過敏性紫癜患兒 β2-MG、25-（OH）D 水平表達(dá)及與病情相關(guān)性

鄭連營 高婧

（1 河南省兒童醫(yī)院鄭州兒童醫(yī)院 鄭州 450003；2 黃河水利委員會(huì)黃河中心醫(yī)院 河南鄭州 450000）

過敏性紫癜（HSP）是臨床較為常見的血管變態(tài)反應(yīng)性疾病，多因機(jī)體受到致敏性物質(zhì)侵襲發(fā)生變態(tài)反應(yīng)，從而導(dǎo)致毛細(xì)血管脆性與通透性增加，臨床以關(guān)節(jié)、腸道及腎臟小血管的炎癥與出血為主要表現(xiàn)[1]。國內(nèi)外已有研究表明，維生素D 不僅能夠維持機(jī)體正常骨骼生理功能與鈣磷代謝，還參與調(diào)節(jié)免疫功能及炎癥反應(yīng)，且可參與多種自身免疫性疾病的發(fā)生與發(fā)展[2~3]。25-羥維生素D[25-（OH）D]是維生素D 在機(jī)體中的主要存在形式，自身免疫性疾病的發(fā)生可誘發(fā)機(jī)體出現(xiàn)變態(tài)免疫反應(yīng)，從而導(dǎo)致25-（OH）D 水平呈下降趨勢[4]。β2-微球蛋白（β2-MG）是人血漿中一種小分子球蛋白，在正常人機(jī)體中β2-MG 的合成率相對恒定，可經(jīng)腎小球自由濾過，因此正常情況下β2-MG 排出相對微量，可作為評價(jià)腎小球?yàn)V過功能的重要指標(biāo)。臨床研究發(fā)現(xiàn)HSP 的發(fā)病機(jī)制與β2-MG 水平變化可能存在一定關(guān)系，特別是對HSP 早期腎臟損傷具有良好的評估作用[5~6]。但關(guān)于 β2-MG、25-（OH）D 水平及聯(lián)合評估在 HSP 患兒機(jī)體中的表達(dá)與病情相關(guān)性分析報(bào)道鮮有。本研究將通過對比HSP 患兒與正常健康兒童的β2-MG與25-（OH）D 水平，探討兩者在HSP 發(fā)病機(jī)制中的作用。現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2021 年1~12 月收治的HSP 患兒53 例臨床資料納入HSP 組，男30 例，女 23 例；年齡 3~12 歲，平均年齡（7.31±2.27）歲；體質(zhì)量 22~35 kg，平均（25.42±3.37）kg；體質(zhì)量指數(shù)（BMI）15.8~21.7 kg/m2，平均（18.15±2.26）kg/m2。另選擇同期在醫(yī)院體檢的健康兒童60 例作為健康對照組，男 34 例，女 26 例；年齡 3~12 歲，平均年齡（7.37±2.21）歲；體質(zhì)量 22~36 kg，平均（25.17±3.16）kg；BMI 15.3~21.5 kg/m2，平均（18.27±2.18）kg/m2。兩組一般資料對比無顯著差異（P＞0.05）。本研究已獲醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理字202100316 號）。

1.2 入組標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：HSP 均符合《兒科學(xué)》[7]中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；彌漫性腹痛；任一部位活檢顯示免疫球蛋白A（IgA）沉積；關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)痛；血尿或蛋白尿；均已簽署知情同意書。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：近期接受過維生素D 治療或（及）激素治療；伴有佝僂病、過敏史；凝血功能障礙；自身免疫缺陷性疾病、代謝功能障礙；伴有血液系統(tǒng)及（或）免疫系統(tǒng)相關(guān)疾?。徽J(rèn)知或精神功能障礙而無法配合檢查。

1.3 檢測方法

1.3.1 指標(biāo)檢測 HSP 組于患兒入院后第2 天抽取清晨空腹靜脈血3 ml，健康對照組則于體檢時(shí)抽取空腹靜脈血3 ml，以3 000 r/min 離心處理5 min后取上清液，置于-70℃的環(huán)境中保存待檢。儀器選擇貝克曼庫爾特UniCel DxI 800 Access 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（國械注進(jìn)20173406577），采用化學(xué)發(fā)光法檢測25-（OH）D 水平；采用放射免疫法檢測尿β2-MG 水平。試劑盒由上海科艾博生物技術(shù)有限公司提供，所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書執(zhí)行。

1.3.2 紫癜癥狀評分標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)皮疹、腹痛、關(guān)節(jié)痛及尿常規(guī)鏡檢對紫癜癥狀進(jìn)行評分[8]。（1）紫癜分布：包含雙足、雙小腿、雙上肢、雙大腿、腰臀及其他部位，0 分為無損害；1 分為累及 1 個(gè)部位；2 分為累及2 個(gè)部位；3 分為累及3 個(gè)及以上部位。（2）腹痛：無腹痛為0 分；輕微腹痛及大便隱血（+）為1 分；中度腹痛及大便隱血（++）為2 分；重度腹痛及大便隱血（+++）為 3 分。（3）關(guān)節(jié)疼痛：無疼痛為 0 分；有關(guān)節(jié)疼痛且輕微腫脹為1 分；有關(guān)節(jié)疼痛且中度腫脹為2 分；有關(guān)節(jié)疼痛且重度腫脹為3 分。（4）尿常規(guī)：高倍鏡下紅細(xì)胞數(shù)≤5 個(gè)，pH 及尿蛋白陰性或弱陽性；高倍鏡下紅細(xì)胞數(shù)≤10 個(gè)，pH 及尿蛋白陽性為2分；高倍鏡下紅細(xì)胞數(shù)≥16 個(gè)，pH 及尿蛋白強(qiáng)陽性為3 分。總分為所有項(xiàng)相加，得分越高則癥狀越嚴(yán)重。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以（）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson 檢驗(yàn)，繪制ROC 曲線并計(jì)算曲線下面積（AUC）分析預(yù)測價(jià)值。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組 β2-MG、25-（OH）D 及紫癜癥狀評分對比HSP 組25-（OH）D 低于健康對照組，β2-MG 水平及紫癜癥狀評分均高于健康對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組 β2-MG、25-（OH）D 水平及紫癜癥狀評分對比（）

表1 兩組 β2-MG、25-（OH）D 水平及紫癜癥狀評分對比（）

紫癜癥狀評分（分）HSP 組健康對照組組別n25-（OH）D（ng/ml）β2-MG（g/ml）53 60 χ2 P 23.26±8.67 44.07±12.64 10.072 0.000 0.44±0.16 0.28±0.14 5.670 0.000 6.35±1.28 1.05±0.82 26.509 0.000

2.2 β2-MG、25-（OH）D 與紫癜癥狀評分的相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson 相關(guān)性顯示，HSP 組β2-MG 與紫癜癥狀評分呈正相關(guān)（r＞0，P＜0.05），25-（OH）D 與紫癜癥狀評分呈負(fù)相關(guān)（r＜0，P＜0.05）。見表2。

表2 β2-MG、25-（OH）D 水平與紫癜癥狀評分的相關(guān)性分析

2.3 β2-MG、25-（OH）D 水平及聯(lián)合對 HSP 的診斷價(jià)值分析 ROC 曲線顯示，β2-MG、25-（OH）D 水平及聯(lián)合對HSP 發(fā)病診斷的AUC 分別為0.789（95%CI：0.702~0.876）、0.804 （95% CI：0.722~0.886）、0.885（95%CI：0.816~0.953）。見表 3、圖 1。

表3 β2-MG、25-（OH）D 水平及聯(lián)合對 HSP 的診斷價(jià)值分析

圖1 β2-MG、25-（OH）D 水平及聯(lián)合對 HSP 的 ROC 曲線圖

3 討論

目前，HSP 的病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，多認(rèn)為與免疫系統(tǒng)紊亂、遺傳等因素有關(guān)，受到多種刺激因素影響，而激活遺傳易感性的T 細(xì)胞，導(dǎo)致免疫功能出現(xiàn)紊亂，B 細(xì)胞大量增殖后會(huì)分泌IgA 等炎癥因子，沉積于血管壁后則會(huì)引起自身炎癥反應(yīng)及組織損傷，進(jìn)一步導(dǎo)致系統(tǒng)性血管炎及組織臟器損傷，甚至威脅患兒的生命健康[9]。

維生素D 是人類維持生命所必要的重要營養(yǎng)因素，也是維持機(jī)體健康發(fā)育的重要物質(zhì)之一。維生素D 廣泛分布于機(jī)體骨骼肌、免疫細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等組織細(xì)胞中，其不僅參與機(jī)體骨骼代謝，還能夠發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫功能的作用。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，維生素D 可通過改變與刺激分子間的表達(dá)，增強(qiáng)對T 細(xì)胞的比例調(diào)節(jié)，并可抑制相關(guān)自身免疫反應(yīng)[10]。另外，維生素D 通過改變并刺激分子的表達(dá)可增加調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞的比例及白細(xì)胞介素的分泌能力，從而抑制多發(fā)性硬化相關(guān)的自身免疫反應(yīng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，維生素D 在調(diào)節(jié)激活的T 淋巴細(xì)胞向Th2 細(xì)胞分化并產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子，從而抑制T 淋巴細(xì)胞的凋亡[11]。HSP 患兒的公認(rèn)致病因素為免疫調(diào)節(jié)失常，主要表現(xiàn)以炎癥細(xì)胞因子、趨化因子比例及T淋巴細(xì)胞亞群的失調(diào)為主。

β2-MG 是細(xì)胞表面人類淋巴細(xì)胞抗原（HLA）的β 鏈部分，多由淋巴細(xì)胞、血小板及多形核白細(xì)胞產(chǎn)生[2]。在正常生理狀態(tài)下，β2-MG 的表達(dá)水平相對較低，可自由通過腎小球?yàn)V過膜，并經(jīng)腎小管重吸收后經(jīng)尿液排出體內(nèi)；而腎小球損傷加重會(huì)損傷濾過的屏障，從而導(dǎo)致較大分子量的血漿蛋白出現(xiàn)[12]。本研究結(jié)果顯示，HSP 組25-（OH）D 水平低于健康對照組，β2-MG 水平及紫癜癥狀評分均高于健康對照組；進(jìn)一步經(jīng)Kendall” s Tau-b（K）相關(guān)性顯示，HSP 組 β2-MG 與紫癜癥狀評分呈正相關(guān)，25-（OH）D 水平與紫癜癥狀評分呈負(fù)相關(guān)，提示25-（OH）D 在HSP 患兒中呈低水平表達(dá)，而β2-MG 呈高水平表達(dá)，β2-MG 及25-（OH）D水平與HSP 的病情嚴(yán)重程度具有相關(guān)性。分析原因可能在于：（1）25-（OH）D 可對T 淋巴細(xì)胞的表達(dá)凋亡相關(guān)因子起到抑制作用，阻止炎癥細(xì)胞因子的增殖與合成，從而調(diào)節(jié)免疫功能；而25-（OH）D 缺乏，則可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能失衡，炎癥介質(zhì)釋放后對小血管內(nèi)皮造成損傷，從而促進(jìn)HSP 的發(fā)生。宋慶梅等[13]根據(jù)HSP 不同臨床癥狀表現(xiàn)對比25-（OH）D表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，關(guān)節(jié)、消化道及混合癥狀的HSP 患兒血尿25-（OH）D 水平均低于單純HSP 患兒，可證明25-（OH）D 參與了疾病的發(fā)生，且與嚴(yán)重程度具有一定關(guān)系。（2）β2-MG 的水平越高，往往表明腎臟累及程度越嚴(yán)重，腎小球纖維蛋白沉積及腎小管損害加重。王亮等[14]通過對100 例HSP 患兒進(jìn)行尿纖維母細(xì)胞標(biāo)志蛋白人成纖維細(xì)胞特異蛋白-1（FSP-1）、β2-MG 水平進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)尿β2-MG與FSP-1 水平異常與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，與本研究結(jié)果一致。

進(jìn)一步經(jīng)ROC 曲線顯示，β2-MG、25-（OH）D 水平及聯(lián)合對HSP 發(fā)病診斷的AUC 分別為0.789（95%CI：0.702~0.876）、0.804（95%CI：0.722~0.886）、0.885（95%CI：0.816~0.953），表明 β2-MG、25-（OH）D水平表達(dá)對HSP 的發(fā)生具有一定的診斷價(jià)值，臨床通過聯(lián)合 β2-MG、25-（OH）D 檢測可提高 HSP 發(fā)生的預(yù)測價(jià)值。但本研究仍存在一定不足：如研究屬于回顧性分類，因此統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果可能存在一定偏倚；未對25-（OH）D 水平及其相關(guān)因子的表達(dá)進(jìn)行分析，因此未來期待大樣本量、前瞻性隨機(jī)對照、多中心的研究加以佐證。綜上所述，HSP 患兒β2-MG 水平呈高表達(dá)、25-（OH）D 水平呈低表達(dá)，兩者聯(lián)合可有效診斷HSP 的發(fā)生。