血清胱抑素C和尿液腎損傷分子-1檢測對妊娠期高血壓患者早期腎損傷的診斷價值

王金英

(汝南縣人民醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗科，河南 駐馬店 463300)

妊娠期高血壓病(HDCP) 是妊娠期一類特有疾病，疾病出現(xiàn)與全身的細小動脈痙攣，引起內(nèi)皮受損從而導(dǎo)致局部缺血有關(guān)。隨著我國高齡產(chǎn)婦基數(shù)的增長，加之群眾對妊娠期間營養(yǎng)干預(yù)、作息方式的認知欠科學(xué)，導(dǎo)致一些常見產(chǎn)科合并癥，如妊娠期高血壓疾病近年來的發(fā)病趨勢顯著提升。HDCP 在孕20 周后孕婦中較為多見，主要表現(xiàn)為高血壓、水腫以及蛋白尿等，結(jié)束分娩之后癥狀可消失，部分患者出現(xiàn)抽搐、臟器功能衰竭與昏迷等嚴重情況，對母嬰健康產(chǎn)生嚴重影響。腎損傷屬于HDCP 患者一類常見病理生理改變，近年來妊娠有關(guān)急性腎損傷患病人數(shù)不斷增多，常見原因包含大出血、先兆子癇和敗血癥等。早期腎損傷未及時得到診斷和治療，患者病情繼續(xù)加重，產(chǎn)生少尿和腎功能衰竭等癥狀，甚至引發(fā)腎實質(zhì)受損，若伴隨腎皮質(zhì)壞死，則腎功能受損無法逆轉(zhuǎn)。因此，HDCP 患者的腎損傷需早期得到診斷后及時治療，以改善其預(yù)后。當前，臨床診斷HDCP患者的腎損傷主要依靠實驗室檢查，以往采取血清肌酐、尿酸以及尿素氮靈敏度不高，尿白蛋白檢測結(jié)果易受到較多因素影響，需積極探索出更為可靠的腎損傷診斷標志物[1]?；谏鲜霰尘?，本研究對2019年3月至2021年3月汝南縣人民醫(yī)院收治的HDCP 患者及正常孕婦進行對照觀察，通過對正常妊娠孕婦和HDCP 孕婦血清SCys C、UKIM-1 水平的檢測，分析血清SCys C、UKIM-1 水平與妊娠期高血壓早期腎損傷的相關(guān)性，具體內(nèi)容如下：

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2019年3月至2021年3月本院收治的110 例HDCP 伴早期腎損傷患者為腎損傷組，另選取同時間段內(nèi)收治的100 例無腎損傷HDCP 患者為非腎損傷組、100 例正常妊娠孕婦為對照組。本研究經(jīng)過本院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)審批。

納入標準：①腎損傷組和無腎損傷組患者均與《婦產(chǎn)科學(xué)》第7 版[2]中有關(guān)HDCP 的診斷標準相符，且腎損傷組24 h 尿蛋白定量在0.3 ～2.0 g；②腎損傷組與無腎損傷組患者均是初次前往醫(yī)院就診，既往無HDCP 治療史；③對照組均為體檢無任何異常的孕婦；④具備正常的認知能力，可配合完成研究。

排除標準：①妊娠前已經(jīng)確定存在腎實質(zhì)疾病者；②伴糖尿病等能使腎臟出現(xiàn)病變的各類疾病者；③泌尿生殖系統(tǒng)感染或者出血者；④伴心力衰竭者；⑤伴胎膜破裂者；⑥甲狀腺功能處在低下狀態(tài)者；⑦拒絕或者中途退出此次研究者。

1.2 方法

1.2.1 儀器和試劑

雙人超凈工作臺( 蘇州凈化SW-CJ-2FD 型)；產(chǎn)自德國Eppendorf Centrifuge 5415R 的低溫高速離心機； -80℃立式低溫冰箱存放實驗標本Thermo(美國)；-20℃ 立式冰箱存放實驗標本( 中國海爾公司PW-25L262)；日立7600 生化分析儀( 國食藥監(jiān)械( 進) 字2011 第2401157 號)；美國雷杜RT-3100 洗板機；酶標免疫檢測儀( 廠商：深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；粵械注準：20192220393；型號：MR-96A)；北京九強生物技術(shù)公司生產(chǎn)的SCys C、UKIM-1 檢測試劑盒；上海躍進生產(chǎn)的恒溫水浴箱；GC-1200γ 放射免疫計數(shù)器(中國科大創(chuàng)新股份有限公司) 。

1.2.2 標本采集

入院后禁止研究對象劇烈運動及過量飲食，用生化促凝管采集研究對象清晨空腹8 h 狀態(tài)下肘靜脈血3 mL，離心5 min，取上清液備用；另囑咐受試者留取晨尿及任意中段尿5 mL，于1 500 r/min 離心機中離心5 min 后取上清液，將上清液置于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆?。排空膀胱后開始計時留24 h 尿液。

1.2.3 檢測方法

SCys C 檢測：抽取受檢者清晨空腹狀態(tài)下的靜脈血液3 ～4 mL，以3 500 r/min 離心10min 分離得到血清，采取免疫比濁法對血清內(nèi)的SCys C 含量開展檢測，將標本加入緩沖液稀釋后，針對各個小試管做好標記，將試劑37 ℃保溫5 min 后分別加入蒸餾水管、標準品管及樣品血清管，混勻后37 ℃保溫10 min，利用全自動分析儀在波長340 nm 和700 nm 出測定免疫復(fù)合物濁度，根據(jù)吸光度增加量得出血清中胱抑素C 的含量。操作者嚴格依據(jù)說明書中有關(guān)內(nèi)容開展操作。

UKIM-1 檢測：將試劑盒從4 ℃冰箱中取出，平衡室溫30 min，經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附方法開展檢測，操作嚴格依據(jù)試劑盒中說明書進行。將標準品濃度對數(shù)值當作橫坐標，其相對應(yīng)的OD 值是縱坐標，采取Excel 進行標準曲線繪制，再結(jié)合樣本OD 值計算出UKIM-1 水平。

血肌酐(Scr) 及尿素氮(BUN) 均采用全自動生化分析儀檢測。

1.3 觀察指標

①比較各組孕婦的基線資料，包括年齡、確診時孕周、體重指數(shù)、孕次、產(chǎn)次、分娩經(jīng)歷、文化程度、家庭人均月收入、醫(yī)療費用付費方式、職業(yè)等；②比較各組孕婦的血清CysC、尿KIM-1 和Scr、BUN 水平；③分析血清CysC、尿KIM-1 及Scr、BUN 之間的相關(guān)性。④分析血清CysC、尿β2-MG 和Scr、BUN 關(guān)于診斷妊娠期高血壓疾病早期腎損傷的敏感度、特異度、準確度及診斷界值，同時將SCys C 及UKIM-1 帶入Logistic 回歸方程計算，分析早期腎損傷的影響因素。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

經(jīng)SPSS23.0 統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以n(%)表示，行χ2檢驗；符合正態(tài)分布的計量資料以±s表示，行t檢驗，多組間計量資料對比采取方差分析，采用Pearson 相關(guān)性分析法檢驗兩變量間的相關(guān)性，采取Logistic 回歸方法分析早期腎損傷影響因素，將P＜0.05作為評定存在差異的標準。

2 結(jié) 果

2.1 三組基線資料對比

三組年齡、確診時孕周、體重指數(shù)、孕次、產(chǎn)次、分娩經(jīng)歷、文化程度、家庭人均月收入、醫(yī)療費用付費方式、職業(yè)等基線資料對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，詳見表1。

表1 三組基線資料對比結(jié)果(± s )Table 1 Comparative results of three groups of baseline data(± s )

表1 三組基線資料對比結(jié)果(± s )Table 1 Comparative results of three groups of baseline data(± s )

一般資料 腎損傷組(n=110) 非腎損傷組(n=100) 對照組(n=100) χ2/t P年齡/歲 28.14±4.18 28.05±4.26 28.34±4.60 0.050 0.960確診時孕周/周 35.45±5.12 35.16±5.08 35.24±5.26 0.634 0.528體重指數(shù)/(kg/m2) 23.45±0.54 23.50±0.58 23.28±0.67 0.368 0.714孕次/次 2.38±0.45 2.26±0.50 2.30±0.54 1.600 0.400產(chǎn)次/次 1.48±0.32 1.50±0.28 1.46±0.35 0.203 0.674分娩經(jīng)歷/例 0.060 0.806初產(chǎn)婦 66 62 60經(jīng)產(chǎn)婦 44 38 40文化程度/例 0.026 0.979初中及以下 25 22 20高中及中專 58 53 51大專及以上 27 25 29家庭人均月收入/元 0.575 0.565＜2 500 25 22 25 2 500 ～5 000 48 49 47＞5 000 37 29 28醫(yī)療費用付費方式/例 0.059 0.808自費 25 20 19社保 85 80 81職業(yè)/例 0.069 0.945自由職業(yè) 32 29 28工人 15 18 16農(nóng)民 10 11 12干部 19 17 16職員 24 16 18其他 10 9 10

2.2 三組SCys C 及UKlM-1 水平對比

三組SCys C 及UKIM-1 水平對比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；腎損傷組的SCys C 及UKIM-1、BUN 水平均高于非腎損傷組及對照組(P＜0.05)，Scr 水平低于非腎損傷組及對照組(P＜0.05)，非腎損傷組和對照組的SCys C 及UKIM-1、BUN、Scr 水平對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，詳見表2。

表2 三組SCys C 及UKIM-1 水平對比(± s )Table 2 Comparative results of SCys C and UKIM-1 levels in three groups(± s )

表2 三組SCys C 及UKIM-1 水平對比(± s )Table 2 Comparative results of SCys C and UKIM-1 levels in three groups(± s )

注：和非腎損傷組及對照組對比，①P ＜0.05；和對照組對比，②P ＞0.05。

組別 例數(shù) SCys C/(mg/L) UKIM-1/(μg/L) BUN/(mmol/L) Scr/(μmol/L)腎損傷組 110 1.50±0.34① 1.55±0.50① 6.28±2.35 63.95±125.36非腎損傷組 100 1.05±0.28② 0.61±0.20② 4.75±3.86② 72.75±130.28②對照組 100 0.98±0.30 0.58±0.14 4.20±2.64 70.95±125.36 F 88.820 299.910 3.449 0.063 P 0.001 0.001 0.001 0.942

2.3 血清SCys C 與KlM-1、BUN、Scr 的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson 相關(guān)分析顯示，血清SCys C 與KIM-1、BUN、Scr 均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別0.756、0.537、0.485。UKIM-1 與BUN、Scr 均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別0.628、0.634，BUN 與Scr 呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.497(P＜0.05)，詳見表3。

表3 血清SCys C 與KIM-1、BUN、Scr 的相關(guān)性分析Table 3 Correlation analysis of serum SCys C with KIM-1, BUN, and Scr

2.4 早期腎損傷出現(xiàn)的Logistic 回歸分析結(jié)果

將SCys C、UKIM-1 帶入Logistic 回歸方程計算，發(fā)現(xiàn)SCys C、UKIM-1 均是判斷早期腎損傷出現(xiàn)的預(yù)測因子，OR＞1，詳見表4。

表4 早期腎損傷出現(xiàn)的Logistic 回歸分析結(jié)果Table 4 Logistic regression analysis of early renal injury

2.5 血清CysC、尿液KlM-1 預(yù)測妊娠期高血壓孕婦早期腎損傷的ROC 曲線分析結(jié)果

血清CysC 預(yù)測妊娠期高血壓孕婦早期腎損傷的ROC曲線下面積(AUC) 為0.769 (95%CI 0.528 ～0.804)，以0.79 mg/L 為截斷值時，其靈敏度為86.67% ，特異 度 為68.61%; 尿 液KIM-1 的AUC 為0.864 (95%CI 0.713 ～0.925)，以3.24 μg/L 為截斷值時，其靈敏度為89.99%，特異度為85.71%。

3 討 論

HDCP 作為妊娠階段女性一類常見疾病，是指發(fā)生于妊娠期間的高血壓疾病。該病的發(fā)病與營養(yǎng)、遺傳、免疫調(diào)節(jié)、血管內(nèi)皮損傷等因素相關(guān)。病情惡性進展下，該病會對產(chǎn)婦的腎臟、心臟等器官造成損傷，甚至會誘發(fā)腦水腫、抽搐、腦出血等問題，嚴重威脅孕婦和胎兒生命健康。HDCP 和產(chǎn)科出血以及心臟病是孕婦的三大主要死因[3]。伴孕周增加，子宮動脈血液供應(yīng)相應(yīng)增多，血管阻力降低，發(fā)生HDCP 的機率上升。一項流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)[4]，妊娠期高血壓的發(fā)病率達6.5%，好發(fā)年齡段為25 ～29 歲，其中單胎妊娠的患者占比更是高達82.1%，提示該妊娠期合并癥在產(chǎn)科較為常見，HDCP 作為產(chǎn)科一類重要的并發(fā)癥，已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)研究中的熱點問題。HDCP 能引發(fā)腎小球擴張和內(nèi)皮細胞腫脹，血肌酐與尿素氮水平迅速增高，腎小球濾過率降低[5]。早期無法及時有效診斷并采取合理治療措施，能引起嚴重不良后果。因此積極尋找到特殊、敏感的早期標志物有著重要意義。

UKIM-1 屬于早期腎功能受損一個重要的預(yù)警指標，其屬于跨膜蛋白，在腎臟出現(xiàn)毒性受損或者缺血期間，去極化近端小管細胞能過度表達出UKIM-1。當前，UKIM-1 已在多項研究中被確定和腎功能受損程度相關(guān)，當血清中的UKIM-1 水平≥3.25 μg/L 代表孕婦存在HDCP 風險，同時需重視孕婦的腎功能。據(jù)有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[6]，UKIM-1 于缺血性腎受損中尤為敏感，于其他臟器內(nèi)表達較少。血清UKIM-1 水平上升，腎小球濾過率迅速降低，為UKIM-1 早期預(yù)警HDCP 患者的腎損傷帶來可靠依據(jù)。SCys C 屬于一類半胱氨酸蛋白酶抑制劑，其分子量較低，可以通過腎小球自由濾過，并且完全被腎小管上皮細胞吸收分解，從而清楚地表達腎小球濾過率的變化，是當前唯一一種代謝途徑[7]。BUN 是血漿中除蛋白質(zhì)外的一種含氮化合物，可直接通過腎小球濾過途徑排出體外，并且在患者發(fā)生腎功能不全失代償表現(xiàn)時可直接呈高表達狀態(tài)，從而反映人體腎小球濾過功能；而Scr 屬于一種肌肉代謝產(chǎn)物，可通過尿液排出體外，在腎小球濾過功能降低時，人體Scr 水平會明顯上升，進而一直被視為反映腎功能的常見指標[8]。據(jù)有關(guān)研究顯示[9]，SCys C 能被用于腎功能評估，其特異度和敏感度較高，能評定急性腎臟損傷患者的病情及預(yù)后，且該項指標水平不會受性別、年齡、體質(zhì)量以及種族影響。

本次研究發(fā)現(xiàn)， 腎損傷組SCys C 及UKIM-1、BUN、Scr 水平較非腎損傷組及對照組高(P＜0.05)，非腎損傷組和對照組SCys C 及UKIM-1、BUN、Scr 水平對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，提示HDCP 患者的SCys C 及UKIM-1 水平存在異常升高。除BUN、Scr 兩項目前已被臨床認可的指標外，SCys C 及UKIM-1同樣值得應(yīng)用于HDCP 患者的早期腎損傷篩查中。此外，經(jīng)Pearson 相關(guān)分析顯示，血清SCys C 與KIM-1、BUN、Scr 均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別0.756、0.537、0.485。UKIM-1 與BUN、Scr 均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別0.628、0.634，BUN 與Scr 呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.497(P＜0.05)。由本研究結(jié)果可以看出血清CysC、尿KIM-1 是檢測妊娠期高血壓疾病早期腎損傷的理想指標，診斷界值分別為0.79 mg/L、3.24 μg/L，當檢測結(jié)果高于界值水平時，考慮患有妊娠期高血壓伴腎損傷的可能性較大。這和陳素萍[10]研究中提出對照組和HDCP組SCys C 與KIM-1 水平存在正相關(guān)(r=0.12，P=0.022;r=0.30，P=0.514)。SCys C 與KIM-1 曲線下面積分別為0.739 和0.551，診斷的靈敏度和特異性較好的結(jié)論相一致，佐證本研究并非偶然。但本文與之不同之處在于，我們將根據(jù)孕婦是否出現(xiàn)腎損傷進行二次分組，充分展示上述指標在是否合并腎損傷患者中的差異性。值得注意的是，血清CysC 的敏感度及特異度較低，易受某些外在因素影響，在診斷過程中存在一定的假陽性率和假陰性率，因此，我們建議臨床診斷中不可單純依靠某一種指標盲目檢測，多項指標聯(lián)合檢測才能明顯提高妊娠期高血壓疾病及早期腎損傷的診斷效能[11]。此外，本次研究的創(chuàng)新之處在于觀察了早期腎損傷的影響因素，最終發(fā)現(xiàn)，SCys C、UKIM-1 均是判斷HDCP 患者早期腎損傷出現(xiàn)的預(yù)測因子，OR值＞1，提示兩項指標對HDCP患者的早期腎損傷發(fā)生均有著一定預(yù)測價值。

綜上所述，血清SCys C、 尿液UKIM-1 在診斷HDCP患者的早期腎損傷中有著重要價值，能為臨床評定患者病情和制定后續(xù)治療方案提供重要參考依據(jù)。但本次研究中仍存在一定不足，如納入的樣本數(shù)不多，且研究時間不長，未對HDCP 伴早期腎損傷患者的遠期預(yù)后開展統(tǒng)計分析等，這些均需在日后研究中加以完善，以得到更為全面、客觀的研究結(jié)果，更好地指導(dǎo)臨床實踐。