豬苓半野生栽培技術(shù)研究

廉 冬，馬珍璐，馬亞團(tuán)，張小燕，張躍進(jìn)

(1.山西藥科職業(yè)學(xué)院，太原 030031；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)，陜西 楊凌 712100)

豬苓是我國珍稀藥用真菌，具有利水通淋、除濕退腫等功效,對(duì)下尿路感染[1]、腎系病[2]、胃炎[3]等疾病具有良好效果，應(yīng)用廣泛。但是由于豬苓生物學(xué)特性的研究不夠系統(tǒng)透徹，且生長周期長、栽培環(huán)節(jié)較為復(fù)雜，造成人工栽培豬苓產(chǎn)量不穩(wěn)定。蜜環(huán)菌種栽培法、菌材栽培法和菌床栽培法是豬苓人工半野生栽培最常用的栽培方法，其中蜜環(huán)菌種栽培法相較于另兩種栽培方法具有用材少、操作簡便、成本低等優(yōu)點(diǎn)[4]。本研究對(duì)蜜環(huán)菌種栽培法的種植密度、蜜環(huán)菌用量、營養(yǎng)素及木棒等栽培措施進(jìn)行優(yōu)化，以期完善蜜環(huán)菌種栽培技術(shù)體系，獲得優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的豬苓。

1 材料與方法

1.1 材 料

研究材料來自于陜西略陽豬苓栽培基地，經(jīng)人工挑選獲得的新鮮無霉變、表面光滑、具有彈性的幼嫩黑苓。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)地位于陜西省漢中市略陽縣(東經(jīng)106°17′7″，北緯32°25′52″，海拔1 070 m)。略陽縣地處秦嶺南麓、漢中盆地西緣，屬暖溫帶濕潤季風(fēng)性氣候，年平均日照時(shí)數(shù)達(dá)1 558 h，平均氣溫為13.2 ℃，無霜期236 d，年平均降水量為860 mm。

表示同一年限不同處理在p<0.05水平上差異顯著。下同。

根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)(見表1)按不同種植密度、蜜環(huán)菌用量、營養(yǎng)素用量、栽培措施等分別進(jìn)行栽培。各處理重復(fù)10窩，每年取樣一次。CS 1處理組及CS 2處理組浸泡時(shí)間為24 h，一瓶蜜環(huán)菌的重量為750 g。

表1 試驗(yàn)處理設(shè)計(jì)

根據(jù)試驗(yàn)地地勢(shì)，采用環(huán)山梯式法栽培，將試驗(yàn)地開墾后挖成長70 cm左右、寬50～60 cm、深20～30 cm的穴窩，窩上鋪一層濕樹葉，樹葉上放樹棒(長50 cm左右，直徑10～20 cm)，試驗(yàn)CS樹棒為7根/窩，其余試驗(yàn)為5根/窩，在樹棒兩側(cè)均勻放入種苓，空隙處放入樹枝，撒上蜜環(huán)菌，鋪一層樹葉，覆土10～15 cm[5]。

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1產(chǎn)量測(cè)定

采樣后去除泥沙，稱重，根據(jù)下列公式計(jì)算每窩產(chǎn)量增長率：

產(chǎn)量增長率(%)=[(G-M)/M]×100%

式中：G為每窩樣品去除泥沙的重量，M為每窩的用種量。

1.3.2麥角甾醇含量測(cè)定

參照《中國藥典》豬苓項(xiàng)下麥角甾醇含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定[6]。

1.3.3數(shù)據(jù)處理及分析

采用Microsoft Excel 2016軟件及SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)獲得的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 種植密度對(duì)豬苓產(chǎn)量及質(zhì)量的影響

由表2可知，當(dāng)種植密度相同時(shí)，豬苓產(chǎn)量增長率均隨著生長年限的增加呈上升的趨勢(shì)，三年生豬苓的產(chǎn)量增長率最高，顯著高于一年生，但與二年生無顯著差異。以產(chǎn)量增長率為指標(biāo)，豬苓最佳種植密度為300 g/窩。

表2 不同種植密度對(duì)豬苓產(chǎn)量的影響

由圖1可知，3種生長年限，各處理組之間麥角甾醇含量差異顯著。各處理組僅第三年的麥角甾醇含量達(dá)到《中國藥典》的要求(不低于0.07%)。以麥角甾醇含量為指標(biāo)，種植密度為300 g/窩或700 g/窩為宜。

圖1 種植密度對(duì)豬苓麥角甾醇含量的影響

綜上所述，豬苓人工栽培中種植密度以300 g/窩為宜，采收年限不低于三年。

2.2 不同蜜環(huán)菌用量對(duì)豬苓產(chǎn)量及質(zhì)量的影響

由表3可知，生長年限為三年時(shí)，豬苓的產(chǎn)量增長率隨著蜜環(huán)菌用量的增加逐漸升高，MHJ 4處理組的產(chǎn)量增長率最高，為269.33%，差異較MHJ 1處理組及MHJ 2處理組顯著。蜜環(huán)菌用量相同時(shí)，隨著生長年限的增加，豬苓產(chǎn)量增長率呈上升的趨勢(shì)。以產(chǎn)量為指標(biāo)，蜜環(huán)菌最佳用量為2 250 g/窩。

表3 不同蜜環(huán)菌用量對(duì)豬苓產(chǎn)量的影響

由圖2可知，MHJ 3處理組不同年限之間麥角甾醇含量均高于《中國藥典》的規(guī)定。MHJ 4處理組僅第一年未達(dá)到《中國藥典》的要求。MHJ 1處理組及MHJ 2處理組僅第三年達(dá)到《中國藥典》的要求。當(dāng)蜜環(huán)菌用量相同時(shí)，不同生長年限之間豬苓的麥角甾醇含量差異顯著，各處理組均是三年生麥角甾醇含量最高。除MHJ 1處理組外，其他三組處理的麥角甾醇含量隨著生長年限的增加逐漸升高。以麥角甾醇含量為指標(biāo)，蜜環(huán)菌最佳用量為2 250 g/窩。

圖2 不同蜜環(huán)菌用量對(duì)豬苓麥角甾醇含量的影響

綜上所述，豬苓人工栽培中蜜環(huán)菌用量以2 250 g/窩為宜，采收年限不低于三年。

2.3 不同ZnSO4·7 H2O用量對(duì)豬苓產(chǎn)量及質(zhì)量的影響

由表4可知，生長年限為三年時(shí)，Z 1處理組的產(chǎn)量增長率最高，Z 1處理組及Z 3處理組的產(chǎn)量增長率顯著高于ck處理組。ZnSO4·7 H2O用量相同時(shí)，豬苓的產(chǎn)量增長率隨著生長年限的增加呈上升的趨勢(shì)。以產(chǎn)量為指標(biāo)，ZnSO4·7 H2O最佳用量為5 g/窩。

表4 不同ZnSO4·7 H2O用量對(duì)豬苓產(chǎn)量的影響

由圖3可知，ck處理組、Z 1處理組及Z 2處理組僅三年生的豬苓麥角甾醇含量達(dá)到《中國藥典》的要求，Z 3處理組僅一年生的豬苓麥角甾醇含量未達(dá)到《中國藥典》的要求。ZnSO4·7 H2O用量相同時(shí)，不同生長年限之間豬苓的麥角甾醇含量差異顯著，各處理組均是三年生的麥角甾醇含量最高。除Z 2處理組外，其他三組處理的麥角甾醇含量隨著生長年限的增加逐漸升高。以麥角甾醇含量為指標(biāo)，ZnSO4·7 H2O最佳用量為15 g/窩。

圖3 不同ZnSO4·7 H2O用量對(duì)豬苓麥角甾醇含量的影響

綜上所述，豬苓栽培中適當(dāng)添加ZnSO4·7 H2O有利于豬苓生長發(fā)育，且以15 g/窩用量為宜。

表6 不同KH2PO4用量對(duì)豬苓產(chǎn)量的影響

2.4 不同CuSO4·5 H2O用量對(duì)豬苓產(chǎn)量及質(zhì)量的影響

由表5可知，豬苓的產(chǎn)量增長率隨著生長年限的增加呈上升的趨勢(shì)。T 1處理組及T 2處理組不同生長年限之間產(chǎn)量增長率差異顯著。以產(chǎn)量為指標(biāo)，CuSO4·5 H2O最佳，用量為5 g/窩。

表5 不同CuSO4·5 H2O用量對(duì)豬苓產(chǎn)量的影響

由圖4可知，僅三年生ck處理組、T 1處理組及T 2處理組的麥角甾醇含量達(dá)到《中國藥典》的要求。CuSO4·5 H2O用量相同時(shí)，不同生長年限之間豬苓的麥角甾醇含量差異顯著，各處理組均是三年生的麥角甾醇含量最高。除T 2處理組外，其他三組處理的麥角甾醇含量隨著生長年限的增加逐漸升高。以麥角甾醇含量為指標(biāo)，CuSO4·5 H2O最佳用量為10 g/窩。

圖4 不同CuSO4·5 H2O用量對(duì)豬苓麥角甾醇含量的影響

綜上所述，豬苓栽培中適當(dāng)添加CuSO4·5 H2O有利于豬苓生長發(fā)育，且以10 g/窩用量為宜。

2.5 不同KH2PO4用量對(duì)豬苓產(chǎn)量及質(zhì)量的影響

由表5可知，豬苓的產(chǎn)量增長率隨著生長年限的增加呈上升的趨勢(shì)。除ck處理組外，其他三組處理組不同生長年限之間產(chǎn)量增長率差異顯著。以產(chǎn)量為指標(biāo)，KH2PO4最佳用量為10 g/窩。

由圖5可知，各處理組僅第三年的麥角甾醇含量達(dá)到《中國藥典》的要求。KH2PO4用量相同時(shí)，不同生長年限之間豬苓的麥角甾醇含量差異顯著，隨著生長年限的增加，豬苓的麥角甾醇含量呈上升的趨勢(shì)。以麥角甾醇含量為指標(biāo)，KH2PO4最佳用量為10 g/窩。

圖5 不同KH2PO4用量對(duì)豬苓麥角甾醇含量的影響

綜上所述，豬苓栽培中適當(dāng)添加KH2PO4有利于豬苓生長發(fā)育，且以10 g/窩為宜。

2.6 不同腐殖酸用量對(duì)豬苓產(chǎn)量及質(zhì)量的影響

由表7可知，ck處理組豬苓的產(chǎn)量增長率隨著生長年限的增加呈上升的趨勢(shì)，但第二年和第三年的產(chǎn)量增長率無顯著差異。F 1處理組及F 3處理組不同生長年限之間產(chǎn)量增長率差異顯著，二年生的產(chǎn)量增長率最高，一年生的產(chǎn)量增長率最低。F 2處理組二年生的產(chǎn)量增長率最高，但與三年生的產(chǎn)量增長率無顯著差異。以產(chǎn)量為指標(biāo)，ck處理組為最佳處理。

表7 不同腐殖酸用量對(duì)豬苓產(chǎn)量的影響

由圖6可知，僅ck處理組、F 2處理組及F 3處理組的三年生豬苓麥角甾醇含量符合《中國藥典》的規(guī)定。腐殖酸用量相同時(shí)，各處理組均是三年生的豬苓麥角甾醇含量最高。以麥角甾醇含量為指標(biāo)，ck處理組、F 3處理組為最佳處理。

圖6 不同腐殖酸用量對(duì)豬苓麥角甾醇含量的影響

綜上所述，豬苓栽培中添加腐殖酸對(duì)豬苓生長發(fā)育具有一定的抑制作用，不宜添加。采收年限以三年為宜。

2.7 不同栽培措施對(duì)豬苓產(chǎn)量及質(zhì)量的影響

由表8可知，生長年限為一年時(shí)，CS 2處理組的產(chǎn)量增長率較CS 3處理組(即對(duì)照組)顯著增加，CS 1處理組的產(chǎn)量增長率與CS 3無顯著差異。生長年限為二年時(shí)，CS 1處理組的產(chǎn)量增長率較CS 3處理組顯著增加，CS 2處理組的產(chǎn)量增長率與CS 3處理組無顯著差異。各處理組第一年和第二年的產(chǎn)量均是負(fù)增長，且CS 2處理組和CS 3處理組第二年的產(chǎn)量低于第一年。兩次采樣發(fā)現(xiàn)各處理組的豬苓菌核均未有蜜環(huán)菌侵入，且未發(fā)現(xiàn)白苓及灰苓，這說明產(chǎn)量的負(fù)增長是因?yàn)槊郗h(huán)菌未能侵入豬苓菌核以及部分菌核腐爛造成的。

表8 不同栽培措施對(duì)豬苓產(chǎn)量的影響

由圖7可知，生長年限為一年時(shí)，各處理的豬苓麥角甾醇含量差異顯著。生長年限為二年時(shí)，各處理的豬苓麥角甾醇含量差異顯著，CS 1處理組及CS 2處理組的豬苓麥角甾醇含量顯著高于CS 3處理組，CS 2處理組的麥角甾醇含量最高，為0.095%。CS 1處理組及CS 2處理組僅二年生的麥角甾醇含量符合《中國藥典》的規(guī)定，CS 3處理組僅一年生的麥角甾醇含量達(dá)到《中國藥典》的要求。以麥角甾醇含量為指標(biāo)，CS 2處理組為最佳處理。

圖7 不同栽培措施對(duì)豬苓麥角甾醇含量的影響

綜上所述，0.1% KH2PO4浸泡木棒處理的二年生豬苓質(zhì)量較好。

3 結(jié)論與討論

本研究從種植密度、蜜環(huán)菌用量、營養(yǎng)元素及栽培措施等方面優(yōu)化豬苓人工栽培技術(shù)，獲得了優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)豬苓人工半野生栽培的關(guān)鍵技術(shù)，即種植密度為300 g/窩，蜜環(huán)菌用量2 250 g/窩；ZnSO4·7 H2O添加量15 g/窩，CuSO4·5 H2O添加量10 g/窩，KH2PO4添加量10 g/窩。在本試驗(yàn)范圍內(nèi)添加腐殖酸不利于豬苓生長發(fā)育。0.1% KH2PO4浸泡木棒處理及水浸泡木棒有利于提高豬苓的質(zhì)量。

豬苓人工半野生栽培試驗(yàn)一年生出現(xiàn)負(fù)增長的現(xiàn)象，有兩方面原因：一是蜜環(huán)菌尚未侵入種苓，導(dǎo)致種苓未萌發(fā)；二是因腐爛或被地下害蟲等動(dòng)物破壞而導(dǎo)致部分種苓消失。豬苓栽培后的一至二年內(nèi)，菌核需要與蜜環(huán)菌建立共生關(guān)系，導(dǎo)致其生長緩慢，栽后三至四年豬苓生長才達(dá)到旺盛期[7]。試驗(yàn)結(jié)果表明，豬苓的最低采收年限為三年，這與楊海燕等[8]的研究結(jié)果一致，陳靳松[9]的試驗(yàn)結(jié)果表明，豬苓在河北地區(qū)的采收年限以3.5～4年為宜，也進(jìn)一步說明豬苓適宜采收年限在三年以上。

邱鵬程等[10]發(fā)現(xiàn)，P、K、Cu、Zn元素可促進(jìn)豬苓菌絲在固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基的生長，但未見這些礦物質(zhì)在豬苓栽培生產(chǎn)中的應(yīng)用，本研究發(fā)現(xiàn)少量礦物質(zhì)有利于豬苓增產(chǎn)，腐殖酸不利于豬苓生長，可能是由于所選取的腐殖酸濃度不合適導(dǎo)致的。楊海燕等[8]

研究同樣發(fā)現(xiàn)腐殖酸有機(jī)肥不利于豬苓生長。在栽培措施試驗(yàn)中，僅0.1% KH2PO4浸泡木棒處理第二年產(chǎn)量高于第一年，可能是因?yàn)檩^其他兩組處理，KH2PO4有利于蜜環(huán)菌生長[11]。

研究結(jié)果表明，豬苓有效成分麥角甾醇的含量隨生長年限逐年升高，但也有個(gè)別例外，出現(xiàn)這種情況的原因可能與采樣時(shí)灰苓所占比例較大有關(guān)，灰苓的麥角甾醇含量低于黑苓[12]。添加適宜濃度的營養(yǎng)素能提高豬苓麥角甾醇的含量。在自然界中，豬苓菌絲進(jìn)行菌核分化形成白苓這一階段需從外界環(huán)境中吸收大量的營養(yǎng)。因此，在這一階段，添加適宜量的有益元素可為豬苓的高產(chǎn)打下基礎(chǔ)。適宜濃度營養(yǎng)素提高豬苓麥角甾醇含量具體機(jī)制有待進(jìn)一步探究。