血清IL-31、IL-33水平與中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療效果的關系*

何宏月,任小苗

西安市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,陜西西安 710000

子宮內(nèi)膜癌因早期臨床癥狀不明顯，且發(fā)病隱匿，多數(shù)患者在確診時已進展至中晚期，治療難度增加，即便是符合新輔助化療適應證，也仍有部分患者會出現(xiàn)化療無效的情況[1]。因此，早期準確預測中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療無效風險尤為關鍵。研究發(fā)現(xiàn)，人附睪分泌蛋白E4和糖類抗原(CA125)等均可用于診斷子宮內(nèi)膜癌，但需要注意的是，該研究僅僅針對診斷[2]。白細胞介素-31(IL-31)主要由CD4+T細胞產(chǎn)生，能夠促使機體中血管內(nèi)皮因子呈過表達狀態(tài)[3]。此外，有研究證實，IL-31的表達與上皮性卵巢癌的發(fā)生及發(fā)展密切相關[4]。白細胞介素-33(IL-33)可經(jīng)ST2受體傳導，誘發(fā)新生血管生成[5]。有文獻指出，IL-33在胃癌組織中呈過表達狀態(tài)，且與胃癌患者的預后有關[6]。結合上述IL-31、IL-33在腫瘤疾病中的表達特點，推測血清IL-31、IL-33異常表達可能與子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療效果有關，但尚未被證實。基于此，本研究主要分析血清IL-31、IL-33與子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療效果的關系?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究內(nèi)容經(jīng)西安市人民醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準同意實施，且患者及其家屬均知曉并簽署知情同意書。選取2017年1月至2020年1月于本院接受新輔助化療的123例中晚期子宮內(nèi)膜癌患者作為研究對象。納入標準：(1)經(jīng)診斷性刮宮病理檢查確診為中晚期子宮內(nèi)膜癌。(2)接受新輔助化療。(3)Ⅱ～Ⅳ期。(4)符合新輔助化療適應證[7](①Ⅱ～Ⅳ期患者；②經(jīng)影像學或腹腔鏡下探查初步評估難以實現(xiàn)滿意的腫瘤細胞減滅術的Ⅳ期患者；③合并嚴重內(nèi)科疾病，或體能狀態(tài)差，不能耐受侵襲性手術者)。排除標準：(1)合并心、肝、腎等器官功能不全或衰竭；(2)合并其他惡性腫瘤；(3)合并嚴重傳染性疾病或感染性疾??；(4)合并免疫系統(tǒng)疾??；(5)存在其他子宮內(nèi)膜癌的高危因素(如肥胖、高血壓、糖尿病、多囊卵巢等)；(6)既往有放化療史。123例子宮內(nèi)膜癌患者年齡59～66歲；絕經(jīng)年齡45～50歲；分化程度：低分化37例，中分化53例，高分化33例。

1.2方法

1.2.1新輔助化療方法 全部患者均接受AP方案(阿霉素+順鉑化療)，每3周為1個化療周期，均化療3個周期。

1.2.2化療效果評價及分組方法 全部患者均于化療3個周期后觀察至少1個月，根據(jù)文獻[8]評估療效，完全緩解為所有患者病變部位完全消失，維持時間>1個月；部分緩解為病變部位最大橫徑與最大直徑相乘的縮小程度≥50%，維持時間>1個月；疾病穩(wěn)定為病變部位最大橫徑與最大直徑相乘的縮小程度<50%，維持時間>1個月；疾病進展為出現(xiàn)新病灶或病變部位最大橫徑與最大直徑相乘的增大程度≥25%。臨床緩解率=[(完全緩解人數(shù)+部分緩解人數(shù))/總人數(shù)]×100%。將完全緩解、部分緩解患者納入緩解組，疾病穩(wěn)定、疾病進展患者納入無效組。

1.2.3一般資料收集方法 采用醫(yī)院自制基線資料調(diào)查量表調(diào)查兩組患者的一般資料，Cronbach′s α系數(shù)為0.86，重測效度為0.88，包括年齡、妊娠次數(shù)(>3次、≤3次)、分娩次數(shù)(>2次、≤2次)、初始月經(jīng)來潮年齡(≤13歲、>13歲)、絕經(jīng)年齡。

依據(jù)穿刺活檢結果，并結合《臨床腫瘤學》[9]明確腫瘤分布形態(tài)(彌漫型、局限型)，淋巴結轉(zhuǎn)移(有、無)，病理類型(腺癌、鱗癌、其他)，肌層浸潤程度(Ⅰa、Ⅰb、Ⅰc)，分化程度(低分化、中分化、高分化)，病理分期(Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期)。

1.2.4實驗室指標檢測方法 分別于兩組患者接受新輔助化療當天早晨抽取患者空腹外周靜脈血5 mL，使用TD5A自動脫蓋離心機(長沙英泰儀器有限公司)取血清。缺氧誘導因子1α(HIF-1α)：以5 000 r/min的速度離心10 min后取血清，經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)：以3 000 r/min的速度離心15 min后取血清，經(jīng)ELISA檢測。IL-31、IL-33：以2 500 r/min的速度離心10 min后取血清，經(jīng)ELISA檢測。ELISA試劑盒均由合肥萊爾生物科技有限公司提供。

1.3統(tǒng)計學處理 采用SPSS24.0軟件進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析，全部計量資料均經(jīng)Shapiro-Wilk正態(tài)性檢驗，偏態(tài)分布的計量資料以M(P25，P75)表示，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗；計數(shù)資料用頻數(shù)或百分比表示，組間比較采用χ2檢驗，等級資料采用秩和檢驗。偏態(tài)分布變量間的相關性采用雙變量Spearman直線相關性分析。采用Logistic回歸分析各指標與子宮內(nèi)膜癌化療無效的關系。繪制受試者工作特征(ROC)曲線，評估主要指標預測子宮內(nèi)膜癌患者化療無效風險的價值，以曲線下面積(AUC)評價，AUC≤0.500為無預測價值，0.5000.900為預測價值較高。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1新輔助化療效果 123例中晚期子宮內(nèi)膜癌患者經(jīng)新輔助化療3個周期后，緩解組89例(72.36%)中完全緩解6例，部分緩解83例；無效組34例(27.64%)中疾病穩(wěn)定24例，疾病進展10例。

2.2無效組與緩解組基線資料、實驗室指標水平比較 兩組年齡、妊娠次數(shù)、分娩次數(shù)、初始月經(jīng)來潮年齡、絕經(jīng)年齡、腫瘤分布形態(tài)、淋巴結轉(zhuǎn)移、病理類型、肌層浸潤程度、分化程度、病理分期比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；無效組血清HIF-1α、VEGF、IL-31、IL-33水平均高于緩解組(P<0.05)。見表1。

表1 無效組與緩解組基線資料、實驗室指標水平比較[M(P25，P75)/n(%)]

續(xù)表1 無效組與緩解組基線資料、實驗室指標水平比較[M(P25，P75)/n(%)]

2.3各指標與中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效關系的Logistic回歸分析 將中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療前血清HIF-1α、VEGF、IL-31、IL-33水平分別作為協(xié)變量，化療效果作為因變量(1=無效，0=緩解)，經(jīng)二元回歸分析后將2.2中全部資料納入，建立多元Logistic回歸模型，結果顯示，化療前血清HIF-1α、VEGF、IL-31、IL-33與中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效有關，HIF-1α、VEGF、IL-31、IL-33過表達可能是中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效的風險因子(OR>1，P<0.05)。見表2。

表2 各指標與中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效關系的Logistic回歸分析

2.4各項指標預測中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效風險的效能分析 將中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療前血清HIF-1α、VEGF、IL-31、IL-33水平分別作為檢驗變量，化療效果作為狀態(tài)變量(1=無效，0=緩解)，繪制ROC曲線，結果顯示，化療前血清HIF-1α、VEGF、IL-31、IL-33水平分別預測中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效風險的AUC均>0.800，預測價值均較理想，見圖1。依據(jù)ROC曲線得出，化療前血清HIF-1α、VEGF、IL-31、IL-33的最佳截斷值分別為51.410 ng/L、233.597 pg/mL、170.991 pg/mL、108.163 pg/mL。見表3。

圖1 各項指標預測中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效風險的ROC曲線圖

表3 各項指標預測中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效風險的效能分析結果

2.5中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療前血清IL-31水平與IL-33水平間的相關性分析 雙變量Spearman直線相關性分析結果顯示，中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療前血清IL-31水平與IL-33水平呈正相關(r=0.338，P=0.005)。見圖2。

圖2 中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療前血清IL-31水平與IL-33水平的相關性散點圖

3 討 論

作為一種上皮性惡性腫瘤，子宮內(nèi)膜癌不僅是女性生殖系統(tǒng)常見的腫瘤，也是導致女性病死排名第3位的婦科惡性腫瘤。新輔助化療是現(xiàn)階段子宮內(nèi)膜癌主要的治療手段之一，但疾病早期因缺少特異性的表現(xiàn)及體征，易出現(xiàn)誤診、漏診情況，多數(shù)患者確診時已錯失最佳治療時機，可能對化療的反應不佳，存在較高的化療無效風險[10]。

VANDENPUT等[11]研究指出，子宮內(nèi)膜漿液性癌Ⅳ期患者經(jīng)新輔助化療3個周期后仍有30%左右的患者化療無效。本研究結果顯示，123例中晚期子宮內(nèi)膜癌患者，經(jīng)新輔助化療3個周期后，化療無效34例，無效率為27.64%，其中疾病穩(wěn)定24例，疾病進展10例，與上述研究相近，表明部分中晚期子宮內(nèi)膜癌患者在接受新輔助化療后仍有無效風險。因此，本研究著重分析可能與中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療無效有關的因子。有研究指出，缺氧、血管新生在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起著關鍵性作用，而HIF-1α、VEGF是常見缺氧誘導因子、血管內(nèi)皮生長因子[12-13]。且本研究也證實，中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療無效組HIF-1α和VEGF水平高于緩解組。分析二者參與中晚期子宮內(nèi)膜癌新輔助化療無效的可能機制為：HIF-1α能夠穩(wěn)定腫瘤細胞的能量代謝，增加腫瘤細胞的侵襲性，提高遠處轉(zhuǎn)移風險，繼而增加化療無效風險[14]。而VEGF能夠激活蛋白酶，使細胞外基質(zhì)減少，更利于新生血管的生成，進而促進腫瘤細胞發(fā)生轉(zhuǎn)移，影響化療效果[15]。

白細胞介素是白細胞或免疫細胞間相互作用的淋巴因子，已被證實能夠與血細胞生長因子相互協(xié)調(diào)、相互作用，共同參與機體多種生理及病理功能的調(diào)節(jié)[16]。IL-31、IL-33是白細胞介素家族中的主要成員，已被諸多研究證實其不僅與免疫調(diào)節(jié)有關，還可進一步引發(fā)并加重機體炎性反應，增加組織、細胞的受損程度，為腫瘤細胞的浸潤及侵襲創(chuàng)造條件，不利于預后[17-18]。本研究結果顯示，無效組血清IL-31、IL-33水平均高于緩解組，初步推測血清IL-31、IL-33異常表達可能與中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療效果有關。且以上推測均在進一步的回歸分析中被證實，表明中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療實施前血清IL-31、IL-33異常表達不僅與化療效果有關，還可能是化療無效的風險因子。分析可能的原因如下：IL-31可通過輔助性T細胞2(Th2細胞)進一步加重患者體內(nèi)炎性反應，使體內(nèi)VEGF呈過表達狀態(tài)；此外，IL-31還能直接刺激腫瘤細胞，使其釋放大量VEGF，促進大量新生血管生成[19]。而研究證實，腫瘤組織處大量新生血管的生成可提高血管通透性，使血管內(nèi)皮細胞大量產(chǎn)生及血管內(nèi)物質(zhì)發(fā)生滲漏，繼而可影響腫瘤細胞的凋亡機制[20]。因此，當中晚期子宮內(nèi)膜癌患者體內(nèi)IL-31呈過表達狀態(tài)時，不利于腫瘤細胞的凋亡，可進一步影響新輔助化療效果，導致化療無效。IL-33能夠增加血管通透性，使血管收縮，不利于腫瘤細胞凋亡；同時，IL-33還能在病灶處募集大量炎癥因子，進一步加重體內(nèi)炎性反應程度，增加腫瘤細胞轉(zhuǎn)移風險[21]。此外，有研究顯示，IL-33在結直腸癌組織中呈過表達狀態(tài)，可通過改變腫瘤組織內(nèi)微環(huán)境，誘導腫瘤血管新生，進而啟動腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移機制[22]。因此，當中晚期子宮內(nèi)膜癌患者體內(nèi)IL-33呈過表達時提示腫瘤存在轉(zhuǎn)移風險，這將影響新輔助化療的效果，進一步導致化療無效。

本研究對各項指標預測中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效風險繪制了ROC曲線，結果顯示，化療前血清HIF-1α、VEGF、IL-31、IL-33水平分別預測中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療無效風險的AUC均>0.800，預測價值較理想。上述結果證實，新輔助化療前血清IL-31、IL-33水平不僅是中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療無效的風險因子，還可作為患者化療前預測化療無效風險的關鍵標志物。但需要注意的是，血清HIF-1α、VEGF的定量檢測技術日益增多，且各種檢測技術之間仍存在著差異，在應用價值方面仍有局限。因此，未來臨床若早期監(jiān)測到中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療前血清IL-31、IL-33水平有異常，可在治療原發(fā)病的同時實施合理干預，如對患者實施消炎、抗感染治療，以改善患者血清IL-31、IL-33水平，可能對提高患者整體化療效果有積極意義。此外，本研究對中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療前血清IL-31水平與IL-33水平的相關性分析結果顯示，二者間呈正相關，說明中晚期子宮內(nèi)膜癌患者化療前血清IL-31水平與IL-33水平可能存在一定聯(lián)系，二者可能相互影響、相互作用，共同參與了中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療無效的發(fā)生，這可能與二者均是炎癥相關因子有關，其中某一指標水平改變均可能影響另一指標的變化。但由于對IL-31、IL-33之間關系的研究較少，尚不能根據(jù)本研究結果推斷上述指標之間在疾病中的具體關系，仍需要在未來增加樣本量、延長觀察時間并查閱大量文獻加以驗證。

綜上所述，血清HIF-1α、VEGF、IL-31、IL-33水平與中晚期子宮內(nèi)膜癌患者新輔助化療無效有關，可能是患者化療無效的風險因子，對預測患者新輔助化療無效風險有一定價值。