姜荷花品種“紅火炬”的組織培養(yǎng)技術(shù)

陳 麗，王鍵蓉，陳桂玲，楊碧蘭，鄭丹虹，陳愛華，鄭運(yùn)歡

(汕頭市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，廣東 汕頭 515021)

姜荷花（Curcuma alismatifolia Gagnep）是姜科姜黃屬多年生球根草本植物，原產(chǎn)于泰國清邁一帶。其花型獨(dú)特，花色鮮艷，花期長，因其苞片酷似荷花而得名[1]。作為一種新型的花卉種類，姜荷花是姜荷屬植物中最具觀賞性的高檔切花之一，是國際上流行的一種切花材料，在花卉王國荷蘭是一種稀有高檔的花卉品種，被譽(yù)為“熱帶郁金香”；花期一般在夏秋季，正好可以彌補(bǔ)此時(shí)其他花卉資源相對(duì)較少的空缺,在園林應(yīng)用方面有著十分明顯的優(yōu)勢(shì),可觀賞性強(qiáng)[2]。姜荷花花期長，自然花期一般在3個(gè)月左右，瓶插壽命約15 d；生長快，一般在種植后100 d左右開花，栽培容易，管理簡便，對(duì)栽培環(huán)境大多沒有特殊要求，掌握好栽培季節(jié)和水肥管理方法，即可正常生長和開花，病蟲害也相對(duì)較少。我國主要在海南、廣東、福建種植，且規(guī)模不大，有很大的發(fā)展空間。姜荷花紅火炬因其花期長，花朵大，花色艷麗，產(chǎn)花率高，露地栽培觀賞性好，抗逆性強(qiáng)，既可切花又可盆栽等特點(diǎn)而暢銷。本試驗(yàn)利用組培快繁技術(shù)，對(duì)紅火炬進(jìn)行離體組織培養(yǎng)，快速繁殖來獲得紅火炬種苗，以滿足市場(chǎng)需求[3]。

選用健康、壯實(shí)的紅火炬的花軸作為外植體，比較不同處理方式、不同激素及濃度對(duì)其叢生芽誘導(dǎo)、增殖、分化、壯苗生根的影響，探索適合的培養(yǎng)方法，達(dá)到快速獲得大量種苗的目的。

1 材料與方法

1.1 材料準(zhǔn)備

選取健壯、無病蟲害的紅火炬花軸，先用75%的酒精擦拭其表面的灰塵，然后在超凈工作臺(tái)上將長段的材料于無菌盤中切成3段，用0.1%升汞溶液分別設(shè)置3個(gè)不同的消毒時(shí)間對(duì)比其誘導(dǎo)成功率。消毒時(shí)間：6 min+3 min；10 min+5 min；15 min+8 min，每次用0.1%升汞溶液浸泡消毒后用無菌水沖洗3次，消毒時(shí)消毒液必須要漫過材料并持續(xù)搖動(dòng)，使材料與消毒液充分接觸。消毒完成后將外植體置于無菌盤中，用過濾紙擦干水，剝?nèi)ケ砻婕t色鱗片后切成長與寬均為1~1.5 cm，厚度約為0.5 cm的小塊外植體[4]。

1.2 誘導(dǎo)培養(yǎng)

誘導(dǎo)培養(yǎng)基蔗糖30 g/L、瓊脂粉5.5 g/L，pH值為6.8。將消毒好的外植體接于下列6種培養(yǎng)基中：MS+6-BA 0 mg/L；MS+6-BA 2 mg/L；MS+6-BA 4 mg/L；MS+6-BA 6 mg/L；MS+6-BA 8 mg/L；MS+6-BA 10 mg/L，每瓶培養(yǎng)基接種4塊，每種培養(yǎng)基接種10瓶，室溫（26±2）℃，黑暗培養(yǎng)40 d后觀察誘導(dǎo)情況[5]。

1.3 繼代培養(yǎng)

繼代培養(yǎng)基中的基質(zhì)為蔗糖30 g/L、瓊脂粉5.5 g/L，pH值為6.8。將誘導(dǎo)出的不定芽分成單芽，切掉葉片后分別接種于繼代培養(yǎng)基中，繼代培養(yǎng)基為：MS+6-BA 0mg/L；MS+6-BA 2 mg/L；MS+6-BA 4 mg/L；MS+6-BA 6 mg/L；MS+6-BA 8 mg/L；MS+6-BA 10 mg/L。每瓶培養(yǎng)基接種4個(gè)芽，每種培養(yǎng)基接種5瓶。培養(yǎng)30 d后，調(diào)查芽的增殖情況[6]。

1.4 生根培養(yǎng)

生根培養(yǎng)基中蔗糖20 g/L、瓊脂粉5.5 g/L，pH值為6.8。將經(jīng)繼代培養(yǎng)長到3 cm高并帶有兩個(gè)葉片以上的芽，單個(gè)接種于生根培養(yǎng)基中：MS+NAA 0 mg/L；MS+NAA 0.2 mg/L；MS+NAA 0.4 mg/L；MS+NAA 0.6 mg/L；MS+NAA 0.8 mg/L；MS+NAA 1 mg/L。每瓶培養(yǎng)基接種4個(gè)芽，每個(gè)配方培養(yǎng)基接種10瓶。培養(yǎng)30 d后，統(tǒng)計(jì)平均每株生根條數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同外植體處理方式對(duì)污染率的影響

由表1可知，外植體經(jīng)過滅菌，培養(yǎng)40 d后，第一種處理方式滅菌時(shí)間較短，污染率較高；第二種方式效果相對(duì)合適；第三種處理方式滅菌時(shí)間較長，外植體全部失活。因此，把握外植體的滅菌處理方式對(duì)外植體污染率與死亡率有較大影響。

表1 不同外植體處理方式的污染率與死亡率

2.2 不同培養(yǎng)基對(duì)誘導(dǎo)率的影響

由表2可知，外植體經(jīng)過培養(yǎng)40 d后，當(dāng)6-BA濃度在10 mg/L時(shí)的外植體誘導(dǎo)率較高。因此，6-BA濃度為10 mg/L的培養(yǎng)基較適合外植體的誘導(dǎo)。

表2 不同培養(yǎng)基對(duì)誘導(dǎo)率的影響

2.3 不同培養(yǎng)基對(duì)繼代增殖的影響

由表3可知，不定芽在不同6-BA濃度的培養(yǎng)基上，20 d后都可見叢芽長出。30 d后調(diào)查總芽數(shù)，6-BA濃度在0~6 mg/L時(shí)，隨著6-BA濃度的增加，芽的數(shù)量增多。當(dāng)6-BA濃度大于6 mg/L時(shí)，芽的增殖緩慢，基本與濃度為6 mg/L時(shí)持平。

表3 不同培養(yǎng)基對(duì)繼代增殖的影響

2.4 不同培養(yǎng)基對(duì)生根培養(yǎng)的影響

由表4可知，芽苗培養(yǎng)30 d后，在不同NAA濃度的培養(yǎng)基中均能生根。當(dāng)NAA濃度大于0.2 mg/L時(shí)，平均每株苗生根條數(shù)與NAA濃度為0.2 mg/L時(shí)持平，每株苗根的條數(shù)不隨NAA濃度提高而增加。

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明：不同的處理方式與外源激素培養(yǎng)基對(duì)紅火炬不定芽的生長具有一定影響。采用10 min+5 min的0.1%升汞溶液消毒方式比較適合，污染率與死亡率較低；采用6 min+3 min的0.1%升汞溶液消毒時(shí)間較短，污染嚴(yán)重；采用15 min+8 min的0.1%升汞溶液消毒時(shí)間較長，植物組織全部死亡。當(dāng)6-BA濃度為10 mg/L時(shí)，誘導(dǎo)效果較好。當(dāng)6-BA濃度為6 mg/L時(shí)，增殖的效果較好；且隨著6-BA濃度增長至10 mg/L時(shí)增殖的效果與6-BA濃度為6 mg/L時(shí)持平。當(dāng)NAA濃度為0.2 mg/L時(shí)，生根效果較好且根系強(qiáng)壯。紅火炬通過花軸的組織培養(yǎng)，可提高增殖率，且生產(chǎn)良好，規(guī)格統(tǒng)一，對(duì)規(guī)模化商品化生產(chǎn)具有一定的指導(dǎo)作用。