TCT與HPV E6蛋白篩查對(duì)宮頸癌及癌前病變的臨床價(jià)值

張娟 康燕華 謝雙雙

在女性惡性腫瘤中，宮頸癌發(fā)病率位居第二，且發(fā)病逐漸呈年輕化［1］。針對(duì)各種宮頸癌前病變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）情況進(jìn)行預(yù)防和治療可以及時(shí)避免宮頸癌的發(fā)生，減少患者痛苦，減輕疾病成本［2］。目前，臨床常見的宮頸癌及癌前病變篩查有宮頸癌病理活檢、宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)（Thinprep cytologic test，TCT）篩查、HPV DNA 以及相關(guān)蛋白檢測(cè)篩查等方法［3-4］。TCT 篩查比起宮頸刮片巴氏涂片法，明顯提高了受檢標(biāo)本的滿意度及宮頸異常細(xì)胞檢出率，并減少了巴氏涂片法檢測(cè)的繁瑣程度。既往研究顯示，宮頸癌與高危型人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染密切相關(guān)［5］。HPV E6 蛋白檢測(cè)對(duì)宮頸癌特異性和陽性預(yù)測(cè)值較高，但HPV 相關(guān)蛋白檢測(cè)仍然存在漏診、誤診等診斷靈敏度不夠高的問題［6］。TCT 檢測(cè)時(shí)，可能出現(xiàn)病變細(xì)胞漏取，導(dǎo)致患者錯(cuò)過最佳治療時(shí)機(jī)［7］。本研究探討了TCT 與HPV 161845 型E6 蛋白檢測(cè)篩查對(duì)宮頸癌及癌前病變患者的臨床價(jià)值，以期為提高宮頸癌篩查準(zhǔn)確率、遏制疾病發(fā)生以及爭(zhēng)取最佳治療時(shí)機(jī)提供臨床數(shù)據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年3月至2021年3月于河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院進(jìn)行宮頸病變篩查的124 例懷疑宮頸出現(xiàn)異常情況的受檢者，均接受TCT 及HPV161845 型E6 蛋白檢測(cè)篩查，以病理活檢結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)。受檢者均為女性，平均年齡（42.11±11.06）歲，平均孕（2.41±1.74）次，平均產(chǎn)（1.62±1.14）次。納入標(biāo)準(zhǔn)：有性生活史；自愿接受宮頸病變篩查。排除標(biāo)準(zhǔn)：7 d 內(nèi)存在陰道藥物使用情況；經(jīng)期以及妊娠期女性；既往有宮頸良惡性腫瘤史；嚴(yán)重傳染病患者；嚴(yán)重心臟、腎臟等器官性疾病患者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過，受試者均簽署知情同意書。

1.2 篩查、診斷方法

TCT 檢查：檢查前24 h 禁止性生活、禁止陰道用藥、沖洗。受檢者需保持膀胱截石位，窺陰器宮頸暴露出來后，擦拭宮頸表層及周圍黏液后，使用宮頸刷（上?？道噬锟萍加邢薰荆┹p旋若干圈，采集受檢者宮頸處脫落細(xì)胞，通過離心機(jī)處理后，制成薄層細(xì)胞涂片。根據(jù)國(guó)際癌癥協(xié)會(huì)推薦的伯塞斯達(dá)系統(tǒng)（2001）分類標(biāo)準(zhǔn)［8］進(jìn)行判別：無上皮內(nèi)病變以及惡性病變；意義不明的不典型鱗狀上皮細(xì)胞；傾向高度病變的不典型鱗狀上皮細(xì)胞；低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變；高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變；宮頸癌。意義不明的不典型鱗狀上皮細(xì)胞及其以上病變判斷為篩檢陽性。

取患者宮頸脫落細(xì)胞，利用酶聯(lián)免疫HPV E6蛋白檢測(cè)試劑盒（美國(guó)eBioscience，GOY-E6075）對(duì)全部受檢者進(jìn)行HPV 161845 型E6 蛋白檢測(cè)，嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行操作。

對(duì)全部受檢者進(jìn)行電子陰道鏡檢查，觀察受檢者宮頸灶的形態(tài)、顏色、結(jié)構(gòu)、血管征象，并對(duì)病變區(qū)多點(diǎn)取材，進(jìn)行病理活檢篩查。診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2014年世界衛(wèi)生組織分類標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行［9］，組織學(xué)診斷分為：正常或慢性炎癥改變；癌變病變即宮頸上皮內(nèi)瘤變1 級(jí)（CINⅠ）、2 級(jí)（CINⅡ）、3 級(jí)（CINⅢ）以及鱗狀細(xì)胞癌。其中正常、慢性炎癥活檢結(jié)果為陰性，CINⅠ期、CINⅡ期、CIN Ⅲ期、鱗狀細(xì)胞癌活檢結(jié)果為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，采用Kappa 一致性檢驗(yàn)，以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 受檢者病理診斷結(jié)果

受檢者中正常及慢性炎癥占比最大（57.26%），與檢出CINⅠ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)以及鱗狀細(xì)胞癌占比比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 受檢者病理診斷結(jié)果Table 1 Pathological diagnosis results of subjects

2.2 TCT、E6 蛋白檢測(cè)陽性檢出率和病理陽性符合率比較

TCT 檢出陽性符合率為78.18%，E6 蛋白檢出陽性符合率為82.35%，聯(lián)合檢出陽性符合率為95.92%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 受檢者TCT、E6 蛋白檢測(cè)陽性檢出率和病理陽性符合率Table 2 Positive detection rates of TCT and E6 protein and positive coincidence rate of pathology

2.3 TCT、E6 蛋白檢測(cè)以及聯(lián)合檢測(cè)陽性檢出與病理診斷分級(jí)情況比較

TCT、E6 蛋白聯(lián)合檢測(cè)陽性結(jié)果中正常及慢性炎癥2 例，CINⅠ級(jí)29 例，CINⅡ級(jí)11 例，CIN Ⅲ級(jí)5 例，鱗狀細(xì)胞癌2 例。見表3。

表3 TCT、E6 蛋白檢測(cè)以及聯(lián)合檢測(cè)陽性檢出與病理診斷分級(jí)情況比較Table 3 Comparison on positive detection rates and pathological diagnosis grading of TCT，E6 protein and combined detection

2.4 TCT 與E6 蛋白檢測(cè)宮頸癌及癌前病變的一致性比較

以活檢診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，采用TCT、E6 蛋白聯(lián)合檢測(cè)診斷宮頸癌的Kappa 值分別為0.866（P＜0.05）。見表4。

表4 TCT 與E6 蛋白檢測(cè)宮頸癌及癌前病變的一致性比較Table 4 Consistency comparison of TCT and E6 protein in the detection of cervical cancer and CIN

3 討論

目前，全球?qū)m頸癌年發(fā)病人數(shù)超過46 萬人，我國(guó)年發(fā)病人數(shù)超過13 萬，已經(jīng)超過全球年發(fā)病人數(shù)的28%［10］。宮頸癌早期癥狀不明顯，一般發(fā)展至中晚期才被發(fā)現(xiàn)，疾病預(yù)后性較差，因此早期篩查顯得十分重要［11］。宮頸癌的發(fā)生與持續(xù)感染高危型HPV 有關(guān)，宮頸上皮細(xì)胞發(fā)生異常增生，出現(xiàn)宮頸上皮內(nèi)瘤變，最終發(fā)展為宮頸癌［12］。目前有超過150 種HPV 病毒被鑒定出可引發(fā)宮頸癌，其中，70%宮頸癌發(fā)生與HPV 16、HPV 18 持續(xù)感染有關(guān)。宮頸活檢是確診宮頸癌最可靠的篩查方法之一，在高度懷疑存在宮頸癌的情況下，患者通過陰道鏡，進(jìn)行宮頸活組織取材，可以準(zhǔn)確地確定腫瘤的病理類型和細(xì)胞分化程度［13］。在本研究中，受檢者中正常及慢性炎癥占比最大（57.26%），與檢出CINⅠ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)以及鱗狀細(xì)胞癌占比比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但宮頸活檢篩查方法創(chuàng)傷較大，不利于患者宮頸的恢復(fù)，因此，尋求檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確、損傷更小的宮頸癌檢測(cè)方法是臨床需要繼續(xù)探究的重要問題之一。

TCT 和HPV 161845 型E6 蛋白檢測(cè)是目前常用的檢測(cè)宮頸癌以及癌前病變的篩查方法，雖創(chuàng)傷較小，但靈敏度和特異度低于宮頸活檢檢測(cè)［14］，因此探討如何提高TCT 和HPV161845 型E6 蛋白檢測(cè)宮頸癌的精確度有重要意義。在本研究中，TCT 檢出陽性符合率為78.18%，E6 蛋白檢出陽性符合率為82.35%，TCT、E6 蛋白聯(lián)合檢出陽性符合率為95.92%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且聯(lián)合檢測(cè)在各病理分級(jí)的診斷中檢出效果同樣十分理想，說明TCT 和HPV161845 型E6 蛋白檢測(cè)單獨(dú)篩查可能出現(xiàn)誤診、漏診情況，二者聯(lián)合可以顯著提高與病理活檢的陽性符合率，明顯提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。

利用TCT 對(duì)宮頸細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分析能減少血壓、宮頸黏液等對(duì)宮頸細(xì)胞標(biāo)本的干擾，與原始的巴氏涂片法篩查相比，提高了獲取標(biāo)本滿意度，能明顯加強(qiáng)惡性細(xì)胞的檢出情況［15］。TCT 用于評(píng)價(jià)細(xì)胞學(xué)的異常情況檢查結(jié)果，雖不能完全確定病灶位置，但可以基本確定宮頸管內(nèi)存在的病變情況，方便陽性患者接受進(jìn)一步的檢查，減少非必要的篩查和宮頸損傷，減少對(duì)女性的身心傷害［16］。E6基因?yàn)镠PV 感染發(fā)生的主要基因，宮頸癌及癌前病變的發(fā)展程度與E6 蛋白的過度表達(dá)息息相關(guān)，HPV E6 蛋白檢測(cè)對(duì)于上皮內(nèi)瘤變的發(fā)生以及癌變檢測(cè)特異度極高，可以避免出現(xiàn)HPV DNA 篩查過度情況，減輕傷害［17］。本研究結(jié)果顯示，以活檢診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，采用TCT、HPV161845 型E6蛋白聯(lián)合檢測(cè)Kappa 值明顯高于TCT、E6 蛋白單獨(dú)檢測(cè)。說明TCT 聯(lián)合E6 蛋白篩查檢測(cè)結(jié)果和病理活檢結(jié)果的一致性較好，提高了檢測(cè)靈敏度和特異性。因此，TCT 聯(lián)合E6 蛋白篩查對(duì)臨床預(yù)測(cè)宮頸癌及癌前病變價(jià)值極高，可以為早期診斷宮頸癌以及癌前病變提供可靠依據(jù)。

綜上所述，TCT 與HPV161845 型E6 蛋白檢測(cè)聯(lián)合篩查宮頸癌及癌前病變可以提高檢測(cè)敏感性、特異性以及檢測(cè)準(zhǔn)確性，聯(lián)合檢測(cè)可有效防止宮頸癌及癌前病變漏診。