飼料中常見(jiàn)的獸藥及其檢測(cè)技術(shù)

臧合英

（河南省獸藥飼料監(jiān)察所，河南 鄭州 450008）

獸藥在調(diào)節(jié)動(dòng)物生理機(jī)能，治療、預(yù)防動(dòng)物疫病，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育方面起著重要作用。但是在獸藥使用過(guò)程中，如果無(wú)視休藥期規(guī)定、不遵守食品安全法規(guī)，肆意售賣屠宰動(dòng)物，極易導(dǎo)致動(dòng)物體內(nèi)殘留獸藥成分，而這勢(shì)必會(huì)對(duì)畜牧產(chǎn)品質(zhì)量及消費(fèi)者健康造成不利影響。因此，為了保障畜牧產(chǎn)品質(zhì)量及消費(fèi)者健康安全，必須針對(duì)飼料中常見(jiàn)獸藥做好檢測(cè)工作，熟練掌握獸藥檢測(cè)技術(shù)。

1 飼料中常見(jiàn)的獸藥

1.1 大環(huán)內(nèi)酯類藥物大環(huán)內(nèi)酯類藥物是一種弱堿性抗菌素，紅霉素是其中最具典型的代表。將其運(yùn)用到動(dòng)物養(yǎng)殖當(dāng)中，不僅可以用作治療藥物，而且可以用作預(yù)防藥物，促進(jìn)生長(zhǎng)藥物，而這對(duì)動(dòng)物養(yǎng)殖效益的提高是極為有利的。如果長(zhǎng)期使用這類藥物，在動(dòng)物器官和組織中積累到一定的濃度，會(huì)對(duì)動(dòng)物腎臟器官造成嚴(yán)重危害。消費(fèi)者如果食用這類藥物的高殘留動(dòng)物產(chǎn)品，會(huì)出現(xiàn)毒性、致敏性反應(yīng)，導(dǎo)致體內(nèi)菌群失調(diào)。

1.2 磺胺類藥物磺胺類藥物主要用于治療、預(yù)防細(xì)菌性傳染病。在動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中，常被用于飼料添加劑的磺胺類藥物主要包括磺胺二甲基嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶等。但是據(jù)相關(guān)研究顯示，消費(fèi)者如果長(zhǎng)期食用含有磺胺類藥物殘留的動(dòng)物產(chǎn)品，極易出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)。

1.3 四環(huán)素類藥物四環(huán)素類藥物屬于光譜抗生素的范疇，主要包括四環(huán)素、土霉素、金霉素等。在動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中，四環(huán)素類藥物可以用作消毒劑、獸藥等，用于促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、防治動(dòng)物腸道感染等。但是這類藥物極易造成食品殘留，導(dǎo)致病株出現(xiàn)耐藥性，而且積累到一定濃度，會(huì)導(dǎo)致消費(fèi)者腸道菌群微生態(tài)平衡失調(diào)，出現(xiàn)再生性貧血癥狀。

1.4 氯霉素類抗生素氯霉素類抗生素是一種光譜類抗生素，主要包括氟甲砜霉素、甲砜霉素、氯霉素等，常被應(yīng)用于動(dòng)物傳染病的預(yù)防及治療中。但是由于氯霉素類抗生素極易蓄積于人體及動(dòng)物體內(nèi)，導(dǎo)致人體或動(dòng)物體出現(xiàn)嚴(yán)重的毒副作用，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)?dǎo)致人體或動(dòng)物體造血功能受到抑制，所以包括我國(guó)在內(nèi)的諸多國(guó)家都將其列入禁用藥范疇。

1.5 頭孢菌素類藥物頭孢菌素類藥物屬于β-內(nèi)酰胺類抗生素，具有廣譜抗菌、過(guò)敏率低等優(yōu)勢(shì)。當(dāng)前頭孢菌素類藥物有很多，按照其抗菌性能及發(fā)明順序，主要可以分為頭孢噻呋、頭孢克洛、頭孢拉定等。但是由于頭孢菌素類藥物具有較強(qiáng)的耐藥性，所以為了保障人類及動(dòng)物安全，包括美國(guó)在內(nèi)的諸多國(guó)家都禁止在動(dòng)物飼料中添加頭孢菌素類藥物。

1.6 硝基呋喃類藥物硝基呋喃類藥物是一種光譜抗菌類藥物，對(duì)大多數(shù)原蟲(chóng)、真菌、革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌都能起到良好的殺滅作用。當(dāng)前市面上比較常見(jiàn)的硝基呋喃類藥物主要有呋喃西林、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃唑酮四種。硝基呋喃類藥物由于具有良好的抗菌作用，并且價(jià)格低廉，所以廣泛的應(yīng)用于蜂、水產(chǎn)、家畜、家禽等動(dòng)物傳染病的治療及預(yù)防當(dāng)中。但是由于此類藥物及其代謝產(chǎn)物可加大人體出現(xiàn)畸胎、癌癥等風(fēng)險(xiǎn)，所以許多國(guó)家都將其列入水產(chǎn)動(dòng)物及畜禽動(dòng)物飼料中禁止添加的獸藥。2005年我國(guó)農(nóng)業(yè)部頒布了560號(hào)令，正式將硝基呋喃類藥物納入動(dòng)物飼料禁用藥范疇。

1.7 喹諾酮類藥物喹諾酮類藥物是一種人工合成的抗菌藥，也被稱為吡啶酮酸類藥物或吡酮酸類藥物。當(dāng)前市面上常見(jiàn)的喹諾酮類藥物主要包括氟羅沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星等。此類藥物主要用于皮膚組織、呼吸道的革蘭氏陰菌感染，以及胃腸疾病、泌尿系統(tǒng)疾病的治療當(dāng)中。喹諾酮類藥物屬于人畜通用藥物，不僅可以應(yīng)用于動(dòng)物疾病的治療，而且可以應(yīng)用于人體治療，但是這種藥物在人體內(nèi)蓄積、殘留，會(huì)使人體產(chǎn)生較強(qiáng)的抗藥性，進(jìn)而影響疫病后續(xù)治療。2005年美國(guó)將恩諾沙星列入禁用獸藥范疇。

1.8 β-興奮劑類藥物β-興奮劑類藥物也就是我們常說(shuō)的“瘦肉精”，此類藥物具有減慢蛋白質(zhì)代謝分解、加速脂肪代謝分解的功效，進(jìn)而可以起到降低動(dòng)物機(jī)體脂肪含量，促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體肌肉組織生長(zhǎng)的目的。在動(dòng)物飼料中適量添加β-興奮劑類藥物，可以提高動(dòng)物增重量、瘦肉量以及飼料利用轉(zhuǎn)化率。當(dāng)前市面上較為常見(jiàn)的β-興奮劑主要包括沙丁胺醇、萊克多巴胺、鹽酸克倫特羅藥。β-興奮劑類藥物對(duì)動(dòng)物及人體的腎臟、肝臟等內(nèi)臟器官會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的毒副作用。隨著β-興奮劑類藥物殘留事件的日益高發(fā)，我國(guó)已經(jīng)β-興奮劑類藥物納入禁用獸藥范疇。

1.9 硝基咪唑類藥物硝基咪唑類藥物對(duì)原蟲(chóng)及厭氧菌具有良好的殺滅作用，所以被廣泛添加在動(dòng)物飼料當(dāng)中用來(lái)抗菌、抗原蟲(chóng)感染。除了抗菌和抗原蟲(chóng)感染外，硝基咪唑類藥物還具有一定的促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)的作用。當(dāng)前市面上常見(jiàn)的硝基咪唑類藥物主要包括奧硝唑、替硝唑、地美硝唑等。此類藥物及其代謝物會(huì)導(dǎo)致包括人體在內(nèi)的諸多步入動(dòng)物出現(xiàn)突變、畸形、癌癥等后果，并且具有一定的遺傳性，因此國(guó)際諸多國(guó)家都將硝基咪唑類藥物納入禁用藥的范疇。

2 飼料中常見(jiàn)獸藥的檢測(cè)技術(shù)

2.1 分光光度法牛純青等曾采用分光光度法對(duì)飼料中泰樂(lè)菌素的含量進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)其濃度在5.0～50μg/mL時(shí)，其吸光度與濃度存在良好的線性關(guān)系。分光光度法雖然對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器要求較低，但是實(shí)驗(yàn)操作較為繁瑣，檢測(cè)范圍較為有限，只能應(yīng)用于青霉素、環(huán)丙沙星等少數(shù)幾種獸藥的檢測(cè)當(dāng)中，并且檢測(cè)的精準(zhǔn)度有限，極易出現(xiàn)檢測(cè)誤差。

2.2 微生物學(xué)法微生物學(xué)法也被稱管碟法，主要用于發(fā)酵抗生素含量檢測(cè)，這種檢測(cè)方法具有靈敏度高、用量少、檢測(cè)與原理一致等優(yōu)勢(shì)。顧欣等曾采用微生物學(xué)法對(duì)恩拉霉素在飼料中的含量進(jìn)行了檢測(cè)，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)這種檢測(cè)方法的最低檢測(cè)限度為0.5mg/kg。除了恩拉霉素可以用這種檢測(cè)方法檢測(cè)外，泰樂(lè)菌素、金霉素、林可霉素等都可以運(yùn)用這種檢測(cè)方法檢測(cè)。這種檢測(cè)方法雖然應(yīng)有諸多有限，但是由于對(duì)操作過(guò)程具有嚴(yán)苛的要求，一旦出現(xiàn)一個(gè)操作失誤或操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致整組實(shí)驗(yàn)失敗，從而導(dǎo)致其推廣應(yīng)用仍較為局限。

2.3 免疫分析法免疫分析法是基于抗體抗原特異性結(jié)合而建立的一種檢測(cè)方法，可以廣泛應(yīng)用于抗體、半抗、抗原的檢測(cè)當(dāng)中。在飼料獸藥檢測(cè)中應(yīng)用較廣的免疫分析法主要包括膠體膠體金免疫層析法和酶聯(lián)免疫吸附法。膠體金免疫層析法比較適用于少數(shù)樣品或單個(gè)樣品檢測(cè)；酶聯(lián)免疫吸附法比較適用于大規(guī)模樣品檢測(cè)。免疫分析法具有準(zhǔn)確、靈活、快速、操作簡(jiǎn)單、對(duì)儀器要求低等優(yōu)點(diǎn)，可以廣泛應(yīng)用于飼料獸藥檢測(cè)當(dāng)中。

2.4 薄層色譜法薄層色譜法操作簡(jiǎn)單、對(duì)儀器要求較低、檢測(cè)成本較低，但是只能進(jìn)行粗略檢測(cè)，無(wú)法定量檢測(cè)。韓鳳麗等采用薄膜色譜法對(duì)飼料中磺胺的含量進(jìn)行了測(cè)定，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)最低檢出率為0.05μg/mL。

2.5 氣相色譜法氣象色譜法屬于分離分析方法的范疇，雖然檢測(cè)成本高、檢測(cè)步驟繁瑣、需要運(yùn)用的試劑較多，但是由于其檢測(cè)準(zhǔn)確度高、檢出限低、精密度高、檢測(cè)較為靈敏，所以在我國(guó)具有較為廣泛的應(yīng)用。當(dāng)前我國(guó)主要運(yùn)用氣相色譜法進(jìn)行氯霉素類抗生素藥物的檢測(cè)，最低檢出限度為0.005mg/kg，能很好地滿足日常獸藥添加檢測(cè)需求。

2.6 高效毛細(xì)管電泳法高效毛細(xì)管電泳法是一種新興的檢測(cè)技術(shù)，該技術(shù)主要以毛細(xì)管為分離通道，以高壓電場(chǎng)為動(dòng)力來(lái)源，根據(jù)樣品中各成分分配行為及淌度方面的差異，達(dá)成成分分離，并以此開(kāi)展分析的方法。這種檢測(cè)技術(shù)具有選擇性強(qiáng)、適用范圍廣、分離效率高、分離速度快、試樣和溶劑消耗少等優(yōu)點(diǎn)。陳紅青曾運(yùn)用此種檢測(cè)技術(shù)對(duì)飼料中的沙丁胺醇和鹽酸克倫特羅的含量進(jìn)行檢測(cè)，最低檢測(cè)限度為0.03μg/kg和0.02μg/kg。

2.7 電化學(xué)分析法電化學(xué)分析法是在以被測(cè)物質(zhì)某些量與電量、電流、電導(dǎo)、電位之間的劑量關(guān)系為基礎(chǔ)，對(duì)被測(cè)物質(zhì)的成分進(jìn)行定量、定性分析的方法。這種檢測(cè)方法具有檢測(cè)便捷、靈敏度高、選擇性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)，所以在生物活性成分，微量化合物檢測(cè)方面具有較為廣泛的應(yīng)用。張寅艷等曾運(yùn)用這種檢測(cè)技術(shù)對(duì)6種磺胺類藥物開(kāi)展了檢測(cè)，最低檢測(cè)限度為0.08μg/mL。王偉宇等也曾運(yùn)用這種檢測(cè)技術(shù)對(duì)β-興奮劑開(kāi)展了檢測(cè)，最低檢出限度為2.06×107g/mL。

2.8 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法具有分辨率高、選擇性分析等優(yōu)勢(shì)，比較適合應(yīng)用于穩(wěn)定性相對(duì)較差的化學(xué)藥物檢測(cè)，并且在檢測(cè)過(guò)程中還能進(jìn)行蛋白質(zhì)序列測(cè)定及化學(xué)結(jié)構(gòu)剖析。近年來(lái)有許多文獻(xiàn)記載了運(yùn)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)磺胺類藥物、苯丙咪唑類藥物、β-興奮劑類藥物、氟喹諾酮類藥物的報(bào)道。這種檢測(cè)技術(shù)具有檢出限度地、靈敏度高、定性效果好等優(yōu)點(diǎn)，但是由于其檢測(cè)步驟繁瑣、檢測(cè)成本高、檢測(cè)設(shè)備昂貴，導(dǎo)致這種檢測(cè)技術(shù)當(dāng)前在國(guó)內(nèi)應(yīng)用仍較為有限。

2.9 生物傳感器法生物傳感器是一種有轉(zhuǎn)換器和生物敏感部件構(gòu)成，能夠?qū)ι锘钚晕镔|(zhì)或特定化學(xué)物質(zhì)具有可逆性和選擇性響應(yīng)的裝置，具體而言主要包括微生物傳感器、組織傳感器、酶?jìng)鞲衅鞯?。相較于傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)，這種檢測(cè)技術(shù)具有適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)、高通量、易于操作、靈敏度高、選擇性好等優(yōu)勢(shì)。但是這種檢測(cè)技術(shù)當(dāng)前在國(guó)內(nèi)尚處于探索階段，所以應(yīng)用極為有限，但是英國(guó)食品環(huán)境研究院曾運(yùn)用這種檢測(cè)技術(shù)對(duì)多種獸藥進(jìn)行了有效檢測(cè)。

2.10 高效液相色譜法高效液相色譜法具有容易回收、進(jìn)樣量少、靈敏度高、檢測(cè)速度快等優(yōu)勢(shì)，所以在獸醫(yī)檢測(cè)方面得到了廣泛應(yīng)用。近來(lái)來(lái)相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)在制定時(shí)，也會(huì)運(yùn)用高效液相色譜法。當(dāng)前高效液相色譜法比較常用的檢測(cè)器主要包括熒光檢測(cè)器、二極管陣列檢測(cè)器、紫外光度檢測(cè)器等。這三種檢測(cè)器各有優(yōu)點(diǎn)，（1）熒光檢測(cè)器。熒光檢測(cè)器具有靈敏度高，選擇性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)。張素霞等曾運(yùn)用熒光檢測(cè)器對(duì)萊克多巴胺藥物進(jìn)行檢測(cè)，最低檢出限度為0.48μg/g；（2）紫外光度檢測(cè)器。紫外光度檢測(cè)器具有對(duì)不會(huì)對(duì)樣品造成損壞、靈敏度高、線性范圍快等優(yōu)勢(shì)。邸萬(wàn)山等曾采用紫外光度檢測(cè)器對(duì)鹽酸克倫特羅藥物進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)的偏差為0.13%；（3）二極管陣列檢測(cè)器。二極管陣列檢測(cè)器具有線性范圍寬、噪音低、靈敏度高、溫度和流速對(duì)其影響小等優(yōu)勢(shì)。曹鵬曾運(yùn)用二極管陣列檢測(cè)器對(duì)4種硝基呋喃類藥物進(jìn)行了檢測(cè)，最低檢出限度為0.5mg/kg。

3 結(jié)語(yǔ)

為了促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，預(yù)防、治療動(dòng)物疫病，飼料中會(huì)添加大量獸藥，這些獸藥如果消化不完全，會(huì)殘留在動(dòng)物體內(nèi)，對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量乃至消費(fèi)者健康造成不利影響。因此，為了降低獸藥對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量乃至消費(fèi)者健康的影響，必須對(duì)獸藥在飼料中添加的種類及劑量嚴(yán)格加以要求，并做好相應(yīng)的檢測(cè)工作。