術(shù)前TACE治療對(duì)肝癌患者黏著斑激酶、核因子-κBp65表達(dá)及術(shù)后生存率的影響

原發(fā)性肝癌是世界上發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一，在我國(guó)是排第4位 的常見(jiàn)惡性腫瘤，腫瘤致死病因排第2位，嚴(yán)重威脅人民的健康和生命

。肝細(xì)胞癌(HCC)占原發(fā)性肝癌的85%～90%

，手術(shù)切除是肝癌的首選治療方法，但由于本病起病隱匿，發(fā)現(xiàn)時(shí)多為中晚期，80%～90%的患者就診時(shí)就已失去了手術(shù)切除的機(jī)會(huì)

。即使可以手術(shù)的患者，其遠(yuǎn)期療效差，患者3年復(fù)發(fā)率高達(dá)50%、5年復(fù)發(fā)率高達(dá)70%

。經(jīng)導(dǎo)管肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)(TACE)是目前公認(rèn)的中晚期肝癌的首選治療方法，能夠有效延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間，提高生命質(zhì)量

。黏著斑激酶( FAK)是蛋白質(zhì)酪氨酸激酶中的一個(gè)家族，近年來(lái)大量研究表明，F(xiàn)AK在多數(shù)腫瘤中高表達(dá)，尤其是在消化道腫瘤中，其活性與腫瘤的轉(zhuǎn)移、 侵襲密切相關(guān)，可作為腫瘤診療、預(yù)后的評(píng)價(jià)指標(biāo)

。激活核因子-κB(NF-κB)是一種廣泛存在于哺乳動(dòng)物中的轉(zhuǎn)錄因子，有研究表明，NF-κBp65的持續(xù)活化可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，減弱腫瘤細(xì)胞的凋亡，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用

。本研究選擇在原發(fā)性肝癌患者手術(shù)切除治療前行TACE治療的患者作為研究對(duì)象，收集患者術(shù)后病理標(biāo)本，檢測(cè)癌組織中FAK和NF-κBp65的表達(dá)，探究FAK、NF-κBp65表達(dá)與患者3年生存率間的關(guān)聯(lián)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2015年6月至2017年6月我院收治的在手術(shù)切除治療前行TACE治療的原發(fā)性肝癌患者56例作為研究對(duì)象。術(shù)前接受TCAE治療的患者均因病灶位置及大小、肺功能障礙或高齡等原因不能直接手術(shù)切除。所有患者接受TACE治療后行手術(shù)切除治療，收集患者手術(shù)切除的癌組織及癌旁組織，癌旁組織距離腫瘤邊緣2～5 cm。出院后對(duì)所有患者進(jìn)行3年的隨訪，記錄患者的生存狀況。本研究已經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查通過(guò)。

1.2 方法 所有患者入院后均行TACE治療，TACE治療后2個(gè)月內(nèi)行手術(shù)切除治療。手術(shù)中收集患者癌組織標(biāo)本，檢測(cè)標(biāo)本中FAK、NF-κBp65蛋白的表達(dá)。

1.3 結(jié)果判斷 FAK、NF-κBp65主要位于細(xì)胞質(zhì)，出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞。每張切片隨機(jī)觀察5個(gè)高倍鏡(×400)視野，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)進(jìn)行判定，陽(yáng)性細(xì)胞<10%為陰性，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)10%～50%為弱陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>50%為強(qiáng)陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，組間差異采用

檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間差異采用χ

檢驗(yàn)。隨訪結(jié)束，以患者是否死亡作為試驗(yàn)終點(diǎn)，采用Cox回歸分析影響患者3年死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 免疫組織化學(xué)結(jié)果 FAK在癌組織、癌旁組織以及正常肝組織的陽(yáng)性率分別為75.0%(42/56)、41.07%(23/56)、10.71%(6/56)；NF-κBp65在癌組織、癌旁組織以及正常肝組織的陽(yáng)性率分別為78.57%(44/56)、33.93%(19/56)、12.5%(7/56)，癌組織中FAK、NF-κBp65陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于癌旁組織。

2.3 癌組織NF-κBp65表達(dá)與一般臨床資料間的關(guān)系 根據(jù)NF-kBp65表達(dá)情況，NF-kBp65表達(dá)陽(yáng)性的患者，肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、門靜脈癌栓者所占比例顯著高于NF-kBp65表達(dá)陰性患者；NF-kBp65表達(dá)陽(yáng)性患者中，Edmondson分級(jí)Ⅲ～Ⅳ、TNM分級(jí)Ⅲ～Ⅳ所占比例顯著大于NF-kBp65表達(dá)陰性患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。NF-kBp65表達(dá)與患者的年齡、性別無(wú)關(guān)，見(jiàn)表2。

本次檢測(cè)期間，天氣晴朗，氣溫35℃左右，由于混凝土中鋼筋吸收探地雷達(dá)電磁波脈沖信號(hào)，返回信息較弱，對(duì)測(cè)量數(shù)據(jù)造成一定干擾。

2.2 癌組織FAK表達(dá)與一般臨床資料間的關(guān)系 根據(jù)FAK表達(dá)情況，F(xiàn)AK表達(dá)陽(yáng)性患者，肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、門靜脈癌栓所占比例顯著顯著高于FAK表達(dá)陰性患者；FAK表達(dá)陽(yáng)性患者中，Edmondson 分級(jí)Ⅲ～Ⅳ、TNM分級(jí)Ⅲ～Ⅳ所占比例顯著大于FAK表達(dá)陰性患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。FAK表達(dá)與患者的年齡、性別比無(wú)關(guān)，見(jiàn)表1。

科恩于1922年出生在紐約市。他的父母均為法律專業(yè)人士，然而科恩在紐約市立學(xué)院求學(xué)時(shí)卻選擇了物理，并于1940年畢業(yè)。他在哥倫比亞大學(xué)獲得了碩士學(xué)位，之后在1943年應(yīng)召入伍，在醫(yī)療部隊(duì)做研究工作。1945年，他被派往廣島，研究這座城市被投放原子彈后遭受的影響。

后期疫情防治工作的重點(diǎn)。商品活豬調(diào)運(yùn)仍舊嚴(yán)格限制，嚴(yán)格管理調(diào)運(yùn)車輛，查處生豬違規(guī)交易和違規(guī)跨省外調(diào)；防控境外疫情再次傳入；保障區(qū)域豬肉供給；完善問(wèn)責(zé)制度。

肝癌患者在行手術(shù)切除治療前進(jìn)行TACE治療可有效提高患者的生存率，有研究表明，術(shù)前行TACE治療后手術(shù)切除的原發(fā)性肝癌患者，癌組織中FAK、NF-κBp65表達(dá)陽(yáng)性率顯著提高，但FAK、NF-κBp65表達(dá)與患者的生存預(yù)后間的關(guān)聯(lián)目前尚缺乏相關(guān)研究證明

。本研究通過(guò)檢測(cè)癌組織FAK、NF-κBp65的表達(dá)情況，進(jìn)一步分析了其與患者3年生存率間的關(guān)聯(lián)。

政府認(rèn)為20%～22%的核電份額目標(biāo)是能夠?qū)崿F(xiàn)的，但需要滿足三個(gè)前提條件：30臺(tái)機(jī)組重啟，2臺(tái)在建機(jī)組按計(jì)劃投運(yùn)，以及允許在運(yùn)機(jī)組延壽20年，即將運(yùn)行壽期從最初的40年延長(zhǎng)到60年。

3 討論

2.4 影響患者3年生存率的獨(dú)立危險(xiǎn)因素 根據(jù)患者術(shù)后3年是否存活，采用多因素Cox回歸分析影響患者3年生存率的獨(dú)立相關(guān)因素。其中，年齡、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、門靜脈瘤栓、FAK表達(dá)以及NF-kBp65表達(dá)均是影響患者術(shù)后3年生存的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，見(jiàn)表3。

人FAK基因全長(zhǎng)4285堿基，分子質(zhì)量125 ku，F(xiàn)AK作為生長(zhǎng)因子受體信號(hào)通路的下游分子，使得Caspase-3失活從而抑制細(xì)胞的凋亡

；FAK參與P130cas-Crk-JNK-C-Jun通路使得金屬基質(zhì)蛋白酶(MMP-2、MMP-9)活化，增強(qiáng)腫瘤的侵襲力

；FAK還可激活RAS-MAPK-ERK、PI3K-AKT等信號(hào)通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖

，F(xiàn)AK的過(guò)表達(dá)可改變細(xì)胞的局部粘附能力，促進(jìn)細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲，與肝癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。目前研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)AK核酸及蛋白水平在乳腺癌、前列腺癌、大腸癌以及卵巢癌等多種組織中處于過(guò)度激活和高表達(dá)的狀態(tài)

。本研究結(jié)果表明，F(xiàn)AK在肝癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于癌旁組織以及正常肝組織。有研究表明，人肝癌細(xì)胞株在缺氧環(huán)境中，侵襲能力增強(qiáng)且FAK表達(dá)水平顯著升高

。TACE治療過(guò)程中，阻斷腫瘤供血，造成環(huán)境缺氧，促進(jìn)癌組織FAK表達(dá)陽(yáng)性。FAK表達(dá)陽(yáng)性與患者腫瘤病理分化程度、TNM分期、轉(zhuǎn)移等因素存在相關(guān)性

。本研究中，術(shù)前行TACE的患者，肝癌組織FAK表達(dá)陽(yáng)性與患者的肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、門靜脈癌栓Edmondson分級(jí)Ⅲ～Ⅳ以及TNM分級(jí)等有關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)論一致。

p50和p65是人NF-κB家族中重要的核轉(zhuǎn)錄因子，NF-κB p65可誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)大量的抗凋亡基因，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，并激活原癌基因

，研究表明，其表達(dá)與食管癌、胃癌、肝癌等惡性腫瘤密切相關(guān)

。本研究結(jié)果表明，癌組織NF-κB p65表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于癌旁組織及正常肝組織，與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)論一致。腫瘤耐藥機(jī)制研究表明，多種耐藥細(xì)胞系中存在著異常的NF-κB表達(dá)，可能是化療導(dǎo)致的DNA損傷激活NF-κB阻止細(xì)胞凋亡，從而導(dǎo)致NF-κB陽(yáng)性表達(dá)

。有研究表明，肝細(xì)胞癌中NF-κB p65蛋白高表達(dá)，腫瘤的分化程度、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等與其高表達(dá)有關(guān)

。本研究結(jié)果表明，NF-κB p65蛋白表達(dá)陽(yáng)性與患者腫瘤病理分化程度、TNM分期、存在門靜脈癌栓、轉(zhuǎn)移等因素存在相關(guān)性。有研究表明，NF-κB p65的陽(yáng)性表達(dá)率在Edmondson分級(jí)Ⅲ～Ⅳ的癌細(xì)胞顯著高于Edmondson分級(jí)Ⅰ～Ⅱ的患者

，與本研究結(jié)論一致。

本研究結(jié)果表明，年齡、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、門靜脈瘤栓以及FAK和NF-kBp65表達(dá)陽(yáng)性均是影響患者術(shù)后3年生存的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。存在門靜脈癌栓易造成肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移，加速門靜脈高壓的形成引起食管靜脈曲張破裂出血，是目前統(tǒng)一認(rèn)可的影響患者生存率的一大主要因素

。腫瘤轉(zhuǎn)移是目前公認(rèn)的影響預(yù)后的又一指標(biāo)之一，原發(fā)性肝癌患者中，無(wú)轉(zhuǎn)移、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的中位生存時(shí)間依次下降

。原發(fā)性肝癌患者中FAK、NF-κBp65表達(dá)陽(yáng)性患者生存率顯著小于表達(dá)陰性的患者，是影響患者生存的顯著相關(guān)因素

。

綜上所述，肝癌患者手術(shù)切除前行TACE治療后癌細(xì)胞中FAK、NF-κBp65表達(dá)陽(yáng)性是影響患者3年生存率的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究初步探究了FAK、NF-κBp65表達(dá)與手術(shù)切除前行TACE治療原發(fā)性肝癌患者的3年生存率間的相關(guān)性，但樣本量有限，未進(jìn)一步探究TACE化療藥物及化療次數(shù)、時(shí)間等對(duì)FAK、NF-κBp65蛋白及患者生存率的影響，肝癌細(xì)胞中FAK、NF-κBp65與患者生存預(yù)后間的確切關(guān)系尚需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行探究。

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