李晶晶,李澤明,張麗芳,周 超,康 倩,李 旭,李 麗
(錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院,遼寧 錦州 121001)
大黃(Rheum palmatum L)是蓼科的一種多年生草本植物,已經(jīng)有幾千年的用藥歷史,在中國及其他亞洲國家被廣泛的用于治療便秘和胃腸道消化不良等疾病。蒽醌是多酚的主要成分,包括大黃酚、大黃素和蘆薈素等。本研究通過小鼠小腸排便作用實(shí)驗(yàn),對大黃提取物的對小鼠排便的影響進(jìn)行研究。
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品 大黃超聲波提取物(每1g提取物分別相當(dāng)于原生藥15g),由錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院動物藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。
炭末標(biāo)記混懸液的制備:稱量1g羧甲基纖維素鈉,加入100mL蒸餾水,充分溶解,向1%羧甲基纖維素鈉溶液中加入5g活性炭粉末,煮沸30min,待溶液冷卻后,加入蒸餾水定容至100mL,密封,備用。
1.1.2 實(shí)驗(yàn)器材 KQ-300B型超聲波清洗器、FA2004N型電子天平、DHG-9245A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、手術(shù)剪、眼科鑷、鼠籠、灌胃針及注射器等,均由錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院動物藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。
1.1.3 實(shí)驗(yàn)動物 昆明系小鼠,雌雄各半,體重為(20±2)g,購自錦州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
將50只小鼠隨機(jī)分為5組,每組10只。實(shí)驗(yàn)開始前16h將各組小鼠禁食,但正常飲水。正式實(shí)驗(yàn)前,稱重并記錄各組小鼠的體重。空白對照組小鼠給予蒸餾水,劑量為0.2mL/10g,大黃超聲波提取物高、中、低劑量組劑量分別為0.4g/kg、0.2g/kg、0.1g/kg,按各組劑量分別配制溶液,灌胃量為0.2mL/10g;便秘模型組小鼠給予大黃水提取液,灌胃量為0.2mL/10g。30min后,對每組小鼠給予炭末混懸液,0.1mL/10g,分別記錄從首次給予炭末混懸液時至小鼠首次排出黑便時的時間、6h內(nèi)小鼠排出黑便的數(shù)量、質(zhì)量及黑便的性狀。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPASS13.0軟件單因素方差分析(one way ANOVA)進(jìn)行組間差異的比較。數(shù)據(jù)用(±S)表示。
實(shí)驗(yàn)各組用藥情況及從首次給予炭末混懸液時至小鼠首次排出黑便時的時間、6h內(nèi)小鼠排出黑便的數(shù)量、質(zhì)量及黑便的性狀(見表1)。
表1 大黃超聲波提取物對小鼠排便的影響(±S,n=10)
表1 大黃超聲波提取物對小鼠排便的影響(±S,n=10)
注:同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。
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試驗(yàn)結(jié)果表明:與空白對照組相比,便秘模型組首次排黑時間、6h內(nèi)排便數(shù)和質(zhì)量均有顯著性差異(P<0.05),糞便的性狀上也有明顯差異,說明造模成功。與便秘模型組比較,大黃水提取物栓劑高、中、低劑量組均顯著縮短了小鼠首次排黑時間(P<0.05),且高劑量組明顯強(qiáng)于中、低劑量組(P<0.05),而中、低劑量組之間差異不顯著(P>0.05);與便秘模型組比較,大黃水提取物栓劑高、中、低劑量組均能顯著性增加小鼠6h內(nèi)排便數(shù)和6h排便質(zhì)量(P<0.05),但三個劑量組間差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明,增大大黃劑量雖可以短時間促進(jìn)排便,但在一定時間內(nèi)動物排便數(shù)量和質(zhì)量沒有顯著增加。
3.1 關(guān)于大黃的化學(xué)成分與作用大黃含有蒽衍生物類、有機(jī)酸類和揮發(fā)油類類等多種有效成分。在大黃的根中含有約2%~5%的蒽衍生物,其中以大黃素、白藜蘆醇和大黃酸為主。蒽衍類成分在國內(nèi)外開發(fā)新型瀉藥研究中是主要檢測的物質(zhì)。除做為瀉藥使用,大黃還被用于改善消化系統(tǒng)、調(diào)節(jié)血液系統(tǒng)、促進(jìn)新陳代謝、影響神經(jīng)系統(tǒng),還可以改善腎臟功能、減輕延緩疼痛、抗炎、抗腫瘤、抑制細(xì)菌、抗氧化應(yīng)激、抗病毒和防止肺部疾病等。
3.2 關(guān)于大黃超聲波提取物對小鼠排便影響紀(jì)曉萍等采用大黃提取物游離蒽醌,觀察記錄小鼠糞便含水量、炭末推進(jìn)率,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明大黃提取物中游離蒽醌可顯著提高便秘型小鼠的炭末推進(jìn)率,促進(jìn)腸運(yùn)動,提高糞便含水量,改善便秘,具有顯著瀉下作用。關(guān)于大黃超聲波提取取的報(bào)道較少,楊波等采用超聲波工藝提取大黃中大黃酚,最佳提取條件為料液比1:35,超聲波功率60%,超聲處理時間30min,本工藝提取率高(13.60%),且省時簡便。本研究在參照以上工藝基礎(chǔ)上,將超聲時間延長到45min,提取率稍有提高(13.85%)。采用復(fù)方地芬諾酯致小鼠便秘模型,此模型是目前運(yùn)用最為普遍的一種試驗(yàn)室便秘模型。通過觀察灌服炭末后首次排出黑便時間,糞便數(shù)量和黑便的性狀,結(jié)果表明0.4mg/10g大黃超聲波提取物對小鼠排便具有顯著的影響(P<0.05)。本試驗(yàn)結(jié)果可為大黃及其提取物在獸醫(yī)臨床上用于治療動物便秘提供依據(jù)。