普魯蘭多糖/羧甲基殼聚糖復(fù)合膜的制備及其對羅氏沼蝦的保鮮效果

陳露珠，李念，裴諾，施文正,2，汪之和,2,3*

1(上海海洋大學(xué) 食品學(xué)院，上海，201306)2(國家淡水水產(chǎn)品加工技術(shù)研發(fā)分中心(上海)，上海，201306) 3(上海水產(chǎn)品加工及貯藏工程技術(shù)研究中心，上海，201306)

羧甲基殼聚糖(carboxymethyl chitosan，CMC)具有較好的安全性、成膜性、生物相容性、生物降解性和抗菌活性等特性，是一種較好的聚合物基質(zhì)[1]。為了增強(qiáng)CMC保鮮膜的機(jī)械強(qiáng)度和保鮮性能，目前關(guān)于CMC與其他成分復(fù)配制備復(fù)合膜已成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。ZIMET等[2]在CMC的膜液中加入乳酸鏈球菌素，所制成復(fù)合膜的理化性能和抗菌性能均得到提升。譚福能等[3]采用CMC/海藻酸鈉/納米二氧化硅復(fù)合涂膜保鮮草莓，使草莓水分有效保留并可降低其代謝。

普魯蘭多糖是出芽短梗霉利用糖發(fā)酵產(chǎn)生的胞外多糖，又名茁霉多糖[4-5]。普魯蘭多糖具有良好的成膜性、生物相容性以及降解性，最主要的特點(diǎn)是其膜透氣性要低于其他的高分子合成材料。近年來其涂膜已廣泛應(yīng)用于食品保鮮[6-9]。胡云峰等[10]研究了普魯蘭多糖對雞蛋保鮮效果的影響，發(fā)現(xiàn)普魯蘭多糖水溶液能較好地在雞蛋表面形成涂膜層，阻止微生物進(jìn)入和空氣接觸，減少失重，延長雞蛋的貨架期。有研究證實(shí)普魯蘭多糖在水產(chǎn)品中的保鮮應(yīng)用也有良好的效果，用普魯蘭多糖保鮮白蝦可將保鮮期延長至8～9 d[11]。因此將普魯蘭多糖和CMC進(jìn)行復(fù)配，可以制備出一種可食用、環(huán)保、性能優(yōu)良的多糖復(fù)合保鮮膜。

本研究將普魯蘭多糖添加至CMC中，研究不同添加量的普魯蘭多糖對復(fù)合膜的理化性能和結(jié)構(gòu)的影響,并用制備的復(fù)合膜液對羅氏沼蝦進(jìn)行涂膜保鮮，在(4±1) ℃條件下貯藏，對羅氏沼蝦進(jìn)行感官評價(jià)、揮發(fā)性鹽基氮(total volatile base nitrogen，TVB-N)、pH值、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)值和菌落總數(shù)的測定，以研究復(fù)合膜對羅氏沼蝦的保鮮效果。本文可為CMC和普魯蘭多糖復(fù)配膜的進(jìn)一步研究及其在食品中的開發(fā)利用提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

CMC(取代度≥0.95)，實(shí)驗(yàn)室自制；普魯蘭多糖(食品級)，浙江一諾生物科技有限公司；2-TBA、三氯乙酸、氫氧化鉀、硼酸、甲基紅指示劑、溴甲酚綠指示劑、氧化鎂(輕質(zhì))，皆為分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

新鮮羅氏沼蝦，購于上海市浦東新區(qū)南匯新城鎮(zhèn)水產(chǎn)品店，30 min內(nèi)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。

1.2 儀器與設(shè)備

PHS-3CpH計(jì)，上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；H2050R高速冷凍離心機(jī)，長沙湘儀有限公司；UV-2450紫外分光光度計(jì)，日本島津公司；Kjeltec2300全自動(dòng)凱氏定氮儀，丹麥FOSS公司；XLW(EC)型智能電子拉力試驗(yàn)機(jī)，濟(jì)南蘭光機(jī)電技術(shù)有限公司；JB-1A型磁力攪拌器，上海精密科學(xué)儀器有限公司；DZF-6050型真空干燥箱，上?；厶﹥x器制造有限公司；Hitachi S-3400 N掃描電子顯微鏡，日本日立公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 南極磷蝦CMC的制備

將南極磷蝦殼粉與5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))HCl以1∶10(料液比，下同)比例充分混合，在室溫下反應(yīng)1 h后用蒸餾水洗滌至中性，然后按1∶10比例加入4%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))NaOH溶液，在100 ℃下反應(yīng)1 h后用蒸餾水洗滌至中性，再按1∶10的比例加入45% NaOH溶液，150 ℃條件下處理5 h后用蒸餾水洗滌至中性并放置真空干燥箱(60 ℃)烘干，即得到南極磷蝦殼聚糖。以上步南極磷蝦殼聚糖質(zhì)量為準(zhǔn)，加入異丙醇(料液比1∶12)溶脹1 h，按1∶10比例加入40%NaOH溶液，于30 ℃下攪拌1 h，然后再按1∶10比例加入50%(體積分?jǐn)?shù))氯乙酸-異丙醇溶液，微波處理(微波功率540 W)25 min后，再按1∶10比例加入40%NaOH溶液，在50 ℃ 條件下反應(yīng)1 h后用鹽酸溶液調(diào)pH值至7.0。離心(10 000 r/min)5 min后取上清液并加入無水乙醇靜置30 min，使CMC完全沉淀析出，最后用甲醇多次洗滌后放置真空干燥箱(60 ℃)烘干，即得到南極磷蝦CMC，取代度為0.95。

1.3.2 普魯蘭多糖-CMC(pullulan CMC，CP)復(fù)合膜的制備

在25 ℃下完全溶解CMC后，加入不同濃度的普魯蘭多糖攪拌至完全溶解；將混合膜液超聲20 min去除氣泡；利用流延法將超聲后的混合膜液(40 mL)在成膜板(17 cm×17 cm×2 cm)上于真空干燥箱中干燥成膜(50 ℃，24 h)，所成膜保存于恒溫恒濕(25 ℃，53%)的干燥器中穩(wěn)定48 h，等待檢測。每種類型的薄膜至少制備3片膜。具體見表1。

表1 復(fù)合膜中普魯蘭多糖和CMC的添加量及其命名Table 1 The dosage of pullulan polysaccharide and CMC in composite membrane and its naming

1.3.3 拉伸強(qiáng)度與斷裂伸長率

根據(jù)VUDDANDA等[12]的方法并稍作修改，將膜裁成150 mm×15 mm的長條，設(shè)置初始上下夾片距離為50 mm，拉伸速率50 mm/min。記錄薄膜的拉伸強(qiáng)度和斷裂伸長率，每個(gè)樣品測定6次，取其平均值。

1.3.4 水蒸氣透過系數(shù)

取20 mL蒸餾水倒入50 mL燒杯中，用膜包覆杯口并用細(xì)皮筋進(jìn)行固定，在22 ℃條件下，放入含有硅膠的干燥器中。每隔2 h稱量，稱取6次，每組膜取3個(gè)平行樣品，按照公式(1)計(jì)算水蒸氣透過系數(shù)[13]。

(1)

式中：x為膜厚，mm；S為有效面積，S=16.61×10-4m2；Δm為水分透過的質(zhì)量，g；t為間隔時(shí)間，s；ΔP為膜兩邊的壓強(qiáng)差，ΔP=3 167 Pa(25 ℃)

1.3.5 透光率

使用紫外可見分光光度計(jì)評估薄膜的透明度。選取光滑、平整和潔凈的膜，將膜切成矩形，緊貼在比色皿的內(nèi)側(cè)。以空皿作為空白對照，在600 nm處測定其透光率，用透光率的大小來表征復(fù)合膜透明度。透光率越高，表明膜的透明度越高。

1.3.6 傅里葉紅外光譜

采用KBr壓片法，將膜烘干剪碎后與溴化鉀混合，研磨均勻后壓片，在400～4 000 cm-1內(nèi)掃描，掃描速率為4 cm-1，掃描次數(shù)為32次。并記錄各樣品的紅外光譜。

1.3.7 掃描電鏡觀察

將膜在干燥器中干燥一段時(shí)間后，將其裁剪成5 mm×5 mm的大小，用導(dǎo)電膠將膜固定在銅板上，真空噴金處理。采用掃描電子顯微鏡觀察膜表面形態(tài)。

1.3.8 CP保鮮復(fù)合膜羅氏沼蝦的保鮮效果

選用最優(yōu)性能CP復(fù)合膜配方對羅氏沼蝦進(jìn)行涂膜處理，研究復(fù)合膜對羅氏沼蝦保鮮效果的影響。

將鮮活羅氏沼蝦浸沒在冰水中致其昏死，挑選個(gè)體大小一致，蝦體完整的羅氏沼蝦，在不同膜液中浸漬10 min，處理后快速分裝于聚乙烯保鮮袋，并用封口機(jī)封口，放置在(4±1) ℃生化培養(yǎng)箱中進(jìn)行保鮮實(shí)驗(yàn)，每隔2 d取樣進(jìn)行指標(biāo)測定。以未涂膜的羅氏沼蝦作為對照組(CK)。

1.3.8.1 感官評價(jià)

感官評定由6名有感官評定經(jīng)驗(yàn)的人員組成，分值由高到低為9～0分，對羅氏沼蝦從肌肉組織、體表色澤和氣味等方面進(jìn)行評分，具體評分標(biāo)準(zhǔn)見表2。

表2 羅氏沼蝦綜合感官評分表Table 2 Sensory evaluation of Macrobrachium rosenbergii

1.3.8.2 TVB-N的測定

按照GB/T 5009.228—2016《食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定》[14]進(jìn)行測定。

1.3.8.3 肌肉pH值

稱取2.00 g樣品，加入10 mL蒸餾水，均質(zhì) 1 min 后進(jìn)行冷凍離心10 min(10 000 r/min、4 ℃)，過濾后取上清液進(jìn)行pH值測定[15]。

1.3.8.4 TBA值測定

準(zhǔn)確稱取1.00 g樣品，加入4 mL蒸餾水和5 mL三氯乙酸溶液(20%，質(zhì)量分?jǐn)?shù))，均質(zhì)1 min，靜置1 h 后冷凍離心10 min(8 000 r/min，4 ℃)。過濾取其上清液定容至10 mL，取其5 mL并加入5 mL TBA溶液(0.02 mol/L)，迅速搖勻并置于沸水中加熱20 min后，進(jìn)行流水冷卻5 min，測其吸光度A(532 nm)。用蒸餾水作空白實(shí)驗(yàn)，每組樣品平行測定3次。TBA值=A×7.8，以mg/100g表示[16]。

1.3.8.5 菌落總數(shù)

按照GB 4789.2—2016《食品微生物學(xué)檢驗(yàn)-菌落總數(shù)測定》[17]進(jìn)行測定。

1.3.9 數(shù)據(jù)處理與分析

每組實(shí)驗(yàn)進(jìn)行3個(gè)平行，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件進(jìn)行計(jì)算，以SPSS 23.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，在單因素方差分析(ANOVA)的基礎(chǔ)上，采用Duncan法多重比較。運(yùn)用Origin 9.1繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗拉伸強(qiáng)度和斷裂伸長率

復(fù)合膜的機(jī)械性能用抗拉強(qiáng)度和斷裂伸長率這2個(gè)指標(biāo)來表征。其中抗拉強(qiáng)度反映了膜的力學(xué)強(qiáng)度，而斷裂伸長率是反映膜的柔韌性的指標(biāo)[18]。圖1顯示了不同配比復(fù)合膜的抗拉強(qiáng)度和斷裂伸長率。

圖1 不同配比對復(fù)合膜抗拉伸強(qiáng)度和斷裂伸長率的影響Fig.1 The effect of different ratios on the tensile strength and elongation at break of the compositefilm注：抗拉伸強(qiáng)度的平均值間不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，斷裂伸長率的平均值間不同大寫字母表示差異顯著(P<0.05)

隨著普魯蘭多糖含量的增加，復(fù)合膜的抗拉強(qiáng)度呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。其中CP2組的抗拉強(qiáng)度最大，為14.36 MPa，顯著高于其他組復(fù)合膜(P<0.05)，比CMC膜高98.34%。說明具有較強(qiáng)的抗拉強(qiáng)度，這為CMC中的羧基與普魯蘭多糖中的羥基之間所形成氫鍵作用所致，隨著復(fù)合膜中普魯蘭多糖比例的增加，羥基的數(shù)目也相應(yīng)增加了，從而增強(qiáng)了多糖分子間的氫鍵作用。CP組復(fù)合膜的斷裂伸長率均高于CMC膜，說明普魯蘭多糖的加入可以增強(qiáng)CMC膜的柔韌性。其中CP1，CP2和CP4組的斷裂伸長率無顯著性差異(P>0.05)。綜合考慮，CP2組的機(jī)械性能較好。

2.2 水蒸氣透過系數(shù)

水蒸氣透過系數(shù)的大小反應(yīng)了復(fù)合膜透濕性的高低，而透濕性的高低會(huì)直接影響到對產(chǎn)品的包裝效果，透濕性越低，即水蒸氣透過系數(shù)越小，說明膜的阻水性越好，則越有利于食品的保鮮[19-20]。圖2為不同配比復(fù)合膜的水蒸氣透過系數(shù)。隨著普魯蘭多糖添加量增加，復(fù)合膜的水蒸氣透過系數(shù)先降低后增大，其中CP2組復(fù)合膜的水蒸氣透過率最小，為2.32×10-12g/(m·s·Pa)，顯著低于其他組復(fù)合膜(P<0.05)，且比CMC膜的水蒸氣透過系數(shù)低12.5%，說明CP2組復(fù)合膜的透濕性最低，最有利于食品保鮮。

圖2 不同配比對復(fù)合膜水蒸氣透過系數(shù)的影響Fig.2 The effect of different ratios on the water vapor transmission coefficient of composite membranes注：圖中不同復(fù)合膜配比的不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)(下同)

2.3 透光率

復(fù)合膜的透光率通常是判斷共混高分子材料相容性好壞的輔助手段，若復(fù)合膜中2種多糖相容性很差，則在相界面上由于光的散射或反射而使膜的透光率降低[21]。圖3為不同配比復(fù)合膜的透光率的變化。隨著普魯蘭多糖添加量的增加，復(fù)合膜的透光率增大，并呈現(xiàn)顯著上升的趨勢(P<0.05)，這是因?yàn)槠蒸斕m多糖為白色物質(zhì)，CMC為淡黃色物質(zhì)，普魯蘭多糖比例的增加會(huì)提高復(fù)合膜液透明度。所有復(fù)合膜的透光率均大于90%，顯著高于CMC膜，說明復(fù)合膜中2種多糖有較好的相容性。

圖3 不同配比對復(fù)合膜透光率的影響Fig.3 The influence of different ratios on the light transmittance of the composite film

2.4 紅外光譜分析

紅外光譜可以反映出各組分的特征基團(tuán)和相互作用，尤其是氫鍵的作用，已被廣泛地應(yīng)用于表征共混物之間的相容性。相容的共混物之間有強(qiáng)相互作用，其產(chǎn)生的光譜相對于各組分的光譜產(chǎn)生較大的偏差，由此體現(xiàn)物質(zhì)的相容性[22]。

圖4為不同配比復(fù)合膜的紅外光譜圖。CMC膜在3 452 cm-1處有強(qiáng)吸收峰，是—OH和—NH2的特征吸收峰，可以反映出—OH和—NH2分子內(nèi)和分子間氫鍵。CP1，CP2，CP3和CP4復(fù)合膜在此處也有強(qiáng)吸收峰，CP4膜在此處的吸收峰有明顯增強(qiáng)，這說明普魯蘭多糖的加入增強(qiáng)了—OH和—NH2分子內(nèi)和分子間氫鍵作用。CMC膜在2 830 cm-1處的吸收峰是C—H伸縮振動(dòng)吸收峰，隨著普魯蘭多糖的加入，CP復(fù)合膜的吸收峰均向更高波數(shù)偏移(CP1膜為2 831 cm-1，CP2膜為2 838 cm-1，CP3膜為2 846 cm-1，CP4膜為2 902 cm-1)，表明普魯蘭多糖和CMC之間存在強(qiáng)烈的氫鍵作用。CMC膜在1 617 cm-1處的吸收峰為羧基的不對稱振動(dòng)，CP組復(fù)合膜發(fā)生了偏移。CMC膜在1 369 cm-1處的吸收峰為羧基的對稱振動(dòng)，CP組復(fù)合膜的吸收峰發(fā)生偏移，可能是因?yàn)镃MC中的羧基與普魯蘭多糖的羥基之間存在氫鍵作用。由于普魯蘭多糖添加量的增加，CP4組在1 391 cm-1處出現(xiàn)了1個(gè)新峰，這是因?yàn)槠蒸斕m多糖中C—O的伸縮振動(dòng)。這些基團(tuán)的變化可能導(dǎo)致復(fù)合膜的物理和化學(xué)性質(zhì)的變化。由于從紅外圖譜中證明普魯蘭多糖和CMC之間存在氫鍵作用，這可以在一定程度上說明復(fù)合膜具有比較良好的相容性。

圖4 不同配比復(fù)合膜的紅外光譜圖Fig.4 Infrared spectra of composite films with different ratios

2.5 掃描電鏡分析

利用掃描電鏡放大500倍觀察CMC、CP1、CP2、CP3和CP4的表面形態(tài)結(jié)構(gòu)(圖5)。純CMC膜(圖5-a)表面平滑，但呈現(xiàn)大量纖維狀物質(zhì)。隨著普魯蘭多糖的加入，膜的表面變得光滑，纖維狀物質(zhì)減少。圖5-c和圖5-d表面光滑，無纖維狀；圖5-e存在少量微纖維狀物質(zhì)。所有薄膜的表面微觀結(jié)構(gòu)不存在任何的裂隙和小孔，為均勻、光滑的表面形態(tài)，無明顯相分離現(xiàn)象，表現(xiàn)出很好的相容性。

a-CMC；b-CP1；c-CP2；d-CP3；e-CP4圖5 不同配比復(fù)合膜的掃描電鏡圖Fig.5 Scanning electron micrographs of composite films with different ratios

2.6 復(fù)合膜對羅氏沼蝦保鮮效果的分析

2.6.1 感官評價(jià)變化

圖6為不同處理組的羅氏沼蝦在4 ℃低溫保鮮過程中感官評分的變化。隨著保鮮時(shí)間的延長，各處理組羅氏沼蝦的感官評分逐漸降低。羅氏沼蝦在貯藏過程中產(chǎn)生的氣味和色澤黑變，是由于自身內(nèi)源酶和微生物的作用，導(dǎo)致蝦體內(nèi)的脂質(zhì)氧化和蛋白質(zhì)降解所致[23]。在0～8 d的貯藏過程中，CP2組和CMC組的感官評分始終高于CK組。這是因?yàn)槟ひ禾幚韺α_氏沼蝦的保鮮起到了一定的作用。在保鮮前4 d，CMC組和CP2組的感官評分并無明顯差異(P>0.05)。在保鮮后期(6～8 d)時(shí)，CP2組的感官評分顯著高于CMC組(P<0.05)。說明CP2組的復(fù)合膜液對羅氏沼蝦的保鮮效果優(yōu)于CMC單一膜液。這主要是因?yàn)閺?fù)合膜的機(jī)械性能好，水蒸氣透過系數(shù)低，能有效抑制微生物生長，降低脂質(zhì)氧化和蛋白質(zhì)降解的速率，從而抑制羅氏沼蝦在貯藏過程中的腐敗變質(zhì)，維持羅氏沼蝦的感官質(zhì)量。

圖6 羅氏沼蝦保鮮過程中感官評分的變化Fig.6 Changes in sensory scores during the preservation of Macrobrachium rosenbergii注：不同貯藏時(shí)間的不同組別間的上標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)(下同)

2.6.2 TVB-N變化

TVB-N是在水產(chǎn)品貯藏過程中，由于微生物和酶的作用，蛋白質(zhì)被分解產(chǎn)生氨氣及揮發(fā)性胺類物質(zhì)，是評價(jià)水產(chǎn)品新鮮程度的重要指標(biāo)之一[24]。圖7為不同處理組對羅氏沼蝦在4 ℃貯藏過程中TVB-N的變化。隨著保鮮時(shí)間的延長，各處理組的TVB-N值均呈現(xiàn)上升趨勢，其中CK組的TVB-N值顯著高于CMC組和CP2組(P<0.05)，CK組樣品TVB-N值[(20.48±0.25) mg/100g]已超過國家規(guī)定的限量值20 mg/100g。在保鮮到第8天時(shí)，CMC處理組和CP2處理組的TVB-N值分別為(21.26±0.20)和(19.92±0.31) mg/100g，比CK組延長4 d左右，這不僅因?yàn)镃MC可以抑制微生物生長，從而降低羅氏沼蝦體內(nèi)蛋白質(zhì)被分解的速率，還因?yàn)镃P2膜的機(jī)械性能和水蒸氣透過系數(shù)優(yōu)于CMC膜，可以更有效地阻止外界空氣和水，防止外界微生物的進(jìn)一步侵染繁殖。

圖7 羅氏沼蝦保鮮過程中TVB-N的變化Fig.7 Changes in TVB-N during the preservation of Macrobrachium rosenbergii

2.6.3 pH變化

圖8為不同處理組羅氏沼蝦在4 ℃貯藏過程中pH的變化。隨著貯藏時(shí)間的延長，所有處理組的pH值呈現(xiàn)上升的趨勢。這與羅氏沼蝦在內(nèi)源酶和微生物的作用下，體內(nèi)蛋白質(zhì)被分解產(chǎn)生一系列堿性化合物有關(guān)，如三甲胺，組胺，吲哚等，進(jìn)而導(dǎo)致各處理組pH值的持續(xù)上升[25]。在貯藏過程中，CP2組的pH值始終低于CK組和CMC組。在貯藏到第8天時(shí)，CK組的pH值已上升至8.30，與CP2組區(qū)別顯著(P<0.05)。說明CP2組的復(fù)合膜液在貯藏過程中可以更有效地控制內(nèi)源酶和微生物的作用，抑制pH值上升，從而延長羅氏沼蝦的貯藏時(shí)間。

2.6.4 TBA值變化

圖9為不同處理組羅氏沼蝦在4 ℃貯藏過程中TBA值的變化。隨著貯藏時(shí)間的延長，所有處理組的TBA值呈現(xiàn)上升的趨勢。TBA值越大，脂肪氧化程度越高，水產(chǎn)品腐敗程度越嚴(yán)重[26-27],因此常根據(jù)TBA值的變化來判斷水產(chǎn)品脂肪氧化程度。貯藏8 d 時(shí)，CK組的TBA值從0.26 mg MDA/100g增加到1.25 mg MDA/100g；而CMC組和CP2組分別增加到0.94和0.83 mg MDA/100g，說明CMC和CP2膜液能夠在一定程度上抑制羅氏沼蝦的脂肪氧化。其中CP2處理組的TBA值顯著低于其他處理組(P<0.05)。這是因?yàn)榧尤氲钠蒸斕m多糖使復(fù)合膜液的成膜性能更好，水蒸氣透過系數(shù)更低，具有了良好的阻氧性，進(jìn)而抑制蝦體的脂質(zhì)氧化，起到一定的保鮮作用。

圖9 羅氏沼蝦保鮮過程中TBA值的變化Fig.9 Changes in TBA value during the preservation of Macrobrachium rosenbergii

2.6.5 菌落總數(shù)變化

水產(chǎn)品的腐敗變質(zhì)主要是因?yàn)槲⑸锏姆敝乘鶎?dǎo)致，所以菌落總數(shù)可以作為衡量水產(chǎn)品腐敗情況的重要指標(biāo)之一[28]。圖10為不同處理組羅氏沼蝦在4 ℃貯藏過程中菌落總數(shù)的變化。隨著貯藏時(shí)間的延長，CK組的菌落總數(shù)一直呈現(xiàn)快速上升的趨勢，而CMC組和CP2組的菌落總數(shù)則呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢。這可能是因?yàn)樵诒ｕr初期，羅氏沼蝦本身所攜帶的細(xì)菌受低溫和保鮮膜液的雙重抑制，生長出現(xiàn)延滯期，而后隨著貯藏時(shí)間延長，細(xì)菌逐漸適應(yīng)了環(huán)境，耐冷微生物不斷繁殖，以致菌落總數(shù)逐漸上升[29]。在貯藏8 d的過程中，CK組的菌落總數(shù)由4.81 lgCFU/g上升至5.86 lgCFU/g，CMC組和CP2組的分別上升至5.50 lgCFU/g和5.37 lgCFU/g。CP2組的菌落總數(shù)明顯低于CMC組(P<0.05)，說明CP2組的復(fù)合膜液對羅氏沼蝦的抑菌效果更好，能更有效地延緩腐敗變質(zhì)。

圖10 羅氏沼蝦保鮮過程中菌落總數(shù)的變化Fig.10 Changes in the total number of colonies during the preservation of Macrobrachium rosenbergii

3 結(jié)論

普魯蘭多糖和CMC復(fù)配能有效改善單一CMC膜的性能。結(jié)果顯示，加入1%普魯蘭多糖與1%CMC按1∶1復(fù)配后，復(fù)合膜的抗拉伸強(qiáng)度和斷裂伸長率明顯增加，水蒸氣透過系數(shù)顯著降低，透光率增高，說明能制備出性能優(yōu)良的復(fù)合膜。將復(fù)合膜應(yīng)用于羅氏沼蝦的保鮮試驗(yàn)上，發(fā)現(xiàn)復(fù)合膜能顯著降低其TVB-N、pH值、TBA值和菌落總數(shù)，可將羅氏沼蝦的貨架期由4 d延長至8 d，說明復(fù)合膜對羅氏沼蝦具有良好的保鮮效果。