安神補心六味丸對小鼠自主活動及鎮(zhèn)靜作用實驗研究

劉小偉，美 麗，新圖雅，白塔那，于 水，陳紅梅*，王秀蘭

(1.內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000；2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

隨著經(jīng)濟社會的高速發(fā)展，生活節(jié)奏快、作息不規(guī)律、飲食不當?shù)纫蛩貒乐赜绊懮硇慕】?，心血管疾病也逐漸呈年輕化發(fā)展趨勢，已成為我國居民的首要致死因素[1]。安神補心六味丸為蒙醫(yī)藥經(jīng)典復(fù)方制劑，載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準·蒙藥分冊》，有祛“赫依”、鎮(zhèn)靜等功效，用于治療心慌，氣短等癥，對于心赫依病(心臟神經(jīng)官能癥)[2]臨床療效顯著。本文通過實驗研究蒙藥安神補心六味丸對小鼠自主活動及睡眠作用的影響，觀察其鎮(zhèn)靜安神作用，為進一步開發(fā)研究藥物提供實驗依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 實驗動物

健康昆明小鼠(雌雄各半)210只，體重(20±2)g，購于遼寧長生生物技術(shù)股份有限公司(遼寧省實驗動物資源中心)，實驗動物生產(chǎn)許可證號SCXK(吉)：2016-0003。飼養(yǎng)溫度22～25 ℃，濕度45%～65%，光照12 h，明暗交替，給予標準飼料和飲用水，飼養(yǎng)環(huán)境為清潔級。

1.2 實驗藥品

安神補心六味丸(批號：191218，內(nèi)蒙古奧特奇蒙藥股份有限公司生產(chǎn))；地西泮片(批號：20200403，華中藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn))；咖啡(批號：20200909HO，廣東省東莞雀巢有限公司)；戊巴比妥鈉(批號：268595)；INTERNATIONAL LABORATORY USA(美國國際實驗室)；氯化鈉注射液(批號：2002111210，吉林省都邦藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn))。

1.3 儀器與設(shè)備

ZZ-6小鼠自主活動測試儀和小動物行為學(xué)系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司)；SQP型電子分析天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)。

2 實驗方法

2.1 安神補心六味丸對正常情況下小鼠自由活動的影響

將50只小鼠隨機分為5組，分別為正常組，安神補心六味丸低、中、高劑量組和陽性對照組，每組10只。安神補心六味丸低、中、高劑量組給藥量分別為1.56 g/kg、3.12 g/kg、4.56 g/kg，陽性組給予地西泮0.2 mg/kg，連續(xù)給藥14 d。末次灌胃給藥30 min 后將各組小鼠依次置于自主活動記錄儀中，適應(yīng) 5 min，在開啟儀器后測定5 min 內(nèi)自主活動次數(shù)和站立次數(shù)。

2.2 安神補心六味丸對興奮模型小鼠自由活動的影響

將60只小鼠隨機分為6組，分別為正常組、模型組、安神補心六味丸低、中、高劑量組和陽性對照組，每組10只。正常組以外50只小鼠分別灌胃咖啡液(1.86 g/kg)建立興奮小鼠模型，再給予相應(yīng)的藥物，連續(xù)給藥14 d。安神補心六味丸低、中、高劑量組和陽性對照組的給藥量與“2.1實驗”的給藥量一致。末次灌胃給藥30 min 后把各組小鼠依次置于自主活動記錄儀中，適應(yīng)5 min，在開啟儀器后測定5 min內(nèi)自主活動次數(shù)和站立次數(shù)。

2.3 安神補心六味丸協(xié)同閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠指數(shù)、睡眠率的影響

取50只小鼠，分組與給藥量與“2.1實驗”的一致。灌胃給藥(1次/d)，連續(xù)10 d。于末次給藥1 h后對各組小鼠腹腔注射閾下劑量的戊巴比妥鈉35 mg/kg，觀察各組小鼠睡眠指數(shù)，并計算睡眠率。

2.4 安神補心六味丸協(xié)同睡眠劑量戊巴比妥對小鼠睡眠潛伏期、睡眠時間的影響

取50只小鼠，分組與給藥量與“2.1實驗”的一致。灌胃給藥(1次/d)，連續(xù)10 d。于末次給藥1 h后對各組小鼠腹腔注射閾下劑量的戊巴比妥鈉50 mg/kg，觀察各組小鼠睡眠潛伏期及睡眠時間的變化。

2.5 實驗觀察指標

本實驗以小鼠睡眠時間、覺醒時間、睡眠率、睡眠潛伏期時間作為了各組間的觀察指標。即小鼠翻正反射消失1 min以上可作為進入睡眠時間；小鼠恢復(fù)翻正反射1 min以上為覺醒時間；睡眠率=(入睡動物數(shù)/每組動物數(shù))×100%；腹腔注射戊巴比妥鈉到翻正反射消失時間定義為睡眠潛伏期時間[3-5]。

2.6 統(tǒng)計學(xué)方法

3 實驗結(jié)果

3.1 安神補心六味丸對正常情況下小鼠自由活動的影響

與空白對照組相比較，各給藥組不同程度的減少小鼠的自主活動次數(shù)和站立次數(shù)，其中安神補心六味丸高劑量組和地西泮組顯著減少(P<0.05，P<0.01)。結(jié)果見表1。

表1 安神補心六味丸對正常情況下小鼠自由活動的影響

3.2 安神補心六味丸對興奮模型小鼠自由活動的影響

與空白對照組比較模型組小鼠自主活動和站立次數(shù)明顯增多(P<0.05)。與模型組相比較，各給藥組不同程度減少小鼠的自主活動次數(shù)和站立次數(shù)，其中安神補心六味丸高劑量組和地西泮組小鼠的自主活動和站立次數(shù)明顯減少(P<0.05，P<0.01)。結(jié)果見表2。

表2 安神補心六味丸對興奮模型小鼠自由活動的影響

3.3 安神補心六味丸協(xié)同閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠指數(shù)、睡眠率的影響

與空白對照組相比較，安神補心六味丸各劑量組不同程度地增加小鼠睡眠指數(shù)，地西泮組小鼠的睡眠指數(shù)明顯增加(P<0.01)。結(jié)果見表3。

表3 安神補心六味丸協(xié)同閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠指數(shù)、睡眠率的影響

3.4 安神補心六味丸協(xié)同睡眠劑量戊巴比妥對小鼠睡眠潛伏期、睡眠時間的影響

與空白對照組相比較，各給藥組不同程度地減少小鼠的睡眠潛伏期、增加睡眠時間，其中安神補心六味丸高劑量組和地西泮組顯著增加睡眠時間，地西泮組顯著減少睡眠潛伏期(P<0.05，P<0.01)。結(jié)果見表4。

表4 安神補心六味丸協(xié)同睡眠劑量戊巴比妥對小鼠睡眠潛伏期、睡眠時間的影響

4 結(jié)論

本文中所述對蒙藥安神補心六味丸進行的藥理學(xué)實驗研究在對該復(fù)方制劑相關(guān)研究中尚屬首次，通過“3.1”和“3.2”實驗可知，實驗中各給藥組小鼠的自主活動次數(shù)和站立次數(shù)均不同程度地減少，其中安神補心六味丸高劑量組和地西泮組顯著減少(P<0.05，P<0.01)；“3.3”實驗發(fā)現(xiàn)，安神補心六味丸各劑量組小鼠睡眠指數(shù)不同程度地增加；“3.4”實驗發(fā)現(xiàn)，安神補心六味丸高劑量組和地西泮組顯著增加小鼠睡眠時間，地西泮組顯著減少小鼠睡眠潛伏期(P<0.05，P<0.01)。以上結(jié)果表明蒙藥安神補心六味丸具有明顯的安神、鎮(zhèn)靜的作用。

5 討論

蒙藥安神補心六味丸為蒙醫(yī)藥經(jīng)典復(fù)方制劑，對心赫依病引起的心慌、心悸、氣短、心顫、命脈赫依、心激蕩等癥具有良好的治療作用，是蒙醫(yī)治療心臟病的常用藥物。蒙醫(yī)藥傳統(tǒng)核心理論“三根學(xué)說(赫依、希拉、巴達干)”認為三根中任何一方在人體中偏盛或偏衰，會使機體平衡失調(diào)，從而導(dǎo)致疾病發(fā)生。心赫依是指赫依偏盛后竄進心臟，與巴達干相搏導(dǎo)致心臟功能紊亂的病癥。據(jù)《四部醫(yī)典》記載：“治心、主脈、大腸之病，應(yīng)以抑赫依為主?！?臨床上心赫依偏盛病勢輕者有頭昏失眠、心悸、心神不安、心煩易怒、手足顫抖等癥狀，重者有胡言亂語、脈象芤、時而停搏、尿清有泡沫等癥，治療時當宜以鎮(zhèn)赫依(鎮(zhèn)靜)、安心(安神)為原則。

對小鼠進行自主活動實驗是評價中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮狀態(tài)的一項重要指標，小鼠自主活動次數(shù)與大腦皮層的興奮狀態(tài)密切相關(guān)，兩者間呈正相關(guān)[3-5]。本文通過實驗發(fā)現(xiàn)，安神補心六味丸可顯著減少小鼠自主活動次數(shù)與站立次數(shù)，表明該藥物具有良好的鎮(zhèn)靜、安神作用。同時實驗組與對照組小鼠比較，給藥后一周內(nèi)活動與站立次數(shù)明顯增多，一周后逐漸減少，14 d后差異顯著，鎮(zhèn)靜安神療效明確，可能與該藥物先強心、后安神的作用有關(guān)。

通過觀察受試藥物對巴比妥類藥物誘導(dǎo)小鼠睡眠的作用影響是觀察藥物安神、催眠作用的經(jīng)典方法[6-8]。本實驗采用閾下/睡眠劑量戊巴比妥鈉協(xié)同睡眠實驗觀察小鼠睡眠指數(shù)、睡眠率、睡眠潛伏期時間、睡眠時間等，結(jié)果表明安神補心六味丸可有效增加閾下劑量戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠指數(shù)、提高睡眠率，縮短睡眠劑量戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠潛伏期，并且延長其睡眠時間。

本研究表明，蒙藥安神補心六味丸具有明顯的安神、鎮(zhèn)靜作用，其療效與蒙醫(yī)傳統(tǒng)理論中所述治療理念緊密貼合，尤其對心血管疾病療效突出。但該藥物的作用機制尚未明確，因此，應(yīng)結(jié)合蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論，開展更深入廣泛的實驗研究，以逐步闡明其現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵。