傳染性單核細(xì)胞增多癥合并多種病原體感染的臨床特點(diǎn)及淋巴細(xì)胞亞群變化特點(diǎn)分析

彭啟迪, 閆 波,胡 波, 夏遠(yuǎn)航,袁麗萍

傳染性單核細(xì)胞增多癥(infectious mononucleosis,IM)是兒童時(shí)期常見(jiàn)的一種急性淋巴細(xì)胞增生性疾病，臨床上以發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大、眼瞼浮腫和肝脾腫大等為主要表現(xiàn)，嚴(yán)重者可引起多臟器功能受損。IM主要由EB病毒(

Epstein

-

Barrvirus

,EBV)感染導(dǎo)致，也有部分患兒合并巨細(xì)胞病毒(

Cytomegalovirus

,CMV)、肺炎支原體(

Mycoplasma

pneumoniae

,MP)、單純皰疹病毒(

Herpesimplex

virus

,HSV)、腺病毒(

Adenovirus

,ADV)等多種病原體感染。近年來(lái)，對(duì)IM的發(fā)病機(jī)制和機(jī)體免疫防御研究較多，但尚未完全闡明。該研究通過(guò)對(duì)IM合并多種病原體感染的臨床特點(diǎn)及淋巴細(xì)胞亞群變化特點(diǎn)進(jìn)行分析，對(duì)該病的診療提供參考。

1 材料與方法

1.1 病例資料

選擇2018年1月—2020年12月安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科病區(qū)收治的IM患兒100例，根據(jù)病原體感染情況分為單純EBV感染組(53例)和多重感染組(47例)。單純EBV感染組包括男38例，女15例，年齡1～12 (4.37±2.05)歲。多重感染組包括男32例，女15例，年齡1～10 (4.89±2.34)歲。同時(shí)選取兒科門(mén)診健康體檢兒童80例作為對(duì)照組，包括男57例，女23例，年齡1～10 (4.44±2.35)歲。各組兒童性別、年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有IM患兒均符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。健康體檢兒童家屬簽署知情同意書(shū)，且該研究經(jīng)醫(yī)院倫理會(huì)審核通過(guò)。

1.2 試劑與儀器

EBV抗體檢測(cè)試劑盒(深圳維潤(rùn)賽潤(rùn)生物技術(shù)有限公司,批號(hào)為20200901)；MP、CMV、HSV、ADV、呼吸道合胞病毒(

Respiratory

syncytial

virus

，RSV)、風(fēng)疹病毒(

Rubella

, RV)、乙型流感病毒(

Influenza

B

virus

,IBV)等病原體IgM抗體檢測(cè)試劑盒(美國(guó)Becman公司，批號(hào)為P1101901001)；流式細(xì)胞儀(flow cytometry，F(xiàn)CM) (深圳亞輝龍公司，型號(hào)為IFLash3000-A)。

1.3 主要方法

1

.

3

.

1

檢測(cè)IM患兒病原體 抽取患兒靜脈血 2 ml，離心后取血清，使用ELISA法檢測(cè)患兒血清中EBV-VCA-IgM、EBV-NA-IgG和EBV-VCA-IgG抗體水平；另外使用ELISA法測(cè)定患兒血清中MP、CMV、HSV、ADV、RSV、RV、IBV等病原體IgM水平。

1

.

3

.

2

分析單純EBV感染組及多重感染組的臨床特點(diǎn) 用χ檢驗(yàn)方法將2組患兒發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大、脾腫大、咽峽炎、皮疹、眼瞼水腫等臨床特點(diǎn)發(fā)病率進(jìn)行比較。

1

.

3

.

3

各組淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定 抽取IM患兒和對(duì)照組兒童晨起2 ml空腹靜脈血,2 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組外周血CD3、CD4、CD8、NK淋巴細(xì)胞的表達(dá)水平。

2 結(jié)果

2.1 多重感染組病原體分布特征

多重感染組感染2種病原體28例(59.57%)，3種病原體15例(31.91%)，4種病原體3例(6.38%)，5種病原體1例(2.13%)。合并感染的病原體主要為MP 25例(53.19%)、CMV 20例(42.55%)。見(jiàn)表1。

表1 多重感染組病原體分布特征

2.2 單純EBV感染組和多重感染組的臨床特征比較

多重感染組比單純EBV感染組咽峽炎、脾腫大、肝功能損害發(fā)生率明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

P

<0.01)，但2組發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大、眼瞼水腫、皮疹發(fā)生率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 單純EBV感染組與多重感染組臨床特征比較[n(%)]

2.3 3組兒童外周血淋巴細(xì)胞亞群比較

多重感染組及單純EBV感染組CD3、CD8表達(dá)水平比對(duì)照組明顯增高，而CD4、CD4/ CD8明顯降低，且多重感染組較單純EBV感染組CD3、CD8水平顯著增高，CD4、CD4/CD8比值降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

P

<0.01)，而NK水平各組間無(wú)明顯差異。見(jiàn)表3。

表3 3組淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)率比較

3 討論

IM主要由EBV感染造成的自限性病毒疾病。近年來(lái)，IM的發(fā)生率有所上升，且臨床癥狀更加復(fù)雜及隱秘，增加了臨床診斷的難度。IM患兒中還可同時(shí)感染除了EBV外的其他多種病原菌，進(jìn)而影響患兒的臨床表現(xiàn)和預(yù)后。該研究分析了IM多重感染患兒的病原體分布特征。結(jié)果表明，大部分患兒為2種病原體感染且以CMV及MP為主要病原體。有研究表明合并呼吸道癥狀患兒易感染多重病原體是因?yàn)楹芏嗖≡w可通過(guò)飛沫、糞口等途徑傳播。也有學(xué)者認(rèn)為易產(chǎn)生多重病原體感染是由于患兒感染EBV后機(jī)體免疫力下降導(dǎo)致。該研究對(duì)單純EBV感染和多重病原體感染的IM患兒的臨床特點(diǎn)進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示多重感染的IM患兒比單純EBV感染的IM患兒咽峽炎、脾腫大、肝功能損害發(fā)生率高，而患兒發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大、眼瞼水腫、皮疹無(wú)顯著性差異，這可能與病例選取有關(guān)。結(jié)果提示多重感染患兒在IM發(fā)展過(guò)程中，其他病原體和EBV協(xié)同引起機(jī)體免疫功能紊亂，通過(guò)不同的作用機(jī)制致使患兒臨床癥狀加重。這也從另一方面提示對(duì)臨床癥狀較重的IM患兒進(jìn)行多種病原體檢測(cè)，將對(duì)臨床治療提供幫助。

目前IM的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，但隨著免疫學(xué)的發(fā)展，IM的免疫失調(diào)機(jī)制越來(lái)越受到學(xué)者關(guān)注。在IM患兒中，EB病毒首先侵入咽喉部上皮細(xì)胞，進(jìn)入人體血液中迅速與B淋巴細(xì)胞表面受體結(jié)合并在其內(nèi)增值，引發(fā)T細(xì)胞防御反應(yīng)，在CD4T細(xì)胞內(nèi)發(fā)生磷酸化并激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，通過(guò)分泌IL-2、IL-4、IL-21等細(xì)胞因子及激活CD4T、CD8T等細(xì)胞，然后CD8T細(xì)胞通過(guò)分泌穿孔素、γ干擾素、顆粒酶等導(dǎo)致細(xì)胞變性、凋亡，隨后激發(fā)強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答反應(yīng)和機(jī)體免疫紊亂從而導(dǎo)致一系列臨床癥狀。該研究表明，與對(duì)照組相比，IM單純EBV感染組及多重感染組CD3、CD8T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯增高，而CD4T淋巴細(xì)胞顯著降低，CD4/CD8比值明顯下降，與高榮理 等報(bào)道一致。且IM多重感染組CD3、CD8T淋巴細(xì)胞表達(dá)量顯著高于單純EBV感染組，而CD4T淋巴細(xì)胞表達(dá)及CD4/CD8比值明顯低于單純EBV感染組。該研究還表明各組間NK細(xì)胞計(jì)數(shù)均無(wú)顯著性差異，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致。這提示該研究多重感染會(huì)進(jìn)一步造成機(jī)體的免疫激活，在臨床上應(yīng)當(dāng)引起重視，避免患兒因免疫水平下降而機(jī)會(huì)性感染其他病原體。

綜上所述，IM患兒的病原體分布特點(diǎn)呈多樣性，主要為EBV合并MP、CMV的多重感染居多。IM多重感染患兒臨床癥狀比單純EBV感染患兒更嚴(yán)重。另外，IM多重感染患兒機(jī)體免疫反應(yīng)更強(qiáng)烈，免疫功能更低下。這些都提示在臨床上對(duì)于病情較重的IM患兒，應(yīng)盡快明確其病原體感染類(lèi)型，為臨床救治提供參考。