達州地區(qū)RhD陽性健康獻血者RhCcEe分布頻率調(diào)查

潘楓，劉娟，熊德瓊，張澤君，馮晨程，李維，王春澤，周曉瑜，祝富銘

(達州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院輸血科，四川 達州 635000)

Rh血型系統(tǒng)是目前已知的最復雜的、最具多態(tài)性的血型系統(tǒng)，與ABO血型系統(tǒng)一樣具有重要的臨床意義[1]。Rh血型系統(tǒng)擁有豐富的抗原數(shù)量，目前已發(fā)現(xiàn)的抗原多達55種，但與臨床聯(lián)系最為緊密的抗原主要為RhD、RhE、Rhe、RhC和Rhc[2-3]。當前，臨床輸血技術(shù)規(guī)范要求輸血前進行RhD、ABO同型檢測，但由于Rh血型系統(tǒng)具有很強的免疫原性，臨床仍存在輸血相關(guān)免疫反應、溶血性疾病的發(fā)生風險，增加輸血安全性事件的發(fā)生率[4-5]。因此，了解各地區(qū)Rh血型各表型的分布特征，是提高輸血安全性、有效性的重要措施。本研究擬調(diào)查達州地區(qū)RhD陽性健康獻血者的RhCcEe分布頻率，旨在準確掌握該地區(qū)健康獻血者的Rh血型表型分布情況，從而更好地保證臨床輸血安全。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用簡單隨機抽樣法選取2020年7月至2020年12月達州地區(qū)1 496例RhD陽性健康獻血者的血液樣本作為研究對象。納入標準：(1)血液經(jīng)Rh血液系統(tǒng)中抗-D檢測為RhD陽性；(2)血液樣本均符合血液入庫標準。其中，男性871例，女性769例；年齡18～55歲，平均(27.85±9.64)歲。

1.2 主要儀器與試劑

微柱凝膠檢測卡(含有抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e單克隆抗體試劑，長春博迅生物技術(shù)有限責任公司)、全自動血型分析儀(Microlab STARlet IVD,瑞士哈美頓博納圖斯股份有限公司)、血型血清學離心機(TD-3A型，長春博研科學儀器有限責任公司)。

1.3 研究方法

取獻血者抗凝血液標本3 mL，裝入試管后常規(guī)離心，紅細胞經(jīng)生理鹽水洗滌后，制成0.8%～1%的紅細胞懸液；在微柱凝膠檢測卡內(nèi)依次加入50 μL紅細胞懸液，900 rpm離心2 min，1 500 rpm離心3 min；以紅細胞抗原與相應抗體凝集，并位于微柱凝膠中上層為陽性。

1.4 觀察指標

(1)據(jù)血型將RhD陽性健康獻血者分為A型(n=548)、B型(n=317)、O型(n=504)和AB型(n=127)，比較各組的Rh抗原分型、Rh抗原分布頻率。(2)比較達州地區(qū)與北京、蘭州、湖北和福州等地區(qū)RhD陽性健康獻血者的Rh血型表型分布。北京、蘭州、湖北和福州地區(qū)RhD陽性健康獻血者的Rh血型表型分布數(shù)據(jù)采用近年來公開發(fā)表的文獻[6-9]。

1.5 統(tǒng)計學分析

采用SPSS20.0軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以[n(%)]表示，組間行χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 RhD陽性健康獻血者Rh抗原分型結(jié)果

1 496例RhD陽性健康獻血者中，血型包括A型548例，B型317例，O型504例，AB型127例。共檢出Rh血型抗原8種分型，檢出頻率從小到大依次為：CCDee>CcDEe>CcDee>ccDEE>ccDEe>CcDEE>CCDEe>ccDee。不同ABO血型獻血者CCDee、CcDEe、ccDEE、CcDee、ccDEe和其他Rh抗原表型(CcDEE、ccDee、CCDEe)的檢出頻率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 RhD陽性健康獻血者Rh抗原分型結(jié)果[n(%)]

表2 RhD陽性健康獻血者Rh抗原分布[n(%)]

2.2 RhD陽性健康獻血者Rh抗原分布頻率

RhD陽性健康獻血者中，Rh抗原C、c、E、e陽性率依次為91.44% (1 368/1 496)、51.27% (767/1 496)、42.78% (640/1 496)和93.98% (1 406/1 496)。不同血型獻血者Rh抗原分布頻率比較，差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.764，P=0.95)。見表2。

2.3 達州地區(qū)與國內(nèi)其他地區(qū)Rh血型表型分布情況比較

達州地區(qū)RhD陽性健康獻血者的Rh血型表型分布與國內(nèi)北京、蘭州、湖北和福州等地區(qū)分布情況接近(P>0.05)。北京和湖北均未檢出CCDEE表型。見表3。

表3 達州地區(qū)與國內(nèi)其他地區(qū)Rh血型表型分布情況比較[n(%)]

3 討論

Rh表型多態(tài)性是發(fā)生免疫應答的基礎(chǔ)，在臨床輸血治療中對受血者進行Rh血型抗體篩查以避免輸血不良反應的發(fā)生被多數(shù)醫(yī)院采用，但尚未將獻血者Rh抗原分型檢查納入常規(guī)檢查中[10]。研究發(fā)現(xiàn)，受血者因RhCE非同型輸血會產(chǎn)生相應的免疫性抗體，從而引發(fā)嚴重的免疫溶血性輸血反應，甚至危及受血者生命[11]。因此，有必要對獻血者Rh抗原分型進行檢查，以減少受血者不規(guī)則抗體的產(chǎn)生，提高輸血的安全性。王劍鋒等[12]對銅川地區(qū)無償獻血人群Rh血型表型分布情況進行調(diào)查，并建立了Rh血型表型數(shù)據(jù)庫，在輸血前根據(jù)受血者血液中不規(guī)則抗體的特點，在數(shù)據(jù)庫中針對性選擇相應抗原缺失的紅細胞懸液進行交叉配血，明顯提高了配血成功率。

本研究分析了達州地區(qū)RhD陽性健康獻血者Rh表型抗原CcEe的分布頻率，結(jié)果顯示，1 496例RhD陽性健康獻血者共檢出8種Rh血型抗原分型，抗原分型以CCDee為主，其次為CcDEe，ccDee檢出率最低，與向敏等[6]報道的Rh血型表型分布特征一致。理論上來說，RhD陽性健康獻血者的Rh表型抗原應有9種，除本研究中檢出的8種分型外，還存在CCDEE型，但在臨床上較為罕見[13]。本研究未檢出CCDEE分型，可能與樣本量較少有關(guān)，也進一步說明CCDEE是一種稀有表型。本研究發(fā)現(xiàn)，不同ABO型血型獻血者Rh抗原表型的檢出頻率比較無明顯差異，符合其他地區(qū)報道的規(guī)律，但與丁佳棟等[7]的研究結(jié)果存在差異，可能與研究樣本量差異較大有關(guān)，也可能與研究對象之間存在民族差異有關(guān)。本研究顯示，RhD陽性健康獻血者中，e、C抗原陽性率達90%以上，且明顯高于c、E，由此推測RhD陽性人群在C、c、E、e抗原不匹配輸注時E、c抗原刺激產(chǎn)生抗體的可能性最大。本研究還發(fā)現(xiàn)，不同血型獻血者Rh抗原分布頻率比較無明顯差異，分析其原因可能是：RhCE基因連鎖在一條染色體上，且在人群中分布較為均衡[14-15]。為明確達州地區(qū)RhD陽性健康獻血者Rh血型表型分布情況是否與國內(nèi)其他區(qū)域存在差異，本研究將達州地區(qū)Rh血型表型分布與北京、蘭州、湖北和福州等地區(qū)的分布情況進行對比，結(jié)果顯示達州地區(qū)RhD陽性健康獻血者的Rh血型表型分布與北京、蘭州、湖北和福州等地區(qū)分布情況接近，提示達州地區(qū)RhD陽性健康獻血者Rh表型分布符合國內(nèi)部分地區(qū)的分布特征。

綜上所述，達州地區(qū)RhD陽性健康獻血者Rh表型抗原以CCDee、CcDEe型最為常見，C、e抗原分布頻率較高，Rh表型分布特征與國內(nèi)部分地區(qū)相似。在臨床輸血實踐中，應針對性地建立本地獻血者Rh血型數(shù)據(jù)庫，為受血者的個性化輸血治療提供依據(jù)，以保證輸血的科學性與有效性。