20%氟吡酰草胺懸浮劑的高效液相色譜分析

張燕青，宋 朋，劉鳳嬌，梅俊紅，曹 磊，段麗芳

(1.山東威瑞信試驗(yàn)檢測(cè)有限公司，山東 濟(jì)南 250119；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥檢定所，北京 100125)

1 前言

氟吡酰草胺英文名稱：picolinafen，CAS號(hào)：83164-33-4，分子式：C19H11F5N2O2，其化學(xué)名稱：N-(4-氟苯基)-6-(A，A，A-三氟間甲基苯氧基)吡啶酰苯胺；N-(4-氟苯基)-6-；3-(三氟甲基)苯氧基]-2-吡啶甲酰胺。氟吡酰草胺屬于吡啶酰胺結(jié)構(gòu)化合物的除草劑，可以抑制類胡蘿卜素的合成，通過雜草體內(nèi)八氫番茄紅素去飽和酶的活性，致使雜草植物細(xì)胞葉綠素被破壞及細(xì)胞破裂，最終導(dǎo)致目標(biāo)雜草白化死亡。

目前國(guó)內(nèi)有關(guān)氟吡酰草胺懸浮劑的分析方法未見公開報(bào)道。本文采用高效液相色譜法對(duì)20%氟吡酰草胺懸浮劑進(jìn)行定量分析，該方法操作簡(jiǎn)便快捷，分離效果好，精密度和準(zhǔn)確度均能達(dá)到定量分析的要求。

2 試驗(yàn)部分

2.1 試劑和溶液 乙腈(色譜純)；超純水(電阻率18.2MΩ·cm，25℃)；氟吡酰草胺標(biāo)樣，已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.8%(由Dr.Ehrenstorfer提供)；20%氟吡酰草胺懸浮劑(由某企業(yè)提供)。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：日立Primaide，具有二極管陣列檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器；日立色譜工作站；色譜柱：250mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝ZORBAX SB-C185μm填充物。

2.3 液相色譜操作條件 流動(dòng)相：Ψ(乙腈：水)=80：20(V/V)；流速：1.0mL/min；柱溫：25±2℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm；進(jìn)樣體積：10μL；保留時(shí)間：氟吡酰草胺約6.8min。典型的氟吡酰草胺標(biāo)樣和20%氟吡酰草胺懸浮劑的高效液相色譜圖(圖1、2)

圖1 氟吡酰草胺標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 20%氟吡酰草胺懸浮劑高效液相色譜圖

2.4 測(cè)定步驟

2.4.1 標(biāo)樣溶液的配制 稱取0.05g(精確至0.000 1g)氟吡酰草胺標(biāo)樣，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取含0.05g(精確至0.000 1g)氟吡酰草胺的試樣，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾。

2.4.3 測(cè)定 在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液的響應(yīng)值相對(duì)變化<1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.4.4 計(jì)算 將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中氟吡酰草胺峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中氟吡酰草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω(%)，按式(1)計(jì)算：

(1)

式中：

A1──標(biāo)樣溶液中氟吡酰草胺峰面積的平均值；

A2──試樣溶液中氟吡酰草胺峰面積的平均值；

m1──標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2──試樣的質(zhì)量，g；

P──標(biāo)樣中氟吡酰草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 色譜條件的選擇 通過日立Primaide高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，獲得氟吡酰草胺的紫外波長(zhǎng)掃描圖(圖3)。從圖中可以看到氟吡酰草胺在波長(zhǎng)290nm處有較大吸收，在該波長(zhǎng)處?kù)`敏度較高，干擾較少，能夠滿足分析的要求，故將檢測(cè)波長(zhǎng)確定為290nm。

圖3 氟吡酰草胺的紫外光譜圖

色譜柱選擇常用的ZORBAX SB-C18反相柱。根據(jù)氟吡酰草胺物化性質(zhì)和溶劑的紫外吸收波長(zhǎng)，選擇乙腈作為溶劑溶解樣品，并以乙腈和水作為流動(dòng)相。將流動(dòng)相按不同比例在色譜柱上進(jìn)行試驗(yàn)，隨著乙腈比例的增加，保留時(shí)間減小，當(dāng)乙腈與水比例達(dá)到85 ： 15時(shí)，有雜質(zhì)峰干擾氟吡酰草胺，峰純度達(dá)不到試驗(yàn)要求，最終選擇Ψ(乙腈：水)=80：20作為流動(dòng)相，流速1.0mL/min。該條件下，氟吡酰草胺色譜峰峰形較好，與雜質(zhì)能完全分離，具有良好的精密度和準(zhǔn)確度，并且分析時(shí)間較短，提高了工作效率。

3.2 分析方法的特異性鑒定 按照2.4.1和2.4.2中方法分別配制標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液，按標(biāo)準(zhǔn)中方法對(duì)氟吡酰草胺進(jìn)行全波段掃描、峰純度分析。結(jié)果表明標(biāo)樣溶液和試樣溶液中氟吡酰草胺純度均>99.0%，有效成分出峰處無其他物質(zhì)干擾，符合定量分析要求。

3.3 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn) 稱取0.052 1g氟吡酰草胺標(biāo)樣于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取3、4、5、6、7mL體積上述溶液分別置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，配制5個(gè)不同濃度的標(biāo)樣溶液。在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，以吡氟酰草胺質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖4)，得到氟吡酰草胺線性回歸方程為y = 73 438x + 152 135，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 9。

圖4 氟吡酰草胺線性關(guān)系圖

3.4 分析方法的精密度試驗(yàn) 從同一產(chǎn)品中準(zhǔn)確稱取5個(gè)試樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測(cè)得氟吡酰草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.151，變異系數(shù)分別為0.752%(表1)。

表1 分析方法的精密度試驗(yàn)結(jié)果

3.5 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn) 從已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氟吡酰草胺懸浮劑(20.09%)中稱取5個(gè)試樣，分別加入一定量的氟吡酰草胺標(biāo)樣(99.8%)，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測(cè)得氟吡酰草胺的平均回收率為99.8%(表2)。

表2 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

本文建立了氟吡酰草胺懸浮劑有效成分含量測(cè)定的高效液相色譜分析方法，試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法分離效果好、線性關(guān)系良好，具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，分析操作簡(jiǎn)便快捷，是氟吡酰草胺懸浮劑產(chǎn)品質(zhì)量控制較為理想的分析方法。