慢性阻塞性肺疾病患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞水平和中性粒細(xì)胞計數(shù)/淋巴細(xì)胞計數(shù)比值與癥狀嚴(yán)重程度及肺功能的關(guān)系

趙展 李準(zhǔn) 曲慧

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是以氣流阻塞為特征的慢性支氣管炎、肺氣腫，進(jìn)一步可發(fā)展至肺源性心臟病和呼吸衰竭[1]。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，全國COPD總患病人數(shù)接近1億人，其中60歲以上成人COPD患病率達(dá)27.0%[2]，是老年患者死亡的主要病因，因此探究COPD的發(fā)病機制具有重要意義。COPD的發(fā)生、發(fā)展與機體免疫功能和炎癥反應(yīng)有關(guān)[3]，中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(NLR)是臨床新近發(fā)現(xiàn)的炎癥反映指標(biāo)，但應(yīng)用于COPD的研究相對較少[4]。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)和樹突狀細(xì)胞(DC)水平均可有效反映機體免疫功能，但在COPD患者癥狀嚴(yán)重程度和肺功能的研究有待深入。本研究主要探討COPD患者Treg、DC水平和NLR與其癥狀嚴(yán)重程度及肺功能的關(guān)系，旨在為臨床評估COPD患者病情、提高臨床診療率和改善患者生活質(zhì)量等提供依據(jù)。

對象與方法

1.對象：納入2018年3月～2020年1月我院收治的240例COPD患者(COPD組)，COPD診斷均符合《慢性阻塞性肺疾病診斷指南》[5]。選擇同期在我院體檢的50例健康受試者(對照組)。兩組患者一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。本研究經(jīng)我院倫理委員會審核通過，所有受試者均知情同意。

2.方法：

(1)一般資料收集：收集所有受試者的一般資料，包括年齡、性別、BMI、文化程度、吸煙及飲酒情況。

(2)分組評估標(biāo)準(zhǔn)[6]：收集患者分組評估指標(biāo)，具體如下：(1) 肺功能：用日本捷斯特HI-801型號肺功能測試儀，測定第1秒用力呼氣量(FEV1)和用力肺活量(FVC)等指標(biāo)。(2) CAT評分：用COPD評分量表進(jìn)行評價，根據(jù)慢性阻塞性肺疾病全球倡議(GOLD)2011指南，CAT評分<10分，判定為癥狀輕，CAT評分≥10分，判定為癥狀重。(3) COPD加重(AECOPD)次數(shù)：記錄診療前12個月發(fā)生AECOPD的次數(shù)。低危：AECOPD發(fā)生次數(shù)<1次，F(xiàn)EV1≥50%；高危：AECOPD發(fā)生次數(shù)≥2次或FEV1<50%。將240例COPD患者分為A組(低危、輕癥狀，58例)、B組(低危、重癥狀，56例)、C組(高危、輕癥狀，64例)和D組(高危、重癥狀，62例)。

表1 兩組患者一般資料比較

(3)觀察指標(biāo)：采集患者空腹外周血，5 ml用于Treg亞群指標(biāo)檢測，5 ml用于DC亞群指標(biāo)檢測，2 ml用于血常規(guī)指標(biāo)檢測。①Treg亞群指標(biāo)檢測：用淋巴細(xì)胞分離液分離外周血單核細(xì)胞，細(xì)胞液加入抗CD4-FITC和CD25-PE單抗，并以IgG-FITC和IgG-PE作為對照，采用FAS-Calibur型號流式細(xì)胞儀(美國BD公司)檢測CD4+CD25+Treg水平，單抗購自美國BD公司。②DC亞群指標(biāo)檢測：采用FAS-Calibur型號流式細(xì)胞儀(美國BD公司)檢測血檢樣本髓樣樹突狀細(xì)胞(mDCs)、漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞(pCDs)、CD123+和CD11+等DC亞群，并用CellQuest軟件分析DC亞群水平。③NLR：采用BS-280型號全自動生化分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)測定中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計數(shù)，計算NLR。

結(jié) 果

1.5組受試者肺功能指標(biāo)比較：5組受試者肺功能指標(biāo)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。對照組、A組、B組、C組及D組患者FEV1和FVC水平依次降低，除B組和C組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)外，余兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 5組受試者肺功能指標(biāo)比較

2.5組受試者Treg亞群水平比較：5組受試者Treg亞群水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；對照組、A組、B組、C組及D組患者CD4+Treg、CD25+Treg、CD4+CD25+Treg水平依次降低，除B組和C組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)外，余兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 5組受試者Treg亞群水平比較

3.5組受試者DC亞群水平比較：5組受試者DC亞群水平比價差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；對照組、A組、B組、C組及D組患者CD123+DC和CD11+DC水平依次降低，mDCs和pCDs DC水平依次升高，除B組和C組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)外，余兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

4.5組受試者NLR比較：5組受試者NLR比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；對照組(2.08±0.49)、A組(3.13±0.58)、B組(5.45±0.67)、C組(5.48±0.54)和D組(7.87±0.76)NLR依次升高，除B組和C組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)外，余兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表4 5組受試者DC亞群水平比較

5.肺功能指標(biāo)與Treg亞群、DC亞群和NLR的相關(guān)性：Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，F(xiàn)EV1及FVC與CD4+Treg、CD25+Treg、CD4+CD25+Treg、CD123+DC和CD11+DC水平呈正相關(guān)(P<0.05)，而與mDCs、pCDs和NLR呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表5。

表5 肺功能指標(biāo)與Treg亞群、DC亞群和NLR的相關(guān)性

討 論

COPD的發(fā)病機制尚未闡明[7]，但臨床上通常認(rèn)為其與炎癥反應(yīng)和免疫功能紊亂相關(guān)[8]。卓超洲等[9]研究表明，NLR與COPD患者病情的發(fā)展密切相關(guān)。DC參與淋巴細(xì)胞的激活或分化，進(jìn)而調(diào)控免疫應(yīng)答方式，Treg在識別自身抗原肽、下調(diào)免疫反應(yīng)機能等方面發(fā)揮重要作用，但二者在COPD中的研究較少，因而本文研究COPD患者Treg、DC水平和NLR與其癥狀嚴(yán)重程度及肺功能的關(guān)系，旨在為臨床提供依據(jù)。

COPD本質(zhì)是慢性炎癥反應(yīng)疾病，炎癥因子和潛在標(biāo)志物的研究是臨床重點[10]。本研究表明，5組受試者NLR比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，且肺功能指標(biāo)與NLR呈負(fù)相關(guān)，提示COPD與炎癥因子的異常表達(dá)相關(guān)。分析認(rèn)為，COPD病理特征為中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等細(xì)胞在肺實質(zhì)和氣道中聚集，增加機體炎癥反應(yīng)，加重病情。羅德云等[11]研究了210例COPD患者，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NLR可有效預(yù)測AECOPD感染性死亡，對炎癥和疾病的預(yù)測有一定的作用。Lee等[12]研究結(jié)果表明，NLR水平與COPD患者氣流受限程度有關(guān)，且NLR水平越高，其COPD病情加重的幾率越高，可作為AECOPD的典型炎癥標(biāo)志物。

COPD的炎癥反應(yīng)會破壞機體正常的免疫功能，表現(xiàn)為Treg和DC的異常表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，5組受試者DC亞群和Treg亞群水平比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，且肺功能指標(biāo)與CD4+Treg、CD25+Treg、CD4+CD25+Treg、CD123+DC和CD11+DC水平呈正相關(guān)，而與mDCs和pCDs呈負(fù)相關(guān)，提示COPD癥狀嚴(yán)重程度與免疫功能緊密聯(lián)系。從一定程度上來說，DC可作為人體免疫系統(tǒng)的啟動因子，在COPD的產(chǎn)生、發(fā)展及惡化加重等進(jìn)程中具有明顯作用，而檢測CD123+DC、CD11+DC、mDCs和pCDs等可有效評估機體免疫狀況，為預(yù)防和治療COPD提供臨床參考[13]。CD4+CD25+Treg是新發(fā)現(xiàn)的T細(xì)胞亞群，可負(fù)性調(diào)節(jié)免疫功能，郝璐等[14]研究發(fā)現(xiàn)，COPD患者血液中Treg水平明顯高于正常人群，CD4+CD25+Treg可發(fā)揮拮抗免疫應(yīng)答，參與COPD疾病的發(fā)展和轉(zhuǎn)歸。本研究樣本量較小，需納入多中心樣本對象，以驗證研究結(jié)果；同時本研究僅針對COPD癥狀嚴(yán)重程度分組，未探討預(yù)后等方面，可作為下一步研究思路。

綜上所述，Treg亞群、DC亞群和NLR對于評估COPD患者的癥狀嚴(yán)重程度和肺功能等具有重要的臨床價值，值得臨床進(jìn)一步研究并推廣。