重度脂血干擾干、濕化學(xué)方法檢測部分生化指標(biāo)的分析

張漢運(yùn) 李有強(qiáng) 鄧雨潔 王晶晶 甘釗杏 曾繁興 陳錫泉

1.廣州市番禺區(qū)何賢紀(jì)念醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣東廣州 511400；2.湖南省郴州市永興縣心家精神病醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南永興 423000

近年來檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性為臨床實(shí)踐做出了重大貢獻(xiàn)，分析前質(zhì)量控制是整個檢驗(yàn)質(zhì)量控制中非常必要且不能忽視的重要環(huán)節(jié)，是保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的前提[1-3]。分析前錯誤占臨床檢驗(yàn)錯誤類型的一半以上，而分析樣品的質(zhì)量對分析前質(zhì)量控制非常重要[4]，因此，血清的溶血、高膽紅素血癥和脂血會極大地影響許多結(jié)果的準(zhǔn)確性[5]。血脂最常見的原因是空腹時間短；其他常見原因包括飲食、糖尿病、急性胰腺炎、腎衰竭、酒精中毒、甲狀腺功能減退和某些藥物[6-7]。在臨床檢驗(yàn)工作中容易發(fā)現(xiàn)脂血標(biāo)本，可能對不同生化參數(shù)的分析結(jié)果造成不同程度的干擾[8]，Soleimani等[9]報道高速離心是有效消除脂血對檢測結(jié)果干擾的方法之一。因此，本研究觀察高速離心前后脂血標(biāo)本在干、濕化學(xué)兩種儀器中14項(xiàng)生化指標(biāo)檢測結(jié)果的差異，分析干、濕化學(xué)方法對重度脂血的抗干擾能力。

1 資料與方法

1.1 樣本收集

收集41例臨床脂血標(biāo)本，標(biāo)本管為黃色真空采血管（含分離膠），血清標(biāo)本外觀為奶白色，不透光。

1.2 主要儀器與試劑

1.2.1 主要儀器 H7600全自動生化分析儀（日本日立Hitachi公司）；V5600干化學(xué)分析儀（德國強(qiáng)生公司）；TDZ5-WS低速離心機(jī)（湖南邁克爾實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；SORVALL ST40高速離心機(jī)（美國賽默飛公司）。

1.2.2 試劑 H7600生化分析儀所用試劑天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）（上海三維生物）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）和肌酸激酶同工酶 MB（creatine kinase isoenzyme MB，CK-MB）（上海執(zhí)誠生物）、淀粉酶（amylase，AMY）和尿素（Urea）（上海科華生物）、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）和膽堿酯酶（cholinesterase，CHE）（浙江東甌生物）、肌酐（creatinine，Cr）和 HCO3-（浙江伊利康生物）、葡萄糖（glucose，Glu）（浙江美康生物）、Ca2+（北京利德曼生化），其余均為儀器配套試劑；干化學(xué)試劑均為儀器配套試劑。質(zhì)控品和校準(zhǔn)品購自美國朗道。

1.3 觀察指標(biāo)及檢測方法

1.3.1 觀察指標(biāo) AST、CK、CK-MB、AMY、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、Ca2+、K+、Na+和 Cl-共 14 項(xiàng)指標(biāo)。

1.3.2 質(zhì)量控制 上樣前檢測質(zhì)控，當(dāng)質(zhì)控在控后開始樣本檢測。

1.3.3 檢測方法 將41例樣本經(jīng)3000 r/min（離心半徑11 cm）離心3 min后，分別在H7600和 V5600上檢測以上14項(xiàng)指標(biāo)；再將標(biāo)本經(jīng)15 000 r/min（離心半徑7 cm）離心8 min后，吸取下層透亮血清，分別在H7600和V5600上再次檢測以上指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計數(shù)資料用率表示，兩組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用GraphPad Prism 5.0制作圖表，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)果如圖1所示，H7600全自動生化分析儀檢測的41例脂血標(biāo)本中，經(jīng)高速離心后，3項(xiàng)指標(biāo)（AMY、CK和Ca2+）的檢測結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=0.9153，P=0.3655；t=1.822，P=0.0760；t=0.6470，P=0.5213），而其他 11 項(xiàng)指標(biāo)（AST、CK-MB、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、K+、Na+和 Cl-）的檢測結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.110，P=0.0412；t=3.632，P=0.0008；t=3.606，P=0.0009；t=3.540，P=0.0010；t=3.246，P=0.0024；t=2.188，P=0.0346；t=5.884，P<0.0001；t=4.559，P<0.0001；t=7.540，P<0.0001；t=11.69，P<0.0001；t=9.602，P<0.0001）。V5600干化學(xué)分析儀檢測的41例脂血標(biāo)本中，經(jīng)高速離心后，8 項(xiàng)指標(biāo)（AMY、CK、Ca2+、AST、LDH、Urea、Cr和K+）的檢測結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=0.6770，P=0.5023；t=0.2535，P=0.8012；t=1.551，P=0.1288；t=0.1019，P=0.9194；t=0.2251，P=0.8230；t=1.402，P=0.1686；t=0.2481，P=0.8053；t=1.033，P=0.8030），而其他 6 項(xiàng)指標(biāo)（CK-MB、CHE、HCO3-、Glu、Na+、Cl-）的檢測結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=4.581，P<0.0001；t=2.090，P=0.0430；t=3.466，P=0.0013；t=2.027，P=0.0494；t=4.609，P<0.0001；t=8.236，P<0.0001）。脂血標(biāo)本在檢測AMY、CK和Ca2+3項(xiàng)指標(biāo)上，對干、濕化學(xué)方法均沒有干擾（P>0.05），但是在檢測 CK-MB、CHE、HCO3-、Na+、Cl-和Glu 6項(xiàng)指標(biāo)上，對干、濕化學(xué)方法均造成干擾（P<0.05）；脂血在檢測 AST、LDH、Urea、Cr和 K+5項(xiàng)指標(biāo)上，對干化學(xué)方法沒有干擾（P>0.05），對濕化學(xué)方法造成干擾（P<0.05）。

圖1 高速離心前后檢測結(jié)果的比較

3 討論

脂血是臨床檢驗(yàn)中常見的干擾物[10-11]。脂血的成分主要包括乳糜微粒和三酰甘油，這兩者可影響光的透射和散射，從而對采用比色法或比濁法檢測的生化項(xiàng)目造成較大干擾，導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，是日常生化檢驗(yàn)工作中最常見的標(biāo)本影響因素之一，給臨床的診斷、治療及預(yù)后造成不利的影響[12]。人們因飲食、某些疾病和服用某些藥物而導(dǎo)致高脂血癥，嚴(yán)重的脂血標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室中并不罕見[9]。近年來，雖然隨著檢驗(yàn)技術(shù)的高速發(fā)展、方法學(xué)的改進(jìn)、儀器性能的提高，消除了輕、中脂血對大部分生化指標(biāo)檢測的干擾，但仍面臨著嚴(yán)重脂血干擾檢測的挑戰(zhàn)[13]。據(jù)文獻(xiàn)報道可通過標(biāo)本稀釋法、低溫冷藏法、磷鎢酸-鎂法和聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）法、脂質(zhì)清除劑、脂質(zhì)提取法、常溫高速離心法和低溫高速離心法消除脂血對檢測結(jié)果的影響[14-19]，而常溫高速離心法操作簡單，對實(shí)驗(yàn)室條件要求不高，結(jié)果較為可靠，更適合臨床檢驗(yàn)實(shí)際應(yīng)用[15]。

關(guān)于重度脂血標(biāo)本干擾干、濕化學(xué)方法檢測生化指標(biāo)的報道不多（僅有一篇），文獻(xiàn)中描述的是脂血標(biāo)本常規(guī)離心后的干、濕化學(xué)方法檢測結(jié)果的比較分析[20]，是干、濕化學(xué)方法上的比較，由于干、濕化學(xué)方法在方法上的根本差異，檢測指標(biāo)的線性范圍可能有所差別，文中得出的結(jié)論可能值得進(jìn)一步討論。不同的是，本研究首次通過觀察高速離心前后脂血標(biāo)本在干、濕化學(xué)檢測結(jié)果的差異，比較干、濕化學(xué)方法對重度脂血的抗干擾能力，結(jié)果顯示，脂血在檢測AMY、CK、Ca2+3項(xiàng)指標(biāo)上，對干、濕化學(xué)方法均沒有干擾（P>0.05），但是在檢測 CK-MB、CHE、HCO3-、Na+、Cl-、Glu 6項(xiàng)指標(biāo)上，對干、濕化學(xué)方法均造成干擾（P<0.05）； 脂血在檢測 AST、LDH、Urea、Cr、K+5 項(xiàng)指標(biāo)上，對干化學(xué)方法沒有干擾（P>0.05），對濕化學(xué)方法造成干擾（P<0.05）。以上結(jié)果表明，重度脂血在不同的程度上均會干擾干化學(xué)和濕化學(xué)兩種方法：濕化學(xué)方法檢測14項(xiàng)生化指標(biāo)，11項(xiàng)生化指標(biāo)受干擾，占比11/14；干化學(xué)方法檢測14項(xiàng)生化指標(biāo)，6項(xiàng)生化指標(biāo)受干擾，占比6/14；由此可見，在部分檢測指標(biāo)上（AST、CK-MB、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、K+、Na+和Cl-），干化學(xué)方法對重度脂血的抗干擾能力優(yōu)于濕化學(xué)方法。本研究存在的不足為：由于本研究所用的V5600干化學(xué)分析儀只開展部分生化指標(biāo)（AST、CK、CK-MB、AMY、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、Ca2+、K+、Na+和 Cl-）檢測，無法納入更多的生化指標(biāo)，使分析的結(jié)論存在一定的局限性，在后續(xù)的研究中考慮納入更多的生化指標(biāo)。

綜上所述，在部分檢測指標(biāo)上（AST、CK-MB、LDH、CHE、Urea、Cr、HCO3-、Glu、K+、Na+和 Cl-），干化學(xué)方法對重度脂血的抗干擾能力優(yōu)于濕化學(xué)方法，若所測的指標(biāo)能被重度脂血干擾，建議重度脂血標(biāo)本經(jīng)高速離心后再上機(jī)檢測，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。