血液分析儀和鏡檢法測(cè)定白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類(lèi)的結(jié)果比較

郭海燕

（江西省九江市第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 九江 332000）

人體血細(xì)胞具有復(fù)雜性和多樣性，在病理情況下患者細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)及染色質(zhì)呈現(xiàn)出多樣的表現(xiàn)。臨床治療過(guò)程中血常規(guī)通常是必查項(xiàng)目之一，能反映多種疾病的發(fā)生及病情進(jìn)展程度，對(duì)血液系統(tǒng)疾病及造血能力的評(píng)估具有重要作用[1]。血常規(guī)測(cè)定方法主要有鏡檢法和血細(xì)胞分析儀法兩種，其中鏡檢法是檢測(cè)血細(xì)胞計(jì)數(shù)的金標(biāo)準(zhǔn)，但該檢測(cè)方法耗時(shí)較長(zhǎng)，不能滿(mǎn)足基層醫(yī)院的推廣應(yīng)用。而血細(xì)胞分析儀符合現(xiàn)代檢驗(yàn)工作機(jī)械化的發(fā)展趨勢(shì)，具有操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、測(cè)定項(xiàng)目多等優(yōu)點(diǎn)，能顯著提高檢測(cè)的工作效率和質(zhì)量，可為臨床醫(yī)師制定診療方案提供參考數(shù)據(jù)[2]?；诖?，本研究旨在探究血液分析儀法和鏡檢法測(cè)定白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類(lèi)的結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2020年1—10月于本院行血常規(guī)檢查的115 例患者的血液標(biāo)本，其中男59 例，女56 例；年齡22～59歲，平均（41.38±3.76）歲。所有患者均對(duì)本研究知情同意并自愿簽署知情同意書(shū)。本研究已通過(guò)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：在醫(yī)生指導(dǎo)下完成相關(guān)檢查、治療；精神正常，能進(jìn)行正常交流溝通。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在凝血功能異常或伴有自身免疫系統(tǒng)疾??；合并嚴(yán)重感染性疾病；近期接受過(guò)可能對(duì)研究結(jié)果產(chǎn)生影響的治療；依從性差。

1.3 方法 采集患者空腹靜脈全血1.5～2 mL，并將血樣置于13 mm×75 mm的K2EDTA抗凝管充分搖勻，在室溫下保存?zhèn)溆?，? h內(nèi)完成檢測(cè)。鏡檢法（金標(biāo)準(zhǔn)）：取15～20 μL 血液樣本直接涂片，血滴于玻片中央，距邊緣約0.5 cm處，推片時(shí)形成30°～45°；實(shí)施瑞氏吉姆薩染色，準(zhǔn)確控制染色深淺；選擇血片體尾交界處，分散均勻、細(xì)胞展開(kāi)良好區(qū)域，采用OLYMPUS CH20光學(xué)顯微鏡行白細(xì)胞分類(lèi)；每張血片取100個(gè)白細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)計(jì)數(shù)，以2張血片各類(lèi)血細(xì)胞計(jì)數(shù)取平均值作為最終檢測(cè)結(jié)果，同時(shí)檢查是否存在異常細(xì)胞、幼稚細(xì)胞及其他細(xì)胞形態(tài)的非正常改變。血液分析儀法：采用Sys‐mex XN-1000全血自動(dòng)模塊血液體液分析儀[希森美康醫(yī)用電子（上海）有限公司，產(chǎn)品注冊(cè)號(hào)：國(guó)食藥監(jiān)械（進(jìn)）字2012第2402486號(hào)]及配套材料對(duì)標(biāo)本血樣進(jìn)行分析。操作步驟嚴(yán)格按照儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范進(jìn)行。

1.4 觀察指標(biāo) ①比較鏡檢法和血液分析儀法測(cè)定白細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢查結(jié)果。②白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平＞10.0×109/L為檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，否則為陰性，比較兩種檢測(cè)方法陽(yáng)性率，計(jì)算血液分析儀法檢測(cè)的準(zhǔn)確性、特異度、靈敏度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值。準(zhǔn)確性=（真陽(yáng)性+真陰性）/（真陽(yáng)性+假陰性+假陽(yáng)性+真陰性）；特異度=真陰性/（真陰性+假陽(yáng)性）；靈敏度=真陽(yáng)性/（假陰性+真陽(yáng)性）；陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=真陽(yáng)性/（真陽(yáng)性+假陰性）；陰性預(yù)測(cè)值=真陰性/（假陽(yáng)性+真陰性）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以“”表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 鏡檢法和血液分析儀法白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果比較 115 例患者血液樣本中，人工鏡檢法檢測(cè)的白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平為（7.12±2.37）×109/L，血液分析儀法為（7.10±2.34）×109/L，兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.032，P=0.974）。

2.2 鏡檢法和血液分析儀法白細(xì)胞分類(lèi)結(jié)果比較 兩種檢測(cè)方法淋巴細(xì)胞比率、嗜酸性粒細(xì)胞比率、嗜堿性粒細(xì)胞比率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血液分析儀法檢測(cè)中性粒細(xì)胞比率低于鏡檢法，單核細(xì)胞比率高于鏡檢法義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 鏡檢法和血液分析儀法白細(xì)胞分類(lèi)結(jié)果比較（，%）Table 1 Comparison of white blood cell classification results between microscopy method and hematology analyzer method(,%)

表1 鏡檢法和血液分析儀法白細(xì)胞分類(lèi)結(jié)果比較（，%）Table 1 Comparison of white blood cell classification results between microscopy method and hematology analyzer method(,%)

方法血液分析儀法（n=115）鏡檢法（n=115）t值P值淋巴細(xì)胞比率29.34±2.54 29.00±2.56 1.011 0.313中性粒細(xì)胞比率61.08±3.84 63.40±3.87 4.563 0.000單核細(xì)胞比率7.66±0.97 5.65±0.90 16.290 0.000嗜酸性粒細(xì)胞比率1.69±0.26 1.64±0.27 1.430 0.154嗜堿性粒細(xì)胞比率0.23±0.17 0.22±0.19 0.421 0.674

2.3 鏡檢法與血液分析儀法檢查分析 鏡檢法檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)陽(yáng)性24例，陰性91例；血液分析儀法檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)陽(yáng)性29 例，陽(yáng)性率為25.22%。血液分析儀法檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性為92.17%（106/115）、靈敏度為91.67%（22/24）、特異度為92.31%（84/91）、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為75.86%（22/29）、陰性預(yù)測(cè)值為97.67%（84/86），見(jiàn)表2。

表2 鏡檢法與血液分析儀法檢查分析Table 2 Analysis of microscopic examination and blood analyzer

2.4 鏡檢法與血液分析儀法異常細(xì)胞檢出率比較 血液分析儀法異常細(xì)胞檢出率高于鏡檢法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 鏡檢法與血液分析儀法異常細(xì)胞檢出率比較[n（%）]Table 3 Comparison of abnormal cell detection rate between microscopic examination and blood analyzer[n(%)]

3 討論

血液學(xué)指標(biāo)是評(píng)估患者健康狀況和了解其各器官功能狀態(tài)的重要依據(jù)，能客觀地反映機(jī)體的生理功能和代謝狀況。血常規(guī)檢查是臨床上一種基礎(chǔ)的化驗(yàn)檢查，相關(guān)生理指標(biāo)的測(cè)定對(duì)疾病的診斷、治療和預(yù)后判斷具有重要參考價(jià)值。因此，有效檢測(cè)、分析患者血常規(guī)，在特定情況下對(duì)疾病診斷及治療干預(yù)具有重要意義[3]。白細(xì)胞在病菌侵入人體時(shí)變形穿透毛細(xì)血管壁，將其包圍吞噬，是人體與疾病斗爭(zhēng)的“衛(wèi)士”。白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)是血常規(guī)檢測(cè)的主要項(xiàng)目之一，對(duì)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)的判斷能有效反映疾病的發(fā)生及是否存在感染等情況，且能初步檢測(cè)患者的感染類(lèi)型及嚴(yán)重程度[4]。

鏡檢法能清楚地呈現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)、細(xì)胞漿染色特點(diǎn)、核染色質(zhì)及核仁，能彌補(bǔ)儀器對(duì)形態(tài)鑒別的不足，還能直觀評(píng)估和驗(yàn)證血細(xì)胞分析儀結(jié)果的準(zhǔn)確性，但由于檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)檢驗(yàn)人員的專(zhuān)業(yè)性要求較高，臨床推廣應(yīng)用受限[5]。血液分析儀具有檢測(cè)效率和質(zhì)量高的優(yōu)點(diǎn)，還適應(yīng)大樣本批量檢測(cè)，越來(lái)越受到臨床重視。在白細(xì)胞檢測(cè)過(guò)程中，血液分析儀首先將樣品紅細(xì)胞溶解，之后對(duì)白細(xì)胞核酸進(jìn)行熒光染色，選擇能較好反映檢測(cè)結(jié)果的血片，從核酸濃度、細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度及細(xì)胞大小進(jìn)行白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)[6-7]。本研究結(jié)果顯示，兩組淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞比率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血液分析儀法檢測(cè)中性粒細(xì)胞比率低于鏡檢法，單核細(xì)胞比率高于鏡檢法（P＜0.05）。提示血液分析儀檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)分類(lèi)能高效獲取五分類(lèi)白細(xì)胞的分類(lèi)統(tǒng)計(jì)，但與鏡檢法相比存在一定差異。分析原因?yàn)?，血液分析儀基于半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù)，能獲得較好的檢查效果。但血液分析儀是根據(jù)細(xì)胞核及其體積的大小所產(chǎn)生的脈沖不同而分類(lèi)，檢測(cè)過(guò)程利用低角前向散射光反映細(xì)胞體積大小，高角前向散射光反映細(xì)胞內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒物質(zhì)，并以散點(diǎn)圖體現(xiàn)所采集信息。因此，儀器檢測(cè)對(duì)部分大的單核細(xì)胞及在某些血液系統(tǒng)發(fā)生疾病時(shí)，部分胞質(zhì)顆粒物質(zhì)增多、核型扭曲折疊的幼稚細(xì)胞分辨困難，易將其誤認(rèn)為單核細(xì)胞，導(dǎo)致結(jié)果中單核細(xì)胞比率增高。

本研究結(jié)果顯示，115例患者血液樣本中，人工鏡檢法檢測(cè)的白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平為（7.12±2.37）×109/L，血液分析儀法為（7.10±2.34）×109/L，兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；鏡檢法檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)陽(yáng)性24 例，陰性91 例；血液分析儀法檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)陽(yáng)性29 例，陽(yáng)性率為25.22%。血液分析儀法檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性為92.17%（106/115）、靈敏度為91.67%（22/24）、特異度為92.31%（84/91）、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為75.86%（22/29）、陰性預(yù)測(cè)值為97.67%（84/86）；血液分析儀法異常細(xì)胞檢出率高于鏡檢法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。表明血液分析儀應(yīng)用于血常規(guī)檢查能較好地滿(mǎn)足日常血細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類(lèi)，獲得較理想的診斷特異度、靈敏度，且異常細(xì)胞檢出率高于鏡檢法。分析原因?yàn)?，血液分析儀法臨床應(yīng)用存在諸多局限性，尤其是細(xì)胞識(shí)別過(guò)程中出現(xiàn)誤判的可能性較大。在細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析方面，血液分析儀并不能細(xì)致地區(qū)分白細(xì)胞的大小、形態(tài)、結(jié)構(gòu)及其細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、染色質(zhì)著色深淺、顆粒變化特點(diǎn)，而只能根據(jù)物理特性對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行粗略分類(lèi)，具有一定局限性。對(duì)于與五分類(lèi)白細(xì)胞形態(tài)接近的部分紅細(xì)胞，在儀器檢測(cè)中通常計(jì)入白細(xì)胞。對(duì)細(xì)胞形態(tài)識(shí)別有誤的細(xì)胞，如幼稚細(xì)胞，常在白細(xì)胞直方圖上被錯(cuò)誤分類(lèi)或出現(xiàn)異常提醒，增加淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)等，在檢測(cè)過(guò)程及后續(xù)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)時(shí)不可避免出現(xiàn)一定的假陽(yáng)性，進(jìn)而對(duì)檢查結(jié)果產(chǎn)生一定的影響，導(dǎo)致臨床誤診[8-10]。因此，血液分析儀檢測(cè)雖有較高的靈敏度，但其特異性要稍低于傳統(tǒng)檢測(cè)方法，對(duì)有異常警報(bào)、嗜堿性粒細(xì)胞或單核細(xì)胞比率增高的標(biāo)本，單獨(dú)應(yīng)用儀器分析可能存在診斷結(jié)果差錯(cuò)，不能完全替代鏡檢法。對(duì)檢測(cè)結(jié)果數(shù)據(jù)明顯異常的患者，過(guò)度依賴(lài)儀器檢測(cè)，缺乏有效鏡檢復(fù)診易造成誤診。因此，對(duì)血液分析儀檢測(cè)顯示白細(xì)胞有異常圖形或報(bào)告異常結(jié)果數(shù)值的患者，需加強(qiáng)人工鏡檢復(fù)查，實(shí)現(xiàn)鏡檢法與儀器檢測(cè)的結(jié)合，以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性，降低漏診率、誤診率，更好地推進(jìn)臨床診療方案的制定，促進(jìn)患者恢復(fù)。

綜上所述，血液分析儀應(yīng)用于白細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)效果較好，但單獨(dú)應(yīng)用儀器分析可能存在誤診情況，無(wú)法取代具有識(shí)別各類(lèi)細(xì)胞、分類(lèi)控制作用的鏡檢法。