TIPE2通過抑制Akt磷酸化促進(jìn)LPS活化的巨噬細(xì)胞凋亡①

叢麗 謝小林 劉素娟 向麗萍 符曉華

（湖南師范大學(xué)小分子靶向藥物研究與創(chuàng)制實(shí)驗(yàn)室，長沙 410013）

心血管疾病是全球死亡最常見原因之一，其病死人數(shù)約占全球總死亡人數(shù)的31%，且在全球醫(yī)療保健支出中占比較高［1-2］。動脈粥樣硬化是心血管疾病重要的病理生理基礎(chǔ)，是不穩(wěn)定型心絞痛、心源性猝死、卒中的根本原因［3］。巨噬細(xì)胞在動脈粥樣硬化病變過程中扮演重要角色，是主要的炎癥細(xì)胞，也是不穩(wěn)定型斑塊的重要特征［4］?；罨木奘杉?xì)胞可產(chǎn)生炎癥細(xì)胞因子、蛋白酶、活性氧、氮自由基分子等，促使巨噬細(xì)胞向炎癥性巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化，并降低其清除死亡細(xì)胞的能力，促進(jìn)動脈粥樣硬化發(fā)展［5］。活化的巨噬細(xì)胞凋亡在動脈粥樣硬化各階段均發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用，既可抑制早期病變進(jìn)展，又可促進(jìn)晚期壞死核形成，增加斑塊脆性及促進(jìn)血栓形成［6-7］。因此，探索促進(jìn)活化巨噬細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制對心血管疾病防治具有重要臨床意義。

腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8樣分子2（tumor necrosis factor-α-induced protein 8-like 2，TIPE2）是一種先天免疫負(fù)調(diào)控因子，在巨噬細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)［8-9］。TIPE2主要通過抑制T細(xì)胞受體和Toll樣受體調(diào)控下游信號通路，維持免疫穩(wěn)態(tài)［10］；此外，TIPE2也可與Caspase-8結(jié)合，抑制激活蛋白-1和核轉(zhuǎn)錄因子-κB活化，促進(jìn)Fas介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡［11］。蛋白激酶B（protein kinase B，PKB）/Akt是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，在調(diào)控細(xì)胞存活和凋亡中具有重要作用，PI3K/Akt是調(diào)控細(xì)胞凋亡的主要信號通路［12］。研究表明TIPE2可靶向RGL-PDK1和PI3K-rac抑制Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，且能通過下調(diào)Akt和ERK1/2信號通路激活內(nèi)源性凋亡途徑抑制胃癌生長［13-15］。據(jù)此，課題組推測TIPE2/Akt信號通路可能在調(diào)控活化巨噬細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。

本研究以內(nèi)毒素的重要特異性抗原——脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）活化的RAW264.7細(xì)胞為研究對象，采用慢病毒載體和Akt磷酸化激動劑深入探討TIPE2對活化巨噬細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制，以期為動脈粥樣硬化防治策略提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料LPS（L8880）購自Solarbio；高糖DMEM培養(yǎng)基（010521ACS）、胎牛血清（040011ACS）、鏈霉素/青霉素、PBS緩沖液（020231ACS）購自以色列Bioind公 司；TRIzol（R401-01）、HiScript?ⅡQ RT SuperMix for qPCR（+gDNA wiper）（R223-01）、AceQ?qPCR SYBR Green Master Mix（Q111-02）、CCK-8試劑盒（A311-01）、Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（A211-01）、Tunel凋亡試劑盒（A112-01）購自南京Vazyme公司；RIPA細(xì)胞裂解液、BCA蛋白定量試劑盒（P0012S）購自上海Beyotime公司；慢病毒顆粒購自上海Genechem公司；cleaved Caspase-8（AF5267）、cleaved Caspase-3（AF7022）、TIPE2（DF3326）抗體購自美國Affinity公司；Bax（YM3619）、Bcl-2（YM3041）、Akt（YM3618）、p-AktSer473（YP0006）抗 體 購 自美國ImmunoWay公司；CHOP（2895T）抗體購自美國Cell Signaling Technology公司；β-actin（CW0096）抗體和GAPDH（CW0100）抗體購自江蘇CWBIO公司；兔IgG（CW0156S）和鼠IgG（CW0102S）購自北京Com?Win Biotech公司。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理RAW264.7細(xì)胞株來源于中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會細(xì)胞庫（上海），由本實(shí)驗(yàn)室保存。細(xì)胞復(fù)蘇后，常規(guī)培養(yǎng)于DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清、1 000 U/ml青霉素、100 U/ml鏈霉素），置于37℃、5%CO2、飽和濕度中繼續(xù)培養(yǎng)，每天觀察細(xì)胞。將處于對數(shù)生長期的細(xì)胞接種于6孔板（1×106個(gè)/ml），采用LPS（1.0 mg/L）刺激24 h，抽提細(xì)胞總RNA和總蛋白分別檢測有關(guān)基因、蛋白表達(dá)。

將生長狀態(tài)良好的RAW264.7細(xì)胞接種于12孔板（1×105個(gè)/ml），待細(xì)胞貼壁后，按照說明書采用過表達(dá)或敲降TIPE2的慢病毒顆粒感染細(xì)胞，培養(yǎng)48 h，更換含嘌呤霉素（2.5 mg/L）的完全培養(yǎng)基持續(xù)篩選7 d，RT-qPCR和Western blot驗(yàn)證穩(wěn)定細(xì)胞系是否構(gòu)建成功。

1.2.2 RT-qPCR檢測mRNA表 達(dá)采 用TRIzol直接裂解法提取細(xì)胞總RNA，多功能酶標(biāo)儀檢測RNA純度和濃度，按照HiScript?ⅡQ RT SuperMix for qPCR（+gDNA wiper）逆轉(zhuǎn)錄試劑說明書合成cDNA，采用AceQ?qPCR SYBR Green Master Mix試劑盒，以18 S為內(nèi)參，進(jìn)行相對熒光定量檢測，2-ΔΔCt法分析基因表達(dá)。引物序列見表1。

表1 引物序列Tab.1 Primers sequences

1.2.3 Western blot檢測蛋白表達(dá)采用RIPA裂解液抽提細(xì)胞總蛋白，BCA試劑盒檢測蛋白濃度。取40 μg樣品于10%SDS-PAGE凝膠中電泳，轉(zhuǎn)至PVDF膜，5%脫脂牛奶室溫封閉1 h，TBST（PBS包含0.05%Tween-20）洗3遍；分別滴加一抗TIPE2（1∶2 000）、cleaved Caspase-8（1∶2 000）、Bcl-2（1∶2 000）、Bax（1∶2 000）、CHOP（1∶2 000）、cleaved Caspase-3（1∶2 000）、Akt（1∶2 000）、p-AktSer473（1∶2 000）、β-actin（1∶10 000）或GAPDH（1∶10 000）4℃孵育過夜，TBST洗3遍；滴加羊抗兔（1∶10 000）或羊抗鼠（1∶10 000）二抗室溫孵育1 h，TBST洗3遍；ECL化學(xué)發(fā)光液顯影，凝膠成像系統(tǒng)檢測蛋白灰度值并分析相對表達(dá)。

1.2.4 CCK-8法檢測細(xì)胞活力將單細(xì)胞懸液（5×104個(gè)/ml）接種于96孔板（100 μl/孔），待細(xì)胞貼壁后更換培養(yǎng)基，滴加LPS（1.0 mg/L）處理24 h。棄培養(yǎng)基，PBS浸洗2次，依次加入90 μl完全培基和10μl CCK-8試劑輕搖混勻，培養(yǎng)箱中孵育2 h。分別設(shè)置空白孔和對照孔，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔，多功能酶標(biāo)儀檢測450 nm處吸光度（OD）值。細(xì)胞相對活力（%）=（OD處理孔-OD空白孔）/（OD對照孔-OD空白孔）×100%。

1.2.5 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡率將單細(xì)胞懸液（5×107個(gè)/ml）接種于12孔板，細(xì)胞貼壁后LPS（1.0 mg/L）處理24 h。滴加胰蛋白酶（不含EDTA）消化、收集細(xì)胞，800 r/min室溫離心7 min，預(yù)冷PBS洗滌2次；100μl結(jié)合緩沖液重懸細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度至3×105個(gè)/ml，加入5 μl Annexin V-FITC混勻，室溫避光孵育15 min；加入5 μl碘化丙啶溶液避光孵育5 min，混勻，流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡率。細(xì)胞總凋亡率（%）=Q2象限細(xì)胞凋亡率+Q4象限細(xì)胞凋亡率。

1.2.6 Tunel法檢測細(xì)胞凋亡指數(shù)取細(xì)胞爬片置于12孔板，將單細(xì)胞懸液（5×104個(gè)/ml）接種于爬片，待細(xì)胞貼壁后采用LPS（1.0 mg/L）處理24 h。棄培養(yǎng)基，PBS洗2次，滴加0.2%Triton室溫孵育5 min；100μl 1×Equilibration Buffer室溫平衡30 min；50μl TdT標(biāo)記液（34μl ddH2O、10μl 5×Equilibration Buffer、5 μl BrightRed Labeling Mix、1 μl Recombinant TdT Enzyme）37℃濕盒內(nèi)避光孵育60 min，PBS浸洗2次，5 min/次；DAPI室溫避光 孵育5 min，PBS洗3次，5 min/次；熒光顯微鏡下分析樣本，620 nm處觀察紅色熒光，460 nm處觀察藍(lán)色熒光。細(xì)胞凋亡指數(shù)=Tunel染色細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS20.0軟件和Graph?Pad Prism 5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以±s表示，數(shù)據(jù)間比較采用t檢驗(yàn)和方差分析（ANOVA）。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 LPS活化巨噬細(xì)胞，并下調(diào)TIPE2表達(dá)LPS（1.0 mg/L）處理RAW264.7細(xì)胞24 h，RT-qPCR檢測 結(jié) 果 顯 示，細(xì) 胞IL-6和TNF-α表 達(dá) 增 多（P<0.001），表明LPS可有效活化巨噬細(xì)胞；此外，LPS也可明顯下調(diào)細(xì)胞TIPE2 mRNA和蛋白表達(dá)（P<0.001，P<0.01，圖1）。推測免疫負(fù)調(diào)控因子TIPE2可能參與活化巨噬細(xì)胞的凋亡過程。

圖1 LPS對巨噬細(xì)胞炎癥因子及TIPE2表達(dá)的影響Fig.1 Effects of LPS on expressions of inflammatory fac?tors and TIPE2 in macrophages

2.2 過表達(dá)TIPE2促進(jìn)活化巨噬細(xì)胞凋亡采用慢病毒載體構(gòu)建TIPE2過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系，熒光顯微鏡下觀察表達(dá)綠色熒光GFP蛋白的細(xì)胞比例達(dá)95%以上；RT-qPCR和Western blot檢測結(jié)果顯示，與空載體組相比，過表達(dá)組細(xì)胞TIPE2 mRNA表達(dá)上調(diào)約200倍（P<0.001），TIPE2蛋白表達(dá)上調(diào)約2倍（P<0.001，圖2A）。表明TIPE2過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建成功，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。LPS刺激穩(wěn)定過表達(dá)TIPE2的細(xì)胞24 h，結(jié)果顯示，TIPE2過表達(dá)可明顯減弱活化巨噬細(xì)胞活力（P<0.001），促使其凋亡率和凋亡指數(shù)升高，并增加促凋亡蛋白cleaved Caspase-8、Bax、CHOP、cleaved Caspase-3表達(dá)，減少抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)（P<0.01，P<0.001，圖2B~E）。提示TIPE2可通過多種途徑有效促進(jìn)活化巨噬細(xì)胞凋亡。

圖2 過表達(dá)TIPE2對LPS活化巨噬細(xì)胞凋亡的影響（×200）Fig.2 Effects of TIPE2-overexpression on apoptosis of LPS-activated macrophages（×200）

2.3 敲降TIPE2抑制活化巨噬細(xì)胞凋亡構(gòu)建TIPE2敲降穩(wěn)定細(xì)胞系，熒光顯微鏡下觀察表達(dá)綠色熒光GFP蛋白的細(xì)胞比例達(dá)95%以上；與空載體組相比，敲降組細(xì)胞TIPE2 mRNA和蛋白表達(dá)下調(diào)約70%（P<0.001，圖3A），說明TIPE2敲降穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建成功。LPS處理穩(wěn)定敲降TIPE2的細(xì)胞24 h，結(jié)果顯示，敲降TIPE2可增強(qiáng)活化巨噬細(xì)胞活力（P<0.05），降低細(xì)胞凋亡率和凋亡指數(shù)，減少cleaved Caspase-8、Bax、CHOP、cleaved Caspase-3蛋白表達(dá)，并促進(jìn)Bcl-2蛋白表達(dá)（P<0.05，P<0.01，P<0.001，圖3B~E）。表明敲降TIPE2可通過內(nèi)源性、外源性和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑抑制活化巨噬細(xì)胞凋亡。

圖3 敲降TIPE2對LPS活化巨噬細(xì)胞凋亡的影響（×200）Fig.3 Effects of TIPE2-knockdown on apoptosis of LPSactivated macrophages（×200）

2.4 TIPE2調(diào)控活化巨噬細(xì)胞Akt磷酸化水平為進(jìn)一步明確TIPE2是否通過調(diào)控Akt磷酸化影響活化巨噬細(xì)胞凋亡，采用LPS處理穩(wěn)定過表達(dá)或敲降TIPE2的細(xì)胞24 h，Western blot結(jié)果顯示，過表達(dá)TIPE2可明顯下調(diào)活化巨噬細(xì)胞p-AktSer473蛋白表達(dá)（P<0.05），而對Akt蛋白表達(dá)無影響；敲降TIPE2作用與之相反（P<0.001，圖4）。表明TIPE2可抑制活化巨噬細(xì)胞磷酸化Akt表達(dá)，推測TIPE2可能通過該途徑激活多種凋亡信號通路。

圖4 TIPE2對活化巨噬細(xì)胞Akt磷酸化水平的影響Fig.4 Effects of TIPE2 on Akt phosphorylation of activated macrophages

2.5 Akt磷酸化激動劑抑制TIPE2對活化巨噬細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用為驗(yàn)證TIPE2/Akt對活化巨噬細(xì)胞凋亡的影響，采用胰島素樣生長因子1（insulinlike growth factors，IGF-1）預(yù)處理穩(wěn)定過表達(dá)TIPE2的細(xì)胞2 h后再與LPS共處理24 h，CCK-8檢測結(jié)果顯示，IGF-1不僅增強(qiáng)活化巨噬細(xì)胞活力，還明顯減弱TIPE2過表達(dá)對細(xì)胞活力的抑制作用（P<0.05）；Western blot結(jié)果顯示，IGF-1可下調(diào)活化巨噬細(xì)胞cleaved Caspase-8、Bax、CHOP、cleaved Caspase-3蛋白表達(dá)，上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)，并抑制TIPE2過表達(dá)對活化巨噬細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用（P<0.05，P<0.01，圖5）。提示提高Akt磷酸化水平可有效逆轉(zhuǎn)TIPE2對活化巨噬細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用。

圖5 IGF-1對TIPE2促進(jìn)活化巨噬細(xì)胞凋亡的影響Fig.5 Effects of IGF-1 on TIPE2 promoting activated macrophages apoptosis

3 討論

《中國心血管健康與疾病報(bào)告2019》指出，中國心血管病患病率和病死率仍處于持續(xù)上升階段，目前心血管病患者約3.30億，動脈粥樣硬化性心血管病高危和極高危人群降脂治療率與達(dá)標(biāo)率現(xiàn)狀堪憂，中國心血管病負(fù)擔(dān)日益加重，已成為重大公共衛(wèi)生問題［16］。動脈粥樣硬化是一個(gè)血管慢性炎癥反應(yīng)過程，樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞均影響其發(fā)生和進(jìn)展。巨噬細(xì)胞凋亡是動脈粥樣硬化病變發(fā)展的關(guān)鍵因素，可減少炎癥細(xì)胞在血管壁中的沉積，有效抑制炎癥反應(yīng)發(fā)生，影響早期斑塊形成，也是清除體內(nèi)病原微生物的重要途徑［6］。巨噬細(xì)胞凋亡是動脈粥樣硬化、急性心肌梗死等心血管病發(fā)生發(fā)展的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，可作為臨床診斷信號，探究其凋亡機(jī)制可為有關(guān)疾病防治提供參考，具有重要的臨床價(jià)值。

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞程序性死亡的一種形式，發(fā)生于多細(xì)胞生物體，主要通過外源性、內(nèi)源性、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激3種途徑誘導(dǎo)凋亡維持體內(nèi)平衡［17］。外源性凋亡途徑由死亡配體與受體結(jié)合，引起半胱-天冬氨酸蛋白酶（Caspase）級聯(lián)反應(yīng)。Caspase-8是級聯(lián)瀑布上游始動因子，Caspase-3是最主要的凋亡執(zhí)行蛋白，可作為多種調(diào)節(jié)途徑的效應(yīng)物，引起細(xì)胞不可逆死亡［18-19］。Bcl-2家族在內(nèi)源性凋亡通路中發(fā)揮重要作用，分為促凋亡蛋白和抗凋亡蛋白，當(dāng)兩者比值升高時(shí)，線粒體膜電位發(fā)生變化，細(xì)胞色素C釋放至胞漿并激活Caspase-9和Caspase-3誘導(dǎo)凋亡［20］。此外，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凋亡通路中，CHOP是重要的促凋亡信號分子［21］。文獻(xiàn)報(bào)道，LPS與TLR4結(jié)合可促進(jìn)NF-κB核轉(zhuǎn)位，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化，釋放多種炎癥因子，加速動脈粥樣硬化進(jìn)程［22］。本研究采用LPS刺激小鼠巨噬細(xì)胞模擬動脈粥樣硬化發(fā)生微環(huán)境，研究影響活化巨噬細(xì)胞凋亡的基因，為深入探討動脈粥樣硬化病理生理機(jī)制，開發(fā)心血管病防治藥物提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

炎癥負(fù)調(diào)控因子TIPE2最初由賓夕法尼亞大學(xué)的SUN等［9］在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎模型中發(fā)現(xiàn)。后續(xù)研究顯示TIPE2的高分辨率晶體結(jié)構(gòu)不是典型的DED折疊，而是位于中心位置的一個(gè)能結(jié)合輔因子的巨大疏水腔，這一結(jié)構(gòu)為其免疫穩(wěn)態(tài)奠定了基礎(chǔ)，可作為炎癥性疾病的藥物作用靶點(diǎn)［23］。TIPE2異常表達(dá)與多種人類感染性疾病和自身免疫性疾病有關(guān)，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、哮喘、乙型肝炎和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等［24-26］。文獻(xiàn)報(bào)道，TIPE2可能通過調(diào)控細(xì)胞凋亡或細(xì)胞自噬促進(jìn)巨噬細(xì)胞凋亡，但分子機(jī)制尚未闡明［27］。本研究表明，LPS處理巨噬細(xì)胞后，炎癥因子表達(dá)上調(diào)而TIPE2表達(dá)下調(diào)，與在系統(tǒng)性紅斑狼瘡和肝炎等慢性炎癥性疾病患者中的研究結(jié)果一致。隨后，通過基因干擾技術(shù)發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)TIPE2能影響多種凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)，促進(jìn)活化巨噬細(xì)胞凋亡，而敲降TIPE2則抑制其凋亡，提示TIPE2與活化巨噬細(xì)胞凋亡關(guān)系密切，可能通過外源性、內(nèi)源性、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑調(diào)控巨噬細(xì)胞凋亡。

Akt信號通路是調(diào)控細(xì)胞凋亡的重要通路，巨噬細(xì)胞主要表達(dá)Akt1、Akt2和Akt3 3種亞型，雖然是不同基因產(chǎn)物，但具有相似結(jié)構(gòu)［28］。Akt1和Akt3普遍表達(dá)于多種組織，Akt2在棕色脂肪、骨骼肌和肝臟等胰島素反應(yīng)組織中表達(dá)［29］。MANNING等［30］研究發(fā)現(xiàn)，Akt Ser/Thr位點(diǎn)磷酸化水平提高與抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)，Akt可通過下游多個(gè)途徑對靶蛋白進(jìn)行磷酸化修飾進(jìn)而發(fā)揮抗凋亡作用，該信號通路激活需要啟動疏水基序列中S473磷酸化。本研究顯示，過表達(dá)TIPE2可明顯抑制活化巨噬細(xì)胞Akt磷酸化水平，而敲降TIPE2可產(chǎn)生相反生物學(xué)效應(yīng)，表明TIPE2可能通過抑制Akt磷酸化促進(jìn)活化巨噬細(xì)胞凋亡發(fā)揮免疫調(diào)控功能。

胰島素樣生長因子IGF-1屬于多肽類生長因子，是Akt特異性激活劑，可介導(dǎo)PI3K/Akt信號通路活化，上調(diào)Akt磷酸化水平［31］。IGF-1的生物學(xué)功能主要由IGF-1受體（IGF-1R）介導(dǎo)，IGF-1R可激活PI3K/Akt通路促進(jìn)有絲分裂和腫瘤發(fā)生，而Akt是IGF-1R的直接下游效應(yīng)因子［32］。本研究采用IGF-1處理穩(wěn)定過表達(dá)TIPE2的細(xì)胞，探討Akt磷酸化激動劑對TIPE2促凋亡作用的影響，發(fā)現(xiàn)IGF-1不僅可抑制活化巨噬細(xì)胞凋亡，且能夠明顯減弱TIPE2對活化巨噬細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用。進(jìn)一步證實(shí)TIPE2可能通過抑制Akt磷酸化，誘導(dǎo)LPS活化的巨噬細(xì)胞凋亡，進(jìn)而減少血管壁中炎癥細(xì)胞沉積，延緩早期斑塊形成，降低心血管病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，本研究表明TIPE2可能通過抑制Akt磷酸化，激活外源性、內(nèi)源性和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凋亡通路，促使LPS活化的巨噬細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用。但TIPE2在動物體內(nèi)是否具有同樣作用及機(jī)制尚未明確。后續(xù)研究將深入探討TIPE2調(diào)控Akt磷酸化影響活化巨噬細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制，為動脈粥樣硬化防治提供更多參考。