌七肽能夠改善草魚(yú)魚(yú)肉品質(zhì)。

3.3 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

作為重要的生理學(xué)、病理學(xué)以及毒理學(xué)指標(biāo)，血清生化指標(biāo)的測(cè)定通常用于反映魚(yú)體營(yíng)養(yǎng)代謝情況和組織器官功能[23]。在魚(yú)類(lèi)研究中發(fā)現(xiàn)，天蠶素抗菌肽、Surfactin抗菌肽以及水產(chǎn)動(dòng)物重組抗菌肽的添加能促進(jìn)各類(lèi)水產(chǎn)動(dòng)物抗氧化能力和非特異性免疫性能[24]。

在氨基酸代謝過(guò)程中，ALT和AST是兩個(gè)重要的氨基轉(zhuǎn)移酶，其活性可反映機(jī)體蛋白質(zhì)的合成與分解[25-26]。ALT和AST主要存在于肝臟中，通過(guò)測(cè)定血液中ALT和AST含量的高低可以判斷肝臟是否受損[27]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼料中添加桿菌七肽能夠降低血清中ALT和AST含量，而在肉仔雞的日糧中也發(fā)現(xiàn)添加抗菌肽能夠降低ALT水平[28]，說(shuō)明桿菌七肽能夠改善肝功能，有一定的保肝作用。

AKP在免疫反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用，參與吞噬細(xì)胞殺菌過(guò)程，能清除體內(nèi)異物，也是機(jī)體內(nèi)溶酶體的標(biāo)志酶和維持機(jī)體健康所必需的酶[25]。在凡納濱對(duì)蝦和羅非魚(yú)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，抗菌肽能提高血清中AKP活性[29-30]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著桿菌七肽含量的增加，AKP活性提高，說(shuō)明桿菌七肽提高了草魚(yú)的非特異性免疫性能。

SOD是魚(yú)體抗氧化系統(tǒng)中的關(guān)鍵酶之一，它能清除自由基，使其發(fā)生歧化反應(yīng)，產(chǎn)生H2O2和O2，免除其對(duì)生物分子的損傷[31]。T-AOC 用于衡量機(jī)體抗氧化功能，包括酶促抗氧化系統(tǒng)和非酶促抗氧化系統(tǒng)[32]。研究表明飼料中添加0.4%的抗菌肽使得河蟹SOD水平提高39.51%[33]；抗菌肽也能提高羅非魚(yú)[34]和鯉魚(yú)[35]血清中T-AOC和SOD活性。本試驗(yàn)中添加桿菌七肽能提高草魚(yú)血清SOD 和T-AOC 活性，有利于增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力。

TG 在肝臟中合成，是評(píng)價(jià)肝臟是否受損的指標(biāo)之一，肝臟嚴(yán)重受損時(shí)，TG 含量合成減少，而血清中TG含量的降低表現(xiàn)得更早[36]。草魚(yú)血清中TG活性未發(fā)生顯著性變化，說(shuō)明肝臟并未受損。

3.4 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)腸道菌群的影響

腸道微生物作為魚(yú)體消化系統(tǒng)中重要的組成部分，影響著魚(yú)類(lèi)的營(yíng)養(yǎng)吸收、腸道免疫和腸道生理調(diào)節(jié)[37]。大腸桿菌和乳酸桿菌均為動(dòng)物體腸道內(nèi)的正常菌群，但大腸桿菌有些菌株是致病菌，含量過(guò)高則會(huì)引起疾病，乳酸桿菌能增強(qiáng)機(jī)體免疫力，是動(dòng)物體內(nèi)的有益菌[38]。在本試驗(yàn)中，添加桿菌七肽降低草魚(yú)腸道大腸桿菌數(shù)量，增加乳酸桿菌數(shù)量，這與吉富羅非魚(yú)的研究結(jié)果相似[39-40]，表明桿菌七肽可有效調(diào)節(jié)草魚(yú)腸道不同菌群的數(shù)量，改善腸道微生態(tài)環(huán)境，有利于腸道微生態(tài)平衡，對(duì)維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)意義重大。

3.5 桿菌七肽對(duì)草魚(yú)腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

腸道絨毛高度、肌層厚度和隱窩深度是評(píng)價(jià)腸道健康的重要指標(biāo)，絨毛高度影響機(jī)體對(duì)養(yǎng)分的吸收能力，絨毛高度的增加可以提高絨毛表面積，從而能夠更有效地吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[41-42]；隱窩深度影響著小腸細(xì)胞的遷移分化過(guò)程，從而影響消化吸收；腸道蠕動(dòng)的動(dòng)力來(lái)源于平滑肌的收縮，當(dāng)肌層厚度增加時(shí)，腸道蠕動(dòng)增強(qiáng)，從而提高腸道的消化吸收能力[24]。研究表明，在沙門(mén)氏菌日糧中添加AMPs 導(dǎo)致大口黑鱸幼魚(yú)絨毛高度、絨毛寬度、腸壁厚度和腸道直徑的增加[43]。在蘇保元[44]的試驗(yàn)結(jié)果中發(fā)現(xiàn)天蠶素抗菌肽和Surfactin抗菌肽均可增加斜帶石斑魚(yú)的腸黏膜皺襞高度和肌層厚度。本試驗(yàn)結(jié)果與以上研究結(jié)果相似，飼料中添加桿菌七肽可改善草魚(yú)腸道黏膜結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)腸道消化吸收能力，從而促進(jìn)機(jī)體的生長(zhǎng)，然而當(dāng)桿菌七肽用量過(guò)高時(shí)，其廣譜殺菌性會(huì)影響到腸道各類(lèi)微生物的生長(zhǎng)，導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)，影響腸道發(fā)育及腸道組織結(jié)構(gòu)。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，桿菌七肽能提高血清抗氧化能力和免疫性能，改善腸道組織形態(tài)和功能，從而促進(jìn)生長(zhǎng)，且添加量為7.5 mg/kg時(shí)效果較佳。