血清Leptin、PKCε與乳腺癌患者臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研究*

高 飛,任冠穎,高曉培,郄 帥,洪 丹,楊 琳

1.保定市第一中心醫(yī)院放療科，河北保定 071000；河北大學(xué)附屬醫(yī)院：2.腫瘤內(nèi)科；3.放療科，河北保定 071000

近年來(lái)，我國(guó)已成為乳腺癌發(fā)病率增長(zhǎng)速度最快的國(guó)家之一，乳腺癌也成為發(fā)病率最高的女性惡性腫瘤[1]。目前，乳腺癌以手術(shù)治療為主，放療、化療、內(nèi)分泌治療等多種治療方案為輔，通過(guò)治療可提高患者遠(yuǎn)期治愈率，但部分患者仍存在病情復(fù)發(fā)、病灶轉(zhuǎn)移等情況[2]。因此，探索乳腺癌的臨床發(fā)病機(jī)制，并探討相應(yīng)的診斷與治療手段具有十分重要的臨床意義[3]。蛋白激酶Cε(PKCε)是一種新型家族激酶成員，有研究表明，在乳腺癌細(xì)胞中PKCε多處于異常高表達(dá)狀態(tài)，Leptin是參與細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育和能量代謝的一種分泌蛋白，在多種腫瘤細(xì)胞中均處于異?；钴S狀態(tài)[4]，但PKCε和Leptin在乳腺癌患者血清中的水平及與患者病理特征的相關(guān)性鮮見(jiàn)報(bào)道。因此，本研究擬探討乳腺癌臨床病理特征和臨床預(yù)后與血清Leptin、PKCε水平的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取河北大學(xué)附屬醫(yī)院2017年11月至2018年2月收治的40例乳腺癌患者作為觀察組，均為女性；年齡(43.29±5.50)歲；TNM分期Ⅰ期13例，Ⅱ期14例，Ⅲ期10例，Ⅳ期3例；病灶區(qū)最大徑(3.85±1.29)mm；腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例，未轉(zhuǎn)移28例；浸潤(rùn)性乳腺癌29例，導(dǎo)管原位癌11例。另選取同期50例體檢健康女性作為對(duì)照組，年齡(45.14±5.74)歲。

1.2觀察組納入標(biāo)準(zhǔn) (1)確診后無(wú)任何抗腫瘤治療；(2)經(jīng)病理組織學(xué)檢測(cè)確診為乳腺癌；(3)近3個(gè)月內(nèi)無(wú)急性感染；(4)無(wú)腎臟或類(lèi)風(fēng)濕疾??；(5)近半年未應(yīng)用激素類(lèi)藥物；(6)活動(dòng)狀態(tài)評(píng)分≥60分；(7)經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者均簽署知情同意書(shū)。

1.3觀察組排除標(biāo)準(zhǔn) (1)骨髓功能異常的乳腺癌患者；(2)嚴(yán)重臟器疾病患者；(3)合并免疫性疾病患者；(4)內(nèi)分泌代謝性疾病患者。

1.4方法 本研究對(duì)患者隨訪2年，詳細(xì)記錄患者預(yù)后質(zhì)量。入組后采集患者空腹靜脈血3 mL,3 000 r/min離心5 min，離心并收集血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清Leptin和PKCε水平，Leptin和PKCε試劑盒均購(gòu)自杭州聯(lián)科生物科技有限公司，并嚴(yán)格遵照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清Leptin、PKCε水平比較 觀察組血清Leptin、PKCε水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組血清Leptin、PKCε水平比較

2.2不同病理特征患者血清Leptin、PKCε水平比 較同TNM分期、病灶區(qū)最大徑和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清Leptin、PKCε水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；隨著TNM分期升高、病灶區(qū)最大徑增大及腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移出現(xiàn)，患者血清Leptin、PKCε水平呈明顯升高狀態(tài)(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同病理特征患者血清Leptin、PKCε水平比較

2.3不同病理特征與血清Leptin、PKCε水平的相關(guān)性分析 患者血清Leptin、PKCε水平與TNM分期、病灶區(qū)最大徑、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)(r=0.675～0.743，P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 不同病理特征患者血清Leptin、PKCε水平的關(guān)系

2.4不同預(yù)后質(zhì)量患者血清Leptin、PKCε水平比較 死亡組患者血清Leptin、PKCε水平均明顯高于存活組(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 不同預(yù)后質(zhì)量患者血清Leptin、PKCε水平比較

2.5不同Leptin、PKCε水平情況患者預(yù)后質(zhì)量 本研究以Leptin、PKCε水平均值作為高水平和低水平的臨界值，高水平Leptin共15例，高水平PKCε共13例，高水平Leptin和高水平PKCε患者生存率明顯低于低水平Leptin和低水平PKCε(P<0.05)，見(jiàn)圖1、2。

圖1 高水平和低水平Leptin患者預(yù)后質(zhì)量調(diào)查結(jié)果

圖2 高水平和低水平PKCε患者預(yù)后質(zhì)量調(diào)查結(jié)果

2.6Leptin、PKCε水平對(duì)乳腺癌患者預(yù)后質(zhì)量的影響 血清高水平Leptin和高水平PKCε是影響乳腺癌患者預(yù)后質(zhì)量的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見(jiàn)表6。

表6 Leptin、PKCε表達(dá)對(duì)乳腺癌患者預(yù)后質(zhì)量的影響

3 討 論

作為目前全球女性群體中發(fā)病率最高的惡性腫瘤，乳腺癌已逐漸成為臨床中嚴(yán)重威脅女性群體健康的疾病之一[5]。目前，對(duì)于乳腺癌的治療以手術(shù)治療為主，但患者治療后仍可能出現(xiàn)病情復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的情況，如何對(duì)患者進(jìn)行有效治療并改善患者治療預(yù)后質(zhì)量具有十分重要的意義[6]。有研究者發(fā)現(xiàn)，炎性反應(yīng)、免疫功能異常改變均與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[7]。惡性腫瘤具有抗凋亡、抗生長(zhǎng)抑制、易侵襲性、轉(zhuǎn)移性、永生性，持續(xù)血管生長(zhǎng)等特征，而炎癥微環(huán)境是腫瘤進(jìn)展的主要病理特征[8]。且炎癥可促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移，并可誘發(fā)腫瘤細(xì)胞逃避免疫殺傷，與多種惡性腫瘤特征密切相關(guān)。惡性腫瘤患者體內(nèi)微環(huán)境多處于失衡狀態(tài)，伴隨免疫功能下降的情況。目前的研究發(fā)現(xiàn)，在結(jié)直腸癌、肝癌、呼吸系統(tǒng)腫瘤、消化系統(tǒng)腫瘤、血液病等患者血液中，Leptin和PKCε處于明顯異常表達(dá)狀態(tài)，Leptin和PKCε與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、增加腫瘤耐藥性及患者預(yù)后可能存在一定相關(guān)性，但仍需要進(jìn)一步深入探究[9-11]。有學(xué)者指出，對(duì)乳腺癌的臨床發(fā)病機(jī)制進(jìn)行深入研究，并輔助患者的臨床治療，對(duì)于改善患者治療療效與臨床預(yù)后具有十分重要的意義[12]。

乳腺癌細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)紊亂在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中起著重要作用[13]。Leptin可誘導(dǎo)乳腺癌MAPK/ERK和PI3K/Akt等信號(hào)通路相關(guān)蛋白激活，Leptin還可調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外基質(zhì)相互作用，刺激血管生成，從而促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。Leptin通過(guò)調(diào)控多種細(xì)胞因子下游表皮生長(zhǎng)因子、血小板衍生生長(zhǎng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子等下游蛋白，介導(dǎo)乳腺癌等腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移及侵襲信號(hào)整合和傳遞。有研究顯示，Leptin會(huì)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞中MAPK/ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，調(diào)控乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)生存、骨架穩(wěn)定、細(xì)胞形態(tài)、凋亡和侵襲等細(xì)胞行為[14]。在多種信號(hào)通路中，蛋白激酶(PKCs)是關(guān)鍵效應(yīng)分子，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后關(guān)系密切，這也是近年臨床研究的熱點(diǎn)。PKCs常依照絲-蘇氨酸激酶亞基結(jié)構(gòu)不同分為3類(lèi)，其中PKCε是新型的PKC種類(lèi)，其分子活化不依賴(lài)于鈣離子。研究顯示，在乳腺癌細(xì)胞系中PKCε水平高于正常乳腺細(xì)胞系，提示PKCε在乳腺癌發(fā)生和調(diào)控過(guò)程中起到重要作用[15]。

本研究結(jié)果顯示，觀察組血清Leptin、PKCε水平均明顯高于對(duì)照組，隨著TNM分期升高、病灶區(qū)直徑增大及腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移出現(xiàn)，患者血清Leptin、PKCε水平呈明顯升高狀態(tài)，且相關(guān)性分析結(jié)果顯示，患者血清Leptin、PKCε水平與TNM分期、病灶區(qū)直徑、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)?；颊哳A(yù)后質(zhì)量分析結(jié)果顯示，死亡組血清Leptin、PKCε水平均高于存活組。進(jìn)一步以Leptin、PKCε水平均值作為高水平和低水平的臨界值，高水平Leptin共15例，高水平PKCε共13例，高水平Leptin和高水平PKCε患者生存率明顯低于低水平Leptin和低水平PKCε。Logistics回歸模型分析結(jié)果顯示，乳腺癌患者血清高水平Leptin和高水平PKCε是影響患者預(yù)后質(zhì)量的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果表明，隨著患者血清Leptin、PKCε水平升高，乳腺癌患者病情惡化程度加重，進(jìn)而導(dǎo)致患者預(yù)后質(zhì)量降低。Leptin會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞異常生長(zhǎng)，還可通過(guò)全身內(nèi)分泌和自分泌作用于乳腺上皮細(xì)胞，促進(jìn)脂肪組織中雌二醇的轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致乳腺上皮細(xì)胞出現(xiàn)異常增殖，在乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展中起到十分重要的作用。與此同時(shí)，PKCε會(huì)促進(jìn)形成mTORC2復(fù)合物，活化細(xì)胞內(nèi)AKT，激活PI3K-AKT信號(hào)通路，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移和增殖，導(dǎo)致患者預(yù)后質(zhì)量不佳。

綜上所述，乳腺癌患者血清Leptin、PKCε水平與TNM分期、病灶區(qū)直徑、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，且高水平Leptin和高水平PKCε是影響患者預(yù)后質(zhì)量的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。但本研究臨床樣本數(shù)較少，有待后續(xù)持續(xù)追蹤和分析。