基于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路探討針灸治療血管性癡呆的作用機(jī)制

顏麗巧，易伊人，陳 茂，張 夏，金小鈺，劉運(yùn)珠

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，廣西 南寧 530200；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530200）

血管性癡呆（vascular dementia,VD）是以認(rèn)知和記憶功能障礙為主要臨床表現(xiàn)的癡呆[1]，是繼阿爾茨海默?。ˋD）之后第二常見的癡呆類型。由于腦組織缺血、缺氧及低灌注損傷，大腦局部神經(jīng)元壞死，導(dǎo)致認(rèn)知障礙逐漸加重，大腦功能逐步下降，臨床上以梗死性癡呆最為常見。VD在祖國(guó)醫(yī)學(xué)中歸于“癡呆”“呆病”等范疇，病位在腦，與五臟密切相關(guān)，證屬本虛標(biāo)實(shí)，病因病機(jī)主要為髓海不足、脾腎兩虛、痰濁蒙竅、瘀血內(nèi)阻[2]。針灸治療VD臨床療效肯定，但其具體作用機(jī)制尚未完全明確。近年來，大量研究表明[3-6]，針灸可調(diào)控相關(guān)信號(hào)通路，通過抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)血管再生、減輕炎癥反應(yīng)、抑制細(xì)胞自噬等方式，減少大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞的死亡，促進(jìn)損傷腦組織的修復(fù)與再生，改善大腦缺血區(qū)血供，促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶行為的恢復(fù)。本文旨在通過總結(jié)針灸干預(yù)相關(guān)信號(hào)通路分析針灸治療VD的機(jī)制，為未來針灸治療該病的研究方向提供理論和實(shí)踐參考。

1 MAPK級(jí)聯(lián)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路是所有真核細(xì)胞共有的信號(hào)通路，MAPK家族主要包括p38絲裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK），分別介導(dǎo)3條并行的MAPK信號(hào)通路，這些信號(hào)通路主要參與介導(dǎo)腦缺血損傷中神經(jīng)細(xì)胞周期控制、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞凋亡分化[5]。

1.1 p38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路VD的發(fā)生與腦缺血密切相關(guān)，腦缺血可導(dǎo)致自由基的產(chǎn)生、內(nèi)皮功能障礙等病理損傷，p38MAPK通路被激活，進(jìn)而參與調(diào)控細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞應(yīng)激等生理病理過程[6]。研究[7]發(fā)現(xiàn)，向VD模型大鼠側(cè)腦室注射SB202190抑制p38MAPK信號(hào)通路后，SB202190組大鼠海馬區(qū)凋亡細(xì)胞較模型組減少，同時(shí)細(xì)胞凋亡調(diào)控因子Bcl-2表達(dá)升高，Caspase-3表達(dá)降低，證明了p38MAPK通路可通過調(diào)控Bcl-2、Caspase-3的表達(dá)，減少細(xì)胞凋亡的發(fā)生，從而改善大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。賈睿幗[8]發(fā)現(xiàn)，分別采用2 Hz、100 Hz、2/100 Hz 3種頻率電針刺激VD模型大鼠，3組大鼠海馬區(qū)p38MAPK及Caspase-3蛋白表達(dá)降低，Bcl-2蛋白表達(dá)明顯升高，與模型組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中2 Hz組降低Bcl-2蛋白表達(dá)作用更顯著，而2/100 Hz組降低Caspase-3蛋白表達(dá)更顯著。腦缺血刺激后，腦組織損傷區(qū)域產(chǎn)生的大量炎癥因子過度表達(dá)會(huì)加重腦損傷[9]。研究[10-11]發(fā)現(xiàn)腦缺血再灌注中p38MAPK蛋白的磷酸化水平明顯升高，上調(diào)促炎細(xì)胞因子的表達(dá)，誘導(dǎo)炎性級(jí)聯(lián)反應(yīng)，并增加神經(jīng)元損傷。劉飛來[12]采用電針治療腦缺血再灌注認(rèn)知障礙大鼠，結(jié)果顯示，與模型組比較，電針組大鼠水迷宮逃避潛伏期減短，腦梗死體積明顯減小，海馬組織p38MAPK mRNA、TNF-α mRNA、IL-1β mRNA表達(dá)明顯降低，表明電針改善大鼠認(rèn)知功能障礙的作用機(jī)制可能與抑制p38 MAPK信號(hào)通路的活性、下調(diào)炎癥因子有關(guān)。袁愛紅等[13]的研究同樣證明了這一觀點(diǎn)。

1.2 JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路 腦缺血可激活JNK信號(hào)通路中的MAPKK激酶，引起JNK的磷酸化，被激活的pJNK既可上調(diào)促凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)，進(jìn)而激活死亡受體凋亡通路，又可調(diào)節(jié)Bcl-2家族成員的活性，參與由線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路，激活Caspase凋亡蛋白酶，誘導(dǎo)腦神經(jīng)元凋亡[14]。郭菲等[15]發(fā)現(xiàn)電針可顯著下調(diào)VD模型大鼠海馬組織JNK、p-JNK、Caspase-8、Caspase-3蛋白表達(dá)，劉雅儒[16]則發(fā)現(xiàn)電針可使腦缺血再灌注損傷（CIRI）模型小鼠海馬、皮層組織細(xì)胞JNK的活化被抑制，Bax、Caspase-3的表達(dá)降低，Bcl-2表達(dá)升高，Caspase-9表達(dá)與模型組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），實(shí)驗(yàn)中未進(jìn)一步研究及闡述。

1.3 ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路 腦缺血損傷后ERK與JNK、p38 3條通路的動(dòng)態(tài)平衡決定了細(xì)胞的存亡，ERK通路的激活可以抑制神經(jīng)元的凋亡[17]。ERK1/2通過轉(zhuǎn)錄非依賴機(jī)制調(diào)控生存蛋白，繼而磷酸化促凋亡蛋白Bad，使抑制Bcl-2或Bcl-xl的抗凋亡作用喪失，從而抑制細(xì)胞的凋亡[18]，ERK1/2的活化還能誘導(dǎo)活化Bcl-2等抗凋亡蛋白[19]，抑制細(xì)胞色素C的釋放，維持線粒體的功能，從而抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生。程紅亮等[20]研究發(fā)現(xiàn)，與模型組比較，電針組VD大鼠跳白實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期延長(zhǎng)、錯(cuò)誤次數(shù)減少，海馬CA1區(qū)ERK陽性神經(jīng)元表達(dá)增加。林亞平等[21]發(fā)現(xiàn)經(jīng)針刺治療后的CIRI大鼠，神經(jīng)功能缺損評(píng)分、腦梗死面積、Bax表達(dá)以及凋亡細(xì)胞和ERK1/2蛋白的磷酸化水平均明顯低于模型組，Bcl-2表達(dá)明顯高于模型組，提示針灸可能是通過ERK通路，降低ERK1/2蛋白的磷酸化水平及調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)因子Bcl-2、Bax表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的對(duì)腦組織的保護(hù)作用。

1.4 多條通路共同參與MAPK聯(lián)級(jí)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是一條復(fù)雜的通路，研究[22]發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞存亡依賴于幾條通路之間相互抑制或協(xié)作，JNK和p38MAPK激活的同時(shí)ERK1/2的活化被抑制才能促進(jìn)細(xì)胞凋亡。馬莉等[23]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)電針治療后的VD大鼠與模型組相比，Bax、p-p38 MAPK蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯降低，Bcl-2、p-ERK1/2蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯升高。其他研究[24-25]發(fā)現(xiàn)，電針治療敲除JNK基因的CIRI大鼠后，大鼠海馬組織p-ERK1/2蛋白相對(duì)表達(dá)量升高而p-p-38MAPK蛋白相對(duì)表達(dá)量降低，證明了針灸能動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)兩條信號(hào)通路，通過降低神經(jīng)元的壞死來發(fā)揮腦保護(hù)功能。

2 Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

Notch通路主要由Notch受體、配體及靶基因三部分組成，配體與受體結(jié)合促使Notch分子活化，釋放受體胞內(nèi)段活性結(jié)構(gòu)域（NICD）。NICD的形成是Notch通路激活的標(biāo)志，進(jìn)而啟動(dòng)Notch下游靶基因Hes家族等的轉(zhuǎn)錄而發(fā)揮調(diào)控作用[26]，不同的Hes作用不同，如Hes1表達(dá)可促進(jìn)神經(jīng)前體細(xì)胞進(jìn)行自我更替與增殖，Hes3在維持神經(jīng)元的未分化狀態(tài)、促進(jìn)其增殖等方面發(fā)揮重要作用，Hes5可維持細(xì)胞骨架、抑制分化信號(hào)遷移及傳遞。腦缺血損傷后Notch信號(hào)通路被激活，活化的Notch信號(hào)通路起到調(diào)節(jié)神經(jīng)干細(xì)胞增殖、促進(jìn)血管新生等作用[27]。

2.1 調(diào)節(jié)神經(jīng)干細(xì)胞增殖 王瑩等[28]研究發(fā)現(xiàn)，與西藥組比較，經(jīng)艾灸治療的VD大鼠海馬組織中神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）、Hes3、Notch1的mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量均明顯升高，由此推測(cè)艾灸改善癡呆大鼠記憶和認(rèn)知能力，可能與調(diào)節(jié)Notch信號(hào)通路有關(guān)。陶靜等[29]發(fā)現(xiàn)電針治療CIRI大鼠3 d和7 d均能改善Catwalk步態(tài)系統(tǒng)部分行為學(xué)功能，使其運(yùn)動(dòng)速度增加，持續(xù)時(shí)間減少，大鼠腦缺血周圍區(qū)皮質(zhì)、缺血側(cè)室管膜下區(qū)（SVZ）NICD蛋白、Hes1和Hes5的表達(dá)上調(diào)，神經(jīng)干細(xì)胞數(shù)量上調(diào)，采用γ分泌酶抑制劑阻斷其通路時(shí)，電針促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖現(xiàn)象被抑制。

2.2 促進(jìn)血管新生 張雙雙[30]采用眼針干預(yù)CIRI大鼠后，發(fā)現(xiàn)眼針組大鼠缺血半暗帶區(qū)腦組織Notch1、Hes1、NICD水平顯著上調(diào)，同時(shí)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)亦明顯升高，馬菡[31]同樣發(fā)現(xiàn)電針干預(yù)腦梗死模型大鼠后，與模型組比較，電針組大鼠腦組織Notch1、Notch4、Hes1的mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量均明顯升高，同時(shí)，VEGF及其受體VEGFR-1、VEGFR-2的mRNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量也明顯升高，由此推測(cè)針灸可通過激活VEGF-Dll4/Notch信號(hào)通路，介導(dǎo)血管新生，進(jìn)而促進(jìn)腦缺血后的血管新生與重塑，發(fā)揮對(duì)缺血區(qū)損傷組織的保護(hù)作用。

3 NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路可調(diào)控炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增殖與神經(jīng)元凋亡、自噬等過程，是導(dǎo)致認(rèn)知障礙發(fā)生與發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[32]。腦缺血后細(xì)胞受到氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子、內(nèi)毒素等信號(hào)刺激，NF-κB得以活化，誘導(dǎo)細(xì)胞因子（如TNF-α、IL-1β、IL-6等）、趨化因子（如IL-8）等不同炎癥靶基因的過度或持續(xù)表達(dá)，進(jìn)而趨化大量中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、聚積于炎癥部位，最終造成炎癥反應(yīng)。同時(shí)，活化的NF-κB信號(hào)通路在細(xì)胞進(jìn)程中可發(fā)揮抗凋亡或者抑凋亡的雙向調(diào)節(jié)作用，如在線粒體凋亡通路中NF-κB可以通過對(duì)細(xì)胞凋亡抑制蛋白IAP家族成員的激活而抑制凋亡，也能夠使促凋亡基因Bcl-X、Bax等表達(dá)上調(diào)而促進(jìn)凋亡[33]。目前針灸在NF-κB信號(hào)通路調(diào)控自噬過程的相關(guān)研究相對(duì)缺乏。

3.1 調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng) 馬莉等[34]發(fā)現(xiàn)經(jīng)電針干預(yù)的VD大鼠海馬組織中的蛋白去乙?；窼IRT1表達(dá)水平降低，抑制其下游因子NF-κB p65去乙酰化，從而減少促炎因子的合成和釋放。莊麗華等[35]認(rèn)為電針能通過抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，下調(diào)Toll樣受體TLR4 mRNA和蛋白的表達(dá)，使其介導(dǎo)的MyD88/NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被抑制，減少血清炎癥因子TNF-α、IL-1β的釋放，起到減輕腦缺血炎癥反應(yīng)的作用。以上實(shí)驗(yàn)表明電針通過調(diào)節(jié)NF-κB信號(hào)通路，抑制炎癥反應(yīng)，進(jìn)而有效改善模型大鼠認(rèn)知功能障礙，陶一鳴等[36]實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明了這一觀點(diǎn)。阮靜茹等[37]對(duì)VD大鼠行艾灸治療后，同樣發(fā)現(xiàn)大鼠海馬組織中NF-κB p65蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β等促炎因子表達(dá)量顯著減少，證明艾灸亦可調(diào)控NF-κB通路的活化狀態(tài)，抑制促炎因子釋放，減輕腦缺血引發(fā)的炎性損傷。

3.2 調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖與神經(jīng)元凋亡 豁銀成等[38]發(fā)現(xiàn)預(yù)電針組、預(yù)艾灸組及預(yù)針灸組阿爾茨海默病（AD）大鼠海馬組織NF-κB表達(dá)明顯降低，Bcl-2的表達(dá)均明顯升高，可推測(cè)針灸預(yù)刺激可抑制NF-κB表達(dá)，增加Bcl-2的表達(dá)，發(fā)揮抗凋亡作用，以保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，延緩AD進(jìn)程。許瀟瑩[39]則認(rèn)為電針通過調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，抑制TLR2介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路，促進(jìn)膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（GDNF）的表達(dá)發(fā)揮腦神經(jīng)保護(hù)作用。

4 PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)信號(hào)通路廣泛存在于各種細(xì)胞中，參與并調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化與遷移過程，是經(jīng)典的抗凋亡、促存活的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，與VD的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[4]。

4.1 抑制細(xì)胞凋亡 腦缺血缺氧后多數(shù)受損腦細(xì)胞最終會(huì)死亡或凋亡，PI3K/Akt信號(hào)通路可通過調(diào)節(jié)mTOR、Bcl-2、Bax等的表達(dá)，進(jìn)而控制凋亡和促凋亡蛋白的合成[40]。石菊榮[41]研究發(fā)現(xiàn)電針在縮短VD大鼠逃避潛伏期、增加跨越平臺(tái)次數(shù)、降低神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分方面均有很好的療效，且大鼠海馬CA1區(qū)PI3K、Akt、mTOR的表達(dá)明顯高于模型組、西藥組。李令建等[42]發(fā)現(xiàn)采用電針干預(yù)MCAO模型大鼠，電針組大鼠海馬組織PI3K、Akt、Bcl-2 mRNA及蛋白表達(dá)明顯高于模型組，Bax蛋白表達(dá)明顯低于模型組。陳晶等[43]則認(rèn)為電針可激活PI3K/Akt信號(hào)通路，活化的Akt與磷酸化糖原合成酶激酶-3β（p-GSK-3β）結(jié)合后，向細(xì)胞膜轉(zhuǎn)位，抑制GSK-3β的活性，阻止細(xì)胞凋亡發(fā)生，從而發(fā)揮腦保護(hù)作用。李龍春等[44]則認(rèn)為針刺通過激活PI3K/Akt/mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，改善氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的線粒體功能損傷和線粒體膜電位下降現(xiàn)象，減少受損線粒體的積累，緩解細(xì)胞損傷，從而改善VD大鼠的認(rèn)知功能。

4.2 促進(jìn)血管新生 血管新生功能異常是VD發(fā)生的根本原因，腦血管病變過程中，血管新生不足會(huì)導(dǎo)致循環(huán)障礙和組織壞死，治療性血管新生是治療腦血管病變致腦損害后出現(xiàn)的認(rèn)知功能障礙的新方式。袁麗君等[45]發(fā)現(xiàn)采用土家族麝針療法治療的MCAO大鼠海馬組織中PI3K、Akt蛋白表達(dá)顯著升高，mTOR蛋白表達(dá)顯著降低，同時(shí)血漿中HIF-1α、VEGF的含量顯著升高。李瓊莉等[46]則認(rèn)為電針可通過上調(diào)p-AKT和其下游的p-mTOR和p-P70S6K的表達(dá)，增加腦皮質(zhì)缺血區(qū)CD34+微血管數(shù)目，上調(diào)VEGFR2蛋白的表達(dá)，促進(jìn)大腦皮質(zhì)缺血區(qū)血管再生。胥虹貝等[47]發(fā)現(xiàn)采用特異性抑制劑LY294002阻斷PI3K/AKT通路后，電針處理不再增加大鼠大腦皮質(zhì)缺血區(qū)CD34+微血管數(shù)目。

4.3 促進(jìn)神經(jīng)生長(zhǎng)因子釋放 大腦周圍神經(jīng)損傷后神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子釋放減少，神經(jīng)生長(zhǎng)因子與酪氨酸激酶結(jié)合后激活PI3K/Akt信號(hào)通路，抑制神經(jīng)元的損傷，從而促使神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子釋放增加[48]。據(jù)報(bào)道，有學(xué)者[49]發(fā)現(xiàn)頭穴叢刺可上調(diào)缺氧缺血性腦損傷大鼠海馬CA1區(qū)BDNF、TrkB、p-ERK、p-Akt蛋白表達(dá)，胡冠宇[50]進(jìn)一步證明頭針可能通過上調(diào)BDNF與TrkB的表達(dá)，從而激活的下游PI3K/Akt/GSK-3β信號(hào)通路，起到了對(duì)大鼠腦組織細(xì)胞的修復(fù)和保護(hù)作用。

4.4 抑制細(xì)胞自噬 缺血損傷后可導(dǎo)致自噬過度活化，細(xì)胞損傷死亡，PI3K/Akt信號(hào)通路的激活可抑制過度活化的自噬水平，減輕細(xì)胞損傷[51]。王曼曼[52]采用電針刺激缺血性腦卒中大鼠曲池和足三里穴位，發(fā)現(xiàn)電針能激活PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路，并降低LC3等自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)，從而抑制神經(jīng)元的自噬與凋亡，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。

5 其他相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

已有學(xué)者研究[53]發(fā)現(xiàn)，Wnt/β-catenin信號(hào)通路與VD的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路能夠改善大鼠腦缺血再灌注導(dǎo)致的神經(jīng)元損傷。朱曉璐[54]研究也證明了Wnt/β-catenin蛋白表達(dá)下調(diào)可能與持續(xù)低灌注引起的VD后膠質(zhì)細(xì)胞活化、PECAM-1免疫活性具有關(guān)聯(lián)性。楊楊[55]研究發(fā)現(xiàn)，智三針可以通過上調(diào)β-Catenin、LRP5和LEF1等Wnt/βcatenin信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)，抑制GSK-3β活化，從而促進(jìn)Wnt/β-Catenin信號(hào)通路傳導(dǎo)，達(dá)到改善認(rèn)知障礙大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的作用。

JAK-STAT信號(hào)通路與腦缺血誘導(dǎo)的腦損傷密切相關(guān)，且該通路的炎癥信號(hào)可介導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞激活[4]，參與了VD的發(fā)病。曹燕[56]發(fā)現(xiàn)針刺能夠上調(diào)α7煙堿樣乙酰膽堿受體（α7nAChR）表達(dá)及下游JAK2/STAT3信號(hào)通路的活化，抑制VD大鼠海馬區(qū)神經(jīng)炎癥因子的表達(dá)，抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，從而提高VD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。

6 小 結(jié)

綜上，針灸可能通過調(diào)控MAPK、Notch、NF-κB、PI3K/Akt、Wnt/β-catenin及JAK-STAT等相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，起到調(diào)控細(xì)胞增殖、抗神經(jīng)元凋亡、抑制炎癥反應(yīng)、推進(jìn)血管新生、抑制細(xì)胞自噬等作用，進(jìn)而改善認(rèn)知功能，提高學(xué)習(xí)記憶能力，從而防治血管性癡呆。

然而，目前針灸干預(yù)血管性癡呆相關(guān)信號(hào)通路的研究仍相對(duì)薄弱，且存在諸多不足，如：（1）針灸治療血管性癡呆的穴位選取、針刺手法缺乏客觀標(biāo)準(zhǔn)，如部分實(shí)驗(yàn)中均使用電針作為干預(yù)手段，但電針的波形、頻率、留針時(shí)間長(zhǎng)短不盡相同，今后可在實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步規(guī)范量化；（2）目前實(shí)驗(yàn)研究多以針刺為主要干預(yù)手段，針刺中又以電針為主，艾灸或其他治療方式相關(guān)研究則極少，干預(yù)手段相對(duì)單一，只有部分文章將現(xiàn)代醫(yī)學(xué)分子機(jī)制與中醫(yī)傳統(tǒng)理論結(jié)合起來，今后可從這方面綜合研究針灸干預(yù)血管性癡呆相關(guān)信號(hào)通路，為針灸治療血管性癡呆提供更全面的理論支撐；（3）細(xì)胞中的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路網(wǎng)絡(luò)十分復(fù)雜，一條通路可能受到多個(gè)信號(hào)蛋白或信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控，不同的上游和下游分子亦產(chǎn)生不同的激活效應(yīng)，目前研究主要是以單獨(dú)通路或通路的某一節(jié)段為主，較少采用多條通路間交互作用的研究思路，這方面有待進(jìn)一步挖掘；（4）目前的研究主要以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為主，鑒于人與動(dòng)物之間的差異，實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)論在指導(dǎo)臨床實(shí)踐過程中，需要有探索、修正、驗(yàn)證等臨床過渡階段進(jìn)一步探索，以期更好的指導(dǎo)應(yīng)用于臨床。