地舒單抗在骨巨細(xì)胞瘤治療中的應(yīng)用現(xiàn)狀與挑戰(zhàn)

馬鍵飛， 商冠寧

骨巨細(xì)胞瘤(giant cell tumor of bone，GCTB)是一種常見的原發(fā)交界性骨腫瘤，具有侵襲性、復(fù)發(fā)性和肺轉(zhuǎn)移傾向，好發(fā)于20～40歲青中年[1]。單純病灶刮除術(shù)術(shù)后復(fù)發(fā)率較高，廣泛切除術(shù)雖可降低復(fù)發(fā)率，但對(duì)于腫瘤延伸到骨骺區(qū)域者，需要人工關(guān)節(jié)假體植入，而GCTB患者多為青中年，面臨著頻繁翻修的問題。此外，關(guān)節(jié)功能喪失等降低了患者生存質(zhì)量。分子靶向藥地舒單抗(Denosumab)可使GCTB患者術(shù)前降期，保留關(guān)節(jié)功能，在治療中就起到了關(guān)鍵性的作用[2]。本文就地舒單抗在GCTB治療中的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀與挑戰(zhàn)進(jìn)行綜述。

1 地舒單抗治療GCTB的作用機(jī)制

GCTB溶骨是由單核梭形基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的核因子κB受體活化因子配體(receptor activator of nuclear factor-κB ligand ,RANKL)與多核破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞過表達(dá)的核因子κB受體活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)相互作用，激活RANKL/RANK/OPG信號(hào)通路，破骨細(xì)胞活性增強(qiáng)所致。特異性靶向RANKL的單克隆抗體即地舒單抗能與單核梭形基質(zhì)細(xì)胞分泌的RANKL競爭性結(jié)合，抑制RANKL與破骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞前體和多核破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞表面的RANK結(jié)合，阻斷RANK/RANKL/OPG信號(hào)通路傳導(dǎo)。應(yīng)用地舒單抗治療GCTB后，RANKL幾乎不表達(dá)，多核破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞顯著減少，單核梭形基質(zhì)細(xì)胞減少且增殖速度減慢[1]。地舒單抗治療后伴隨著巨噬細(xì)胞樣髓系細(xì)胞比例大幅度降低，T細(xì)胞比例明顯上升，且CD8+T細(xì)胞程序性死亡受體-1(PD-1)、T細(xì)胞免疫球蛋白黏蛋白-3(TIM-3)、CD69均呈高表達(dá)[3]。在梭形基質(zhì)細(xì)胞減少區(qū)域，出現(xiàn)大量無增殖性的高密度編織骨組織。地舒單抗通過抑制多核破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞活性，減少了溶骨發(fā)生，同時(shí)通過抑制單核梭形基質(zhì)細(xì)胞的活性，減少單核巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞的募集和多核破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞的形成，繼而抑制多核破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞的活性，增加新骨形成，延緩腫瘤進(jìn)展。

2 地舒單抗治療GCTB的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀

GCTB多發(fā)于股骨遠(yuǎn)端和脛骨近端，亦可發(fā)生于四肢其他部位、骨盆、脊柱、肋骨、骶骨和下頜骨等。張潤梓等[4]觀察到GCTB患者應(yīng)用地舒單抗前后影像學(xué)腫瘤最大徑明顯縮小，證明地舒單抗可明顯使GCTB術(shù)前降期。Sambni等[5]分析了接受地舒單抗治療的骨盆GCTB患者，約69%在影像學(xué)上表現(xiàn)出腫瘤范圍縮小。Zhang等[6]對(duì)難治的脊柱GCTB患者術(shù)前規(guī)范應(yīng)用地舒單抗，神經(jīng)功能癥狀等得以改善，腫瘤體積縮小、密度增加，使手術(shù)簡化并減少了術(shù)后局部復(fù)發(fā)可能。Matsunobu等[7]對(duì)第一肋骨GCTB患者，術(shù)前規(guī)范應(yīng)用地舒單抗治療后行切除術(shù)，手術(shù)成功且保留了鎖骨，術(shù)后無功能喪失且未出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥及復(fù)發(fā)。Pogrel等[8]對(duì)下頜骨GCTB患者規(guī)范應(yīng)用地舒單抗，所有病灶均在影像學(xué)上出現(xiàn)鈣化，臨床癥狀減輕，未見復(fù)發(fā)或腫瘤進(jìn)展。

地舒單抗減少骨吸收和骨破壞，增加骨小梁和皮質(zhì)骨的骨密度與骨強(qiáng)度，促進(jìn)骨重建與骨殼形成，減小GCTB腫瘤體積、延緩GCTB進(jìn)展以及預(yù)防骨相關(guān)事件(skeletal related events，SRE)。多項(xiàng)臨床研究表明，地舒單抗可控制GCTB的進(jìn)展、緩解疼痛和減少止痛劑的使用[2,9-10]，使一些不可手術(shù)GCTB患者治療后降期[11-12]，部分患者經(jīng)地舒單抗治療后，溶骨完全消失，新的皮質(zhì)骨形成，骨完整性恢復(fù)，病情完全控制免于手術(shù)[13-14]。而對(duì)于可手術(shù)者，術(shù)前應(yīng)用地舒單抗可明確腫瘤邊界，降低腫瘤分期[15-17]，最大限度地保留原生關(guān)節(jié)[9,14,18]。對(duì)復(fù)發(fā)者，地舒單抗同樣有降期作用[18-19]。

需要特別注意的是，在臨床應(yīng)用地舒單抗治療GCTB中，應(yīng)當(dāng)及時(shí)評(píng)價(jià)療效。若發(fā)現(xiàn)影像學(xué)檢查未表現(xiàn)好轉(zhuǎn)跡象，療效距離預(yù)期差異過大或者癥狀加重，甚至腫瘤進(jìn)一步發(fā)展，需最先懷疑初始診斷是否準(zhǔn)確，再次行病理學(xué)檢查或其他輔助分子生物學(xué)檢驗(yàn)以排除富于巨細(xì)胞的其他罕見骨腫瘤或者GCTB惡性進(jìn)展等情況。

3 地舒單抗治療GCTB面臨挑戰(zhàn)

3.1 治療后不良反應(yīng) 地舒單抗治療GCTB應(yīng)注意監(jiān)測(cè)藥物相關(guān)并發(fā)癥或不良反應(yīng)以及長期應(yīng)用的耐藥性等問題[10,20]。地舒單抗治療GCTB時(shí)，嚴(yán)重不良反應(yīng)包括：背痛、四肢肌肉骨骼疼痛、下頜骨壞死、非典型股骨骨折、低鈣血癥、低磷血癥等[21]。其他少見不良反應(yīng)包括：膀胱炎、眩暈、失眠、疲乏、貧血、高膽固醇血癥、腹痛、惡心、脹氣、胃食管反流病、周圍性水腫、上呼吸道感染、肺炎、咽炎、帶狀皰疹、心絞痛、心房顫動(dòng)、脊柱骨關(guān)節(jié)炎、坐骨神經(jīng)痛、周圍神經(jīng)病變、皮疹、瘙癢等[22]。Chawla等[23]在對(duì)應(yīng)用地舒單抗的GCTB患者案例分析中報(bào)告了約26%的患者出現(xiàn)嚴(yán)重不良事件，其中較常見的為低磷血癥、下頜骨壞死、肢體疼痛、貧血、背痛、非典型股骨骨折和高鈣血癥。

下頜骨壞死是地舒單抗最嚴(yán)重的不良反應(yīng)之一[24]，除糖尿病、貧血、吸煙等相關(guān)因素外，其發(fā)生率隨地舒單抗應(yīng)用時(shí)間延長而增加[25]。其可能的發(fā)病機(jī)制有：①地舒單抗使破骨細(xì)胞凋亡增加，并抑制破骨細(xì)胞分化，成骨細(xì)胞生成減少，造成下頜骨的骨代謝異常[26]；②地舒單抗應(yīng)用后患者免疫力下降，口腔內(nèi)局部細(xì)菌感染可能造成下頜骨壞死；③地舒單抗在一定程度上抑制骨骼的毛細(xì)血管生長，造成下頜骨局部缺血壞死[27]；④有雙膦酸鹽類或免疫抑制劑服用史的患者在口腔黏膜損傷后，傷口延遲愈合，可能造成局部組織壞死，進(jìn)而繼發(fā)感染。因此，在使用地舒單抗治療前、中、后，需進(jìn)行常規(guī)口腔檢查，定期評(píng)估，保持良好的口腔衛(wèi)生，盡可能避免侵入性牙科手術(shù)。若發(fā)生下頜骨壞死應(yīng)立即停藥。而下頜骨壞死痊愈后能否繼續(xù)應(yīng)用地舒單抗，臨床仍有爭議[28]。

低鈣血癥等電解質(zhì)代謝失衡是地舒單抗另一常見不良反應(yīng)。趙俊等[29]發(fā)現(xiàn)低鈣血癥最短出現(xiàn)在用藥后4 d，最長為用藥后4個(gè)月。約83%用藥者首月內(nèi)發(fā)生低鈣血癥，其中7%患者因疾病進(jìn)展出現(xiàn)反復(fù)低鈣血癥，預(yù)后不佳。因此，應(yīng)用地舒單抗前需糾正低鈣血癥，治療過程中需嚴(yán)密監(jiān)測(cè)電解質(zhì)，特別是鈣、磷、鎂。適量補(bǔ)充鈣、維生素D，同時(shí)關(guān)注肝、腎功能、心電圖等，停藥時(shí)復(fù)查血鈣。

非典型股骨骨折常見于骨質(zhì)疏松者[24,30]。非典型股骨骨折可能與地舒單抗治療后出現(xiàn)的大腿、腹股溝區(qū)域疼痛或股骨應(yīng)力反應(yīng)有關(guān)[30]。需及時(shí)行影像學(xué)檢查，積極治療，治療原則參照骨質(zhì)疏松或轉(zhuǎn)移癌治療后非典型股骨骨折，立即停藥并嚴(yán)格限制負(fù)重，必要時(shí)采取保守治療或更為有效的髓內(nèi)釘、鋼板固定等手術(shù)治療[31-32]。

3.2 治療后復(fù)發(fā) 地舒單抗治療GCTB療效顯著，但仍存在局部復(fù)發(fā)的問題。對(duì)GCTB患者術(shù)前應(yīng)用地舒單抗治療后，90%患者可進(jìn)行關(guān)節(jié)保留手術(shù)，但術(shù)后局部復(fù)發(fā)率約為15%[9]。Rutkowski等[33]報(bào)道了約21%的GCTB患者應(yīng)用地舒單抗治療后術(shù)后局部復(fù)發(fā)，其中3%需行廣泛切除術(shù)，18%行局部病灶刮除術(shù)。

地舒單抗治療GCTB高復(fù)發(fā)率的主要原因有: ①地舒單抗并不完全抑制梭形基質(zhì)細(xì)胞，而是顯著抑制多核破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞形成與分化[1]。破骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞效應(yīng)相互影響，當(dāng)破骨細(xì)胞作用被抑制時(shí)單核梭形基質(zhì)細(xì)胞成骨作用仍在持續(xù)，故在地舒單抗停藥后基質(zhì)細(xì)胞仍然在增殖，易致腫瘤復(fù)發(fā)。Lau等[34]研究表明,當(dāng)?shù)厥鎲慰古c基質(zhì)細(xì)胞膜上RANKL結(jié)合時(shí)并不會(huì)引發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路作用，證明其對(duì)基質(zhì)細(xì)胞沒有抑制作用。②地舒單抗治療后腫瘤周邊不規(guī)則成骨形成較厚的骨殼，腫瘤組織被新生骨組織替代，使得真實(shí)腫瘤邊界難以辨別，不易將包裹在里邊的或難以辨別邊界的腫瘤細(xì)胞完全刮除[35]。Errani等[36]報(bào)告了地舒單抗聯(lián)合病灶刮除術(shù)治療的GCTB患者局部復(fù)發(fā)率為60%，而單獨(dú)病灶刮除術(shù)治療復(fù)發(fā)率僅為16%，與Perrin等[37]報(bào)道的復(fù)發(fā)率相似。為減少復(fù)發(fā)，術(shù)中應(yīng)參考地舒單抗治療前影像學(xué)結(jié)果以區(qū)分腫瘤真實(shí)邊界、防止基質(zhì)細(xì)胞殘留，并借助苯酚或無水乙醇、高速磨鉆、氬氦刀等，盡量徹底清除腫瘤。③值得關(guān)注的是，對(duì)地舒單抗治療GCTB后免疫微環(huán)境的變化可進(jìn)一步解釋局部復(fù)發(fā)的原因。通常認(rèn)為，細(xì)胞程序性死亡配體-1(PD-L1)可通過抑制T細(xì)胞功能來促進(jìn)抗腫瘤免疫應(yīng)答的逃避，信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα)也可調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞逃避免疫吞噬以促進(jìn)其生長。Toda等[38]運(yùn)用免疫組化法分析發(fā)現(xiàn)經(jīng)地舒單抗治療的復(fù)發(fā)病灶相比于原發(fā)病灶或未經(jīng)地舒單抗治療的復(fù)發(fā)病灶， PD-L1和SIRPα表達(dá)顯著增高，且PD-L1陽性病例的SIRPα較PD-L1陰性病例顯著高表達(dá)，這與無復(fù)發(fā)生存期縮短和高Ki-67陽性率密切相關(guān)。GCTB細(xì)胞可能通過表達(dá)PD-L1和SIRPα逃避腫瘤免疫，未來對(duì)地舒單抗治療后復(fù)發(fā)的GCTB患者使用PD-L1和SIRPα免疫抑制劑可能獲得臨床效益。

3.3 治療后惡變 良性GCTB也有惡變風(fēng)險(xiǎn)。Palmerini等[39]回顧了包括美國梅奧診所、意大利里佐利研究所在內(nèi)的4個(gè)腫瘤中心的92例惡性GCTB病例，發(fā)現(xiàn)惡性GCTB的發(fā)病率為4%，其中原發(fā)的發(fā)病率為1.6%，繼發(fā)的為2.4%。惡性GCTB比較罕見，常伴有疼痛和腫脹，預(yù)后差。影像學(xué)上常表現(xiàn)為典型的骨質(zhì)破壞和軟組織侵襲，且容易發(fā)生肺轉(zhuǎn)移。診斷惡性GCTB應(yīng)全面多次組織學(xué)取樣以確保準(zhǔn)確。對(duì)惡性GCTB患者需密切隨訪，尤其是同時(shí)接受了放療的患者。

原發(fā)性惡性GCTB中，病灶區(qū)域與高級(jí)別肉瘤并存；而在繼發(fā)性惡性GCTB中，病灶常發(fā)生在以前治療過的部位，病理報(bào)告往往為侵襲性Campanacci Ⅲ級(jí)GCTB。經(jīng)地舒單抗治療的GCTB組織學(xué)外觀發(fā)生明顯改變，與肉瘤形態(tài)學(xué)相似但缺乏浸潤性生長。Sanchez-Pareja等[40]報(bào)道了1例尺骨遠(yuǎn)端GCTB患者，其在影像學(xué)和臨床表現(xiàn)均提示肉瘤轉(zhuǎn)化后，組織學(xué)表現(xiàn)為假性肉瘤變，因而較早停用了地舒單抗。Roitman等[41]也發(fā)現(xiàn)經(jīng)地舒單抗治療后GCTB組織學(xué)類似于未分化的多形性肉瘤。Wojcik等[42]選擇經(jīng)地舒單抗治療后患者的標(biāo)本進(jìn)行組織學(xué)觀察，并將其與GCTB中出現(xiàn)惡變的病例進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)早期病變巨細(xì)胞耗竭伴新骨沉積，類似于高級(jí)別骨肉瘤，但與新發(fā)高級(jí)別骨肉瘤或GCTB引起的惡性腫瘤不同；經(jīng)地舒單抗治療后的GCTB標(biāo)本表現(xiàn)出較少異型性、有絲分裂活性降低且缺乏浸潤性生長的特征。長期地舒單抗治療的患者腫瘤樣本顯示豐富的新骨形成，類似低級(jí)別骨肉瘤，無浸潤性生長特征。

GCTB中約95%的梭形基質(zhì)細(xì)胞組蛋白3突變，其中H3.3G34W、H3.3G34R和H3.3G34V的表達(dá)能力分別在92%、2%和6%，且即使在GCTB惡變后，仍然保持H3.3G34W陽性[43-44]。組蛋白3突變可能在一定程度刺激梭形基質(zhì)細(xì)胞上RANKL與巨噬細(xì)胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor, M-CSF)高表達(dá)，與GCTB腫瘤起始密切相關(guān)。但在其他巨細(xì)胞豐富的病變?nèi)绻侨饬觥⒊绍浌羌?xì)胞瘤、原發(fā)性動(dòng)脈瘤樣骨囊腫中，H3.3G34W、H3.3G34R、H3.3G34V均為陰性，這一結(jié)論可用于GCTB的鑒別診斷。而未分化的高度多形性肉瘤H3.3G34W呈陽性表達(dá)，提示原發(fā)性惡性GCTB有肉瘤樣生長可能[44]。

地舒單抗減少RANKL表達(dá)，誘發(fā)GCTB惡性轉(zhuǎn)化的可能機(jī)制為：①破骨細(xì)胞通過分泌轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)和胰島素樣生長因子-1(IGF-1)等抑制基質(zhì)細(xì)胞成骨分化，地舒單抗抑制破骨細(xì)胞以后，基質(zhì)細(xì)胞的成骨能力增強(qiáng)，繼而發(fā)生惡變；②RANKL的表達(dá)在樹突細(xì)胞生存以及免疫細(xì)胞等分化中起著重要作用，RANKL表達(dá)減少可能通過免疫抑制引起GCTB惡變；③地舒單抗靶向作用于RANKL抑制核因子κB生物效應(yīng)，從而激活分化較低的腫瘤表型，誘發(fā)惡變；④地舒單抗阻斷了RANK/RANKL/OPG信號(hào)通路傳導(dǎo)，降低了通路下游的免疫抑制活性基因等如人信號(hào)素3A的抑制破骨細(xì)胞活動(dòng)、促進(jìn)骨形成作用，導(dǎo)致GCTB惡變。地舒單抗治療GCTB的惡變風(fēng)險(xiǎn)不容忽視，需要進(jìn)一步研究以驗(yàn)證地舒單抗在GCTB治療中的可行性。

4 結(jié)語與展望

綜上，相較單純手術(shù)、放療等傳統(tǒng)治療方式，臨床應(yīng)用地舒單抗在緩解患者疼痛、控制GCTB進(jìn)展以及術(shù)前降期、保留關(guān)節(jié)功能等方面療效顯著，但與此同時(shí)也面臨著不同程度的用藥后不良反應(yīng)、術(shù)后局部復(fù)發(fā)率升高和惡變風(fēng)險(xiǎn)仍舊存在的多種嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。關(guān)于地舒單抗應(yīng)用具體時(shí)間、術(shù)后是否長期或終生使用、并發(fā)癥得到有效控制后是否恢復(fù)使用以及地舒單抗聯(lián)合手術(shù)治療后確切復(fù)發(fā)或惡變機(jī)制，目前尚無定論。如何在使用地舒單抗達(dá)到理想治療效果后，盡可能地減少不良反應(yīng)以及避免GCTB復(fù)發(fā)和惡變，需要未來大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和臨床研究進(jìn)一步探索。